Лечебно-профилактическая, живая

Поможем в ✍️ написании учебной работы

Имя

Поможем с курсовой, контрольной, дипломной, рефератом, отчетом по практике, научно-исследовательской и любой другой работой

Нажимая кнопку "Продолжить", я принимаю политику конфиденциальности

Инфекции, иммунитет.

45)Противогангренозная сыворотка - Лечебно-профилактическая, антитоксическая .Моно- и поливалентные сыворотки получают гипериммунизацией лошадей анатоксинами или токсинами возбудителей газовой гангрены (CI. perfringens, C1. novii, CI. septicum). Доза каждого типа антитоксинов— 10 000 ME в 1 мл сыворотки. Противогангренозные сыворотки применяются для лечения и профилактики газовой гангрены. С профилактической целью сыворотку вводят внутримышечно, с лечебной — внутривенно, очень медленно, капельным методом. До установления бактериологического диагноза необходимо вводить 18 смесь моновалентных сывороток или поливалентную сыворотку. После определения вида возбудителя, вызвавшего газовую гангрену, вводится сыворотка соответствующего вида.

46)Эритроцитарный сальмонеллезный О-диагностикум — диагностический .Взвесь эритроцитов с адсорбированными на них О-антигенами различных групп сальмонелл. Используется для постановки РПГА с сывороткой больного при уточнении клинического диагноза сальмонеллезной инфекции.

47) Противодифтерийная сыворотка – Лечебно-профилактическая, антитоксическая. получают гипериммунизацией лошадей дифтерийным анатоксином и применяют, главным образом, с терапевтической целью..

48)Сальмонеллезный диагностикум - диагностический .Сальмонеллезные О-диагностикумы содержат О-антигены различных групп сальмонелл (инактивированных 15%-ным раствором глицерина). Применяются для выявления О-антител при сальмонеллезных инфекциях в реакции агглютинации с сывороткой больных. используются для определения заболевания в прошлом (анамнестическая реакция агглютинации) и реже с диагностической целью.

49) 50) 51) 53) Бактериальный диагностикум сальмонелл тифа (или сальмонелл паратифа А и В, шигелл Флекснера, Зонне и др. бактерий семейства Enterobacteriaceae)- диагностический. Является 3-млрд. взвесью бактерий, инактивированных формалином, и применяется в реакции агглютинации для обнаружения антител в сыворотке больных

52)Противоботулинистическая поливалентная сыворотка(А,В,Е)- Лечебно-профилактическая, антитоксическая .Получают от лошадей, гипериммунизированных анатоксинами соответствующих типов, и выпускают в виде моновалентных сывороток, включающих по 1 ампуле сыворотки каждого типа, или в виде поливалентной сыворотки, содержащей в ампуле антитела ко всем 3 типам токсинов клостридий ботулизма. При первых признаках заболевания больному вводят поливалентную сыворотку. После установления типа токсина назначается соответствующая моновалентная сыворотка.

54)Антиген кардиолипиновый для РСК- Диагностический. Способен выявлять антитела к возбудителю сифилиса(Бледная трепонема, tr.Pallidum). Представляет собой раствор трех высокоочищенных липидов: кардиолипина, лецитина, холестерина в абсолютном этиловом спирте.

55)Антительный эритроцитарный сальмонелезный диагностикум- диагностический. Эритроциты, сенсибилизированные очищенным Vi-антигеном S. typhi, применяется в РПГА при выявлении брюшнотифозного бактерионосительства.

Вакцина живая против Ку-лихорадки - лиофилизированная взвесь аттенуированного штамма коксиелл, выращенных на куриных эмбрионах. Предназначена для создания активного иммунитета. Для профилактики.

Вакцина живая коревая - аттенуированный штамм вируса кори, получают на клеточных культурах почек морских свинок. Для активной специфической профилактики, подкожное введение детям 1-ого года жизни.

Вакцина живая туберкулёзная БЦЖ - лиофильно высушенная культура апатогенного (со сниженной вирулентностью) штамма микобактерий туберкулеза. Применяется для активной специфической профилактики туберкулеза.

Вакцина убитая брюшнотифозная спиртовая – сухая, обогащенная Vi-антигеном (растворитель)—содержит возбудителей брюшного тифа, обезвреженных спиртом и высушенных. Для профилактики. Подкожно!

Вакцина живая бруцеллёзная - готовят из вакцинного штамма бруцелл. Прививки проводят по эпидпоказаниям здоровым людям с отрицательной серологической и аллергической реакцией на бруцеллез. Для профилактики.

Химическая вакцина менингококковая – для активной иммунизации, из очищенных капсульных полисахаридов серогрупп А и С.

Энджерикс В – генно-инженерная вакцина рекомбинантная, содержащая HBsантиген против гепатита В. (рекомбинант с клетками дрожжей)

Вакцина убитая против клещевого энцефалита - культуральный специфический антиген вируса клещевого энцефалита, инактивированного формалином. Применяют в эпидемических очагах для профилактики

Анатоксин стафилококковый – очищенный, адсорбированный, экзотоксин стандартного токсигенного штамма стафилококка, обезвреженный формалином. Для активной иммунизации для профилактики.

Вакцина живая оспенная –Леч-проф. сухая, представляет высушенный со стабилизатором живой вирус осповакцины. Создает прочный иммунитет.

Сибиреязвенная вакцина

ВАКЦИНА ПРОТИВОЧУМНАЯ

Лечебно-профилактическая. (Профилактика). Приготовлена из живых бактерий вакционного штамма чумного микроба, лиофилизированных в сахарозно-желатиновой среде. Используется для создания искусственно-приобретенного активного иммунитета. (Аттенуированная вакцина?)

ДИФТЕРИЙНЫЙ АНТИТОКСИН

Диагностический антительный препарат. Сухой Антитоксин очищен ферментолизом и специфической сорбцией. Представляет собой антитела, выделенные методом иммуносорбции-десорбции на иммобилизованном дифтерийном анатоксине из частично ферментированной лошадиной гипериммунной противодифтерийной сыворотки. Предназначен для определения токсигенности возбудителя дифтерии в реакции иммунопреципитации в геле плотной питательной среды.

ЛЮМИНЕСЦИРУЮЩИЕ СЫВОРОТКИ

Диагностический антительный препарат. Представляют собой иммунные сыворотки, содержащие специфические антитела, меченые флюоресцирующими красителями. Три варианта РИФ(Метод Кунса-экспресс-диагностика для выявления АГ микробов или определения антител):прямой, непрямой, с комплементом.

1. Прямой метод основан на том, что АГ тканей или микробы, обработанный Люм.сыворотками, способны светиться в УФ-лучах люминесцентного микроскопа. Бактерии в мазке светятся по периферии клетки в виде каймы зеленого цвета.

2. Непрямой: выявление комплекса АГ-АТ с помощью антиглобулиновой(против антител) сыворотки, меченой флюор-ом. Для этого мазки из взвеси микробов обрабатывают антителами антимикробной кроличьей диагностической сыворотки. Затем антитела, не связавшиеся антигенами микробов, отмывают, а оставшиеся на микробах антитела выявляют, обрабатывая мазок антиглобулиновой(антикроличьей) сывороткой, меченой фл-ами. Образуется комплекс микроб+антимикробные кроличьи антитела+антикроличьи антитела, меченые фл-ом. Комплекм наблюдается в люминесцентном микроскопе, как и при прямом методе.

ПРЕЦИПИТИРУЮЩИЕ СЫВОРОТКИ

Диагностические антительные препараты. Получают иммунизацией кроликов убитыми микроорганизмами, АГ бактерий и тп. Специфические прец.сыв. применяются при диагностике инфекционных заболеваний(сибирская язва, чума, туляремия, дифтерия), в судмед экспертизе для опр-ия видовой принадлежности белка. Реакция преципитации-осаждение растворимого антигена при действии антител в присутствии электролита

ГЕМОЛИТИЧЕСКАЯ СЫВОРОТКА

Диагностические антительные препараты. Получают путем иммунизции кроликов взвесью эритроцитов барана. Используют для титрования комплемента и при постановке реакции связывания комплемента в индикаторной системе. Титр сыворотки-то ее max разведение, которое в присутствии комплемента вызывает гемолиз 3% взвеси эритроцитов барана.

АД-М АНАТОКСИН

Лечебно-проф. Получают методом кислотно-солевого осаждения обезвреженного формальдегидом и нагреванием токсина, полученного при культивировании возбудителей дифтерии. Вакцинация=>Искусственно-приобретенный активный иммунитет.

Толл подобные рецепторы. Класс клеточных рецепторов с одним трансмембранным фрагментом, которые распознают консервативные структуры микроорганизмов и активируют клеточный иммунный ответ. Играют ключевую роль во врождённом иммунитете. Сигнальная трасдукция. объяснение: в рез-те взаимод-я рецец-в с PAMP(патогенно ассоциированные молекулы) происходит его конформационное изменение=> его взаимодействие с Myd-88=>активация каскада серин-треанин-киназ, кот. фосфорилируют NFKB(универсальный фактор транскрипции, контролирующий экспрессию генов иммунного ответа, апоптоза и клеточного цикла) и он переходит в активное состояние.

Реакция непрямой (пассивной) гемагглютинации выявляют антитела сыворотки крови больного с помощью антигенного зритроциторного диагностиками, который представляет собой эритроциты с адсорбированными на них антигенами.Эритроциты с адсорбированными на них антигенами взаимодействуют с соответствующими антителами сыворотки крови ,что вызывает склеивание и выпадение эритроцитов на дно пробирки или ячейки ввиде фестончатого осадка. При отрицательной реакции эритроциты оседают в виде «пуговки». РПГА ставят в пластиковых планшетках или в пробирках с разведениями сыворотки крови больного, к которым добавляют эритроцитарный диагностикум.

Реакция Кумбса Реакция агглютинации для определения антирезусных антител (непрямая реакция Кумбса). У некоторых больных обнаруживают антирезусные антитела, которые являются неполными, одновалентными. Они специфически взаимодействуют с резус-положительными эритроцитами (Rh+), но не вызывают их агглютинации. Наличие таких неполных антител определяют в непрямой реакции Кумбса. Для этого в систему антирезусные антитела + резус-положительные эритроциты добавляют анти глобул и новую сыворотку (антитела против иммуноглобулинов человека), что вызывает агглютинацию эритроцитов. С помощью реакции Кумбса диагностируют патологические состояния, связанные с внутрисосудистым лизисом эритроцитов, например, гемолитическую болезнь новорожденных: эритроциты резус-положительного плода соединяются с циркулирующими в крови неполными антителами к резус-фактору, которые перешли через плаценту от резус-отрицательной матери. Можно также выявлять неполные антитела против антигенных микробов.

АНАТОКСИН. Образующийся при культивировании бактерий токсин в молекулярном виде превращают в нетоксическую, но сохраняющую иммуногенность форму-анатоксин.(Нагревание 37 гр и обработка 0,4% формалином 3-4 недели). +адъювант для для повышения иммуногенности.(дифтерийный, столбнячный анатоксины и тд).

Септанотоксин(?)-является ослабленным токсином.

Секста (пенте-тетра-три) анатоксин – смесь очищенных анатоксинов, адсорбированных на гидроокиси алюминия. Секста-анатоксин состоит из смеси анатоксинов, полученных из клостридий ботулизма типов А, В, Е столбняка, перфрингенс типа А и эдиматиенс. Пента-анатоксин включает теже компоненты, кроме столбнячного анатоксина. Тетра-анатоксин – смесь ботулинических анатоксинов типов А, В, Е и столбнячного анатоксина. Три-анатоксин – смесь адсорбированных ботулинических анатоксинов типов А, В, Е.

Гемагглютинирующие сыворотки- для определения групп крови системы аво

Конъюгант:участвует в риф и ИФ и является иммуноглобулином человека меченым флюорохромом.(Представляет собой фермент,связанный антиглоб.сывороткой)

Агглютинирующая сыворотка-это реакция на стекле

ЗАДАЧА I-p3.

У больной К. микробиологически подтвержден диагноз «дифтерия». Необходимо решить вопрос о проведении экстренной профилактики дифтерии членами ее семьи. На основании знаний об особенностях иммунитета против дифтерии и мерах ее специфической профилактики, обоснуйте проведение профилактических мероприятий, ответив на вопросы:

1. Какое исследование необходимо провести членами ее семьи для установления необходимости экстренной профилактики дифтерии?

2. Каким препаратом следует проводить профилактику 5-летнему ребенку больной?

3. Каким препаратом следует проводить профилактику мужу больной 36- летнего возраста?

*иммунитет после перенесенного заболевания длительный и напряженный гуморальный антитоксический.(наличие антитоксического иммунитета не препятствует формированию ностельства токсигенных штаммомC.diphtheriae )

ОТВЕТ:

1.Серологический(для оценки антитоксического иммунитета).Для этого применяют РПГА с антигенным эритроцитарным диагностикумом и ИФА.

2.ребенку- АД-анатоксин(лучше), АКДС

3.взрослому-АД-М-анатоксин

ЗАДАЧА I-p4.

Врач заподозрил у больного ребенка дифтерию. На основании знаний о свойствах возбудителя дифтерии обоснуйте ход микробиологического исследования для подтверждения диагноза, ответив на вопросы:

1. Какой метод микробиологического исследования подтвердит диагноз?

