Материал: слизь из носоглотки или частицы слизи,
Поможем в ✍️ написании учебной работы
Поможем с курсовой, контрольной, дипломной, рефератом, отчетом по практике, научно-исследовательской и любой другой работой

выбрасываемые при кашле

 

Среда Борде-Жангу Казеиново-угольный агар Микроскопия Окраска по Граму   Реакция агглютинации с коклюшной сывороткой 1 фазы ( S -формы) Микроскопия       Среды МПА          КУА Борде- Жангу Пестрый ряд Реакция агглютинации с коклюшной сывороткой 1 фазы Внутрикожная проба на кролике-альбиносе, развитие некроза

 

Б. Серологический (на поздних стадиях заболевания)реакция

агглютинации и РСК.

 

В. Молекулярно-генетический – ПЦР.

Табл.1. А. Дифференциальные признаки возбудителей коклюша и паракоклюша.

Признак Коклюшная палочка Паракоклюшная  палочка
Рост на простом агаре +
Образование коричневого пигмента на казеиново-угольгом агаре +
Образование уреазы +
Использование цитратов +
Гемолиз + +
Лакмусовое молоко-коагуляция +
Капсула +
Проба Дольда некроз некроз
Агглютинация сыворотками: коклюшной палочки ++ +–
паракоклюшной палочки +– ++

 

Б. Для бактерий рода Bordete ll a характерен специфический тканевой тропизм к цилиарному эпителию респираторного тракта соответствующего хозяина. Патогенными для человека являются возбудитель коклюша (B . pertussis) и паракоклюша (B . parapertussis). В некоторых случаях B . bron c hoseptica вызывает коклюшеподобное заболевание у человека. Наиболее важным признаком, имеющим диагностическое значение, является содержание фимбриальных видоспецифических антигенов: коклюшных - 1,2,3; паракоклюшного - 14 и бронхосептического – 12, выявляемых в реакции агглютинации со специфическими сыворотками.

 

 

З А Н Я Т И Е  6

Дата ______________

Тема: Микробиологическая диагностика туберкулеза, микобактериозов, лепры

План занятия:

1. Правила взятия и пересылки в лабораторию патологического материала от больного туберкулезом.

2. Морфология туберкулезных бактерий - микроскопия готовых препаратов.

3. Культуральные свойства туберкулезных бактерий. Рост туберкулезной палочки на жидких и твердых питательных средах (демонстрация).

4. Бактериоскопическая диагностика туберкулеза. Микроскопия материала с окраской по Цилю-Нильсену. Методы обогащения.

5. Бактериологическая диагностика туберкулеза. Применение метода микрокультур (метод Прайса) для ускоренной диагностики туберкулеза (разбор и демонстрация).

6. Палочка проказы - микроскопия готовых препаратов.

7. Изучение иммунопрепаратов, применяемых для диагностики и профилактики туберкулеза.

 

Методические указания

1. Правила взятия и пересылки в лабораторию патологического материала от больного туберкулезом

 Материалом для исследования чаще служит мокрота. Реже используются моча, гной, спинномозговая жидкость, испражнения. Материал собирают в стерильную баночку, закрывают пробкой. К присылаемому на анализ материалу прилагается бланк лечебного учреждения, в котором четко указывается название материала, цель исследования и предполагаемый диагноз. Кроме того, указывается фамилия, имя, отчество и возраст больного.

2. Морфология туберкулезных бактерий - микроскопия готовых препаратов

Промикроскопировать готовые препараты-мазки туберкулезных бактерий, окрашенных по Цилю-Нильсену. Препараты зарисовать.

 

     
Рис.1. Mycobacterium tuberculosis Окраска по Цилю-Нильсену Рис. 2 Микрокультура Mycobacterium tuberculosis Рис. 3. Mycobacterium leprae Окраска по Цилю-Нильсену

 

3. Культуральные свойства туберкулезных бактерий. Рост туберкулезной палочки на жидких и твердых питательных средах (демонстрация)

 Демонстрация роста туберкулезных бактерий на глицериновом бульоне, яичной среде Петраньяни и других средах.

4. Бактериоскопическая диагностика туберкулеза. Микроскопия материала с окраской по Цилю-Нильсену. Методы обогащения

Перед исследованием мокроту выливают в чашку Петри, поставленную на темном фоне. Из мокроты необходимо выбрать гнойные комочки, приготовить препарат-мазок, окрасить по Цилю-Нильсену. Промикроскопировать, обратив внимание на наличие прямых или слегка изогнутых тонких палочек, часто зернистых, расположенных одиночно или группами. Палочки окрашены в красный цвет, а лейкоциты, посторонние бактерии и слизь - в синий. Препарат зарисовать.

Если содержание туберкулезных бактерий настолько мало, что их не удается обнаружить в мазках, поэтому ранее широко пользовались одним из методов обогащения - методом осаждения или методом флотации.

