21.3.1.1 микроглии и макрофаги крови, полученных

αβ Т-клетка имеет важное значение для контроля Т. гондий в обоих острые и хронические стадии инфекции (см раздел 21.3.2). Мы обнаружили, однако, что в дополнение к Т-клеткам, ИФНγпроизводство другими, чем Т-клеток, клеток необходим для профилактики реактивации инфекции Т. гондий (TE) в головном мозге мышей, хронически инфицированных (Kang и Suzuki, 2001). Бестимусная голый, SCID, и IFN-γдефицитные мыши были инфицированы T. гондиями и обрабатывали сульфадиазин к Estab-ий хронической инфекции. После прекращения серосодержащие-диазин, каждый из этих животных развилась тяжелая TE вследствие реактивации хронической инфекции и умер. Когда животные получали приемную передачу иммунной селезенки или Т-клетки, прежде чем прекращение сульфадиазина, инфицированные бестимусный голый и SCID мышей не развивалось TE и выжил. Тем не менее, инфицированных IFN-γдефицитный мышей до сих пор разработана TE и умер даже после получения перевода клеток (Kang и Suzuki, 2001). Перед передачей клеток, IFN-γ мРНК была обнаружена в мозге голых и SCID мышей, но не в мозге ИФНγдефицитный мышей. IFN-γмРНК была также обнаружена в мозге зараженных мышей SCID истощенных клеток NK, и таких животных не развивались TE после получения иммунных Т-клеток (Kang и Suzuki, 2001). Таким образом, IFN-γ Производство не-Т-клетки, в дополнении к Т-клеткам, необходимо для профилактики реактивации инфекции Т. гондия в головном мозге.

Эти IFN-γ-продуцирующий не-Т-клетка не кажется, NK-клетка.

Сузуки и др. (2005) недавно определили эти не-Т, не-NK-клетки, которые продуцируют IFN- &γв мозге голых и SCID мышей, хронически инфицированных T. гондий. Внутриклеточное окрашивание IFN-γ а затем с помощью проточной цитометрии показала, что Approxi-45-60 процентов счета из клеток, экспрессирующие ИФНЫγв их мозге были положительными на CD11b или F4 / 80 (маркер для микроглии / макрофагов) на их поверхности. Небольшие порции клеток были положительными на пан-НК маркера. Далее меньшие порции были положительными на CD11c (маркер для дендритных клеток), и эти клетки были менее чем 5 процентами от IFN-γ-expressing клеток в головном мозге зараженных мышей SCID. В дополнение к ИФНγ белки, большое количество мРНК для ИФНγ были обнаружены в CD11b+клетки очищали от мозга инфицированных мышей, но это не так в клетках, полученных из неинфицированных животных. В инфицированных мышей SCID истощенных клеток NK (путем обработки анти-асиало-GM1 анти-тела), клетки, экспрессирующие ИФНγ в их мозгах все были положительными CD11b, и IFN-γ-продуцирующих клетки были обнаружены в обоих CD45^низкий и CD45^высокопоп-нормы в. Эти результаты свидетельствуют о том, что CD11b+ CD45^низкий микроглии и CD11b+ CD45^высоко происходящие из крови макрофаги являются основным не-Т, не-NK-клетки, которые экспрессируют IFN-γв головном мозге мышей, зараженных T. гондий. Поэтому, вполне возможно, что IFN-γ производство по микроглии и / или макрофагами играет важную роль в предотвращении ТЭ в сотрудничестве с αβ Т-клетки.

21.3.1.2 γδ Т-клетки

Во время острой стадии инфекции с Т. гондий, увеличение числа Т-клеток, экспрессирующих γδ Т-клеточный рецептор наблюдали в селезенке и перитонеальной полости мышей и периферической крови человека. γδ Т-клетки являются цитотоксическими для инфицированных клеток-мишеней и производить ИФНγ и TNF-αв ответ на паразит в пробирке. ВовлечениеγδТ-клетки в устойчивости против острой инфекции с T.gondii, было показано на мышах. Мыши, дефицитные поγδ Т-клетки из-за лечения с анти-TCR γδ моноклональное антитело (Hisaeda и др., 1995) или отсутствие функционального TCR

δ ген (Kasper и соавт., 1996) умирают раньше, чем у контрольных мышей во время острой стадии инфекции.

570                                Церебральный токсоплазмоз: ПАТОГЕНЕЗ И HOST СОПРОТИВЛЕНИЕ

γδ Т-клетки также могут быть вовлечены в предотвращении TE во время поздней стадии инфекции, а γδТ-клетки могут быть обнаружены в головном мозге, хронически инфицированных мышей и крыс. Из интереса, относительные процентыγδТ-клетки в препаратах лимфоцитов, выделенных из мозга инфицированных мышей значительно выше, чем в их селезенке (Сузуки и др., 1997). Это повышает вероятность того, чтоγδТ-клетки preferen-ственно проникнуть в мозг Т. гондий-инфицированных мышей. Лепаж и др. (1998) предложили возможную рольγδ Т-клетки в повышении защитной активности CD8+ αβ Т-клетки в исследованиях с использованием приемных передачи популяций лимфоцитов.