2. Обоснуйте выбор материала для исследования для подтверждения диагноза?

3. Какое специфическое лечение может быть назначено больному?

ОТВЕТ:

1.Бактериологический

2.Материалом для исследования служит мазок из носоглотки,уха,влагалища. *Посев на среду Клаумберга(гемолизированная кровь+теллурит калия) теллурит калия нужен для того,чтобы подавить рост кокковой флоры. Далее окраска по Нейссеру.

3.а)Специфическое лечение начинают противодифтерийной сывороткой немедленно,так как антитела не нейтрализуют токсин,проникший в ткани.

*Для предотвращения возможных аллергических реакций перед введением ставят пробу с лошадиной сывороткой в разведении 1:100 для определения чувствительности больного к белкам сыворотки лошади.

Б)этиотропная антибиотикотерапия

ЗАДАЧА КИ-3

У больного после возвращения из сельской местности началось заболевание , которое характеризовалось резким повышением температуры, увеличение и болезненностью шейного лимфатического узла. При микроскопии пунктата лимфатического узла были обнаружены мелкие грамотрицательные полиморфные палочки . Какие исследования стоит провести , чтобы поставить диагноз .

ОТВЕТ:

Речь идёт о чуме .

1)Используют бактериологической и серологический метолы исследования , которые проводят в специальных лабораториях ,работающих в соответствии с инструкциями о режиме работы противочумных учреждений. Материал(мокрота, пунктаты бубонов,кровь , моча и тд) засевают на питательные среды (мясопептонный агар,бульон Хоттингера,элективные среды) и ставят биопробу на морских свинках и белых мышах .

2)РИФ-экспресс-диагностика.

3)Серологические исследования проводятся с постановкой РНГА,ИФА с применением парных сывороток, в которых определяется нарастание титра антител к f1-антигену.

Задача 4

Больной госпитализирован в инфекционную больницу в связи с наличием у него кровавого поноса. Вскоре у него стала развиваться почечная недостаточность. Посевы испражнений на среды Эндо, Левина, Плоскирева не выявили наличие лактозоотрицательных колоний. Как следует продолжать исследование? Какой микроб мог вызвать указанное заболевание?

ОТВЕТ:

1. указанное заболевание мог вызвать возбудитель E. coli (энтерогеморрагический тип )

2. Бактериологическое исследование испражнений. Исследуемый материал засевается на дифференциальные лактозосодержащие среды;после инкубации при 37 градусов в течении 18 ч отбираются колонии, агглютинирующие поливалентной ОВ-агглютинирующей сывороткой,которые идентифицируются до вида по биохимическим тестам ,с последующим определением их серологического варианта

Ip -10

В лабораторном исследовании мокроты больного в микропрепарате, приготовленном по методу Прайса и окрашенном по Цилю-Нельсену, обнаружены тонкие, длинные, слегка изогнутые красные палочки, располагающиеся в виде жгутов(“кос”). На основании знаний о свойствах возбудителя туберкулеза обоснуйте диагностическую значимость метода Прайса, ответив на вопросы:

Преимущества:

А) Быстрота получения данных (48-72 ч)

Б)Получение данных о вирулентности

3.Причина образования микроколоний – корд фактор – фактор патогенности. Этот фактор содержат только вирулентные штаммы. Располагается на поверхности клет. Стенки микобактерий -> тесное склеивание между собой

Ip 9

При медицинском обследовании учащихся 1го класса была поставлена проба Манту.На основании знаний об особенностях иммунного ответа при туберкулезе обоснуйте постановку пробы Манту, ответив на вопросы:

Преимущества:

А) Быстрота получения данных (48-72 ч)

Б)Получение данных о вирулентности

3) Через 5-7 дней

КИ5

У больного Р. появились симптомы острой кишечной инфекции: рвота, водянистый понос, сменившийся кровавым поносом. Посевы испражнений на среды Эндо, Левина, Плоскирева не выявили роста лактозоотрицательных колоний. Реакция агглютинации с поливалентной ОК-сывороткой была отрицательной. Состояние больного продолжало ухудшаться. Какие исследования следует провести, чтобы выявить возбудителя заболевания?

ОТВЕТ: Бактериологический метод(кал) на диф-диагн среду (Эндо)=>лактозо+ колонии. Пересев на среду обогащения(Клиглера)=>диффуз изм окраски без почернения=> определение серогруппы в РА(+)

(Это не шигеллы, т.к. у них понос с примесями крови, а не кровавый понос. И у шигелл есть лактозо- колонии. И при шигеллезе пат процесс только в толстой кишке. Бактериемии нет.)

КИ11

У больного с профузным водянистым поносом были взяты испражнения на исследование, которые были посеяны на щелочную 1% пептонную воду, лактозосодержащие дифференциальные среды и приготовлен мазок, который был исследован в РИФ. Исследование мазка из испражнений в РИФ, а также посев на пептонную воду дало отрицательный результат. На лактозосодержащих средах был отмечен рост только лактозоположительных колоний. Объясните ход микробиологического исследования. Как его следует продолжить для выяснения возбудителя заболевания?

ОТВЕТ: : 1.На пепт воду-отриц результат=> возбудитель-не холерный вибрион.

2. Рост лактозо + колоний=>E.coli. Необходимо серотипирование возбудителя в реакции агглютинации с поливалентной ОК-сывороткой.

3. “Диарея путешественников”-холероподобное заболевание, вызванное ЭТКП(энтеротоксиген кишеч палочка). Факторы патогенности: термостабильный и термолабильный энтеротоксины, пили IV типа(факторы колонизации)

1-р13. У больного лепрой лепроминовая проба показала отрицательный результат. На основании знаний об иммунопатологических процессах при лепре обоснуйте результат реакции, ответив на вопросы. Какая у больного форма заболевания? О чем свидетельствует отрицательная реакция на лепромин? Каким методом диагностики можно подтвердить диагноз?  

ОТВЕТ: 1) Лепроматозная форма заболевания.2) Реакция свидетельствует о слабой способности организма отвечать на возбудителя.3) Бактериоскопическое исследование тканевой жидкости, мокроты, пунктатов лимфатических узлов, гистологических биоптатов. Серологическая диагностика: обнаружение антител к фенольному гликолипиду с помощью ИФА.

1-р14. При бактериологическом исследовании материала, полученном от больного с подозрением на туберкулез кожи, рост колоний на питательной среде появился после 7 дней инкубации. На основании знаний о свойствах микобактерий, обоснуйте результаты анализа, ответив на вопросы. На какую среду был сделан посев? Можно ли считать, что у больного туберкулез кожи? Какие дополнительные исследования точно установят диагноз?  

ОТВЕТ: 1) Среда Левенштайна-Йенсена или среда Финна 2. 2) Возможно, да, так как M.tuberculosis растет на жидких средах в виде сухой морщинистой пленки кремового цвета. (???)  3) Проба Манту, диаскин-тест(?).

КИ-2) Работников продовольственного магазина следует обследовать на носительство шигелл и сальмонелл. Какие исследования и каким образом следует провести, чтобы сделать заключение “патогенные бактерии не обнаружены”.

ОТВЕТ:Материал для иссл-кал. Нужен ректальный мазок. Засевать на накопительные питательные жидкие среды=>пит.среда лактозосодерж=>см.лактозонегатив.колонии=>Энтеропатогенные бактерии не обнаружены.

(У шигелл еще после лактозы пересев на среду Клиглера и среду Гисса с маннитом).

КИ-9) При проведении плановой диспансеризации рабочих мясокомбината у них была взята сыворотка для постановки реакции Райта. Титры реакции Райт у всех обследованных не превышали 1:50 ( диагностический т итр 1:100). Достаточно ли проведенного исследования для констатирования отсутствия у обследованных з аболевания бруцеллезом? Не достаточно, так как для при массовом обследовании применяют ещё реакцию Хеддельсона (пластинчатая агглютинация для выявления агглютинирующих и неполных блокирующих антител), РПГА, ИФА, реакцию Кумбса, к ожно-аллергическую пробу Бюрне ( выявление ГЗТ к бруцеллам у больных, инфицированных, привитых живой бруц. вакциной, может быть положительной после болезни и у привитых). Реакция Кумбса применяется при хронических и латентных формах бруцеллеза ( в сыворотке есть антирезусные антитела, взаимодействуют с Rh+ эритроцитами, не вызывая их агглютинации, но вызывают её при добавлении антиглобулиновой сыворотки). Также используют для выявления бруцелл бактериологический и биологический (выделение бруцелл из к онтаминированных материалов посторонней микрофлорой или содержащих небольшое к оличество возбудителей) методы.

P 6

Больному ребёнку, с подозрением на коклюш, врач назначил проведение бактериологического исследования. На основе знаний о возбудителе коклюша обоснуйте ход микробиологического исследования, ответив на вопросы: На какую среду следует провести посев? Каким методом следует провести посев? Через какой срок будет получен результат посева?

ОТВЕТ: 1.для выделения бордетелл применяют казеиново-угольный агар(КУА) или среду Борде-Жангу (картофельно-глицериновый агар с добавлением крови человека и пенициллина).

2. Материал для исследования-слизь с задней стенки глотки- отбирают методом «кашлевых пластинок», при котором посев делают во время приступа кашля непосредственно на чашку Петри с питательной средой, держа её перед лицом пациента.

3.Через 5-7 дней будет получен результат исследования.

Доп: Диагностика: РА на стекле с К-сыворотками, прямую РИФ со специфической флюоресцентный сывороткой и материалом из зёва больного, ИФА и ПЦР. Серологическая диагностика: развёрнутая РА, РПГА, РСК или непрямую РИФ.

В лабораторию материал нужно нести при t=37.

В воинской части один из солдат заболел дифтерией. При бактериологическом исследование мазков из носоглотки сослуживцев, проживающих с больным в одной казарме, от военнослужащего Р. была выделена токсигенная C.diphtheria. Мог ли военнослужащий Р. быть источником инфекции? Почему наличие в носоглотке военнослужащего Р. возбудителя дифтерии не привело к развитию у него заболевания? Как оценить восприимчивость других солдат к дифтерии? Предложите иммунологические препараты для специфической профилактики дифтерии контактировавших с больным солдат.

ОТВЕТ:1. Военнослужащий Р. мог быть источником инфекции.

2. Солдат является носителем, не заболел дифтерией, потому что имеет высокий антитоксический иммунитет.

3. Определить РПГА титр антител

4. Для профилактики вакцинируют АДСМ/АДМ вакциной.

Доп: Дифтерию лечат антитоксической дифт. Сывороткой+антибиотики.

К15

Летом 2011 года в странах Западной Европы вспыхнула эпидемия кишечной инфекции, вызванная ЭГКП. Заболевание сопровождалось развитием геморрагического колита и гемолитико-уремического синдрома. Были летальные случаи,

К23

В инфекционное отделение больницы поступила пациентка с подозрением на холеру. установлено, что накануне она прилетела из Индии, где отдыхала вместе с семьей. в самолете подавали салат из морепродуктов. сразу по прибытии в аэропорт у женщины появилась рвота, боли в животе, частый жидкий стул, повысилась температура тела.

К1

Для диагностики брюшного тифа на 1 неделе заболевания и в течение всего лихорадочного периода, материалом для исследования является кровь больного, из которой выделяют возбудителя. Обоснуйте возможность выделения возбудителя из крови на основе знаний патогенеза брюшного тифа.

ОТВЕТ: Патогенез характеризуется цикличностью течения. Возбудитель попадает через рот, достигает тонкой кишки, где размножается в лимфатических образованиях, из кот-х попадает в кровь( стадия бактериемии). С током крови разносится по организму, оседая в паренхиматозных органах( селезенке, печени, легких, костном мозге). Из печени попадают в желчный пузырь, где сохраняется годами, а затем вновь в тонкую кишку. В результате повторного попадания в тонкую кишку, здесь развивается аллергическая реакция=>некроз лимфатических образований.

К22

Мужчина с клиническим диагнозом «брюшной тиф». Установлено, что пациент болен в течение 5 дней. При посеве крови больного на плотные среды s.typhi выделить не удалось, а из фекалий выделены только лактозоположительные колонии.

ОТВЕТ: Ошибки: фекалии, мочу и желчь берут на посев только со второй недели болезни, кровь берут в первую, предварительно сделав ее посев на жидкую среду (желчный бульон) для обогащения.

Патогенез брюшного тифа:

1. Инкубационный период (10-14 дней): попадание возбудителя в пищеварительный тракт, адгезия и колонизация поверхности тонкой кишки. Проникновение в пейеровы бляшки и солитарные лимфатические фолликулы через М-клетки. Незавершенный фагоцитоз макрофагами, в которых происходит размножение бактерий. Благодаря макрофагам бактерии попадают в мезентериальные и забрюшинные лимфатические узлы, в которых развивается лимфаденит. Период заканчивается прорывом лимфатического барьера и попаданием бактерий в кровяное русло – первичная бактериемия. Под влиянием гуморальных факторов крови часть бактерий погибает, высвобождая эндотоксин – первые клинические проявления болезни.

2. 1я неделя – возбудитель циркулирует в крови, нарастают неспецифические симптомы, связанные с действием эндотоксина.

