Race и Sanger [184] предложили разделить подгруппы В на три категории (табл. 3.11).
| Таблица 3.11 | ||||||
Категории и подгруппы антигена В
Категория
Антиген
Выраженность реакции
Выделительство
1
Bv
В и Н
3
B3, Bx
Анти-А
Н
99
Категория 1
Эритроциты лиц этой категории В слабо агглютинируются антителами анти-В и анти-А,В. Наряду с агглютининами анти-А сыворотка содержит анти-В-антитела. В секретах выделителей содержатся субстанции В и Н. В одном со-
m . Как полагают авторы, он возник
в результате супрессорного воздействия со стороны генов, независимых от ло-куса АВО, поскольку у других членов семьи ген В функционировал нормально (Marsh et el., цит. по Issitt, Anstee [122]).общенииэтотфенотипбылобозначенкак B H
Категория 2
Эритроциты этой категории слабо агглютинируются антителами анти-В и анти-А,В. Секреты выделителей содержат субстанцию Н, а вещество В снижен-но или в следовом количестве. Сыворотки крови антител анти-В не содержат. В одном случае эритроциты В категории 2 были перелиты реципиенту с группой О. Какой-либо реакции гемотрансфузия не вызвала.
Категория 3
Эритроциты В категории 3 не агглютинируются антителами анти-В и анти-А,В или дают с ними очень слабые реакции. Слюна содержит следовое количе-ство веществ Н и В. Иногда вещество В в секретах отсутствует. Антител анти-В сыворотка крови лиц В категории 3 не содержит.
Другие подгруппы В
Эритроциты В, слабо реагировавшие со специфическими антителами, были названы В2 по аналогии с А2. Для другого варианта, обозначенного Bv, харак-терно отсутствие реакции с аллогенными анти-В-реагентами. Эти эритроциты несли В-подобный антиген, напоминающий нефукозилированный парциальный В-антиген эритроцитов кролика. Сыворотка крови содержала особую форму ан-тител анти-В, В-трансфераза в ней отсутствовала. Установлено, что ген, контро-лирующий фенотип Bv , передавался по наследству. При обследовании 567 210 доноров г. Гонконга найдено 46 лиц Bv и 8 АBv (Lin-Chu и соавт. [144]).
B mos
Эритроциты Bmos , как и Amos, представляют собой 2 популяции кле-ток. Одна популяция реагирует, а другая не реагирует с анти-В-реагентами. Продуктивность сывороточных В-трансфераз у лиц Bmos нарушена вследствие соматических мутаций (Marsh и соавт. [151]).
Фенотипы В(А) и А(В)
Сообщения о выявлении фенотипов В(А) и А(В) стали появляться по мере получения соответствующих моноклональных антител анти-А и анти-В.
100
Таблица 3.12
Аминокислотная последовательность, ассоциированная с А-, В-
И двойной (А и В)-трансферазной активностью ферментов
| Синтезируемый | Аминокислотная замена в позиции | ||||
| субстрат | 176 | 234 | 235 | 266 | 268 |
| A | Arg | Pro | Gly | Leu | Gly |
| B | Gly | Pro | Ser | Met | Ala |
| B(A) | Gly | Pro | Gly | Met | Ala |
| B(A) | Gly | Ala | Ser | Met | Ala |
| cisAB | Arg | Pro | Gly | Leu | Ala |
| cisAB | Gly | Pro | Ser | Leu | Ala |
А- и В-гликозилтрансферазы проявляют разную активность по отношению к акцепторному субстрату (табл. 3.12). Высокоавидная В-трансфераза способна в ряде случаев присоединять к веществу Н, помимо D-галактозных остатков, не-которое количество глюкозамина и превращать вещество Н в А-подобную суб-станцию. А1-трансфераза иногда способна придавать исходной Н-субстанции В-антигенность. Следы антигенов А и В на эритроцитах В и А отчетливо выяв-ляют некоторые моноклональные антитела (Beck и соавт. [71, 72]). Указанные варианты фенотипов названы В(А) и А(В). Вместе с тем следует с осторожно-стью относиться к таким сообщениям. Высокоактивные моноклональные анти-тела анти-А способны выявить соответствующий антиген на эритроцитах лиц с подгруппами А3В и АхВ, которые ранее могли быть фенотипированы как В. Тем не менее результаты некоторых посемейных исследований свидетельствуют о существовании гена В(А) и его передаче по наследству (Yamamoto [237]). В слу-чаях с группой крови, получившей обозначение А(В), речь в действительности могла идти о приобретенном В-антигене у лиц с генотипами А 1 А 1 и А 1 О.
