Впервые явление парадоксального выделительства описали Morganti и соавт. в 1959 г. [163, 164]. Они отметили, что группа крови лиц, установленная по слюне и молоку, в некоторых случаях не совпадает с групповой принадлежностью, установ-ленной при исследовании эритроцитов.

Данное сообщение породило сомнение среди судебных медиков относитель-но достоверности экспертиз с целью идентификации виновника по пятнам вы-делений, оставленных на месте противоправных действий.

71

Парадоксальное выделительство зарегистрировано у 0,02–4 % людей (М.А. Бронникова и соавт. [5], Fiori и соавт. [104]. Последующие исследования показали, что парадоксальное выделительство часто оказывалось артефак-том, обусловленным неодинаковыми методами исследования, бактериальным загрязнением и неспецифическим взаимодействием исследуемого материала

с тестовыми сыворотками, перекрестными реакциями [15, 104, 123, 192] Вместе с тем встречается и истинное парадоксальное выделительство, ме-

ханизм которого, по-видимому, связан со своеобразным дискордантным глико-зилированием водорастворимых и водонерастворимых групповых субстанций в выделениях организма и эритроцитах.

Использование высокоавидных узкоспецифических моноклональных реак-тивов и стандартных методов исследования позволяет избежать ошибок, свя-занных с указанным феноменом [5, 15, 38], тем не менее о нем следует всегда помнить при экспертизе выделений и других жидкостей организма.

Онтогенез АВО-антител

Происхождение антител системы АВО является предметом дискуссии. Одни исследователи полагают, что изогемагглютинины анти-А и анти-В имеют есте-ственное происхождение и вырабатываются без предварительного контакта с ан-тигеном под действием генов, контролирующих фенотип А, В и О. Другие спе-циалисты считают, что продукция изогемагглютининов стимулируется А- и В-подобными антигенами, широко распространенными в природе. Многие бакте-рии содержат вещества, химически близкие к антигенам АВО человека. Опыты с гнотобионтами (животные, искусственно выращенные в безмикробных условиях) показали, что не имевшие контакта с микробами животные не содержат агглюти-нинов. Помещение животных в обычные условия приводит к быстрому образова-нию у них антител. Имеются штаммы Esherichia coli с А- и В-серологической ак-тивностью, ими можно адсорбировать изогемагглютинины человека.

Полагают, что клоны иммунокомпетентных клеток (В-лимфоциты), запро-граммированные на синтез анти-А- и анти-В-антител, существуют у людей еще до момента рождения (Daniels [87], Issitt, Anstee [122]). После рождения контакт

с А- и В-подобными веществами активирует клоны указанных В-лимфоцитов. Организм новорожденных способен к синтезу небольшого количества анти-

тел класса IgM, а антитела IgG у них не образуются. Антитела анти-А и анти-В

в пуповинной крови, относящиеся к IgG, пассивно переносятся от матери. Синтез IgM-антител анти-А и анти-В у детей начинается спустя 3–6 мес. после рождения. Наиболее интенсивно они вырабатываются в возрасте 5–10 лет. Титр антител выше у девочек, чем у мальчиков.

Имеются указания на то, что появление изогемагглютининов класса IgG у де-тей и подростков связано с вакцинацией (Н.Н. Меркулова и др. [43]).

Интенсивность антителогенеза может быть обусловлена также этнически-ми особенностями. Так, частота антител АВО IgG-класса существенно ниже у

72

ханты – коренных жителей Среднего Приобья, чем в панмиктической популя-ции, населяющей указанный регион (Н.Н. Меркулова и др. [43]).

Лица А(II) и В(III) синтезируют преимущественно изогемагглютинины IgM,

в то время как люди группы О(I) вырабатывают дополнительно IgG. Люди O(I), помимо анти-А- и анти-В-антител, содержат также анти-А,В-антитела (см. Антиген С), которые не разделяются дифференциальной адсорбцией (С.И. Донсков, Н.М. Михайлова и др. [20, 45, 47]). Существование детерминанты А,В удалось показать с помощью моноклональных антител (С.И. Донсков и др. [21]). В отличие от анти-А-антител, секретируемых людьми группы В(III), анти-А,В-антитела способны распознавать слабые варианты антигена А. Особенность антител анти-А,В заключается в том, что они не являются смесью антител анти-А

и анти-В. Если сенсибилизировать эритроциты А и В антителами анти-А,В и в дальнейшем выделить связавшиеся антитела методом элюции, то оказывается, что элюаты содержат фракцию, реагирующую с клетками обеих групп. Как уже указывалось, антитела анти-А,В выявляются только в сыворотках крови лиц О.

Было показано, что именно эта фракция антител преодолевает плацентарный барьер и соответственно играет основную роль в развитии гемолитической жел-тухи новорожденных.

Активность анти-А,В-антител высока у доноров добровольцев, искусствен-но иммунизированных группоспецифическими субстанциями А и В (Contreras

и соавт. [85]).

Предложено несколько объяснений феномена перекрестного реагирования сывороток людей О(I). Их суть сводится к следующему:

–– сыворотка крови лиц группы О(I) содержит анти-А-, анти-В- и анти-С-антитела. Последние и являются перекрестно реагирующими, посколь-ку эритроциты А и В содержат общий антиген С. Агглютинацию эритро-цитов перекрестно реагирующими антителами можно блокировать, если эритроциты предварительно сенсибилизировать антителами анти-А или анти-В (Issitt, Anstee [122]).