3. 2я неделя – проникновение в паренхиматозные органы. Из печени с током желчи попадают вновь в тонкую кишку, где повторно инвазируют сенсибилизованный лимфоидный аппарат кишки. Развивается гиперэргический воспалительный процесс: набухание фолликулов -> некроз и отторжение -> образование язв и их заживление.

4. Конец 2ой недели – 3я неделя – возбудитель вместе с некротическими массами начинает поступать в просвет кишечника и выделяться с фекалиями.

Соответственно, рационально на первой неделе болезни (бактериемия) брать кровь, с конца 2-начала 3 недели делать посев фекалий.

Бактериологический метод:

1. Посев крови на жидкую среду для накопления

2. Пересев на плотную питательную среду (Эндо, Плоскирева, Левина, ВСА)

3. Оценка культуральных свойств:

-рост бесцветных колоний на лактозосодержащих средах (лак-)

-на среде Клингера: глю+(изменения цвета столбика среды),лак-(не изменен цвет скошенной части), H2S+(почернение среды)

-антигенные свойства: постановка РА с адсорбированными сальмонеллезными сыворотками

4. Фаготипирование

5. Определение чувствительности к антибиотикам методом дисков

Серологический метод:

1. РПГА – парные сыворотки для определения нарастания титра антител с О- и Vi диагностикумами – 4х кратное увеличение титра АТ

2. ИФА для определения АТ/О- и Н-АГ возбудителя.

К19

В инфекционное отделение поступил ребенок с клиническим диагнозом «острый гастроэнтерит». В бактериологической лаборатории из испражнений и рвотных масс больного выделен возбудитель Escherichia coli (O111: K55).

Перечислите группы диареегенных эшерихий и определите, к какой из них относится выделенный возбудитель. Составьте схему микробиологического исследования, которое позволило определить указанный серовар кишечных палочек. Ответ обоснуйте.

ОТВЕТ:ЭПКП(Энтеропатогенные), ЭТКП(Энтеротоксигенные), ЭИКП(Энтероинвазивные), ЭГКП(Энтерогеморрагические), ЭАКП(энтероадгезивные). Наша эшерихия-ЭПКП(серогруппа по О-антигену.+ ЭПКП вызывает диарею у детей).

Лаб.диагностику проводят бактериологическим методом. Материал(испражнения, рвотные массы) засевают на дифференциальные лактозосодержащие среды(ср. Эндо), после 18 ч инкибуции при t=37гр отбирают те колонии, которые агглютинируются поливалентной агглютинирующей ОВ-сывороткой. Затем дифференцируют до вида по биохимическим свойствам. Определяют серогруппу и серовар с помощью РА на стекле с адсорбированными монорецепторными сыворотками.

I-p7

  Больному ребенку, с подозрением на коклюш, врач назначил проведение бактериологического исследования. На основе знаний о возбудители коколюша обоснуйте забора и доставки метериала для исследования в лабораторию, ответив на вопросы:1. что такое метод «кашлевых пластинок»? 2. Какую среду надо выбрать для посева? 3. В каких условиях доставить материал в лабораторию?  

ОТВЕТ: 1. Материал для исследования-слизь с задней стенки глотки. Во время приступа кашля перед лицом пациента держат чашку Петре с питательной средой, в результате чего осуществляется посев. Мазки делают редко так как микроб быстро погибает на тампоне при высушивании. 2. Сложные питательные среды с добавлением сорбентов (уголь, крахмал), так как бактерии выделяют ненасыщенные жирные кислоты, сульфиды и перекиси, ингибирующие их рост. Среда Борде-Жангу (картофельно-глицериновый агар с добавлением 20% крови и пенициллина).3. Материал доставить в лабораторию при температуре 37С.

I-p8  

В хирургическом отделении клиники, снабженной кондиционерами, у 5 пожилых пациентов возникло воспаление легких. Рутинный бактериологический анализ не смог выявить возбудителя. Эпидемиолог клиники предположил, что пневмония вызвана бактериями рода Legionella. На основании знаний о свойствах легионелл обоснуйте предположение эпидемиолога, ответив на вопросы: 1. Какой метод микробиологического исследования подтвердит этиологическую роль легионелл?2. Каким образом произошло заражение пациентов . 3. Следует ли изолировать заболевших пневмонией пациентов от других больных?  

ОТВЕТ: 1. Серологический метод: определяемое четырехкратное нарастание титра антител в парных сыворотках, реакции ИФА, РИФ непрямой. На 2-10 сутки можно выявить растворимый антиген в моче методом ИФА. 2. Аспирационный механизм передачи возбудителя. Легионеллы колонизировали кондиционеры в больничных палатах, которые образовали мелкодисперсный аэрозоль с микробом, вдыхаемый пациентами.3. Нет, так как от человека к человеку болезнь не передаётся.

Задача 1к-8

В городскую инфекционную больницу поступило несколько больных, с симптомами холеры. Из испражнений всех этих больных был выделен холерный вибрион серогруппы О1. Все заболевшие венулись из Индии, где проводили отпуск.

КИ 8) В детском санатории на протяжении 3 недель заболело 16 детей. Заболевание характеризовалось болями в горле, гиперемией лица, высыпаниями на туловище, тошнотой, рвотой, болями в правой половине живота. В меню санаторных обедов ежедневно был включён салат из сырой капусты и моркови. Овощи хранились в чулане, расположенном на подсобном дворе. Какие лабораторные исследования следует провести, чтобы поставить диагноз?

ОТВЕТ:Иерсиниоз (кишечный иерсиниоз?).

Бактериологический метод.

1) Посев на фосфатный буферный раствор (для обогащения)

2) Холодовое обогащение(психрофил).всего 3 недели, каждые 3 дня происходит высев на лактозосодержащюю среду Эндо.

3) Отбор лактозоотрицательных колоний, пересев на МПА

4) Идентификация по биохимическим свойствам, антигенной структуре

Серологический метод.

1) ИФА для определения специфических IgM и G. Наличие IgM свидетельствует об острой инфекции.

2) РПГА/РА (со 2й недели)

Р2

При оформлении на работу в детский сад гражданка М. прошла медицинское обследование. Из материала со слизистой носоглотки у неё была выделена дифтерийная палочка. Однако гражданка М. была принята на работу. На основании знаний свойствах возбудителей респираторных инфекций обоснуйте возможность принятия М. на работу, ответив на вопросы: 1. Какая питательная среда была использована для выделения дифтерийной палочки? 2. Установление какого свойства выделенного микроба позволило принять гражданку М. на работу? 3. Какими методами было проведено исследование свойства дифтерийной палочки, позволившее принять гражданку М. на работу в детский сад?

ОТВЕТ: 1) Растет на сложных питательных средах.

Для первичного посева использована среда Клауберга (содержит теллурит калия – подавляет рост сопутствующей микрофлоры).

*Для накопления чистой культуры:

· элективная среда Ру (или Ру-Леффлера)

2) Токсигенного свойства

3) постановка РПГА, ИФА, двойной (встречной) иммунодиффузии в агаре по Оухтерлони, дополнительные пробы на цистиназу (проба Пизу), уреазу (проба Закса) и реакцию агглютинации с агглютинирующей дифтерийной сывороткой.

К16

В детском санатории на протяжении 2 недель заболело 16 детей. Заболевание характеризовалось появлением тошноты, рвоты, болей в правой половине живота, напоминающих приступ острого аппендицита. Осмотр детей хирургом исключил острый аппендицит, а врач-инфекционист предположил, что у детей инфекция, вызванная энтеропатогенными бактериями.

· Назовите заболевания, вызываемые энтеропатогенными иерсиниями и их возбудителей.

· Назовите методы микробиологической диагностики этих заболеваний.

ОТВЕТ:1)Псевдотуберкулез (Yersinia pseudotuberculosis), кишечный иерсиниоз (Y. Enterocolotocа).

Бактериологический метод.

1) Посев на фосфатный буферный раствор (для обогащения)

2) Холодовое обогащение(психрофил). всего 3 недели, каждые 3 дня происходит высев на лактозосодержащюю среду Эндо.

3) Отбор лактозоотрицательных колоний, пересев на МПА

4) Идентификация по биохимическим свойствам, антигенной структуре.

Серологический метод.

1) ИФА для определения специфических IgM и G. Наличие IgM свидетельствует об острой инфекции.

1) РПГА/РА (со 2й недели)

P14

При исследовании мазков из зёва больного ребёнка, окрашенных по Нейссеру, обнаружили мелкие палочки, расположенные под углом друг к другу, с зёрнами волютина на полюсах клеток. Назовите предполагаемого возбудителя. Перечислите свойства, по которым можно дифференцировать дифтерийную палочку от коринеформных бактерий. Назовите методы определения токсигенности дифтерийной палочки.

ОТВЕТ: 1. Возбудитель – Corynebacterium diphtheriae

2. Отсутствие способности ферментировать сахарозу и разлагать мочевину(отрицательная проба Закса, цвет бульона с мочевиной и феноловым красным не изменяется) является важным диагностическим признаком, отличающим C. Diphtheriae от других коринобактерий. + В отличие от коринеформных бактери, C. Diphtheriae на простых питательных средах не растёт. C. Diphtheriae относится к факультативным анаэробам, коринеформные- к облигатным.

3. ПЦР (на наличие tox-гена) полоску бумаги, пропитанную антитоксином наносят на чашку, а исследуемые культуры засевают бляшками по обе стороны бумажной полоски. Контролем служит заведомо токсигеннаякультура, также посеянная «бляшкой». В результате встречной диффузии токсина и антитоксина в месте их контакта выпадает линия преципитации, сливающаяся с линией преципитации токсигенного штамма.

К-10

Из испражнений больного с острой кишечной инфекцией неясной этиологии выделена чистая культура грамотрицательных лактозонегативных палочек. Обоснуйте с микробиологической позиции выбор материала для исследования и назовите методы диагностики острых бактериальных кишечных инфекций. Перечислите этапы бактериологического исследования, которые были проведены в данном случае. Предложите схему дальнейшего исследования.

ОТВЕТ:: Возбудитель локализуется в эпителиальных клетках толстой кишки- материалом для исследования служат испражнения. Методы диагностики ОКИ- бактериологический, серологический. Были проведены этапы посева на среды обогащения (селентиновый бульон) и на элективно-дифференциальные среды (лактозосодержащие среды Эндо, Плоскирева,Левина) Дальнейшее исследование: -посев колоний на среду Клиглера, чтобы провести предварительную дифф-ию до рода -окончательная идентификация до рода и вида- проведение биохимической идентификации с помощью дифференциально-диагностических сред; определение антигенной структуры возбудителя -внутривидовая идентификация ОКИ для обнаружения источника инфекции Серологический метод - РПГА

Задача1. В двух группах детских яслей трое детей почти одновременно (20-24 сентября) заболели шигеллёзом. Больные госпитализированы, от всех выделены штаммы вида Shigella sonnei. Важно выяснить, произошло ли заражение детей от одного источника, или одновременное возникновение заболевания является случайным совпадением и источник заражения следует искать вне яслей. Каким образом врач-бактериолог может решить эту задачу?  

ОТВЕТ:1. Благоприятной средой для шигелл служат пищевые продукты. Shigella sonnei в молоке и молочных продуктах способны не только жить, но и размножаться. Разумно предположить, что дети отравились некачественными молочными продуктами. Стоит проверить качество данных продуктов.

Задача2. В сельскую больницу из дальнего поселка соседи привезли лесника в очень тяжелом состоянии: сознание спутанно, временами бредит, температура 40, но при этом отмечается брадикардия, кожные покровы бледные, на коже живота и груди-розеолезная сыпь, печень и селезенка увеличены. При расспросе соседей удалось выяснить, что, вероятно, лесник болен около двух недель. В районной СЭС сообщили, что данная местность считается неблагополучной по брюшному тифу. Врач предположил у больного брюшной тиф. Какой материал ля исследования следует взять у больного, чтобы подтвердить диагноз? Какие методы диагностики надо применить? Перечислите необходимые питательные среды.  

ОТВЕТ: 1) У больного следует взять мочу, испражнения и желчь (болеет около 2 недель). 2) Методы диагностики определяются стадией течения болезни. С конца второй недели производят выделение копро-, урино- и биликультур. Начиная со второй недели, проводят серологическое исследование в целях определения наличия антител в РНГА. Положительный титр не менее 1:200. Также используют постановку ИФА. 3) На 1 неделе заболевания посев крови в желчный бульон с пересевом на дифференциально-элективные среды (Эндо, Плоскирева, висмут-сульфитный агар).

Задача3. В хирургическое отделение доставлен больной больной с диагнозом "острый аппендицит". Для дифференциальной диагностики аппендицита от токсикоинфекции в баклабораторию больницы были направлены фекалии больного. При бактериологическом исследовании фекалий обнаружили граммотрицальные средних размеров палочки с округленными концами, беспорядочно расположенные в мазке, не ферментирующие лактозу. Какие микробы, вызывающие пищевые токсикоинфекции, могут иметь такие признаки? Почему на основании полученных результатов нельзя назвать возбудителя? Какие исследования надо ещё провести?  

ОТВЕТ:1)Возбудитель-сальмонелла. 2)По биохимическим свойствам они идентичны, поэтому производят дифференцировку на серогруппы (общность строения О-антигена) и на серовары (различия в строении Н-антигена). (????)

