Цель: формирование умений и навыков определения заселенности семян вредителями и зараженности болезнями.

Задания

1. Определить заселенность семян пшеницы, ячменя или других культур  амбарными вредителями.

 2. Провести предварительный анализ зараженности семян болезнями люминесцентным методом.

Знать методики определения заселенности семян вредителями и зараженности болезнями.

Уметь различать явную и скрытую заселенность вредителями.

Владеть навыками определения заселенности семян вредителями и зараженности болезнями.

Материалы и оборудование

Образцы семян, разборные доски, зерновые лупы с 4-5-кратным увеличением; решета с отверстиями диаметром 1; 1,5; 2,5 мм; шпатели, пинцеты, препаровальные иглы, стекло, черная бумага, лабораторные весы, прибор ПООК-1 для подсчета клещей, ультрафиолетовый осветитель, теплая вода (температура 30ºС); 1%-ный раствор перманганата калия; 1%-ный раствор йодистого калия; 0,5%-ный раствор щелочи (NaOH или KOH); коллекция амбарных вредителей и семян, поврежденных молью, гороховой и фасолевой зерновками, долгоносиком и другими амбарными вредителями.

Литература: Филатов, В.И. Практикум по агробиологическим основам производства хранения и переработки продукции растениеводства/В.И. Филатов, Г.И. Баздырев, А.Ф. Сафонов и др.- М.: Колос, 2002. – С. 235-239.

Методические указания

Наибольшее распространение среди вредителей, повреждающих семена, имеют клещи, амбарный и рисовый долгоносики, гороховая и фасолевая зерновки, зерновая и амбарная моли, хрущаки, люцерновая толстоножка, клоп-черепашка, просяной комарик и др.

Семена, в которых обнаружены живые вредители (яйца, личинки, куколки, взрослые особи в явной и скрытой форме), считают заселенными вредителями.

Различают явную и скрытую форму заселенности семян вредителями (ГОСТ 12045 - 81). При явной форме обнаруживаются взрослые живые вредители или их личинки, а также повреждения на семенах. При скрытой форме вредителей можно обнаружить только при разрезании семян, с помощью химических реактивов, рентгенографии и т.д. Запрещено использовать для посева партии, содержащие живых вредителей, за исключением клеща (ГОСТ 12045 - 81). В семенах III класса некоторых культур допускается наличие клеща (не более 20 экземпляров на 1 кг семян).

Для обнаружения амбарных вредителей используют вторую среднюю пробу (семена, хранящиеся в стеклянной бутылке). Анализ проводят не позднее чем через 2 суток после поступления пробы в лабораторию. В холодный период года пробу перед анализом выдерживают при комнатной температуре не менее 1,5 – 2 ч. Для того чтобы клещи пришли в подвижное состояние, образец семян подогревают в течение 20-30 мин при температуре 25-28ºС.

При определении заселенности семян амбарными вредителями в явной форме образец семян просеивают через два решета с отверстиями диаметром 1,5 и 2,5 мм (на поддон ставят решето с отверстиями 1,5 мм, выше – с отверстиями 2,5 мм, сверху закрывают крышкой). Для мелкосемянных культур вместо решета с отверстиями 1,5 мм ставят решето с отверстиями 1 мм.

Отсев высыпают на стекло, под которое подложена черная бумага, чтобы клещи были лучше видны. Подсчитывают число живых клещей и устанавливают их содержание на 1 кг семян.

При использовании специального оптического прибора ПООК-1 клещей просматривают на освещенной и подогреваемой лампой черной поверхности поддона. Лупа 4-5-кратного увеличения в приборе вмонтирована в окуляр.

Устанавливают визуально, есть ли в семенах, оставшихся на решетах с отверстиями диаметром 1,5 или 1 мм, долгоносики, точильщики, мукоеды, хрущаки, а на решете с отверстиями 2,5 мм – большие хрущаки, зерновки и другие крупные насекомые. При обнаружении первого живого вредителя анализ прекращают.

Определение заселенности семян долгоносиком в скрытой форме проводят, если в образце семян не обнаружены живые вредители, но имеются мертвые долгоносики или поврежденные ими семена.

Скрытую форму заселенности семян пшеницы, ржи, риса, ячменя определяют двумя способами:

- разрезают семена вдоль и просматривают их на наличие долгоносиков;

- семена обрабатывают сначала теплой водой (30ºС) в течение 1 мин, затем 1%-ным раствором перманганата калия в течение 1 мин. После этого выделяют семена, у которых пробочки, закрывающие вход вредителя внутрь семени, окрашены в черный цвет. Диаметр пробочек около 0,5 мм.

В обоих случаях для анализа берут 200 семян основной культуры. При обнаружении первого живого вредителя анализ прекращают.

Явную и скрытую форму заселенности семян бобовых культур зерновками, проса просяным комариком, конопли листоверткой, кукурузы зерновой молью, трав и кориандра семяедами определяют при проведении анализа на чистоту по ГОСТ 12037-81.

Определение явной формы заселенности семян бобовых культур, проса, конопли, кукурузы и трав проводят, просматривая навески, выделенные для анализа чистоты. Если в навесках вредители не обнаружены, просматривают остаток первой средней пробы.

