Проводится бактериологическим (основным) и серологическим методами исследования.

Бактериологический метод позволяет выделить возбудителя коклюша с первых дней болезни и до 25-30-го дня (в катаральном пе­риоде - в 90-95% случаев, в судорожном периоде - в 50%, частота выделения постепенно снижается). Основной исследуемый материал - слизь из носоглотки. Слизь берут с задней стенки глотки, где она оседает при кашле, тампоном на длинной проволоке, который вводят через рот или через носовые ходы. Часто используют метод "кашлевых пластинок". Больному во время приступов кашля подставляют ко рту открытую чашку с питательной средой. Чашку держат вертикаль­но на расстоянии 5-10 см в течение нескольких секунд.

Для выделения и культивирования B.pertussis применяют специ­альные питательные среды: картофельно-глицериновый агар (среда Борде-Жангу) и казеишво-угольный агар (КУА). Для подавле­ния роста посторонней микрофлоры в среды добавляют мегициллин.

Через 48-72 часа после посева на чашках вырастают мелкие бле­стящие выпуклые колонии, напоминающие капельки ртути. Выделен­ную культуру идентифицируют по совокупности морфологических, культуральных, биохимических (B.pertussis практически инертна) и антигенных свойств. B.pertussis агглютинируются антифакторными сыворотками 7 и 1. По ходу бактериологического исследования про­водится дифференциация B.pertussis от B.parapertussis В отличие от коклюшных паракоклюшные бактерии могут расти на МПА, коло­нии вырастают быстрее (за 24-48 часов), они крупнее и имеют корич­невый цвет. B.parapertussis образуют уреазу, расщепляют аргинин, агглютинируются родоспецифической антифакторной сывороткой 7 и видоспецифической сывороткой 14.

Экспресс-метод диагностики. Во время катарального периода B.pertussis можно выявить методом иммунофлюоресценции.

Серологический метод. Его проводят в поздние сроки при ати­пичном течении болезни, если не удалось выделить возбудителя, и иногда проводят для ретроспективной диагностики. Исследуют пар­ные сыворотки больного в серологических реакциях РСК, РА, РИГА, ИФА. Реакции ставят параллельно с коклюшным и паракоклюшным антигенами (диагностикумами). Положительным результатом считается повышение титра антител во второй сыворотке по сравнению с первой не менее, чем в 4 раза.

ИФА позволяет выявлять антитела классов IgM, IgG и IgA. Для оценки местного иммунитета определяют IgA в слизи из носоглотки.

Лечение и профилактика

1) Вакцина коклюшно-дифтерийно-столбнячная адсорбированная жидкая (АКДС - вакцина) - применяется для плановой вакцинации детей от 3 мес. до 3 лет. Содержит взвесь убитых коклюшных микробов 1-й фазы и очищенных дифтерийного и столбнячного анатоксинов, сорбирован­ных на алюминия гидроксиде (20 млрд. микробных клеток коклюшных бактерий/мл); 30 флокулирующих доз (Lf) дифтерийного и 10 антиток-синсвязывающих (ЕС) столбнячного анатоксина в 1 мл.

2) Тегракок (Франция). Содержит 30 ЕС дифтерийного анатокси­на, 60 ЕС столбнячного анатоксина, адсорбированных на гидроокиси алюминия, взвесь убитых коклюшных бактерий и инактивированную полиомиелитную вакцину 1, 2 и 3 типов. Предназначен для профилактики коклюша, дифтерии, столбняка и полиомиелита. Обладает более высокой реактогенностью, чем АКДС вакцина.

3) Противококлюшный иммуноглобулин.

В качестве антибактериальной терапии назначаются антибиотики, которые оказывают терапевтический эффект только в ранние сроки за­болевания. Антибактериальными препаратами, препятствующие коло­низации B.pertussis на цилиндрическом эпителии верхних дыхательных путей являются эритромицин, вильфарен и некоторые другие.

III . План практической работы

1. Микроскопировать с масляной иммерсией демонстрационные микропрепараты, приготовленные из ликвора, окрашенные метиленовой синью, зарисовать, дать заключение.

2. Учесть РПГА с “парными” сыворотками в диагностике менингококковой инфекции.

3. Заполнить таблицу: «Питательные среды для культивирования В.pertussis».

4. Разобрать схему постановки и учесть РСК в серодиагностике коклюша.

5. Решение ситуационных задач.

IV . Примеры ситуационных задач

Ситуационная задача № 1

Ребенок 2-х лет, заболел респираторной инфекцией, сопровождающейся субфебрильной температурой, насморком, слабым кашлем. За 10 дней до начала заболевания имел контакт с больным коклюшем ребенком.

Каков Ваш предполагаемый диагноз?

1) Коклюш, период разрешения

2) Паракоклюш, катаральный период

3) Коклюш, катаральный период

4) Коклюш, судоржный период

Перечислите методы лабораторной диагностики данного заболевания:

1) Бактериологический метод

2) Вирусологический метод

3) Экспресс-метод диагностики

4) Серологический метод

Перечислите основные питательные среды, применяемые для культивирования возбудителя данного заболевания:

1) Среда Борде-Жангу

2) Среда с ристомицином

3) Казеиново-угольный агар

4) Среда Левенштейна-Йенсена