Приобретенный В-антиген
Известно несколько случаев, когда лица, имеющие группу крови А, на не-которе время приобретали группу крови А(В). Носителями приобретен-ного антигена В были, как правило, пациенты с опухолями и инфекциями желудочно-кишечного тракта. Приобретенный антиген В наблюдали только у лиц, имеющих группу крови А. Лиц группы О среди носителей приобретенно-го В-антигена не выявили. Приобретенный В-антиген иногда обнаруживали и у здоровых людей (Garratty и соавт. [108]).
Все лица, носители приобретенного В-антигена, являлись выделителями ве-ществ А и Н. Вещество В в их секретах отсутствовало. Сыворотка крови содер-жала А-трансферазу, В-трансфераза отсутствовала.
Антитела анти-В, имеющиеся в крови носителей приобретенного антиге-на В, реагировали с эритроцитами В, но не реагировали с собственными, А(В), эритроцитами.
Присутствие антигена В часто имело транзиторный характер (Marsh [149]).
101
Приобретенный В-антиген выражен слабее по сравнению с нормальным В-антигеном у лиц группы В и АВ. Отмечены количественные вариации его экспрессии. Его лучше определять антителами анти-В от лиц А2, чем от лиц А1. В сыворотке крови некоторых людей О и А присутствует особая фракция ан-тител, специфически реагирующих с приобретенным В-антигеном. Последнюю можно выделить адсорбцией – элюцией. Некоторые моноклональные антитела анти-В реагируют с приобретенным В-антигеном. При иммунизации животных также удавалось получить антитела, которые специфически реагировали с при-обретенным антигеном В.
Группа крови лиц с приобретенным В-антигеном в рутинных тестах ин-терпретируется как АВ (Gerbal и соавт. [111]). Описано гемотрансфузион-ное осложнение с летальным исходом, когда реципиент группы А с приобре-тенным антигеном В получил трансфузию эритроцитов АВ (Garratty и соавт. [108]). Отмечено также, что эритроциты, несущие приобретенный В- антиген, нередко обладают полиагглютинабельностью (Veneman и соавт. [216]). Первоначально полагали, что появление антигена В обусловлено адсорбци-ей на эритроцитах А В-подобных бактериальных гликолипидов . Позднее было показано, что приобретенный антиген В является результатом своеобразного энзимирования эритроцитов, сопровождающегося деацетилированием мем-браны (Schenkel-Brunner [195]). Сыворотки крови некоторых лиц с приобре-тенным В-антигеном обладали способностью конвертировать эритроциты А в А(В) (Stayboldt и соавт. [204]). Оказалось, что они содержат фермент, вызыва-ющий частичное деацетилирование N-ацетилгалактозамина, в результате чего появляется В-серологическая активность , выявляемая моноклональными анти-телами (Okubo и соавт. [173]). В пользу деацетилирования как причины ука-занного феномена свидетельствовали также другие факты: во-первых, только эритроциты группы А способны приобретать антиген В, во-вторых, экспрес-сия приобретенного антигена В обратно пропорциональна А-серологической активности эритроцитов.
Деацетилазы удалось выделить из культуры Clostridium tertium и некото-рых штаммов Escherichia coli. С помощью этих ферментов на эритроцитах А удавалось воспроизвести В-серологическую активность. Эритроциты груп-пы О такой конверсии не поддавались (Herron и соавт. [118]). Обработка эри-троцитов, несущих приобретенный антиген В, ангидрид ацетатом устраняла В-серологическую активность, при этом экспрессия антигена А восстанавлива-лась до первоначального уровня (Gerbal и соавт. [112]).