У пациента с CD40L дефектом (гипер-IgM-синдром), который разработал TE, заметное увеличение γδТ-клетки наблюдали в своей периферической крови (Лейва и др., 1998). Пациент хорошо ответил на анти-токсоплазматическую химиотерапию и высоких дозы заместительной терапии иммуноглобулинов.γδ Т-клетки, возможно, способствовали борьбе с этой болезнью, но их защитная активность не является достаточным само по себе, чтобы предотвратить развитие TE.

21.3.1.3 NK-клетки

NK-клетки являются важным источником IFN-γв сопротивлении против T. гондий во время ранней стадии инфекции. Истощение NK клеток приводит к ранней или повышенной смертности в SCID и мышей дикого типа. В отличие от ранней стадии инфекции, NK-клетки, кажется, не иметь решающее значение для профилактики ТЭ во время поздней стадии инфекции. Кан и Сузуки (2001) сообщалось в SCID мышах с ADOP-TIVE передачи иммунных Т-клеток, что истощение клеток NK (клетки невозможно обнаружить с помощью проточной цитометрии в мозге и селезенке), не отменили сопротивление этих животных к развитию ТЕ.

21.3.2 Значение «приобретенного иммунитета» с участием CD4+ и CD8 + Т-клетки аб

Ясно, что αβ Т-клетки имеют важное значение для сопротивления против T. гондий, так как бестимусных голых и SCID мышей, которые испытывают недостаток в Т-клетки поддаются острой инфекции и их смертность связана с распространением

большое число тахизоитов в различных органах, включая мозг. CD8+ Т-клетки являются основным эфферентных конечности защитного клеточного иммунитета против острой инфекции, хотя CD4+Т-клетки также вовлечены. Защитная активность CD8+ Т-клетки, преимущественно опосредуется гамма-интерферона (ИФНγ), И эти клетки по всей видимости, является основным источником IFN-γво время острой стадии инфекции (Сузуки и Remington, 1988). Однако, как CD8+ и CD4+ Т-клетка, полученная из селезенки инфицированных мышей способна производить этот цитокин в пробирке после стимуляции тахизоят антигены.

IFN-γтакже играет важную роль в предотвращении TE во время поздней стадии инфекции у мышей (Сузуки и др 1989а;.. Gazzinelli и др, 1992). Нейтрализация активности IFN-γ в хронически инфицированных мышей путем обработки анти-IFN-γмоноклональное антитело (монАТ), в результате тяжелого острого воспаления и развития больших участков некроза в мозге (Suzuki и др., 1989a). В областях острого воспаления и некроза, и тахизоитов T.gondii, антигены были обнаружены, что свидетельствует о том, что такие воспалительные реакции были вызваны prolifera-ции тахизоитов. Заметное увеличение числа тахизоитов в мозге мышей после обработки анти-IFN- &γМАт было также продемонстрировано путем обнаружения повышенные количества тахизоит специфических SAG1 и мРНК SAG2 с использованием обратной транскриптазы-полимеразной цепной реакции (ОТ-ПЦР) (Gazzinelli и др., 1993). Таким образом, очевидно, что IFN-γимеет решающее значение для предотвращения распространения тахи- zoites в мозге мышей. То же самое, кажется, верно в организме человека, так как больные СПИДом имеют нарушенную способность производить IFN-γ и они часто развиваются TE.

Оба CD4+ и CD8+Т-клетки проникают в мозг мышей после заражения. Gazzinelli и др. (1992) сообщили, что истощение как CD4+ и CD8+Т-клетки, требуется, чтобы вызвать тяжелые ТЕ в chroni-ски инфицированных мышей. Браун и МакЛеод (1990) сообщили, что CD8+Т-клетки участвуют в резиста-ANCE путем регулирования количества T.gondii, кист в головном мозге мышей. При использовании приемного переноса популяций иммунных Т-клеток в инфицированный голый мышей, Кан и Сузуки (2001) показали, что как CD4+ и CD8+Т-клетки способны предотвратить TE у животных-реципиентов. Защитная активность

Т-клетки через их производства IFN-γ (Wang и др., 2004).