При определении скрытой формы заселенности семян бобовых культур зерновками вредителей вскрывают семена с заметными входными отверстиями личинок или проколами зерновок. Если в подозреваемых семенах живые вредители не обнаружены, оставшиеся семена навески обрабатывают 1%-ным раствором йодистого калия. Места повреждений становятся хорошо заметными. Затем семена переносят в 0,5%-ный раствор КОН или NaOH на 30с, после чего их быстро просматривают.

При определении скрытой формы заселенности семян проса, конопли, кукурузы, трав из навески выделяют семена, имеющие следующие внешние признаки:

- семена проса, поврежденные просяным комариком, продолговатые, более плоские, чем нормальные, с серовато-матовой цветковой чешуёй;

- семена конопли с листоверткой имеют отверстия, оплетены паутиной;

- семена кукурузы с зерновой молью на зародышах имеют темную точку;

- из семян трав с семяедами при нажиме шпателем выделяется жидкая масса.

Отобранные семена вскрывают. При обнаружении первого вредителя (в любой стадии развития) анализ прекращают.

Люминесцентный метод определения зараженности семян болезнями применяют для предварительного анализа зараженности.

Из навески семян, отобранной из первой средней пробы при анализе на чистоту, выделяют часть семян основной культуры, раскладывают их на черную бумагу, помещают под ультрафиолетовый осветитель и просматривают.

Здоровые семена пшеницы излучают сине-голубой или сине-фиолетовый свет, а семена, сильно зараженные пыльной головней, выглядят темными, тусклыми.

Семена гороха в местах заражения аскохитозом отличаются тусклым коричнево-красным свечением. При заражении семян свеклы фомозом пикниды гриба, находящиеся на поверхности семян, характеризуются белям матовым светом. Семена кукурузы, зараженные фузариозом, излучают яркий оранжевый или малиновый свет. Здоровые семена сои имеют светло-голубое свечение.

По свечению семян делают предварительное заключение о наличии или отсутствии заболеваний. Есть и другие методы определения зараженности семян болезнями: макроскопический, центрифугирования, биологический (проращивание во влажной камере, на питательных средах). Эти методы подробно изложены в ГОСТ 12044-93.

Макроскопический метод применяют для визуального обнаружения в семенах головневых образований, склероциев спорыньи и других грибов, а также галлов пшеничной нематоды. Его используют одновременно с определением чистоты семян по ГОСТ 12037-81.

Центрифугирование применяют при поверхностном заражении семян спорами грибов, для обнаружения зараженности льна карантинной болезнью пасмо и др.

Для анализа используют третий средний образец, из которого отбирают две пробы по 100 семян. Пробы помещают в пробирки с 10 мл воды и взбалтывают в течение 1 мин. Затем воду переливают в чистую пробирку и центрифугируют для осаждения спор в течение 3 мин при частоте вращения 50 мин-¹ и более. Промывную воду сливают, а из осадка готовят 5 препаратов (5 капель) для просмотра микроскопом и установления вида гриба.

Биологический метод основан на стимуляции развития и роста грибов и бактерий в зараженных семенах. Существует несколько его модификаций. Наиболее распространен метод влажной камеры, который используют для обнаружения зараженности семян льна и сои.

Пробы из 100 семян льна (повторность 4-кратная) помещают на влажную вату с марлей или на влажную фильтровальную бумагу, предварительно простерилизованные в чашках Петри или Коха в сушильном шкафу при температуре 130°С в течение 1 ч или в автоклаве под давлением 101 325 Па в течение 40-50 мин. Семена проращивают в термостате 8 дней при температуре 23-26°С. Затем проросшие и непроросшие семена осматривают и по внешнему виду спор и конидий под микроскопом устанавливают вид возбудителя. Если на одном семени несколько болезней, учитывают преобладающую или наиболее вредоносную. При работе соблюдают стерильность.

Для обнаружения фузариоза и бактериоза семена сои проращивают в увлажненном кварцевом свежепрокаленном песке при температуре 22-28°С в течение 9 дней.

Для того чтобы определить внутреннюю инфекцию, семена перед проращиванием дезинфицируют спиртом, перманганатом калия, гипохлоритом натрия или другими дезинфицирующими веществами.

Возбудители многих болезней лучше выявляются при высеве семян на питательные среды: картофельный агар, сахарозонитратную среду Чапека и др. На агаровых средах микроорганизмы, развиваясь, переходят из зараженных семян на субстрат и образуют хорошо заметные колонии. Количество семян, на которых образовались колонии, подсчитывают и определяют процент больных семян. Виды возбудителей устанавливают по цвету колоний и дополнительно путем просмотра небольшой части их под микроскопом. Форма спор и конидий разных возбудителей, а также детали методики определения зараженности семян изложены в специальных руководствах.

Результаты____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Контрольные вопросы

1.Какие методы используются для  определения явной заселенности вредителями? 2. Какие методы используются для определения скрытой заселенности вредителями? 3. Какой метод является лучшим для выявления возбудителей болезней? 4. Какой метод определения болезней применяют при поверхностном заражении семян?