–– некоторые молекулы анти-А- и анти-В-антител имеют общую анти-А-и анти-В-направленность. Существование такого механизма перекрест-ного реагирования весьма сомнительно, поскольку противоречит прин-ципу специфичности (строгой однонаправленности) антител.

–– Matuhasi и Ogata (1959–1962) высказали предположение, что антитела анти-А,В являются простой смесью антител анти-А и анти-В. Однако за счет неспецифического связывания анти-А-антител эритроцитами В, сенсибилизированными анти-В-антителами (неспецифическое свя-зывание анти-А-антител с комплексом В-анти-В) создается видимость перекрестного реагирования антител анти-А с эритроцитами В. И на-оборот, за счет неспецифического связывания анти-В-антител эритро-цитами А, сенсибилизированными анти-А-антителами (неспецифи-ческое связывание анти-В-антител комплексом А-анти-А), создается

73

видимость перекрестного реагирования антител анти-В с эритроци-тами А. Феномен Matuhasi – Ogata, хотя действительно имеет место, не в полной мере объясняет механизм перекрестного реагирования, в частности, не дает ответа на вопрос: почему антитела анти- А, В реа-гируют с эритроцитами А_х, в то время как антитела анти-А с этими эритроцитами не реагируют? Кроме того, феномен Matuhasi – Ogata (феномен неспецифической адсорбции антител на комплексе антиген-антитело), характерный для антител системы резус, Келл и других, не воспроизводится на смеси изогемагглютининов анти-А и анти-В.

–– высказано предположение (Owen и Kabat, 1954–1956), что анти-А,В-антитела распознают детерминанту, общую для антигенов А и В, как это декларировалось в первом пункте.

Последнее объяснение, на наш взгляд, наиболее близко к действительно-сти. Оно подтверждено биохимическим анализом антигенов А и В, позволив-шим установить, что иммунодоминантными сахарами этих антигенов являют-ся N-ацетил-D-галактозамин и D-галактоза соответственно. Эти сахара струк-турно близки и различаются заменой углерода в положении 2 (см. Биохимия ан-тигенов АВО). Вероятно, антитела анти-А,В распознают антигенную детерми-нанту, в которой углерод в положении 2 отсутствует. Аргументы в пользу этой точки зрения были получены с помощью моноклональных антител, имеющих анти-А,В-специфичность. Результаты исследований свидетельствуют о том, что эти антитела распознают, как минимум, один эпитоп, расположенный на терми-нальной части антигенов А и В.

Титр изогемагглютининов варьирует в широких пределах (от 1 : 2 до 1 : 2048

и более). Титр анти-А-антител, как правило, выше, чем анти-В. У отдельных лиц титр изогемагглютининов соответствует разведению в тысячи раз. Имеется суждение, что интенсивность синтеза анти-А- и анти-В-антител, хотя и контро-лируется специальными генами, но все-таки в большей мере зависит от харак-тера питания, баланса кишечной флоры, приема антибиотиков или цитостати-ков. Это было показано при обследовании больных некоторыми кишечными инфекциями и паразитарными инвазиями, при которых синтез изогемагглюти-нинов заметно возрастал. Считается, что изогемагглютинины необходимы для нейтрализации А- и В-подобных субстанций, поступающих из кишечника.

Антитела анти-А и анти-В как класса IgM, так и IgG вызывают in vitro агглюти-нацию эритроцитов, несущих соответствующие антигены. Они обладают способно-стью связывать комплемент, поэтому при использовании свежезаготовленных образ-цов сывороток, помимо агглютинации эритроцитов, нередко наблюдают гемолиз.

Для того чтобы отличить антитела IgM и IgG применяют 2-меркаптоэтанол, дитиотрейтол (унитиол), которые разрывают дисульфидные связи в молеку-лах IgM и тем самым инактивируют их. Иммуноглобулины класса IgG устой-чивы к действию редуцентов дисульфидных связей. Способность редуциро-ванных сывороток к агглютинации эритроцитов указывает на присутствие

74

в них антител анти-А и анти-В класса IgG (Д.В. Лабунов, И.В. Рау [37], М.А. Матвеева и др. [40], Н.Н. Меркулова и др. [41–43], В.А. Мороков и др. [49, 51], И.В. Рау [57], Judd [125]).

Более точно антитела АВО IgM и IgG, а также антитела, относящиеся к субклас-сам IgG₁, IgG₂, IgG₃ и IgG₄, определяют с помощью специально предназначенных для этого антиглобулиновых сывороток, дифференцирующих указанные антитела.

Установлено, что частота антител класса IgG увеличивается с возрастом. Так, по данным Е.А. Хромовой [62], у детей О, А и В в возрасте от одного года до 15 лет IgG-антитела анти-А, -В и -АВ выявляют в 45,5; 4,1 и 15,7 % случаев соот-ветственно. Чаще всего IgG-антитела анти-А и анти-В выявляют у беременных. По данным Е.А. Хромовой [62], среди женщин группы О, А и В – в 76,2; 15,1 и 35,3 % случаев соответственно. Переключение синтеза антител с IgM на IgG ини-циируется повторными контактами с ксеногенными веществами, обладающими А- и В-подобной антигенной активностью. Как уже отмечено выше, у лиц с груп-пой А и В в пуле синтезируемых анти-В- и анти-А-антител преобладают IgM, а у лиц с группой О – IgG. Активность групповых антител несколько выше у женщин, чем у мужчин. Выявлены сезонные колебания, в частности снижение активности указанных антител в осенний период (К.Н. Климова и др. [34]). Содержание IgM в сыворотке крови снижается в пожилом возрасте (Baumgarten и соавт. [69]).