1. Для серодиагностики инфекции определяют специфические Ат в парных сыворотках больного, диагностическое значение имеет сероконверсия в 4 раза и более.

2. Обнаружение антигена в мокроте с использованием реакции иммуноферментного анализа (ИФА) с обнаружением специфических IgG и IgM. ИФА демонстрирует высокую чувствительность и специфичность 92% и 95% соответственно. Время сероконверсии, т.е. четырехкратного возрастания титра антимикоплазменных антител при последовательном исследовании проб крови, взятых в остром периоде заболевания и в периоде реконвалесценции, обычно составляет 38 недель.

3. Коммерческие ДНК–РНК–пробы дают возможность идентифицировать M.pneumoniae в мазках из зева, характеризуются высокой специфичностью, но низкой чувствительностью.

4. Полимеразная цепная реакция (ПЦР). Для проведения этой реакции из исследуемого материала выделяют ДНК, в которой определяют наличие специфичного для данного микроба гена. ПЦР основан на амплификации, т.е. увеличении количества копий специфического (маркерного) гена возбудителя. Для этого двунитевую ДНК, выделенную из исследуемого материала, денатурируют (“расплетают” при нагревании) и достраивают, при охлаждении, к расплетенным нитям ДНК новые комплементарные нити, в результате чего из одного гена образуются два. Этот процесс копирования генов многократно повторяется при заданных температурных режимах. Достраивание новых комплементарных нитей ДНК происходит при добавлении к искомым генам праймеров (затравки из коротких однонитевых ДНК, комплементарных 3’-концам ДНК искомого гена), ДНК-полимеразы и нуклеотидов. Денатурация (разрыв водородных связей и трансформация двухцепочечной ДНК в одноцепочечные) осуществляется при температуре 93-95ºC в течение 1-3 минут. Присоединение (отжиг) праймеров (олигонуклеоитидные генетические затравки) происходит комплементарно к соответствующим последовательностям специфического фрагмента на противоположных нитях ДНК. Температура отжига является специфической для каждой пары праймеров и располагается в интервале 50-65 ºC. Точно рассчитанная и экспериментально проверенная величина температуры отжига праймеров является одной из определяющих специфичность реакции характеристик, исключающих присоединение праймеров к не полностью комплементарным последовательностям.

Комплементарное достраивание цепей ДНК (синтез фрагмента). Присоединившиеся праймеры формируют стартовые блоки, с которых начинается синтез ДНК. Комплементарное достраивание нитей ДНК всегда протекает только в направлении от 5'-конца к 3'- концу нити ДНК и происходит в противоположных друг другу направлениях. Образовавшиеся в первом цикле амплификации продукты синтеза служат матрицами для второго цикла амплификации, в результате которого, собственно, и происходит образование искомого специфического фрагмента ДНК. Начиная с третьего цикла амплификации вновь синтезированные фрагменты ДНК служат в качестве матрицы для синетза новых нитей в следующем цикле амплификации – это и есть цепная реакция в ПЦР. Температура синтеза ДНК 72 ºC, время -3 мин.

Построение новых нитей ДНК из дезоксирибонуклеотидтрифосфатов (дНТФ) осуществляет термостабильная ДНК-полимераза, т.н. Taq-полимераза в присутствии ионов магния и трио- HCl – буфера, которые создают необходимые условия для функционирования фермента.

В результате 30-45 циклов амплификации синтезируются 10⁸ копий фрагмента, что делает возможным визуальный учет результатов после электрофореза в агаровом (полиакриламидном) геле. Использование термостабильной ДНК-полимеразы позволило автоматизировать процесс амплификации с помощью специального прибора, называемого термоциклером или амплификатором. Этот прибор автоматически осуществляет смену температур согласно зажанной программе и числу циклов амплификации.

5. Реакция связывания комплемента (РСК) демонстрирует вариабельную чувствительность (50-90%) и субоптимальную специфичность.

6. Тест холодовой агглютинации ввиду его низкой чувствительности и специфичности в настоящее время в клинической практике не используется.

Лечение и профилактика

Этиотропная терапия заключается в применении антибиотиков группы макролидов: эритромицин, линкомицин, олеандомицин. Применяются и производные окситетрациклина (вибрамицин, доксициклин). Курс 7-10 дней. Специфическоая профилактика не разработана.

Возбудители хламидийной пневмонии

Классификация и таксономия

Хламидийная пневмония - инфекционное антропонозное заболевание, характеризующеся явлениями гематогенной диссеминации, общеинфекционной интоксикации и отчетливо доминирующим респираторным синдромом (преимущественным воспалительным поражением системы органов дыхания).

Chlamydophila pneumoniae относится домену Bacteria, семейству Chlamydiacea, роду Chlamidophila

Нозологичекие формы

Для человека патогенны еще 2 вида хламидий:

- Chlamydia trachomatis

- Chlamydia psittaci

3. Эпидемиология и пути передачи

Четкой сезонности в течение заболевания не наблюдается. Инфекция антопонозная – источником являются больные люди. Пути передачи: воздушно-капельный, аспирационный.

Chlamydophila pneumoniae малоустойчива во внешней среде, высокочувствительна к обычным дезинфицирующим веществам, действию физических и химических факторов. При 40 ^оС в транспортной среде сохраняется в течение суток, повторное замораживание и оттаивание действует на Chlamydophila pneumoniae губительно.