Когда Т-клеточный рецептор Vβ Использование цепи экзамен-INed в Т-клетках, которые производят IFN-γ в головном мозге зараженных мышей BALB / с мышей (генетически устойчивых к TE), клеток, несущих рецептор Т-клеток Vβ8 цепь были признаны наиболее распространенным (Wang и др., 2005). Кроме того, в их селезенке, Vβ8+ Т-клетки получают заметно большее количество IFN-γ чем сделал Vβ8^-населения после стимуляции тахизоит антигенов в пробирке (Kang и др., 2003). Приемные транс-ЧОК селезеночной иммунной Vβ8+Т-клетки в инфицированной голых мышей предотвращено TE в реципиентов (Kang и др., 2003). Таким образом, Т-клетки, несущие TCR Vβ8-видимому, играют важную роль в генетической устойчивости BALB / с мышей от развития ТЭ. Когда иммунная Vβ8+ Т-клетки были разделены на CD4+ и CD8+ популяции Т-клеток, то CD8+ население присвоил гораздо большую устойчивость к развитию TE в зараженном голых мышей, чем сделал CD4+Население. Однако защитная активность общей Vβ8+ Т-клетки, было больше, чем у CD8+ Вβ8+Т-клетки (Wang и др., 2005). Таким образом, CD8+ населения играет важную роль в деятельности Vβ8+ Иммунная Т-клетки против реактивации Infec-ции в мозге, хотя CD4⁺ Население работает аддитивно или синергически с CD8+ Население.

Bcl-3 онкобелок, особый член I-κfamily Б которой functions в виде positive regulator от nuclear factor (NF) -κБ активность, недавно было показано, играют важную роль в монтаже ProTec-TIVE Th1 иммунного ответа на Т. гондий (Franzoso и др., 1997). Bcl-3-дефицитные мыши выживают раннюю острую стадию инфекции; Однако, большинство из них умирает от 3 до 5 недель после заражения. Способность клеток селезенки производить IFN-γв ответ на антигены Т. гондия является нормальным в ранней стадии (через 7 дней после заражения), но ухудшаются на более поздней стадии (12-31 дней после заражения) инфекции. Цитотоксическую активность Т-клеток, но не NK клеток, также дефектный у этих мышей. Эти результаты указывают на критическую роль для Bcl-3 в антиген-специфической грунтовки в долгосрочной перспективе, защитные Th1-типа Т-клеток после инфицирования с Т. гондий.

Что касается NF-κВ семейные факторы транскрипции, Caamaño и др. (2000) продемонстрировали

важность NF-κВ (2) для Т-клеточных реакций в устойчивости к TE. NF-κB (2) дефицитный мышей не имеют дефектов в их способности производить IL-12 и IFN- &γво время острой стадии инфекции; Однако, в хронической стадии заболевания этот дефицитный мышей поддался ТЭ в связи с пониженной способностью к IFN-γпроизводство. Апоптоз Т-клеток, по-видимому, участвует в сокращенном производстве этого цитокина. с-Rel также участвует в сопротивлении против T. гондий в головном мозге (Mason и др., 2004). с-Rel-дефицитных мышей пережить острую фазу инфекции, но развиваются тяжелые TE, связанные с уменьшением количества CD4+ Т-клетки и уменьшить производство IFN-γв их мозге. Таким образом, с-Rel играет важную роль в оптимизации и поддержании иммунного ответа Th1-типа во время T. гондий инфекции (Mason и др., 2004).

Subauste и др. (1999) сообщили, что передача сигналов CD40-CD40L требуется для оптимального производства Т-клеток IFN-γв ответ на T.gondii, в организме человека. Тем не менее, роль взаимодействия CD40-CD40L в ответ Т-клеток, как представляется, отличаются у мышей. CD40L-дефицитные мыши сопоставимых уровней IFN-γ с контрольными животными следующих инфекций, хотя CD40L, имеет важное значение для устойчивости к TE (Райхманн и др., 2000).

В дополнение к производству IFN-γКак человека и мыши CD4+ и CD8+Т-клетки способны убить Т. гондия-инфицированные клетки-мишеней в пробирке в главном комплексе гистосовместимости (MHC) -ограниченных образом; однако, цитотоксическую активность Т-клеток, не было показано, что решающим фактором в предотвращении ТЕ у мышей. При использовании C57BL / 6 (генетически предрасположенных к TE) -background мышей, Denkers и др. (1997) сообщили, что примерно половина из перфорина-дефицитных животных выжили до 150 дней после заражения, тогда как CD8+Т-клеточно-дефицитных мышей умерли 50 дней после заражения (Denkers и др., 1997), предполагая, что перфорина-опосредованный цитолиз с помощью Т-клеток, по-видимому, играют ограниченную роль в устойчивости против Т. гондий. Совсем недавно, Ван и др. (2004) продемонстрировали, с помощью ТЕ-устойчивых BALB / C мышей, которые адоптивный перенос иммунных Т-клеток от перфорина-дефицитных мышей в инфицированной голых мышей предотвратить реактивации инфекции и ТЕ у животных-реципиентов (Wang и др., 2004) , Таким образом, перфорин-опосредованный

572                                Церебральный токсоплазмоз: ПАТОГЕНЕЗ И HOST СОПРОТИВЛЕНИЕ

цитотоксическую активность Т-клеток не требуется для генетической устойчивости BALB / C мышей к развитию заболевания.

УЧАСТИЕ