В одной из московских гостиниц заболел турист, накануне прилетевший из Индии. У больного повысилась температура, появилась рвота, боли в животе, частый жидкий стул. Больной госпитализирован с подозрением на холеру.

В гостинице «Космос» поселился турист, прилетевший из Индонезии. На следующий день после приезда он обратился к врачу с жалобами на слабость, рвоту, боли в животе, частый жидкий стул типа «рисового отвара». При микроскопии в рвотных массах больного были обнаружены грам-отрицательные слегка изогнутые палочки. Врач заподозрил холеру.

Обоснована ли постановка данного диагноза при таких результатах микроскопии? Какие микробиологические исследования необходимо провести, чтобы подтвердить диагноз? Как определить чувствительность возбудителя к антибиотикам?

ОТВЕТ::1)Не обосновано, микроскопия не показательная при диагностике кишечных инфекций.

2)Диагностика проводится по бактериологическим, серологическим медотам.

Этапы:

1. Посев рвотных масс на среду обогащения- щелочную пептонную воду.

2. Пересев на чашки с плотными элективными средами для получения роста колоний

- TCBS среда – рост желтых колоний (ферментация сахарозы

3. Посев на диф-диагностические среды с сахарозой, маннозой, арабиозой, среду Клингера, оксидазная активность

-Манноза +

-Сахароза +

-Арабиоза –

-Оксидаза +

4. Постановка РА с сыворотками О1 и О139 – Положительная реакция с одной из сывороток

5. Определение чувствительности культуры к антибиотиком методом дисков

Можно ли на основании полученных результатов утверждать, что данный пациент не является бактерионосителем после перенесенного заболевания? Какие еще исследования позволят оценить формирование бактерионосительства при брюшном тифе?

ОТВЕТ:1) Нельзя, пациент может быть бактерионосителем.

2)Серодиагностика на бактерионосительство: постановка РПГА с Vi-эритроцитарным диагностикумом.

Задача 10

Задача 11

Какие возбудители могут быть причиной бактериальной дизентерии? Какие правила необходимо соблюдать, забирая материал для исследования? Какие среды нужно использовать для выделения чистой культуры возбудителя?

ОТВЕТ: 0. Возбудители: S.dysenteriae; S.sonnei; S.flexneri - они инвазируют слизистую оболочку кишки с последующим межклеточным распространением. Кроме того все шигеллы продуцируют белковые шига и шигаподобные цитоксины, которые поражают эндотелий, следствием чего является появление в кале крови.

0. При сборе испражнений для выделения шигелл следует учитывать : - Шигеллы наход-ся в слизи и гное, поэтому отбирают пробы, которые содержат слизь или гной; - Первые порции кала- пробки в нижней части кишки, где микроорганизмы могли погибнуть, поэтому для посева отбирают порции кала, которые находятся в верхней части прямой и сигмовидный кишки; - Для исследования не следует брать жидкие порции испражнений, которые являются, содержимым нижнего отрезка тонкой кишки; - Прямой посев проводят в палате, иначе в постоявших испражнениях будут происходить процессы брожения, в которых идёт кислая реакция - при которой шигеллы погибают; - Собранный материал относят в лабораторию в специальной транспортной среде( среда обогащения) - глицериновая смесь; - После доставки в лабораторию- обеспечивают в транспортной среде высев материала на плотную элективно-дифференциальную среду; - Испражнения, которые доставлены в консерванте хранят до посева при температуре 4*C.

0. Плотные среды- среда Плоскирева, Эндо, Левина, Клиглера.

Задача12

У девяти больных, проживающих в соседних поселках области, неблагополучной по брюшному тифу, была выделена гемокультура Salmonella typhi. Этот же вид возбудителя был обнаружен в колодезной воде одного из поселков.

Из крови больного выделена чистая культура грам-отрицательных палочек с закругленными концами, образующая на среде Левина гладкие, блестящие бесцветные колонии. При дальнейшем исследовании выделенного микроба установлено, что он расщепляет глюкозу, образует сероводород, имеет фермент лизиндекарбоксилазу.

У детей младшей группы детского сада через несколько часов после завтрака появились боли в животе, тошнота, рвота, диарея. Установлено, что на завтрак дети ели творог. Врачи поставили клинический диагноз: «пищевая токсикоинфекция».

Рабочих одной из строительных фирм были госпитализированы с признаками острой кишечной инфекции. От всех больных были выделены возбудители одного вида – Salmonella enteritidis. Установлено, что все рабочие обедали в одной столовой.

К третьему дню пребывания в стационаре состояние больного ухудшилось – повысилась температура, участился стул с примесью слизи и крови, появились сильные боли в животе, рвота. При бактериологическом исследовании испражнений больного – на средах Левина и Плоскирева ожидаемые лактозонегативные колонии отсутствуют.

Как объяснить возникшую ситуацию? Назовите возможную причину ухудшения состояния больного на фоне назначенного лечения. Как объяснить полученные результаты бактериологического исследования? Какие микробиологические исследования следует провести для уточнения диагноза?

ОТВЕТ: 1.К середине 60-х годов появились формы шигелл (80—90 %), устойчивые к левомицетину, что привело к значительному снижению его активности при дизентерии. Левомицетин при этой инфекции обычно заменяют. Поэтому антибиотикотерапия могла привести к ухудшению состояния.2. Колонии могли не вырасти из-за перехода шигелл в некультивируемую форму под влиянием левомицетина(Генетически регулируемое состояние, в которое они могут переходить под влиянием неблагоприятных условий и сохранять жизнеспособность до нескольких лет)=>Бактерии не размножаются=>не образуют колоний на плотной питательной среде. Кроме того, роста колоний могло не быть из-за гибели шигелл в кале. Или из-за неправильного сбора. Нужно учитывать: #Шигеллы находятся гл.образом в слизи, крови и гное; #Брать следует средние порции(не первые, в которых бактерии могли погибнуть, и не последние, жидкие, которые являются содержимым тонкой кишки);#Посев нужно делать в палате больного, т.к. в постоявших испражнениях возникнут процессы брожения=>кислая реакция=>шигеллы гибнут. 3. В качестве вспомогательного метода используют серологический метод с постановкой РПГА. Для обнаружения НФБ используют молекулярно-генетические методы (ДНК—ДНК-гибридизация, ПЦР), а также более простой метод прямого подсчета жизнеспособных клеток. С этой целью к исследуемому материалу добавляют в небольшом количестве питательные вещества (дрожжевой экстракт) и налидиксовую кислоту (для подавления синтеза ДНК) на несколько часов.

В инфекционное отделение поступил больной с клиническим диагнозом: « брюшной тиф». Установлено, что пациент болен в течение 7-8 дней. Из крови больного S.typhi выделить не удалось, а при посеве испражнений на среды Эндо и Левина отмечен обильный рост лактозоположительных колоний (при этом лактозонегативные колонии отсутствуют).

Какие микробы могут дать такой рост? Какой метод следует использовать для окрашивания выделенного возбудителя? На какие морфологические и тинкториальныеособенности микробов следует обратить внимание?. Какой метод микробиологической диагностики является основным и как определить биовар и токсигенность возбудителя?

ОТВЕТ: 1. Corynebacterium diphtheria (возбудитель дифтерии) предположительно, бактерии биовара mitis.

2. Окраска по Нейссеру (+по Леффлеру метиленовым синим)

3. При окраскепо Нейсерру выявляются утолщения на концах палочек (из-за зёрен волютина). Зёрна волютина воспринимают анилиновые красители более интенсивно, чем цитоплазма, вследствие метахромазии они приобретают необычный цвет.

4. Основной метод диагностики бактериологический, биовары делят по способности ферментировать крахмал, токсигенность определяют по реакции преципитации.

24)При оформлении на работу воспитательницей в детский сад гражданка М. прошла тщательное медицинское обследование. Из материала со слизистой носоглотки у нее была выделена дифтерийная палочка. Однако, несмотря на это, гражданка М. была принята на работу.

Задача 25. Больная поступила в инфекционное отделение с диагнозом «дифтерия». Диагноз микробиологически подтвержден. Необходимо решить вопрос о проведении экстренной профилактики членам его семьи. Какие исследования необходимо провести и какие препараты следует назначить, если в семье есть ребенок 8 лет, муж больной 36 лет и мать 60 лет?

ОТВЕТ:1.Серологический(для оценки антитоксического иммунитета).Для этого применяют РПГА с антигенным эритроцитарным диагностикумом и ИФА.

Детям от 6 лет и взрослым - АД-М-анатоксин.(Если ребенку менее 6 лет,то АД-анатоксин(лучше), АКДС).

Какие микробиологические исследования необходимо провести для подтверждения диагноза? Какие препараты следует использовать для этиотропного лечения? Какие исследования необходимо провести перед выпиской выздоровевшего ребенка из больницы?

ОТВЕТ:Микробиологические исследования для подтверждения диагноза: бактериологическое исследование: материалы для исследования-слизь и пленки с очагов воспаления. Транспортируют тампоны с раствором глицерина. На простых питательных средах не растёт. Для первичного посева используют дифференциально-диагностические среды, содержащие гемолизированную кровь барана и теллурит натрия (среда Клауберга), на которых образуются колонии чёрного цвета (24-48 ч). В качестве элективных сред: среда Ру-Леффлера (3 части лошадиной сыворотки и 1 часть мясопептонного бульона с 1% глюкозы) и агар с добавлением 10% лошадиной сыворотки (среда Ру), вырастают желто-кремовые колонии (8-14 ч). 2. Этиотропное лечение: этиотропная антибиотикотерапия и специфическая противодифтерийная лошадиная сыворотка (перед введением ставят кожную пробу в разведении 1:100 для определения чувствительности больного к белкам сыворотки)  3. Перед выпиской необходимо провести серологический метод исследования: реакцию РНГА(РПГА) с антигенным эритроцитарным диагностикумом.

Из центрифугата утренней порции мочи, взятой у больного с подозрением на туберкулез почек, был приготовлен мазок и окрашен по методу Циля-Нельсена. В мазке обнаружены единичные кислотоустойчивые палочки.

ЗАДАЧА Б

Из мочи больной, находящейся в урологическом отделении в течение 10 дней по поводу пиелорефрита и обострения мочекаменной болезни, были высеяны K . oxytoca в конценрации 10^ 5 КОЕ, S . saprophyticus в концентрации 10^ 8 КОЕ и E . coli в концентрации 10^ 2 КОЕ.

Задача№2

Задача Д

При использовании серологического метода при скрининговом обследовании на урогенитальный хламидиоз важное значение имеет тип антигенного диагностикума. Назовите тип антигена, из которого будет приготовлен диагностикум, постановка серологического теста (ИФА) с которым исключит появление ложноположительных результатов.

ОТВЕТ: С помощью РИФ и ИФА определяют антигены хламидий в исследуемом материале. Комплексное определение иммуноглобулинов M, G, A в РИФ и ИФА является наиболее достоверенным методом и позволяет определить стадию развития заболевания.

Задача

А. Больной был прооперирован по поводу абсцесса кишечника. Из гнойного экссудата была выделена культура B. fragilis. Назовите факторы патогенности этого микроба, способствующие развитию этого процесса.

ОТВЕТ:

Факторы патогенности B. fragilis:

· Липополисахаридный эндотоксин - синдром эндотоксинемии;

· Гистолитические ферменты (протеиназы, гиалуронидаза, липазы, нуклеазы и пр.):

- Деструкция тканей, матриксных белков (коллагена, фибронектина, ламинина), фибрина;

- Подавление иммунитета (деструкция иммуноглобулинов, комплемента);

· Ферменты, инактивирующие кислород (каталаза, супероксиддисмутаза) - выживание в аэробных условиях (аэротолерантность);

· Капсульный полисахарид - подавление фагоцитоза, абсцедирование;

· Лектиноподобные поверхностные белки - адгезия (мезотелиальные, эпителиальные клетки);

· Гепариназа - локальные тромбозы и тканевая ишемия;

· Летучие и длинноцепочечные жирные кислоты - антифагоцитарный эффект;

· Бета-лактамазы - устойчивость к антибиотикам (ванкомицину, гентамицину, канамицину, стрептомицину);

· IgA-протеаза - подавление иммунитета слизистых оболочек (разрушение секреторных антител);

В. Студент во время купания в грязном пруду получил травму стопы с повреждением наружных покровов. Рана была ушита, однако на следующие сутки вокруг хирургического шва появился отек. Кожа приняла серо-синий цвет. Рана резко болезненна, края её бледные, отёчные, безжизненные, дно раны сухое. Окраска видимых в ране мышц напоминает варёное мясо. При надавливании на края раны из ткани выделяются пузырьки газа с неприятным сладковато-гнилостным запахом. Поставлен диагноз "Газовая гангрена".

Зоо5

У больной, по профессии доярки, которая обратилась в женскую консультацию с проблемой бесплодия был заподозрен хронический бруцеллез. Была взята сыворотка крови, с которой была поставлена реакция Райта. Титр противобруцеллезных антител оказался в 2 раза ниже диагностического. Объясните, достаточно ли проведенного исследования для исключения у больной бруцеллеза.

ОТВЕТ: Недостаточно. Реакция Райта используется для диагностики бруцеллеза в период разгара. Необходима реакция Кумбса для выявления неполных антител в стадию ремиссии.

