Методы лабораторной диагностики
Поможем в ✍️ написании учебной работы
Поможем с курсовой, контрольной, дипломной, рефератом, отчетом по практике, научно-исследовательской и любой другой работой

Осуществляется бактериоскопическим, бактериологическим, серологическим методами. Применяются и экспресс-методы диагнос­тики.

Материалы для исследования: слизь из носоглотки, спинномоз­говая жидкость (ликвор), кровь. Ликвор получают с помощью спин­номозговой пункции. При менингите ликвор вытекает из иглы струей (а не каплями, как в норме) и обычно бывает мутным. Носоглоточную слизь берут с задней стенки глотки специальным заднеглоточным там­поном на длинной изогнутой проволоке, не касаясь слизистой полос­ти рта, языка и зубов.

Менингококки во взятых материалах быстро погибают, особен­но при охлаждении, поэтому исследуемые материалы хранят до посе­ва не более 2-3 часов при 37°С.

Бактериоскопическому исследованию подвергают ликвор (луч­ше брать осадок после центрифугирования) и секционный материал (оболочки мозга). Из исследуемого материала готовят мазки, окраши­вают метиленовым синим или методом Грама. При положительном результате в поле зрения видны лейкоциты и диплококки в виде "ко­фейных зерен", расположенные как внеклеточно, так и внутри лейко­цитов. По Граму менингококки окрашиваются в розовый цвет, т.к. они грамотрицательны.

Бактериологический метод диагностики является основным. Он заключается в выделении и последующей идентификации возбу­дителя из носоглоточной слизи, ликвора, крови, геморрагических вы­сыпаний. Посевы осуществляют на плотные питательные среды на чашки Петри. Среды готовятся на основе бульона Хоттингера (или другого высококачественного бульона) с добавлением крови, сыворотки крови или асцитической жидкости. В среду добавляют для подавления роста сопутствующей микрофлоры антибиотик ристомицин, к которому менингококки устойчивы.

Исследуемую кровь в объеме 5-10 мл сначала засевают в колбу с 50 мл 0,1% МПА (полужидким) и инкубируют при 37°С 24 часа, затем пересевают на плотную питательную среду.

Далее проводят макро- и микроскопическое исследование вырос­ших колоний и выделяют чистую культуру на скошенном сыовороточном или кровяном агаре (параллельно колонии засевают на обычный скошенный агар, на котором менингококки не должны расти).

Идентификация проводится по антигенным свойствам (в реак­ции агглютинации на стекле) для определения серогруппы и биохи­мической активности (N.meningitidis биохимически малоактивна, разлагает с образованием кислоты без газа глюкозу и мальтозу, не фер­ментирует левулезу, сахарозу, лактозу, не образует индол и H2S).

Серологический метод используют как для выявления менингококкового антигена в исследуемых материалах, так и для обнаруже­ния противоменингококковых антител в сыворотке крови больного. Применяют следующие серологические реакции - РИГА, РСК, ИФА. РИФ, встречный иммуноэлектрофорез.

Экспресс-диагностику проводят с помощью реакций коагглютинации и латекс-агглютинации. Обе реакции применяют для выявле­ния как N. meningitidis (в том числе и нежизнеспособных), так и их антигенов.

В реакции коагглютинации специфические противоменингококковые антитела сорбированы на клетках стафилококков, содержащих А-белок, который обладает способностью присоединять Fc-фрагмент IgG антител.

В латекс-агглютинации специфические антитела связаны с час­тицами латекса.

И коагглютинацию, и латекс-агглютинацию ставят на предмет­ных стеклах, добавляя исследуемый материал (чаще всего ликвор) к специфическим противоменингококковым антителам, сорбированным, соответственно на стафилококках или латекс-носителях, Видимый результат - агглютинация - наступает через 15-30 минут в виде обра­зования хлопьев.

Латекс-агглютинацию можно ставить и для обнаружения проти­воменингококковых антител в исследуемых сыворотках. В этом слу­чае используется частицы латекса с сорбированным на них менингококковым антигеном.

Лечение и профилактика

Осуществляется инактивированной химической вакциной, содер­жащей высокоочищенные капсульные полисахариды серогрупп А, С, Y, W-135, каждый из которых формирует лишь групповой иммунитет.

1). Вакцина менингококковая группы А полисахаридная сухая - очи­щенный капсульный специфический полисахарид, выделенный из бульонной культуры менингококка. Препарат предназначен для профи­лактики менингококковой инфекции, вызванный менингококком серог-руппы А у детей и взрослых (по эпидемиологическим показаниям).

2). Вакцина менингококковая групп АиС полисахаридная сухая - аналогична предыдущей. Предназначена для профилактики менинго­кокковой инфекции, вызванной менингококками серогрупп АиС, с 18-летнего возраста но эпидемиологическим показаниям.

3). Иммуноглобулин человека нормальный - иммуногаобулиновая фракция сыворотки человека (серия - от 1000 чел.), очищенная и кон­центрированная методом фракционирования этиловым спиртом, со­держит антитела различной специфичности. Предназначена для экстренной ггрофилактики и лечения в первые дни заболевания при различных заболеваниях менингококковой инфекции, коклюша, а так­же кори гепатита В и др. Препарат применяют в первую очередь у детей с тяжелыми формами заболеваний.

Для лечения применяют сульфаниламиды и антибиотики. При генерализованных формах менингококковой инфекции эффективной является пенициллинотерапия большими дозами.

Возбудители коклюша

1. Классификация и таксономия

Коклюш - острое респираторное инфекционное заболевание, ха­рактеризующееся затяжным течением и наличием судорожного при­ступообразного кашля.

Bordetella pertussis относится к домену Bacteria, типу Proteobacteria, классу Betaproteobacteria, семейству Alcaligenaceae, роду Bordetella.

Нозологичекие формы

Род Bordetella включает также виды:

- B.avium

- B.bronchiseptica

- B.parapertussis

3. Эпидемиология и пути передачи

Единственный источник инфекции - человек, больной коклюшем (заразен до 25-30 дней) или бактерионоситель. Механизм передачи — аэрозольный; путь передачи — воздушно-капельный. Несмотря на массивное выделение возбудителя во внешнюю среду, благодаря крупнодисперсному характеру выделяемого аэрозоля передача микроба возможна только при тесном общении с больным. При этом заражение происходит на расстоянии не более 2 м от источника инфекции. Из-за нестойкости возбудителя во внешней среде передача через предметы обихода, как правило, не происходит.

Дата: 2019-07-24, просмотров: 170.