А-трисахариды, деацетилированные химическим путем, ингибировали ак-тивность анти-В-антител по отношению к приобретенному В. По отношению к нормальному антигену В ингибиции не наблюдали. В-трисахариды, в кото-рых галактозный остаток был заменен на аминогруппу, обладали аналогич-ным эффектом. Агглютинация с приобретенным антигеном В не происходи-ла, если в пробу добавляли галактозамин (Schenkel-Brunner [195]). С помощью
102
молекулярно-генетических методов удалось дифференцировать лиц с обычным (врожденным) и приобретенным антигеном В (Fisher и соавт. [105]).
Н-дефицитные фенотипы
Как уже отмечалось выше, антиген Н является единственным серологически определяемым антигеном системы Hh. Эта система генетически независима от АВО, но вместе с тем обе системы имеют отчетливую фенотипическую связь. Экспрессия антигена Н неодинакова на эритроцитах разных групп, особенно слабых подгрупп, и убывает в последовательности O > A2 > A2B > B > A1 > A1B.
У подавляющего большинства людей (99,99 %) эритроциты содержат Н-антиген, однако существуют редкие, Н-дефицитные фенотипы, при которых антиген Н отсутствует [77–79, 81]. К ним относят типы Бомбей и пара-Бомбей.
O h (Bombay)
В 1952 г. Bhende и соавт. описали 3 жителей Бомбея (Индия), имевших нео-бычную группу О. Сыворотка их крови агглютинировала эритроциты А, В и, что было весьма неожиданным, эритроциты О. При этом собственные эритроциты не агглютинировались. Помимо антител анти-А и анти-В, сыворотки указанных лиц содержали антитела анти-Н, в то время как антиген Н в эритроцитах отсутство-вал, что также несвойственно группе О. Фенотип получил обозначение Bombay или Oh. Исследователи предположили, что локус АВО может содержать еще один аллель, который будучи в гомозиготной форме, приводит к формированию фено-типа Oh. Высказано также предположение, что указанный фенотип является ре-зультатом действия супрессорного гена, независимого от АВО. В последующие годы были найдены другие образцы крови Бомбей, в основном, среди лиц ин-дийского происхождения (Abu Sin и соавт. [65], Aloysia и соавт. [67], Beattie и со-авт. [70], Beranova и соавт. [75], Bhatia и соавт. [77, 78], Hrubishko и соавт. [120], Kitahama и соавт. [130], Moores и соавт. [160], Sringarm и соавт. [202]).
Н-дефицитные фенотипы встречаются крайне редко. Помимо индийцев они выявлены у тамилов – островитян Индийского океана, японцев, американских негров, жителей Таиланда и Судана (Daniels [87]).
Родителями лиц Oh часто являлись кровные родственники (Bhatia и соавт. [77, 79]). Во всех случаях о необычном фенотипе свидетельствовало присут-ствие антител анти-Н, агглютинирующих эритроциты О.
В слюне лиц Oh вещества А, В и Н отсутствуют.
Посемейные исследования подтвердили, что к возникновению фенотипа Бомбей гены локуса АВО не имеют прямого отношения.
Считается, что аллелем гена Н является молчащий ген h. Таким образом, фе-нотип Oh, лишенный антигена Н, возникает у лиц, гомозиготных (hh) по этому редкому аллелю (Ogasawara и соавт. [172], Wagner и соавт. [221]). Высказанное авторами предположение подтвердили молекулярно-генетические исследования Lee и соавт. [139], Schenkel-Brunner [195], Wagner и соавт. [221], показавшие,
103
что лица Oh содержат полноценные гены А и В, однако из-за отсутствия субстанции-предшественника Н синтез веществ А и В у них не происходит.
Родители Oh способны передавать гены А или В детям (рис. 3.5), и у послед-них эти гены нормально функционируют (Voak и соавт. [218], Yunis и соавт. [250]). Для лиц Oh, содержащих такие скрытые гены, приняты обозначения: Oh O,
О , Oh B и Oh AB. Верхний индекс указывает на то, какие гены имеются у лиц Oh.
