Биохимия и молекулярная генетика
Поможем в ✍️ написании учебной работы
Поможем с курсовой, контрольной, дипломной, рефератом, отчетом по практике, научно-исследовательской и любой другой работой

 

Banks и соавт. [1], Spring и соавт. [42, 43] посредством перекрестной имму-нопреципитации показали, что антигенные детерминанты Do a, Gy a, Hy и Jo a расположены на одном и том же экстрацеллюлярном гликопротеине (рис. 16.1), имеющем мол. массу 46,75–57,5 кДа. Обработка эритроцитов эндогликозила-зой F приводила к уменьшению мол массы гликопротеина до 11 кДа, что свиде-тельствовало о N-гликозилировании изучаемого субстрата. Вместе с тем проте-ин Dombrock не подвергался О-гликозилированию.

 

 

Рис. 16.1. Строение гликопротеина

 

Dombrock.


 

732


процессе иммунопреципитации предположительно выделялись также ди-меры указанных соединений.

 

экспрессии антигенов Gy a и Ну участвуют дисульфидные связи. При об-работке сульфгидрильными реагентами мол. масса гликопротеина уменьшалась до 40–50 кДа и он быстрее мигрировал в полиакриламидном геле в присутствии додецил-сульфата.

 

Gubin и соавт. [9] провели скрининг базы данных, включающих около 5000 нуклеотидных последовательностей хромосом, полученных из диффе-ренцирующихся эритроидных клеточных линий. Оказалось, что синтез ГФИ-ассоциированных протеинов кодируют гены, расположенные на хромосоме 12.

 

Идентифицирован фрагмент ДНК, который, по-видимому, и является геном Dombrock. Трансфекция этого фрагмента в эритролейкемические клетки K562 приводила к экспрессии на их поверхности антигенов Do a, Gy a, Hy и Jo a (Gubin

 

35. соавт. [9]).

 

Локус DO имеет величину 14 кб, состоит из трех экзонов (рис. 16.2) и коди-рует синтез протеина, состоящего из 314 аминокислот (рис. 16.3). Экзон 1 ко-дирует аминокислоты в позиции 1–45, экзон 2 – в позиции 49–285, экзон 3 – в позиции 286–314, включая ГФИ-ассоциированный фрагмент из 17 аминокислот (Reid, Lomas-Francis [35]).

 

                         
                         
                         
       

Рис. 16.2. Генная карта локуса DO.

   

MGPLINRCKK ILLPTTVPPA TMRIWLLGGL LPFLLLLSGL QSPTEGSEVA

50

IKIDFDFAPG SFDDQYQGCS KQVMEKLTQG DYFTKDIEAQ KNYFRMWQKA

100

HLAWLNQGKV LPQNMTTTHA VAILFYTLNS NVHSDFTRAM ASVARTPQQY

150

ERSFHFKYLH YYLTSAIQLL RKDSIMENGT LCYEVHYRTK DVHFNAYTGA

200

TIRFGQFLST SLIKEEAQEF GNQTLFTIFT CLGAPVQYFS LKKEVLIPPY

250

ELFKVINMSY HPRGNWLQLR STGNLSTINC QLLKASSKKC IPDPIAIASL

300

SFLTSVIIFS KSRV

314

Рис. 16.3. Аминокислотная последовательность гликопротеина Dombrock.

 

Обследование индивидов Do(a + ) и Do(a −) с использованием молекулярно-генетических методов показало, что антигенные различия Do a / Do b обусловлены нуклеотидной заменой A 793 G в экзоне 2 гена DO (Gubin и соавт. [9], Rios и соавт. [36]). Последняя приводит к аминокислотной замене Asn 265 Asp (табл. 16.4). Два других замещения нуклеотидов, приводящие к появлению аминокислотных остат-ков Tyr 126 и Leu 208, также связаны с различиями Do a / Do b. Антигенные различия Hy +/Hy − и Jo(a + )/Jo(a −) обусловлены заменами Gly 108 Val и Thr 117 Ile.


 

 

733


Таблица 16.4

 





Дата: 2019-02-24, просмотров: 238.