микобактерии туберкулеза вне организма растут в чистых культурах на плотных и жидких средах с хорошим доступом воздуха. Используются глицериновые, белковые (яичные, сывороточные, картофельные) и синтетические. Они должны содержать факторы ро­ста, такие как витамины группы В, биотин, никотин, рибофлавин. На твердых средах рост туберкулезных микобактерий появляется на 14-20 сутки в виде светло-кремового морщинистого или суховато-че­шуйчатого налета, колонии с неровными краями, по мере роста при­обретают бородавчатый вид, напоминающий цветную капусту.

1. Среда Левенштейн-Иенсена содержит суспензию свежих ку­риных яиц, глицерин, аспарагин, крахмал, минеральные соли, раствор малахитовой зелени. Свертывают среду в пробирках в наклонном положении при 85°С 45 минут.

2.  Картофелъно-глицериновая среда. Куски тщательно вымытого сырого картофеля вымачивают сутки в растворе бикарбоната натрия, а затем 2 суток в 6% растворе глицерина. Кладут приго­товленные куски картофеля в широкие пробирки или пробирки с перетяжкой, наливают немного раствора глицерина, стерили­зуют.

3.  Среда Сотона - жидкая синтетическая среда содержит аспара­гин, глицерин, лимонную кислоту, K-jS0₄ Mg₂S0₄, цитрат амми­ачного железа.

6. Антигенная структура

Микобактерии туберкулеза имеют сложный и мозаичный набор антигенов. Вирулентность туберкулезных микобактерии в значительной сте­пени обусловлена строением их трехслойных клеточных стенок, представ­ленных жирными кислотами, восками, сульфолипидами, а глав­ное - миколовыми кислотами и их производными. Миколовые кислоты обуславливают кислотоустойчивость мико­бактерии, участвуют в формировании комплекса пептидогликан-арабиногалактат-миколовая кислота. Этот комплекс образует прочный каркас клеточной стенки микобактерии. При нахождении микобакте­рии внутри клеток (они являются факультативными внутриклеточны­ми паразитами) они покрываются защитным восковым налетом. У микобактерии обнаружена полисахаридная микрокапсула.

МБТ выделяют летучие токсины и эндо­токсин.

Менингококки ферментируют с образованием кислых продуктов только глюкозу и мальтозу, что служит дифференциально-диагностическим признаком. Благодаря особому химическому строению микобактерии туберку­леза обладают значительной устойчивостью к физическим и хи­мическим агентам. Во влажной мокроте микобактерии выдер­живают нагревание в течение 30 мин при 75 °С, при кипячении погибают через 5 мин. В выделенной мокроте МВТ погибают при 100 С через 45 мин. В воде палочки выживают не менее 150 дней после заражения. МВТ выдерживают процессы гниения и мо­гут несколько месяцев сохраняться в погребенных трупах. Препараты хлора и йода хорошо действуют на микобактерии.

8. Факторы патогенности

А. Липидные фракции, входящие в состав клеточной стенки.

1. Корд-фактор - основной фактор патогенности. Это токсичес­кий гликолипид - эфир трегалозы и 2-х остатков миколовой кис­лоты (трегалоза-6,6-димиколат). Корд-фактор является фактором адгезии и колонизации, антифагоцитарным фактором, оказыва­ет токсическое действие на митохондрии после проникновения в клетки хозяина, нарушает окислительные процессы в тканях. Корд-фактор содержат только вирулентные бактерии. Он распо­ложен на поверхности клеточной стенки туберкулезных микобактерий, способствуя их гидрофобности, тесному склеиванию между собой, расположению в виде "жгутов".

2. Воск Д - пептидогликолипид, содержащий миколовые кислоты, является антифагоцитарным фактором.

3. Сулъфолипиды - располагаются в наружном слое клеточной стенки и в сочетании с димикоцерозат фтиоцеролом (воск С) рассматриваются как фактор патогенности, так как способству­ет выживанию микобактерий внутри макрофагов, угнетают вы­деление лизосомальных ферментов.

4. Ацетонрастворимые липиды – усливают иммунодепрессивные свойства микобактерий, при участии туберкулина способны мо­дифицировать мембраны клеток организма таким образом, что иммунные силы организма принимают эти клетки за инфициро­ванные и разрушают их (вместо того, чтобы направлять свое действие на инфицированные туберкулезными микобактериями клетки).

Б. Белковые факторы микобактерий туберкулеза.