Задача №9 ФПНПК

У больного Т. С диагнозом “сифилис”, прошедшего курс лечения, была взята кровь для исследования в реакциях микропреципитации(МП) и РИФ. Были получены следующие результаты: МП-“отрицательная”, РИФ-“положительная”. Как объяснить полученные результаты?

ОТВЕТ: МП относится к отборочным тестам и используется для контроля эффективности лечения. Бывает положительной на ранних этапах заболевания. РИФ явл-ся диагностически подтверждающим тестом и, в связи с длительным сохранением специфических АТ в организме, не может быть использована для оценки эффективности лечения=> РИФ ложноположительна.

Больной сифилисом прошел курс лечение. После чего у него был произведен анализ крови на обнаружение специфических антител реакцией микропреципитацией(МП) с кардиолипиновым диагностикумом и ИФА, в котором в качестве антигена использовался специфический белковый антиген. Результаты проведенного исследования следующие: МП-отрицательный результат; ИФА-положительный результат. Оцените полученные результаты и эффективность лечения.

ОТВЕТ: МП относится к отборочным тестам и используется для контроля эффективности лечения. Бывает положительной на ранних этапах заболевания. Т.к. МП отр=>лечение эффективно. ИФА явл-ся диагностически подтверждающим тестом и, в связи с длительным сохранением специфических АТ в организме, не может быть использован для оценки эффективности лечения=> ИФА ложноположителен.

Задача 2: Через месяц после приезда из Карелии, куда пациент ездил порыбачить в лесных озёрах, у него началась лихорадка, миалгия и на коже шеи появилась кольцевидная эритема. Эритема постоянно увеличивалась в размерах. Какое заболевание можно предположить? Кто возбудитель этого заболевания? Как оно передалось больному? Какими лабораторными методами можно подтвердить диагноз?

ОТВЕТ: 1. Болезнь Лайма;

2. Боррелиоз, патогенные виды рода Borrelia ( B. Burgdorferi);

3. Передалось через укус клеща рода Ixodes;

4. Серологический метод ( используют непрямой РИФ и ИФА); прямая бактериоскопия; ПЦР( для определения наличия боррелий в кожном биоптате, крови).

Задача 4 Кровяные инфекции: У больного, которому была сделана пересадка почки, после игры с кошкой появились симптомы лимфаденита, а после чего появились васкулярные поражения кожи. Какое заболевание могло возникнуть у больного? Кто является возбудителем? Какие свойства у возбудителя заболевания?

ОТВЕТ:1. Болезнь Брилля- Цинссера- протекает тяжело с поливисцеральными поражениями, включая: легкие, почки сердце, и т.д.; 2. R. prowazekii - возбудитель эпидемического (передаваемого вшами) сыпного тифа и болезни Брилля- Цинссера;

3. Основные свойства:

- грамотрицательные палочки;

- абсолютные внутриклеточные паразиты, т.к. не способны продуцировать достаточно энергии;

- делятся бинарным делением;

- размножаются в цитоплазме клеток;

- поражают эндотелий сосудов с развитием васкулитов (появление геморрагий);

-обладают термостабильным группоспецифическим антигеном, который выявляется в РСК, и видоспецифическими белковыми антигенами; - факторы патогенности: пили и белки клеточной стенки, фосфолипаза А2, микрокапсула, токсические субстанции.

У больного с эмпиемой плевры из гноя выделен коагулазоотрицательный стафилококк в количестве 10 в ? (не видно степень, норма – до 10 в 5 степени). Интерпретируйте полученный результат. Предложите схему идентификации выделенного микроорганизма. Перечислите питательные среды, используемые для выделения стафилококка.

ОТВЕТ: Схема идентификации выделенного микроорганизма:

1. Прямая микроскопия мазка из исследуемого материала, окрашенного по Граму (грамположительные кокки в виде скоплений виноградных гроздей)

2. Посев гноя на желточно-солевой агар и 5% кровяной агар (рост круглых непрозрачных колоний с ровными краями кремого или белого цвета с “радужным венчиком” на ЖСА или зонами гемолиза)

3. Пересев на скошенный МПА для накопления чистой культуры

4. Идентификация выделенной чистой культуры по биохимическим свойствам и определение факторов патогенности:

· Проба каталазой на стекле (+)

· Ферментация глюкозы и маннита

· Определение плазмокоагулазы (+: S.aureus, S.intermedius;

-: S.epidermidis, S.saprophiticus)

5. Определение чувствительности выделенной культуры к антибиотикам методом дисков: устойчив к новобиксину – S.saprophiticus, устойчив к полимиксину – S. aureus.

Для выделения стафилококков используются среды: желточно-слоевой агар и 5% кровяной агар.

Это может быть S. saprophiticus

У акушерки роддома при обследовании со слизистой передних отделов полости носа выделен золотистый стафилококк. Обоснуйте необходимость бактериологического исследования. Интерпретируйте полученные результаты. Предложите препараты для лечения.

ОТВЕТ:

Бактериологическое исследование проводить необходимо, потому что акушерка может быть носителем микроба. Она может передать его роженицам или новорожденному ребёнку.

В норма стафилококк может присутствовать на слизистой передних отделов полости носа. Нормальное содержание золотистого стафилококка в носу во взятом бактериальном посеве: 10*3 степени; КОЕ/мл.

Лечение: Основная проблема в лечении стафилококков-устойчивость к антимикробным препаратам. Антибиотик резерва-ванкомицин. Иногда для лечения применяют стафилококковый бактериофаг, антитоксическую противостафилококковую плазму или иммуноглобулин полученный из крови доноров, иммунизированных стафилококковым анатоксином.

Д)При употреблении в пищу консервированных огурцов домашнего приготовления ребенком семи лет через 10 часов у него появилась рвота и диарея. На следующие сутки у ребенка появилась сухость во рту, он перестал четко видеть окружающие предметы. Появилась осиплость голоса, акт глотания стал затрудненным. С диагнозом «ботулизм» ребенок был госпитализирован в стационар. Назовите материал для проведения микробиологического исследования.
Каким образом следует провести исследование?
Какое следует назначить лечение?
ОТВЕТ:
Материалы для исследования: промывные воды желудка, рвотные массы, секционный материал; сыворотка крови, фильтрат пищевых продуктов
Методы исследования : 1) серологический : определение типа ботулотоксина в исследуемом материале в РПГА с антительными эритроцитарными диагностикумами или с помощью ИФА
2) биологический: 1–внутрибрюшинное введение мышам исследуемого материала( при наличии токсина-гибель животных от паралича). 2 - определение типа ботулотоксина: заражение группы животных смесью исслед материала с поливалентной и монорецепторными антитоксическими сыворотками определенного серотипа(тип токсина определяют по выживаемости опред группы животных)
3)бактериологический- не проводят, тк это длительный процесс и не всегда в материале может присутствовать возбудитель
Лечение: 1. Промывание желудка. Необходимо для удаления токсинов и остатков отравленной пищи из кишечника. Проводится в первые 1-2 дня болезни;
2. Для нейтрализации токсина внутривенно или внутримышечно вводятся противоботулинические сыворотки типа А, С, Е (по 10 000 ME) и В (5000 ME). Перед введением сыворотки, ее предварительно десенсибилизируют.
3. Дезинтоксационная терапия.
4. Антибиотики.
5. При нарушении глотательной функции пациента кормят с помощью зонда, преимущественно жидкой пищей. Назначают специальную диету №10 (стол №10).
6. При первых признаках нарушения дыхательной функции, пациента подключают к аппарату искусственной вентиляции легких (ИВЛ).

2кк7) В инфекционную больницу поступила молодая женщина с жалобами на профузную диарею и многократную рвоту. Из анамнеза известно, что накануне она была в гостях, где ела торт с кремом.
Назовите предполагаемого возбудителя заболевания, укажите на его особенности. Обоснуйте выбор материала для исследования, предложите методы микробиологической диагностики.
ОТВЕТ: (не очень уверена в ответе)
S. aureus-грамположительные кокки, продуцируют энтеротоксин – вызывает пищевую интоксикацию; в мазке распологаются в виде скоплений ; факультативные анаэробы.
Материал для исследования – кровь
Методы диагностики – бактериологический, бактериоскопический.

2кк17) В мокроте больного пневмонией под микроскопом обнаружено большое количество круглых форм бактерий.
Предложите схему для выделения, идентификации возбудителя, определения его этиологической значимости.

ОТВЕТ:Бактериологический метод:
1.Посев мокроты на шоколадный или 5% кровяной агар, инкубирование в СО»-инкубаторе в атмосфере с 5-10% СО2; изучение культуральных свойств.
2. Приготовление мазка и окраска по Граму для изучения морфологических и тинкториальных свойств
Пересев характерных колоний на скошенный сывороточный агар для накопления чистой культуры.
3. Микроскопия колоний, выросших на скошенном сахарном агаре для определения чистоты культуры
Определение чувствительности пневмококков к желчи и оптохину- посев на кровяной агар и нанесение дисков с оптохином и желчью.
Идентификация выделенной чистой культуры по антигенным свойствам (р-ия агглютинации на стекле или тест набухания капсулы по Neufeld)
4. Определение чувствительности выделенной культуры с противомикробным химиотерапевтическим препаратам методом дисков
Серологический метод:
Постановка РПГА и ИФА для определения антител к капсульным полисахаридам пневмококка.

КИ 9 При проведении плановой диспансеризации рабочих мясокомбината у них была взята сыворотка для постановки реакции Райта. Титры реакции Райт у всех обследованных не превышали 1:50 (диагностический титр 1:100). Достаточно ли проведенного исследования для констатирования отсутствия у обследованных заболевания бруцеллёзом?
ОТВЕТ: Нет. Следует провести реакцию Кумбса для выявления заболевания в период ремиссии при хронической форме и на ранних этапах инфекции. Высокий титр антител – хроническая форма или форма инаппарантной инфекции.
Р-ия Райта выявляет острую форму заболевания.

(Задача 3 зоо 10). Одним из клинических признаков чумы является образование бубона.Назовите факторы патогенности, которые участвуют в его формировании.

ОТВЕТ: Бубон – увеличенный лимфатический узел, формирующийся при серозно-геморрагическом воспалении вследствие незавершенности фагоцитоза.

Факторы патогенности, обладающие антифагоцитарной активностью: F1-антиген (детерминируется pFra-плазмидой); TTCC, Yops-белки (детерминируются плазмидой pYV); внеклеточная аденилатциклаза и супероксиддисмутаза.

(Задача 2-кк. 11). В реанимационное отделение инфекционной больницы поступил больной с клиническим диагнозом эпидемический цереброспинальный менингит.

Задача 12. Как доказать, что у ребенка с клинической картиной менингита заболевание вызвано N . meningitidis ? Какой следует взять материал для исследования? Как доставить его в лабораторию? Какое произвести исследование?

ОТВЕТ:

Материал – спинномозговая жидкость (ликвор) и кровь. Менингококки во взятых материалах быстро погибают, особенно при охлаждении, поэтому материалы хранят до посева не более 2-3 часов при 37С.

Зоо2. Пациенту поставлен клинический диагноз «бруцеллез». Для подтверждения диагноза в микробиологическую лабораторию была отправлена кровь больного. Был сделан посев крови на печеночный бульон и через три дня получен отриц результат. Возможные причины отрицательного ответа. Методы микробиологической диагностики бруцеллеза.

ОТВЕТ:

Причины отриц результата:

1) Не было произведено параллельного посева в 2 колбы: одна колба инкубируется в атмосфере CO2 (Для B.abortus)

2) Рост культуры занимает до 30 дней – прошло слишком мало времени (всего 3 дня прошло)

3) Возможно, стоит взять другой материал на посев (напр, костный мозг)

Методы диагностики:

1) Биологический метод – заражение лаб животных. Через 20-25 дней производят высеивание крови и т.д. на печеночный агар для выделения чистой культуры

2)Серологический метод

а) р.Хеддельсона – ориентировочная реакция агглютинации на стекле. Ставится с неразведенной сывороткой больного и концентрированным АГ-диагностикумом (единый бруцеллезный диагностикум). Положительный результат –появление хлопьев, окр в синий цвет

б)р. Райта – развернутая реакция агглютинации (в пробирках). Диагностический титр – 1:200, выявляет полные АГ

в)р. Кумбса – для выявления неполных АГ:на ранних этапах инфекции или при хронической форме процесса

г)РПГА с парными сыворотками – нарастание титра АТ

3)Внутрикожная аллергическая проба с бруцеллином (проба Бюрне) – выявление аллергизации организма к бруцеллам (выявляется в т.ч. и у вакцинированных)

В. Клещевой иксодовый боррелиоз характеризуется развитием в организме аутоимунных и иммунопатологических процессов. Назовите фактор патогенности возбдителей клещевого иксодового боррелиоза, который способствует их развитию.

ОТВЕТ:

Клещевой иксодовый боррелиоз – б. Лайма (Лайм-боррелиоз). Возбудитель - спирохеты B.burgdorferi.