Метод осаждения. К мокроте добавляют равное по объему количество однопроцентного едкого натра, плотно закрывают склянку и встряхивают ее в течение 5-15 минут до полного растворения мокроты, центрифугируют, сливают жидкость, осадок нейтрализуют 1-2 каплями десятипроцентного раствора соляной кислоты. Из осадка, в котором сконцентрированы туберкулезные бактерии, приготовляют мазки, окрашивают по Цилю-Нильсену и микроскопируют.

Метод флотации. Мокроту помещают во флакон или колбу с резиновой пробкой емкостью в 250 мл, добавляют равное количество 0,5-1% едкого натра, встряхивают 5-10 минут до полной гомогенизации. Колбу помещают в водяную баню и прогревают при 55°С в течение 30 минут, затем добавляют около 100 мл дистиллированной воды и 1-2 мл ксилола, бензина или газолина. Смесь встряхивают в течение 5-10 минут, еще вливают в колбу около 100 мл дистиллированной воды (до установления уровня жидкости в узкой части горловины) и оставляют при комнатной температуре на 20-30 минут. Образовавшийся сливкообразный слой переносят пипеткой на предметное стекло, которое кладут на крышку водяной бани, нагретой до 60°С. На высохший мазок наносят новые порции материала до тех пор, пока весь флотационный экстракт не будет перенесен на предметное стекло. Сухой препарат промывают эфиром для удаления ксилола или бензина, фиксируют на пламени, красят по Цилю-Нилъсену и микроскопируют.

5. Бактериологическая диагностика туберкулеза. Применение метода микрокультур (метод Прайса) для ускоренной диагностики туберкулеза (разбор и демонстрация)

Знакомство с методом микрокультур (метод Прайса) для ускоренной диагностики туберкулеза. Демонстрационный препарат микрокультуры туберкулезной палочки промикроскопировать и зарисовать. Микрокультура возбудителя туберкулеза выглядит в виде тяжей или скоплений, похожих на канат или косу и состоящих из туберкулезных палочек.

6. Палочка проказы - микроскопия готовых препаратов.

Промикроскопировать и зарисовать готовые препараты палочки проказы. В отличие от туберкулезной палочки возбудитель проказы располагается параллельными рядами (в виде пачек сигар), преимущественно внутри клеток.

7. Изучение иммунопрепаратов, применяемых для диагностики и профилактики туберкулеза

Ознакомление с составом и назначением следующих иммунопрепаратов: туберкулин Коха, очищенный туберкулин РРD-L, вакцина БЦЖ.

Контрольные вопросы

1. Каковы морфологические особенности туберкулезной палочки?

2. Каковы тинкториальные свойства возбудителя туберкулеза?

3. Как растут туберкулезные палочки на жидких и твердых питательных средах?

4. Какие существуют типы туберкулезной палочки, и какова их роль в патологии человека?

5. По каким свойствам различают патогенные типы туберкулезных палочек?

6. Как классифицируют микобактерии по скорости роста и фотоактивации пигментообразования?

7. Почему возбудители туберкулеза относительно устойчивы к воздействию внешних факторов?

8. Какие лабораторные животные чувствительны к туберкулезной палочке?

9. Как происходит заражение человека туберкулезом?

10. Каков характер фагоцитоза при туберкулезе?

11. Какова природа иммунитета при туберкулезе?

12. Какую роль играют лимфоциты в реакции повышенной чувствительности замедленного типа при туберкулезе?

13. Какова природа туберкулина, его назначение и применение?

14. Каковы факторы патогенности туберкулезной палочки?

15. Какие микробиологические методы применяются для диагностики туберкулеза?

16. Как осуществляется бактериоскопическая диагностика туберкулеза?

17. Какие методы используют для обогащения материала при бактериоскопической диагностике туберкулеза?

18. Как ставится биологическая проба для диагностики туберкулеза?

19. Как осуществляется ускоренная диагностика туберкулеза (метод микрокультур)?

20. Каково значение туберкулиновых проб в диагностике туберкулеза?

21. Какие препараты применяются для диагностики и специфической профилактики туберкулеза?

22. Что такое микобактериозы? Их возбудители?

23. Каковы морфологические свойства возбудителя проказы?

24. Какие микробиологические методы используются для диагностики проказы?

25. Какие методы применяются для дифференциации палочки Гансена от туберкулезной палочки?

26. Какие иммунологические реакции используются для диагностики проказы?

27. По каким признакам отличают истинные туберкулезные бактерии от потенциально патогенных и сапрофитных микобактерий?

28. Почему необходимо определять чувствительность туберкулезных бактерий к антибиотикам?

ПРИЛОЖЕНИЕ К ЗАНЯТИЮ 6

МЕТОДЫ МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОЙ ДИАГНОСТИКИ ТУБЕРКУЛЕЗА

А. Бактериоскопический

Материал: гной, мокрота, моча и т.д.

 

Микроскопия Окраска по Цилю-Нильсену Методы обогащения (осаждение, флотация)
Микроскопия Окраска по Цилю-Нильсену Метод люминесцентной микроскопии (аурамин, аурамин-родамин)

Б. Бактериологический

Дата: 2019-03-05, просмотров: 216.