5. Туберкулин - комплекс веществ, высвобождающихся при распаде туберкулезных микобактерий. Туберкулин не токсичен для здоровых людей. Он состоит из нескольких белковых фракций и содержит высокомолекулярные полисахариды. Это основной антиген, против которого направлен иммунный ответ инфицированного организма. Туберкулин обладает выраженными свойствами аллергена и токсичен только для инфицированных и больных туберкулезом людей и животных, у которых развилось состояние гиперчувствительности замедленного типа (ГЗТ), как форма клеточного иммунного ответа. По своим антигенным свойствам туберкулин имеет сходство с антигенами главного комплекса гистосовместимости человека (HLA). Это сходство у разных людей выражено в разной степени. Чем такое сходство больше, тем более человек восприимчив к туберкулезной ин­фекции, тем менее выражен иммунный ответ, ГЗТ не развивает­ся. Таким образом, имеется генетическая предрасположенность к туберкулезной инфекции и ее хроническому те­чению.

Патогенез

В патогенезе заболевания различают два периода: первичный и вторичный. Туберкулезные микобактерий проникают аэрогенным путем в дыхательный тракт, вплоть до альвеол, где они фагоцитируются альвеолярными макрофа­гами, в которых долго остаются жизнеспособными. Незавершенный фагоцитоз связан с наличием у микобактерий антифагоцитарных фак­торов. Основной из них - корд-фактор, который повреждает мембра­ны митохондрий макрофагов, нарушает процесс слияния фагосом с лизосомами, а также оказывает токсическое действие на полиморфноядерные фагоциты. Таким образом, часто первая линия защиты - фагоцитоз - оказы­вается несостоятельной и развивается первичный туберкулез. Он ха­рактеризуется формированием специфического туберкулезного воспалительного очага или мелких очажков - туберкулезных грану­лем, имеющих сходное строение. Воспаление распространяется на отходящие лимфатические пути и региональный лимфатический узел, образуя первичный комплекс: грануломатозный воспалительный очаг + лимфангоит + лимфаденит. Воспалительный туберкулезный очаг (гранулема) содержит ха­рактерные элементы: в центре формируется творожистый некроз, ок­руженный эпителиоидными клетками и клетками Пирогова-Лангерганса. Эпителиоидные клетки образуются из гистиоцитов и макрофагов, клетки Пирогова-Лангерганса - это гигантские многоядерные клетки, образующиеся из эпителиоидных клеток при их слиянии или при про­лиферации макрофагов. Туберкулезные микобактерий находятся в вос­палительном очаге как внеклеточно, так и внутри клеток. Очаг (грану­лема) содержит также лимфоидные клетки и нейтрофилы, располага­ющиеся ближе к периферии. При заживлении воспалительного очага творожистые массы каль­цинируются, вокруг очага образуется капсула из соединительной тка­ни, но внутри могут остаться жизнеспособные микобактерий, часто в виде L-форм. Такие зажившие очаги называются очагами Гона. Они формируются в легочной ткани и внутригрудных лимфоузлах. На этом первичный период может закончиться, но бывает и менее благоприят­ное течение. Воспалительные очаги в легких и лимфоузлах могут приобре­тать более распространенный характер, захватывать бронхи и плевру. Вследствие лимфо- и гематогенного заноса возбудителей в другие ткани и органы в них тоже возможно формирование постпервичных гранулематозных очагов. При достаточной напряженности иммунитета пер­вичный период часто заканчивается клиническим выздоровлением и заболевание больше не возобновляется. Этому способствует своев­ременно проведенная, полноценная химиотерапия.

Но бывает и возврат болезни с развитием вторичного туберку­леза. Вторичный период легочного туберкулеза может возникать че­рез различные сроки после первичного туберкулеза и рассматривается как эндогенная инфекция. При этом происходит реактивация старых очагов на фоне сниженного иммунитета. Преимущественно заболева­ют люди зрелого и пожилого возраста. Для вторичного туберкулеза характерно хроническое волнообразное течение болезни с периодами обострения и улучшения состояния. При отсутствии или недостаточ­ности лечения развиваются множественные воспалительные очаги в легких, бронхах, внутригрудных лимфоузлах, в процесс может вовле­каться плевра.

Иммунитет

Человек обладает определенной естественной резистентностью к туберкулезной инфекции. Часто возбудители туберкулеза, попав в организм еще в детском возрасте, не вызывают видимых проявлений инфекции, за исключением виража туберкулиновой пробы. Тем не менее, возникает приобретенный иммунитет, развивается ГЗТ. Сход­ная картина наблюдается и после иммунизации живой вакциной BCG /БЦЖ/.

Иммунитет при туберкулезе носит преимущественно клеточный характер, имеют значение и антитела. Фагоцитоз, ГЗТ и антитела осуществляют комплексное защитное действие. Каждый из этих  ме­ханизмов в отдельности не может обеспечить состояние иммунитета. Фагоцитоз возбудителей, осуществляемый макрофагами, является не­завершенным. С развитием ГЗТ и появлением специфических анти­тел эффективность фагоцитоза повышается. Иммунные лимфоциты также участвуют в разрушении туберкулезных микобактерий.

Иммунитет при туберкулезе считается нестерильным, т.е. для поддержания состояния иммунитета необходимо присутствие живых туберкулезных микобактерий (вирулентных или вакцинного штамма BCG).