сыворотке крови и на эритроцитах людей Oh Н-трансфераза отсутствова-ла. А- и В-трансферазы выявлялись у лиц Oh A и Oh B соответственно. Однако, несмотря на то, что эти ферменты имелись, они не могли выполнить свою функцию, поскольку субстрат Н, подлежащий специфическому гликозилиро-ванию, у них отсутствовал. Эксперименты in vitro показали, что эритроци-ты Oh (Bombay) могут приобрести Н-антиген в присутствии специфической Н-трансферазы и далее могут быть конвертированы в А или В посредством добавления специфических А- или В-трансфераз и соответствующего акцеп-торного субстрата (Schenkel-Brunner [195]). Результаты посемейных исследо-ваний подтвердили, что активность Н-трансферазы в 2 раза ниже у гетерози-гот (H / h), чем у гомозигот (Н / Н).O A
Рис. 3.5. Наследование фенотипа Oh (Bombay).
Принадлежность эритроцитов к Н-дефицитному фенотипу Oh (Bombay) не была сопряжена с какими-либо дефектами эритроцитов. Все выявленные лица были соматически здоровы (Bhatia и соавт. [79]).
Para-Bombay
том случае, если у носителей группы Бомбей ген Н не функционирует, то
В лиц, отнесенных к группе пара-Бомбей, функция гена Н частично сохраняет-ся. Н-трансфераза имеет низкую активность, и вещество Н синтезируется в су-щественно меньшем количестве, чем у других людей (Le Pendu и соавт. [138]).
104
А- и В-трансферазы соответственно гликозилируют меньшее количество исхо-дной субстанции Н, поэтому экспрессия антигенов А или В у лиц, имеющих тип крови пара-Бомбей, существенно снижена (Lin-Chu и соавт. [145]).
По характеру реагирования эритроциты пара-Бомбей Ah напоминают эритро-циты А2 и Ах. Эритроциты Ah, так же как и эритроциты А2, обладают низкими агглютинационными свойствами и, так же как эритроциты Ах, реагируют не со всеми, а только с некоторыми образцами анти-А-антител.
Эритроциты пара-Бомбей Bh слабо реагируют с антителами анти-В. Групповые субстанции А, В и Н в секретах лиц с типом крови пара-Бомбей
выражены достаточно четко, на эритроцитах они присутствуют в следовых ко-личествах.
Сыворотки крови лиц Ah содержат антитела анти-Н, анти-В и иногда анти-А1. У лиц Bh в сыворотке крови всегда присутствуют антитела анти-А, у некоторых обнаруживают парциальные антитела анти-В (Mak и соавт. [148]).
O h (Reunion)
Фенотипы, подобные Oh Бомбей и пара-Бомбей Ah, Bh и ABh, были выявле-ны у лиц французского происхождения, проживающих на небольшом острове Реюнион в Индийском океане, вблизи восточного побережья Африки. Эти фе-нотипы получили обозначение Reunion. В указанной популяции фенотипы Oh, Ah, Bh и ABh имели ту же генетическую основу, что в других популяциях: мута-цию гена h (Fernandez-Mateos и соавт. [103]).
Тип Реюнион отличается от типа Бомбей наличием вещества Н на эритро-цитах. Антитела анти-Н, продуцируемые лицами фенотипа Бомбей, агглюти-нируют эритроциты Реюнион и эритроциты некоторых лиц Oh. Таким образом, обозначение Oh является не совсем точным, поскольку относится и к лицам, у которых вещество Н отсутствует (фенотип Бомбей), и к лицам, у которых со-держится небольшое количество этой субстанции (фенотипы пара-Бомбей и Реюнион). При фенотипе пара-Бомбей и Реюнион антигены А или В столь сла-бо экспрессированы, что в нативных эритроцитах их можно обнаружить толь-ко с помощью адсорбции – элюции. Для дифференциации различий фенотипов Oh предложено использовать обозначения Oh Bombay и Oh Reunion. Лектин Ulex europaeus агглютинирует папаинизированные эритроциты Oh Reunion, папаини-зированные эритроциты Oh Bombay указанный лектин не агглютинирует.
