1. Засев материала на 5% сывороточный, кровяной или шоколадный агар, инкубирование в атмосфере CO2 в течение суток при t37C

2.Проведение макро- и микроскопических исследований.

а) Идентификация по морфологическим и тинкториальный св-ам: по Граму- грам- диплококки в виде кофейных зерен;

б) По культуральным св-вам: мелкие бесцветные колонии, на кровяном агаре зоны гемолиза не будет;

в) По биохимическим: ферментируют глюкозу и мальтозу с образованием кислоты без газа, оксидаза и каталаза +

г) По антигенным: определение серогруппы с помощью реакции агглютинации на стекле

д) Чувствительность к антибиотикам методом дисков

Серологический метод: выявление менингококковых АГ или противоменингококковых АТ в сыворотке больного (РПГА, ИФА) – выявление АТ к капсульному полисахариду менингококка, определение титра АТ

Экспресс методы: быстрое выявление АГ непосредственно в ликворе: встречный иммуноэлектрофорез (ВИЭФ), латекс-агглютинация с АТ-диагностикумами; выявление АТ в сыворотке: латекс-агглютинация с АГ-диагностикумами.

Зоо2. Пациенту поставлен клинический диагноз «бруцеллез». Для подтверждения диагноза в микробиологическую лабораторию была отправлена кровь больного. Был сделан посев крови на печеночный бульон и через три дня получен отриц результат. Возможные причины отрицательного ответа. Методы микробиологической диагностики бруцеллеза.

ОТВЕТ:

Причины отриц результата:

1) Не было произведено параллельного посева в 2 колбы: одна колба инкубируется в атмосфере CO2 (Для B.abortus)

2) Рост культуры занимает до 30 дней – прошло слишком мало времени (всего 3 дня прошло)

3) Возможно, стоит взять другой материал на посев (напр, костный мозг)

Методы диагностики:

1) Биологический метод – заражение лаб животных. Через 20-25 дней производят высеивание крови и т.д. на печеночный агар для выделения чистой культуры

2)Серологический метод

а) р.Хеддельсона – ориентировочная реакция агглютинации на стекле. Ставится с неразведенной сывороткой больного и концентрированным АГ-диагностикумом (единый бруцеллезный диагностикум). Положительный результат –появление хлопьев, окр в синий цвет

б)р. Райта – развернутая реакция агглютинации (в пробирках). Диагностический титр – 1:200, выявляет полные АГ

в)р. Кумбса – для выявления неполных АГ:на ранних этапах инфекции или при хронической форме процесса

г)РПГА с парными сыворотками – нарастание титра АТ

3)Внутрикожная аллергическая проба с бруцеллином (проба Бюрне) – выявление аллергизации организма к бруцеллам (выявляется в т.ч. и у вакцинированных)

В. Клещевой иксодовый боррелиоз характеризуется развитием в организме аутоимунных и иммунопатологических процессов. Назовите фактор патогенности возбдителей клещевого иксодового боррелиоза, который способствует их развитию.

ОТВЕТ:

Клещевой иксодовый боррелиоз – б. Лайма (Лайм-боррелиоз). Возбудитель - спирохеты B.burgdorferi.

Болезнь сопровождается аутоиммуными реакциями, которые опосредованы липидомодифицированными белками наружной мембраны OspA , OpsB , OpsC. Эти липопротеины - мощные индукторы воспалительных реакций, они могут активировать как клетки неспецифической резистентности (макробактериофаги), так и поликлональные клетки иммунной системы (В- и Т-лимфоциты). Активация поликлональных В-лимфоцитов приводит к синтезу антител, которые вызывают воспалительные реакции в соответствующем органе. При этом, продуцируемые антитела обладают перекрестной иммунологической активностью как в отношении антигенов боррелий, так и тканевых белков. Т.е. появление АТ против белков OspA, OspB, OspC запускает аутоиммунные реакций, как перекрест между боррелиями и тканями человека.

Б. Молодой человек был доставлен в больницу с симптомами поражения печени и началом развития почечной недостаточности. До этого он отдыхал в селе, где купался в пруду недалеко от пастбища коров. Диагноз – лептоспироз. Путь заражения, лаб исследования, которые подтверждают диагноз и мишень, которая поражается лептоспирами?

ОТВЕТ:

Лептоспироз – зооноз с фекально-оральным механизмом передачи. Источник инфекции – крупный рогатый скот, свиньи, собаки.

Диагностика:

Материал для обнаружения – моча

1) Бактериоскопия

а)серебрение по Морозову – темно коричневые избитые бактерии и завитками на концах

б)раздавленная капля – подвижные бактерии, при движении напоминают букву «S»

2) Бактериологический метод

-посев материала на водно-сывороточную среду, инкубирование в CO2 инкубаторе в течение 5-7 суток. После появления роста культур, производят бактериоскопию (см више) и идентификацию по АГ св-ам – РА на стекле с адсорбированными лептоспирозыми сыворотками

3) Серологический метод

а)реакция агглютинации-лизиса, реакция микроагглютинации – поиск АТ (в сыворотке)

б) РПГА с эритроцитарными АТ диагностикумами – поиск АГ

4) Экспресс: ПЦР и ИФА

У больного с инфекцией мочевыводящих путей при бактериоскопическом исследовании в моче обнаружены грам+ кокки. Назовите предполагаемых возбудителей и питательные среды, которые используют для выявления данных микроорганизмов.

ОТВЕТ:

Staphylococcus epidermidis? Staphylococcus saprophyticus? Enterococcus faecales?

-желчный агар с эскулином – энтерококки образовывают колонии черного цвета

-ЖСА и 5% кровяной агар – для стафилококов: рост круглых непрозрачных колоний желтого цвета на ЖСА, на кровяном агаре отсутствует гемолиз

Задача 14 зоо