Болезнь сопровождается аутоиммуными реакциями, которые опосредованы липидомодифицированными белками наружной мембраны OspA , OpsB , OpsC. Эти липопротеины - мощные индукторы воспалительных реакций, они могут активировать как клетки неспецифической резистентности (макробактериофаги), так и поликлональные клетки иммунной системы (В- и Т-лимфоциты). Активация поликлональных В-лимфоцитов приводит к синтезу антител, которые вызывают воспалительные реакции в соответствующем органе. При этом, продуцируемые антитела обладают перекрестной иммунологической активностью как в отношении антигенов боррелий, так и тканевых белков. Т.е. появление АТ против белков OspA, OspB, OspC запускает аутоиммунные реакций, как перекрест между боррелиями и тканями человека.

Б. Молодой человек был доставлен в больницу с симптомами поражения печени и началом развития почечной недостаточности. До этого он отдыхал в селе, где купался в пруду недалеко от пастбища коров. Диагноз – лептоспироз. Путь заражения, лаб исследования, которые подтверждают диагноз и мишень, которая поражается лептоспирами?

ОТВЕТ:

Лептоспироз – зооноз с фекально-оральным механизмом передачи. Источник инфекции – крупный рогатый скот, свиньи, собаки.

Диагностика:

Материал для обнаружения – моча

1) Бактериоскопия

а)серебрение по Морозову – темно коричневые избитые бактерии и завитками на концах

б)раздавленная капля – подвижные бактерии, при движении напоминают букву «S»

2) Бактериологический метод

-посев материала на водно-сывороточную среду, инкубирование в CO2 инкубаторе в течение 5-7 суток. После появления роста культур, производят бактериоскопию (см више) и идентификацию по АГ св-ам – РА на стекле с адсорбированными лептоспирозыми сыворотками

3) Серологический метод

а)реакция агглютинации-лизиса, реакция микроагглютинации – поиск АТ (в сыворотке)

б) РПГА с эритроцитарными АТ диагностикумами – поиск АГ

4) Экспресс: ПЦР и ИФА

У больного с инфекцией мочевыводящих путей при бактериоскопическом исследовании в моче обнаружены грам+ кокки. Назовите предполагаемых возбудителей и питательные среды, которые используют для выявления данных микроорганизмов.

ОТВЕТ:

Staphylococcus epidermidis? Staphylococcus saprophyticus? Enterococcus faecales?

-желчный агар с эскулином – энтерококки образовывают колонии черного цвета

-ЖСА и 5% кровяной агар – для стафилококов: рост круглых непрозрачных колоний желтого цвета на ЖСА, на кровяном агаре отсутствует гемолиз

Задача 14 зоо

В клинику поступил больной с симптомами ботулизма. Выяснилось, что накануне, дома они всей семьёй употребляли законсервированные летом грибы. Следует ли остальным члена семьи, употреблявшим грибы, сделать профилактику ботулизма, если да, то каким образом? Как доказать, что грибы являлись причиной инфекции?

ОТВЕТ: Следует. Противоботулиническая сыворотка. Чтобы доказать вину грибов=>определение ботулотоксина в рвоте, промывных водах желудка, крови. ДОП: У пациента определить серовар=>специфическая сыворотка.

Еще существует ботулинический тетраанатоксин(3 анатоксина ботулин и 1 столбнячный). Применяется по эпид показаниям.

Зоо 7) От больного с клинической картиной туляремии выделен возбудитель, который расщеплял глицерин и был патогенен для кроликов. Назовите предполагаемый подвид (расу) возбудителя туляремии F. Tularensis, а также опишите методику выделения данного микроба из организма человека.

ОТВЕТ:

Неарктический (американский) подвид.

Материал для исследования - кровь, пунктаты из бубона, соскоб из язвы, отделяемое конъюнктивы, налет из зева, мокрота.

Основной метод-серологический: положительные РА, РПГА в диагностическом титре и выше.(1:100 – “+”реакция)

Бактериологический не используется.

Также можно использовать:

Биологический.1)Заражение морских свинок/мышей=>гибнут на 5-7 день=>микроскопия пунктата из паховых органов=>Gr- овоидные палочки=>посев пунктата для получения чистой культуры=>идентификация по бх,АГ св-вам и фаготипирование.

2)Трупы вскрывают,сеют материал на желточные среды с цистеином=>мелкие Gr- палочки и коккобактерии. Колонии белого цвета с ровным краем.
Аллергический. Внутрикожная проба с тулярином.

Экспресс-диагностика. ПЦР и непрямая РИФ.

E) Больному после оперативного вмешательства был назначен курс антибиотикотерапии препаратом широкого спектра действия. Через 4 дня после окончания курса лечения у больного появились боли в брюшной полости, лихорадка, диарея. Назовите микроб, который мог вызвать осложнения. Какой метод исследования можно применить для подтверждения диагноза?

ОТВЕТ:

Микроб - Clostridium difficili(псевдомембранный колит). Бактериологический метод исследования, материал - фекалии, выделяют возбудителя в чистую культуру, определяют наличие токсинов А и В в фекалиях методом ИФА. В тетради еще ванкомицин и коррекция дисбиоза(?)

Г) При перекопке огорода мужчина 45 лет лопатой повредил себе ногу. С раной, загрязненной землей, он был доставлен в стационар. В стационаре была сделана операция и проведена экстренная профилактика столбняка. Назовите препараты, которыми целесообразно провести профилактику столбняка пациенту данного возраста.

ОТВЕТ:

Если у мужчины была профилактика, то применяют столбнячный анатоксин,а если неизвестно, то анатоксин+противостолбнячная сыворотка.

Респираторные инфекции Задача 4
Посев 10-кратных разведений мокроты от больного пневмонией на кровяной агар выявил рост мелких колоний, образующих зеленящий гемолиз в концентрации 10^5 КОЕ/мл.
Какой тип гемолиза вызвали бактерии? Какой предполагаемый диагноз можно поставить? Как дальше продолжить исследования?
ОТВЕТ: альфа-гемолиз. Str.pneumoniae

Пересев на 5% кровяной агар(изучение культур.свойств)=>Приготовление мазка и окраска по Граму(Gr+ кокки цепочки)=>Пересев колоний на скошенный сахарный агар для накопления чистой культуры=>Микроскопия колоний(окраска фуксином)=>чист.культура-кокки в виде цепочек=> опред. чувствит. к желчи, оптохину и бацитрацину(полож или отр)=> Определение чувствительности выдел.культуры к антиб. методом дисков.
Серологический метод:постановка РПГА и ИФА для определения антител к О-стрептолизину, О-стрептокиназе,ДНКазе, гиалуронидазе стрептококков для подтверждения стрептококковой этиологии(полож реакция; опр-ие титра АТ).

Задача А
Из мокроты больного пневмонией были высеяны S. aureus в концентрации 10^2 КОЕ и S. pneumoniae в концентрации 10^6 КОЕ назовите предполагаемого возбудителя заболевания
ОТВЕТ: Streptococcus pneumoniae
Доп*: гр+кокки,имеют капсулу,
тип гемолиза-альфа-гемолиз,дифференцирующий признак-чувствителен к желчи и оптохину,биотоп-ротоглотка
Среда для культивирования-5% кровяной агар,37С,СО2-инкубатор
Факторы пат: нейроминидаза,капсула, IgA -протеаза, гиалуронидаза,пневмолмулы
Внутривид.дифференциация-по капсульному антигену

МП- «положительная»

Задача 2-кк4: Укажите, какие из перечисленных микробов обладают высокой устойчивостью к антибиотикам (гонококки, стафилококки, менингококки, стрептококки). Назовите препараты для этиотропного лечения, которые можно использовать для лечения заболеваний штаммами, обладающих полирезистентностью к антибиотикам?

ОТВЕТ: одним из самых устойчивых штаммов является золотистый стафилококк, который имеет штаммы устойчивые не только к ванкомицину, но и к мецитиллину (мецитиллинрезистентный золотистый стафилококк-MRSA). Антибиотики назначаются по результатм антибиотикограммы конкретного возбудителя! При наличии полирезистентности можно применять следующие препараты:

антистафилококковая плазма

антифагин (препарат стафилококковых антител)

стафилококкоая вакцина- убитая, лечебная(!), часто аутовакцина

бактериофаг (для обработки ран)

стафилококковый анатоксин (профи лактика маститов у рожениц и пассивный иммунитет у новорожденных)

Задача 2-кк15 : У женщины 25 лет развился послеродовой сепсис. Для назначения рационального лечения необходимо определить этиологию заболевания. Назовите микроорганизмы, которые могут стать причиной сепсиса. Предложите методы, позволяющие определить чувствительность к антибиотикам.

ОТВЕТ: S.aureus, S.epidermidis, Энтерококки, E.coli, Псевдомонады и клебсиеллы.  

• Метод серийных разведений (внесение различных концентрации антибактериального препарата на питательную среду, куда затем засевают микроб)- определени минимальной подавляющей концентрации антибиотика.

• Метод дисков (бумажные диски, пропитанные антибиотиком кладут на пит среды и наблюдают зоны подавления роста, по которым можно определить чувствительность микроорганизма к антибиотикам)

• Е-тест (узкая полоска, содержащая градиент антибактериального препарата, при помещении которой на питательную среду с микроорганизмом, зона подавления роста, будет соответствовать концентрации антибиотика от минимальной подавляющей и выше) Практикум стр 128.

Задача 5   Больной Н. поступил в травматологическое отделение с открытым переломом бедра. Через 2 суток у него поднялась темп тела и появились сильные боли в поврежденной конечности. После снятия гипсовой повязки нога отечна, кожа под ней напоминает пергамент.   Поставьте предварительный диагноз.   Как следует провести бактериолог исследование для выделения и идентиф культуры?   Какие лечебно-проф мероприятия необходимо провести?

ОТВЕТ:  Диагноз: Газовая анаэробная гангрена   бактериологическое исследование:  1) Посев на тиогликолевую среду, кровяной агар ( наличие двойной зоны гемолиза), стерильное молоко (створаживание) , желточный агар (лецитиназная активность)  2) культивирование в анаэростате  3)изучение культуральных свойств  4) идентификачия чист культ: окраска по Граму, посев на диф-диагност среды для опред бх-активности   Экспресс методы: газожиткостная хромаотграфия  проф-ка: противогангренозная поливалентная сыв-ка+ секстанатоксин

ЗАДАЧА РХ   У больного с симптомами пневмонии при серолог исслед в крови обнаружены АТ ко 2 фазе Coxiela burnetii . Назовите предполагаемое заболевание и его стадию . У больного, переболевшего пневмонией, в сыворотке крови обнаружены АТ к 1 фазе Coxiela burnetii . Объясните полученный результат анализа  

ОТВЕТ:1)Лихорадка Ку, стадия-начало заболевания  2)АТ к 1 фазе выявляются у реконвалесцентов или в разгаре заболевания    

ЗАДАЧА РХ   В областную больницу с симптомами пневмонии поступил больной из сельской местности. Врач предположил, что у больного лихорадка Ку. Назовите методы лаб диагностики, которые подтвердят поставленный диагноз.  

ОТВЕТ:серологический метод совместно с диагностикой других «атипич пневмоний», постановка РСК, ИФА, непрямой РИФ

ЗАДАЧА РХ   Назовите заболевания вызываемые следующими возбудителями: Bartonella bacillif о rmis , Bartonella guintana , Bartonella henselae , а также клетки мишени для возбудителя в организме человека

ОТВЕТ: Bartonella henselae- болезнь кошачьих царапин, в пат процесс вовлекаются кожные покровы и периф ЛУ с развитием локального лимфаденита  Bartonella guintana- окопная лихорадка. Передача осуществляется фекалиями платяных вшей через расчесы. Клиника: чередующиеся приступы лихорадки, сыпь, неврологические симптомы, гол боль, миалгия.  Bartonella bacillifоrmis- болезнь Карриона.  Болезнь протекает в 2 клинич формах:  1) лихорадка Ороя-острое забол, с развитием тяжелой анемии  2)перуанская бородавка- множество кровоточащих папул на коже, развив через 1-2 мес после острой формы 

Респираторные инфекции Задача 9 Из мокроты больного пневмонией выделен в концентрации 10^5 микроб, образующий на кровяном агаре бета-гемолиз. Как доказать, что выделенный микроб является S . pyogenes ?

ОТВЕТ: нужна реакция с бацитрацином, т.к. S. pyogenes чувствителен к бацитрацину, бета-гемолиз характерен для S.pyogenes(в отлич. от S.pneumoniae); отрицательная реакция с желчью и оптохиномПризнаки S.pyogenes: бета-гемолиз, бацитрацин(+), желчь и оптохин(-)

Кк.16

У ребенка, посещающего детский сад, повысилась температура до 38 C , появилась сыпь, ангина. Был поставлен клинический диагноз скарлатины. Назовите методы микробиологической диагностики. Предложите тесты, позволяющие определить наличие антитоксического иммунитета у контактировавших детей.

ОТВЕТ: бактериологический (в основном), бактериоскопический, серологический.

Тест – постановка РПГА и ИФА для определения антител к эритрогенному токсину для выявления напряженности антитоксического иммунитета к скарлатине у контактных лиц.

Ан.6

В клинику челюстно-лицевой хирургии доставлен больной с одонтогенной флегмоной челюстно-лицевой области. При вскрытии флегмоны – гной с резким зловонным запахом. Выберите материал, который следует взять для микробиологического исследования, и предложите метод для экспресс-диагностики. Укажите, приблизительно, через какое время хирург может получить результат этого исследования.