В настоящее время выявлены аллели Н, кодирующие различную степень экс-прессии вещества Н на эритроцитах, в том числе в сниженном количестве. В сы-воротке крови лиц, имеющих фенотипы пара-Бомбей и Реюнион, Н-трансфераза не обнаружена, однако на эритроцитах она, по-видимому, присутствовала, по-скольку А- и В-трансферазы у лиц Ah и Bh на эритроцитах имелись. Небольшое количество вещества Н у таких лиц полностью конвертировалось в субстанцю А и В соответственно. То, что в этих случаях исходным веществом для антиге-нов А и В была субстанция Н, было установлено экспериментально. Обработка
105
эритроцитов специально подобранными трансферазами (α-галактозилазой, экс-трагированной из Trichomonas foetus) приводила к появлению Н-активности с одновременной утратой антигена В. Далее эти эритроциты (Н + В −) удавалось конвертировать в Ah (А + Н −) добавлением А-трансферазы [195].
Эритроциты лиц Oh Reunion выделителей не агглютинируются большин-ством анти-Н-сывороток и лишь иногда дают слабоположительные реакции
с высокоактивными анти-Н-антителами, присутствующими в сыворотках крови некоторых лиц Oh, или с другими анти-Н-реагентами. Эритроциты та-ких лиц обычно не реагируют с антителами анти-А и анти-В, однако клет-ки некоторых индивидов Oh А выделителей могут вести себя в серологиче-ских тестах как Ах, демонстрируя слабоположительные реакции с высокоак-тивными антителами анти-А,В лиц О. Подобные слабые варианты антигена В описаны у лиц Oh В.
В секретах лиц Oh Reunion выделителей содержание вещества Н в нор-ме, субстанции А и В также присутствуют, если данные лица имеют гены А и В. Сыворотки крови лиц Oh Reunion почти всегда содержат слабые холодовые анти-Н-подобные антитела. Их активность не ингибируется слюной выделите-лей групповых субстанций, они не реагируют с эритроцитами О новорожден-ных. Полагают, что эти антитела имеют специфичность анти-HI.
Индивиды, отнесенные к Н-дефицитному типу, найдены среди представи-телей различных этнических групп – жителей Индии, Европы, Японии, Китая, Юго-Восточной Азии, Среднего Востока, коренных жителей Америки. Их вы-являли с частотой от 1 на 5000 среди жителей Таиланда до 1 на 8000 – 1 на 16 000 среди китайцев.
H m
Еще одна серия Н-дефицитных фенотипов характеризуется следовым коли-чеством или полным отсутствием антигенов А, В и Н на эритроцитах и одно-временно нормальным количеством соответствующих группоспецифических субстанций в секретах. Указанные фенотипы обозначены как Om h, Am h и Bm h. В настоящее время их называют Oh, Ah, Bh выделителями. Угнетение синтеза ве-щества Н у лиц Hm не столь выражено, как у лиц с фенотипами Бомбей, пара-Бомбей и Реюнион. Эритроциты Hm слабо реагируют с анти-Н-антителами, а строма эритроцитов и слюна таких лиц содержит вещество Н в норме.
Остается неясным: имеет ли указанный фенотип какие-либо селективные преимущества в регионе Индийского океана, где он в основном встречается?
Взаимодействие локуса Hh с генами секреции Se и se
Сочетание гена Н с геном Se приводит к тому, что на эритроцитах присутству-ет вещество Н одновременно с А и / или В в зависимости от того, какой аллель АВО унаследован (табл. 3.13). Если аллель Se по наследству не передается, то ве-щества А, В и Н в секретах практически отсутствуют (обычные невыделители).
106
Гомозиготные комбинации генов h и se проявляются как Н-дефицит и невы-делительство.
Другие варианты гена h способны кодировать синтез вещества Н в неболь-шом количестве. Последнее преобразуется нормально функционирующими А-
с В-трансферазами в небольшое количество антигенов А и В, которые можно выявить с помощью адсорбции – элюции.
Таблица 3.13
Дата: 2019-02-24, просмотров: 313.