ОТВЕТ: материал – гной. Экспресс-диагностика ?????ИФА,скорее всего

Ан.2

У больного с одонтогенной флегмоной челюстно-лицевой области при операции был взят на исследование гной с резким зловонным запахом, однако при посеве на кровяной агар роста не обнаружено. Интерпретируйте полученный результат. Перечислите правила забора материала от пациента с гнойно-воспалительными заболеваниями челюстно-лицевой области. Предложите метод микробиологической диагностики, который позволит установить этиологию заболевания.

Ответ: вероятно, стафилококк, необходим посев на ЖСА(желч сол агар)

Правила:

· Материал берут из очага инфекции

· Исключают возможность попадания в материал антибиотиков

· Необходимо соблюдать меры безопасности

· Материал забирают в достаточном количестве, обеспечивающий необхожимый объем для исследования. К материалу, направленному в лабораторию, прилагают сопроводительный документ, в котором указывают фамилию, имя, отчество, время взятия м., предполагаемый диагноз.

· Хранить не более 2 ч при комнатной t

с помощью стерильной иглы и шприца после обработки кожи в месте
предполагаемой пункции получают в объеме не менее 5 мл. В тех случаях,
когда продукция экссудата постоянно продолжается и поставлен открытый
дренаж, необходимо собрать дренажную жидкость в асептических условиях в стерильную пробирку и отправить её в баклабораторию.
Доставка в лабораторию: пробы немедленно доставляют в шприце
(предварительно удалив иглу и надев на наконечник шприца стерильный
колпачок); при невозможности немедленной транспортировки используют
специальные герметичные контейнеры (необходимо избегать охлаждения);
пробу помещают в специальную транспортную среду (лучше для анаэробов).
Обнаруженный возбудитель - этиологический фактор гнойно-
воспалительного процесса.

Задача 7

Задача 8

У пациентки М. обнаружены клинические симптомы воспаления органов малого таза. Обследование на хроническую гонорею дало отрицательный результат. Какие микробы могут быть причиной заболевания? Как следует провести обследование больной?

ОТВЕТ:

1. Chlomydia trachomatis сероваров D-K.

2. Материал для исследования – соскоб с эпителия уретры. Диагностика: микроскопический метод – окрашивание по Романовскому-Гимзе и по Граму; РИФ и ИФА для определение антигенов хламидий (комплексное определение Ig классов M, G, A в РНГА, РИФ и ИФА), ПЦР и метод ДНК-гибридизации, культивирование возбудителя на культурах клеток, иммунохроматография, ферментоспецифическая реакция (на специфическую пептидазу хламидий)

Задача 12

Задача к3 зоо11

При бактериологическом исследовании почвы из скотомогильника была выделена грамположитедьная бацилла. Назовите признаки, которые следует определить у выделенного микроба, чтобы доказать, что это B. Anthracis

ОТВЕТ:

Посев на среду с 0,01% раствором натрия фенолфталеина – при добавлении аммиака не происходит порозовения колоний (не образует лецитиназу, тк обладает низкой фосфатазной активностью); не вызывает гемолиз на кровяном агаре,

Задача 11

Пациентка Р. Обратиласьв женскую консультацию с жалобами на дизурию, боли внизу живота, желтоватые выделения из влагалища. Для исключения диагноза «урогенитальный хламидиоз» врач отправил выделения на исследование методом РИФ. Результат анализа был «отрицательным». Достаточно ли проведённого исследования для постановки диагноза?

ОТВЕТ:

Наиболее чувствительным в диагностики хламидиоза на сегодня признан метод полимеразной цепной реакции (ПЦР). В ходе исследования выявляется ДНК хламидий, что позволяет со 100%-ной уверенностью судить о наличии или отсутствии инфекции. Для анализа требуется соскоб из уретры или цервикального канала.

Доп: Все исследования на хламидиоз: Диагностика: микроскопический метод – окрашивание по Романовскому-Гимзе и по Граму; РИФ и ИФА для определение антигенов хламидий (комплексное определение Ig классов M, G, A в РНГА, РИФ и ИФА), ПЦР и метод ДНК-гибридизации, культивирование возбудителя на культурах клеток, иммунохроматография, ферментоспецифическая реакция (на специфическую пептидазу хламидий)

В5

Рост заболеваемости острыми вирусными гепатитами в конце 90-х годов ХХ века явился стимулом к созданию и практическому использованию иммунобиологических препаратов для специфической профилактики этих заболеваний. Назовите и охарактеризуйте иммунобиологические препараты, используемые для специфической профилактики острых вирусных гепатитов.

ОТВЕТ: Гепатит А- Для специфической пассивной профилактики Ig по эпидемиологическим показаниям(иммунитет 3 месяца). Для специф акт профилактики инактивированная культуральная концентрированная вакцина. Также разработана рекомбинантная генно-инженерная вакцина.

Гепатит В-рекомбинантная вакцина. Состоит из HBs-антигена ВГВ, синтезированного генно-инженерным путем в дрожжевых клетках, который после очистки сорбируется на гидроокиси или Al3(PO4)2 в качестве адъювантов.

Гепатит С- Специф не разработана.

Гепатит D - Как у гепатита В. Вакцина против гепатита В защищает и от гепатита D.

Гепатит Е-Неживая цельновирионная вакцина. Испытываются живая и генно-инженерная вакцины.

Гепатит G -Специф вакцина не разработана. Используют IgB.

Из расспроса 60-летнего больного было установлено, что в детстве он переболел “желтухой”. Анализ крови показал следующие результаты: HBsag -; IgGHBc ag -; IgGHAV +

В 10 классе 3 ученика заболели ветряной оспой. У остальных подростков в амбулаторных картах указано, что в детстве они переболели ветрянкой. Следует ли в отношении их проводить профилактические мероприятия?

ОТВЕТ: Проводить профилактические мероприятия не надо, так как у переболевших формируется пожизненно клеточно-гуморальный иммунитет.

Задача 4-в18 При изучении в световом микроскопе срезов головного мозга собаки, предположительно погибшей от бешенства, тельца Бабеша-Негри не обнаружены. Для проведения биопробы с целью выделения вирусов потребуется не менее 10-12 дней.

Задача 4в23:

Для выделения вирусов из патологического материала, поступившего в вирусологическую лабораторию, использовали куриные эмбрионы. Назовите Сроки развития куриных эмбрионов, используемых для этой цели. Назовите способы введения материала и методы индикации вирусов на этой модели.

ОТВЕТ: Для заражения обычно используют куриные эмбрионы 7–12-дневного возраста.

Куриные эмбрионы заражают вируссодержащим материалом в асептических условиях стерильными инструментами, предварительно обработав скорлупу над воздушным пространством йодом и спиртом. Заражение проводят на хорионаллантоисную оболочку, в амниотическую или аллантоисную полость, либо в желточный мешок.

Индикация вируса в курином эмбрионе производится по гибели эмбриона,

положительной реакции гемагглютинации на стекле с аллантоисной или амниотической жидкостью, по образованию фокусных поражений (ʼʼбляшекʼʼ) на хорионаллантоисной оболочке.

Задача: Больная оперирована по поводу рака шейки матки. Удаленная злокачественная ткань была передана в лабораторию онковирусологии. Методом молекулярного зондирования в ткани была обнаружена ДНК, принадлежащая Papillomavirus. Выделить же вирионы вируса не удалось. Объясните описанный феномен. Каков предполагаемый механизм канцерогенеза, вызываемого Papillomavirus. К каким серотипа могут относиться эти вирусы?

ОТВЕТ: Механизм канцерогенеза: превращение проонкогена в онкоген=> ген, который определяет опухолевые свойства клеток. Развитие заболевания - медленное. Выявляется при гистологическом исследовании. Папилломавирусы среднего и высокого онкогенного риска. Метод - ПЦР => позволяет идентифицировать отдельные типы ВПЧ. Передаётся половым путём. Серотипы HPV 16, HPV 18.

Задача 4в3: В инфекционную больницу поступил пациент с предварительным диагнозом:«вирусный гепатит». Назовите и охарактеризуйте гепатотропные вирусы. Перечислите методы микробиологической диагностики и маркёры для установления вида гепатотропного вируса.

ОТВЕТ:

Гепатит B Возбудитель: Семейство - Hepadnaviridae, род - Orthohepadnavirus BГB; механизм передачи- кровяной; возможность хронизации: (+)

Гепатит A Возбудитель: Семейство - Picornaviridae, род- Hepatovirus BГA; фекально-оральный; (-)

Гепатит C Возбудитель: Семейство - Flaviviridae, род - Hepacivirus BГC; кровяной; (+)

Гепатит D Возбудитель: Неклассифицированный дефектный РНК-содержащий вирус BГD; кровяной; (+)

Гепатит E Возбудитель: Род Hepevirus BГE; фекально-оральный; (-)

HBs ag -

IgMHBc ag -

IgGHBc ag +

IgHBs ag +

ОТВЕТ: HBs ag - означает, что в данный момент пациент не инфекционен, отсутствует стадия острой инфекции.

IgMHBc ag - означает, что у пациента нет острой инфекции в данный момент.

IgGHBc ag + может определяться в течение всей жизни и говорит о перенесенном заболевании (гепатит В).

IgHBs ag + заменяют HBs ag при разрешении острой инфекции, персистируют в течение жизни, обеспечивая протективный иммунитет.

Так как нет HBs ag + и HBe ag +, то и не обнаруживается ВГВДНК, значит пациент излечился от острого гепатита В.

Сделайте заключение по результатам анализа:

HBs ag +

IgMHBc ag +

IgGHBc ag -

HBe ag +

IgHBs ag +

ОТВЕТ: HBs ag + определяется в сыворотке за несколько дней до появления симптомов и присутствует в течение острой инфекции.

IgMHBc ag + присутствуют в высоком титре в течение острой инфекции.

IgGHBc ag - не определяется, значит заболевание в острой форме, ещё не считается перенесенным.

HBe ag + говорит о высокой инфекционности крови, в сыворотке таких больных обнаруживают ВГВДНК.

IgHBs ag + появляются по мере разрешения вирусной инфекции, заменяют HBs ag при разрешении острой инфекции, персистируют в течение жизни, обеспечивая протективный иммунитет.

В заключении диагноза: острый гепатит В.

В конце лета 2006г. В районе Хабаровска была зафиксирована эпидемия асептического менингита среди детей и подростков. Какие вирусы могли быть причиной этого заболевания. Какой материал для исследования следовало брать от больных и как проводить микробиологическое исследование?

ОТВЕТ: В большинстве случаев, асептический менингит вызывают энтеровирусы ECHO и Коксаки. В редких случаях причиной может служить аденовирус, цитомегаловирус, вирус Эпштейна-Бара и аренавирусы.

Так как заболевание может возникнуть при заражении разными вирусами (обитают в разных частных организма, содержатся в разных биологических жидкостях), то рациональнее всего использовать для диагностики кровь или ликвор, так как это общие для этих вирусов среды, содержащие микроб при асептическом менингите.

Исключить нетипичных возбудителей можно с помощью специфической для них клинической картины (симптомы кроме менингита).

Микробиологическое исследование: вирусологический и серологический методы.

	Заражение лабораторных животных	Заражение культуры клеток	Серологическая диагностика
Вирус Коксаки	восприимчивы новорожденные мыши	Не размножается (Коксаки А) Клетки почек обезьян, НеLа (Коксаки В)	+ РТГА, РСК, ИФА
Вирус ЕСНО	не патогенен для лабораторных животных	Клетки почек обезьян	+РТГА, РСК, ИФА

С целью идентификации полиовируса поставлена реакция биологической нейтрализации. При учете результатов через 7 дней оказалось, что в культурах клеток, зараженных смесями выделенного вируса и моновалентных сывороток ко II и III типам вирусов, цвет питательной среды не изменился. В культурах клеток, зараженных смесью вируса с моновалентной сывороткой к I типу полиовируса, наблюдалось изменение цвета питательной среды. Интерпретируйте полученные результаты.

ОТВЕТ: Реакция биологической нейтрализации- реакция идентификации (определение вида/серотипа вируса). Для ее проведения готовят смесь из вируса и известной диагностической сыворотки и выдерживают ее час при температура 36 градусов для нейтрализации вируса антителами. Далее добавляют смесь к культуре клеток и выдерживают 3-4 дня. При разрушении культуры клеток реакция считается отрицательной (в данном случае клетки после контакта со смесями с II и III сывороткой погибли, следовательно вирус НЕ был нейтрализован). При реакции со смесью с I сывороткой вирус был нейтрализован, следовательно культура клеток не погибла и функционирующие клетки выделяли в среду кислые продукты обмена, что привело к изменению окраски (цветная реакция/проба). Значит искомый вирус- вирус полиомиелита серотипа I .

При исследовании были обнаружены тельца Пашена и Гварниери. Охарактеризуйте эти тельца. При каком заболевании они встречаются. Назовите другие методы диагностики этого заболевания.   

ОТВЕТ: Тельца Пашена- вирионы поксвирусов, имеют кирпичеобразную форму, видны при спец.методах окрашивания- серебрение по Морозову. Поверхность вириона состоит из нитевидных, овоидных элементов. Оболочка и наруж мембрана вириона заключает сердцевину (днк и белки.) и мембрану сердцевины. Геном вириона- двунитевая линейная днк с замкнутыми концами. Тельца Гварниери- околоядерные включения в цитоплазме инфицированных клеток.

Несмотря на проводимое лечение больного с хронической формой гепатита В и наличия в крови антител против HBs -антигена, в его крови продолжала определяться ВГВ (ДНК). Является ли лечение больного эффективным?

ОТВЕТ: (???):Там лечение эффективно

Значит лечение эффективно

У больного хронический активный гепатит. Сопровождается интегративной инфекцией. Она происходит в виде интеграциии кольцевой ДНК вируса в хромосомы гепатоцита с образованием провируса. При этом наблюдается синтез HBs-антигена. Клинически это проявляется вирусоносительством. Следствием вирусоносительства может быть развитие первичного рака печени. Поэтому лечение не эффективно???.

Задача 4в-16. В вирусологической лаборатории проводили исследование парных сывороток, полученных из крови пациентки с клиническим диагнозом «менингоэнцефалит», проживающей в районе, эндемичном по клещевому энцефалиту. Титры антител в парных сыворотках, исследованных в реакции нейтрализации, составили 1:20 и 1:40. Интерпретируйте полученные результаты. Ответ обоснуйте.

ОТВЕТ: Для постановки диагноза характерно четырехкратное нарастание титра антител в парных сыворотках. В данном случае это не наблюдается, поэтому диагноз не потверждается(???).

Задача 4в-20. У мышей-сосунков, зараженных интрацеребрально суспензией кусочка мозга, взятого от умершего человека, через 10-11 дней развилось заболевание, сопровождающееся параличом конечностей и гибелью животных. В препаратах из мозговой ткани погибших мышей обнаружили оксифильные цитоплазматические включения. На основании имеющихся сведений назовите предполагаемый вирус.

ОТВЕТ: Это вирус бешенства. Вирион в форме пули, окруженный липопротеиновой оболочкой с гликопротеиновыми шипами. Гликопротеин G отвечает за адгезию и внедрение вируса в клетку. Наследственный материал представлен однонитевой линейной минус-РНК и белками.

Источники инфекции – животные(собаки, кошки, грызуны, летучие мыши и тд). Механизм передачи – контактный при укусах или обильном ослюнении поврежденной кожи.

Вызывает бешенство. Это зоонозная инфекция, при которой поражаются нейроны ЦНС с развитием симптомов возбуждения, параличом дыхательной и глотательной мускулатуры. Болезнь заканчивается летально.

Микробиологическая диагностика: постмортальная диагностика: оксифильные тельца Бабеша-Негри в мазках ткани мозга, выделяют вирус путём биопробы на мышах(гибель через неделю), идентификация вируса с помощью ИФА и РН с использованием антирабического Ig.

Прижизненная диагностика: РИФ, выделение вируса из биологических жидкостей(слюна), определение антител с помощью РСК и ИФА.

В21

В травматологический пункт обратился мужчина по поводу множественных укусов в области лице, головы и верхних конечностей, нанесенных бездомной собакой. Пострадавшему необходимо провести курс лечебной иммунизации против бешенства. Назовите специфические антирабические препараты, которые необходимо использовать в данном случае.

ОТВЕТ: Проводят активно-пассивную иммунизацию. При пассивной - вводят антирабический иммуноглобулин или антирабическую сыворотку. При активной – вводят концентрированную культуральную антирабическую вакцину, инактивированную УФ-лучами или гамма-лучами: условный курс прививок 2-4 инъекции вакцины ( с 10 дневным наблюдением за укусившим животным). Разрабатывается генно-инженерная вакцина, содержащая гликопротеин G.

В осадке мочи новорожденного ребенка, родившегося с гидроцефалией, обнаружены гигантские клетки, с внутриядерными включениями в виде “совиного глаза”. Можно ли по результатам этого анализа сделать заключение о внутриутробной инфекции и какой?

ОТВЕТ: Цитомегаловирус. Нет, необходимо провести идентификацию с помощью ПЦР (обнаружение вирусной ДНК; считается, наиболее достоверным методом), а также в РИФ и ИФА с использованием моноклональных антител. Антитела (IgM, IgG) к вирусу в сыворотке крови больных определяют в ИФА, РИФ , реакции нейтрализации и др.

4-в2) Среди детей начальных классов общеобразовательного учреждения населенного пункта Н. возникла эпидемическая вспышка вирусного гепатита. В сыворотках крови больных обнаружены антитела к вирусу гепатита А в высоких титрах. Назовите серологические реакции, используемые для определения анти- HAV -антител и класс иммуноглобулинов, имеющих диагностическое значение. Ответ обоснуйте.

ОТВЕТ: ИФА, РИФ. Диагностическое значение имеют IgM, т.к. они они появляются в начале заболевания и сохраняются в теч. 4-6 мес, это важно в условиях эпидемической вспышки (для того, чтобы выяснить заражен человек или нет).

В28) В крови больного были обнаружены HBs -антиген, HBe -антиген, и IgM против HBc -антигена. Интерпретируйте результаты анализа, используя знания об антигенной структуре вируса гепатита B и особенностях иммунного ответа против этого вируса. Ответ обоснуйте.

ОТВЕТ: острый гепатит B (вирус размножается (HBe-aг), есть маркеры острой инфекции).

HBs-антиген – поверхностный протеин вируса гепатита B. Ранний маркер острого гепатита B (появл через 3-5 нед. после заражения), присутствует при хронической инфекции.

HBe-антиген – внутренний протеин вируса, кодируется общим с core-белком геном вируса, но в отличие от HBc-аг, HBe-аг хорошо растворим и выявл в сыворотке с начала репликации. Маркер репликации вируса, конц. HBe-аг коррелирует с уровнем вирусемии.

IgM против HBc-аг – ранние антитела класса IgM против HBc-аг. Маркер острой инфекции и продолжающейся репликации вируса.

У мужчины в возрасте 35 лет появились признаки цитомегаловирусной инфекции: лихорадка, пневмония, присутствие в крови аномальных лимфоцитов. Заболевание не поддавалось лечению. На каком фоне могла возникнуть цитомегаловирусная инфекция? Какое доп. исследование необходимо сделать пациенту?

ОТВЕТ: Инфекционный мононуклеоз (аномальные лимфоциты). На фоне сниженного иммунитета (генерализованная форма – есть пневмония).

Цитомегаловирусная инфекция проявляется у больных ВИЧ-инфекцией, после трансплантации костного мозга или какого-либо внутреннего органа, а также у больных заболеваниями, носящими лимфопролиферативный характер (лейкоз) и больных с опухолями, образуемыми за счет кроветворных клеток (гемобластоз).

Вероятнее всего наш пациент ВИЧ+, так что необходимо сделать скрининг на ВИЧ

У пациента через месяц после отпуска, проведенного на заимке у лесника, появились признаки энцефалита. Пациент отрицает имевшиеся у него клещевые укусы. Следует ли данному больному проводить анализы на клещевой энцефалит? Если да, то каким образом могла произойти передача возбудителя. Какой материал следует направить на исследование?

ОТВЕТ: Следует, тк передача возбудителя может происходить не только трансмиссивным путем. Проникновение вируса возможно контактным путем через мелкие поражения кожи. Доказан и алиментарный путь заражения при употреблении сырого молока коз и овец. Материал для исследования – кровь и цереброспинальная жидкость(наиболее целесообразно выделять вирус из крови, взятой на первой неделе заболевания)

Исследуемым материалом от больного с клинической картиной энцефалита было произведено внутричерепное заражение мышей-сосунков, у которых развился паралич с последующей гибелью животных. Какой исследуемый материал был взят от больного? Как доказать наличие в нем вируса клещевого энцефалита?

ОТВЕТ: 1.Материал для исследования – кровь и цереброспинальная жидкость(наиболее целесообразно выделять вирус из крови, взятой на первой неделе заболевания).

2. Проводят заражение культур клеток. Идентификация: в культуре клеток ПЭС вирус обнаруживают по характерному цитопатическому действию, идентифицируют прямым или непрямым методом флюоресцирующих антител. В культуре клеток ФЭК или Vero- методом флюор.антител. Серологическая диагностика : РСК (4х кратное и более нарастание титра антител), РТГА, РН, и методы ускоренной диагностики –РИФ, ИФА, РНГА, РТНГА.

С целью идентификации вируса гриппа поставлена реакция РСК. При учёте результатов установлено, что при РСК с антигеном гриппа А наблюдается гемолиз, с антигеном гриппа В – отсутствие гемолиза. Интерпретируйте полученный результат. Объясните механизм РСК и цели постановки.

ОТВЕТ: 1. Положительный результат – вирус гриппа В.

2. Проводят в 3 этапа : 1й- в пробирку помещают антитела и антигены. В случае их комплиментарности образуется иммунный комплекс антиген-антитело. 2й –добавляют комплемент. Он связывается с иммунным комплексом. 3й – добавляют гемолитическую систему (эритроциты барана и антитела к ним) => если комплемент связался с и.к., гемолиза нет ; если антиген и антитело некомплементарны, комплемент остается свободным и разрушает эритроциты барана ( гемолиз есть). С помощью данной р-ии можно искать антитела в сыворотке больного и неизвестные антигены.

Для выделения вирусов из патологического материала использовали культуру клеток. Назовите виды культур клеток и методы индикации вирусов на этой модели.

ОТВЕТ: 1. Культуры клеток разделяют на:первичные , размножающиеся только в первых генерациях( выдерживают 5-10 пассажей) перевиваемые (стабильные), способные размножаться в лабораторных условиях длительное время полуперевиваемые, имеющие определённую продолжительность жизни (40-50 пассажей)

2. Индикацию вирусов в культуре клеток проводят по Цитопатическому действию ; Бляшкообразованию (блящки – ограниченные участки, состоящие из дегенеративных клеток, которые вирусы способны образовывать в монослое клеток под агаровым покрытием, содержащим витальный краситель, окрашиваюший только живые клетки; видны как светлые пятна на фоне красного слоя клеток); Цветной пробе ( незараженные вирусом культуры клеток выделяют продукты метаболизма, которые подкисляют питательную среду и окрашивают добавляемый в среду индикатор феноловый красный в жёлтый цвет. Если исследуемый материал содержит вирусы, то метаболизм клеток нарушается => среда сохраняет красный цвет) Гемадсорбции (способность культур клеток, инфицированных вирусами, адсорбировать на своей поверхности эритроциты определённых видов животных и птиц)

ОТВЕТ :

1. Применяют живую оспенную вакцину (Э. Дженнер), которую готовят из соскобов сыпи телят или при культивировании вируса вакцины (осповакцины) на куриных эмбрионах. Вакцину вводят скарификационным способом тли накожно с помощью безыгольного инжектора. Разработано также оральная таблетированная вакцина, не уступающая по эффективности накожной, но менее реактивная (Воробьев)

2. Врач Э. Дженнер, который привил против оспы мальчика (ввёл вирус коровьей оспы, поражающий кожу пальцев рук после доениям инфицированных коров), а затем показал его невосприимчивость к вирусу натуральной оспы.

В29 При проведении диспансеризации в крови пациента были обнаружены IgG против HBc -антигена и антитела к HB - s -антигену. Интерпретируйте результаты анализа, используя знания об антигенный структуре вируса гепатита В и в особенностях иммунного ответа против этого вируса. Ответ обоснуйте.

ОТВЕТ:

Наличие в крови IgGHBs-антигена (протективные антитела к поверхностному антигену) говорит о выздоровлении и формировании иммунитета к ВГВ, , IgG HBc-антигена – обнаруживаются в крови долгое время после разрешения болезни.

В22

Назовите модели (объекты), которые могут быть использованы для культивирования вирусов. Охарактеризуйте универсальную вирусологическую модель. Назовите признаки, по которым можно судить о репродукции вирусов в этой модели.

ОТВЕТ:

Вирусы культивируют на трех биологических моделях: чувствительных лабораторных животных, эмбрионах птиц и культурах клеток (тканей).

Культуры клеток (КК), полученные из эмбриональных и опухолевых клеток, способны к быстрому росту. КК могут быть одно- и многослойными.

Культуры клеток разделяют на:

· Первичные, размножающиеся только в первых генерациях (выдерживают только 5-10 пассажей);

· Перевиваемые (стабильные), способные размножаться в лаб. Условиях длительное время;

· Полуперевиваемые, имеющие определенную продолжительность жизни (40-50 пассажей).

Для культивирования клеток необходимы питательные среды, содержащие все необходимые элементы для жизнедеятельности и роста клеток (белки, липиды, углеводы, мин. соли, витамины и др.), а также индикатор для контроля за пригодностью пит. среды и размножения вирусов (цветная проба).

Индикацию вирусов в КК проводят по следующим признакам:

цитопатическому действию (деструкция клеток, вакуоляризация цитоплазмы, образование цитоплазматических и внутриядерных включений), бляшкообразованию, гемадсорбции, цветной пробе (сейчас практически не используется)

Задача

Инфекции, иммунитет.

Сибиреязвенная вакцина

Лечебно-профилактическая, живая

Представляет собой споровую культуру вакцинного бескапсульного штамма и предназначен для специфической профилактики сибирской язвы у людей и животных.

Дата: 2019-02-25, просмотров: 1133.

12 3 4 5 6 7 8 9 10 Следующая ⇒