Культивирование грибов – возбудителей дерматомикозов
Поможем в ✍️ написании учебной работы
Поможем с курсовой, контрольной, дипломной, рефератом, отчетом по практике, научно-исследовательской и любой другой работой

Выделение культур возбудителя дерматомикозов осуществляют, помещая отдельные волосы или фрагменты кожи на агар Сабуро, агар Сабуро с антибиотиками, картофельный декстрозный агар, сусло-агар или другие среды для культивирования грибов.  

 •  Виды Trichophyton вырастают за 2-3 недели, колонии разноцветные, кожистые, радиально исчерченные, врастающие в среду. В микропрепаратах из колоний на фоне переплетающихся гиф видны большие, гладкие и септированные (до 10 септ) макроконидии вытянутой или цилиндрической формы, по форме напоминающие «карандаши» и многочисленные микроконидии-алейрии. Гифы заканчиваются характерными спиралевидными структурами. Внутривидовая идентификация Trichophyton затруднена и требует изучения биохимических свойств.

• Виды Microsporum растут на питательных средах также медленно. Колонии серовато-жёлтые, кожистые, с радиальными складками. М. gypseum на суслоагаре образует плоские бежевые и слегка желтовато-порошистые колонии. Макроконидии в микропрепаратах из колоний многоклеточные, тонкостенные, с 3-6 перегородками, удлинённые, овальные или веретенообразные, напоминающие «лодочки», покрытые микроскопическими шипиками. Алейрии немногочисленны.

 

 

Рис 14• Epidermophyton floccosum образует белые, жёлтые или оливковые колонии. Грибы идентифицируют по наличию множества гладких конидий, напоминающих «дубинки», 7-20 мкм длиной.

 

 ДРОЖЖЕВЫЕ ГРИБЫ

Одноклеточные, лишенные хлорофилла немицелиальные грибы (эукариоты), относящиеся кклассу аскомицетов (сумчатые грибы)

Дрожжи – высшие грибы, утратившие способность образовывать мицелий и превратившиеся в результате этого в одноклеточные организмы.

Дрожжи широко распространены в окружающей среде. Они активно размножаются в тех субстратах, где имеются доступные растворимые источники углерода, т.е. в соках, сиропах, на плодах, в нектарах цветов, в сокотечениях деревьев, на поверхности листьев, в воде, в почве.   

Дрожжевые грибы могут осуществлять спиртовое брожение и аэробное дыхание. В качестве источников углерода дрожжи используют сахара, простые и многоатомные спирты, органические кислоты; некоторые виды усваивают парафины, циклические углеводороды и сложные соединения ароматического строения.             

Строение клетки дрожжей типично для эукариотов. По форме дрожжевые клетки разнообразны: круглые, овальные, яйцевидные, стреловидные, цилиндрические, лимоновидные, грушевидные, треугольные, многоугольные, серповидные. В некоторых случаях форма клетки бывает настолько характерна, что может служить опознавательным признаком рода (рис. 11).

 

а Г   б д в Е

Рис. 15 . Форма дрожжевых клеток: а – стреловидная, б – серповидная,
в – лимоновидная, г – овальная, яйцевидная, д – цилиндрическая,
е – грушевидная

Некоторые дрожжи образуют капсулы (Cryptococcus), включения гликогена (Cryptococcus), волютина (Saccharomyces), жира в виде отдельных капель (Trichosporon) либо одной липидной вакуоли (Lipomyces). Клетки дрожжей богаты питательными веществами – белками, жиром, витаминами, – могут быть использованы для кормовых целей.

Размножение дрожжей зависит от условий жизнедеятельности дрожжевой клетки и от вида дрожжей.

1. Вегетативное размножение.

Происходит почкованием, реже – делением или почкующимся делением.

Клетки, получающиеся в результате почкования, могут оставаться соединенными, образуя псевдомицелий. При этом клетки мицелия могут быть одинаковыми либо разных размеров. В таком случае различают простой или дифференцированный ложный мицелий.

2. Половое размножение.

Половое размножение у некоторых видов дрожжей осуществляется в неблагоприятных условиях.

3. Размножение с помощью спор.

Кроме почкования и деления многие дрожжи способны размножаться с помощью спор. Образование спор у дрожжей может происходить и бесполым и половым путями.  Споры обычно образуются при неблагоприятных условиях и в присутствии большого количества кислорода. Кроме того, дрожжевые грибы могут образовывать артроспоры и хламидоспоры.

Дрожжи – раздельнополые организмы. Жизненные циклы дрожжей включают чередование гаплоидных и диплоидных клеток благодаря наличию полового процесса.

 Род Candida – типичные представители несовершенных грибов Клетки дрожжей кандида яйцевидные или удлиненные, иногда неправильной формы. Размножаются многосторонним почкованием. Могут образовывать ложный и истинный мицелий. Спиртовое брожение обнаружено у многих видов. Колонии, образующиеся на плотной питательной среде, могут быть гладкими, складчатыми или морщинистыми. На поверхности жидкой питательной среды формируются плотные пленки.

Патогенные дрожжи Candida: C. albicans могут вызывать заболевание человека и животных – кандидоз.

 

               Методы выявления и учета роста дрожжевых грибов.

Наиболее широко используемой средой для культивирования дрожжевых грибов является сусло-агар из солодового сусла, а также картофельный и кукурузный агар. Из синтетических сред используются агар Чапека, среда Сабуро, кандида-агар.

Для подавления роста бактерий и актиномицетов среды для выделения дрожжей подкисляют до рН 4,5 путем добавления минеральных или органических кислот.  Для подавления роста посторонней микрофлоры используют антибиотики широкого спектра действия: стрептомицин (80 мг/л или 100 ед/мл), пенициллин (20-100 ед/мл), левомицетин (50 мг/л).

При выделении мезофильных дрожжей инкубацию производят при
20-26-28°С. Сроки инкубации зависят от температуры. Учет опытов производят через две недели или месяц.

При описании колоний дрожжей отмечают размер колонии, ее цвет, консистенцию. При описании роста дрожжей в жидких средах в пробирках отмечают помутнение среды, образование кольца или пленки.

 Наблюдение за строением и размножением дрожжей с помощью светооптического микроскопа проводят на живых культурах. Капсулы выявляют в препарате с жидкой тушью, т. е. методом негативного контрастирования. Псевдомицелий наблюдают на агаровых пластинках (предметное стекло, покрытое пленкой агаризованной среды). Споры у дрожжей наблюдают в живых препаратах при больших увеличениях оптического микроскопа и с использованием электронного микроскопа.

 




Дата: 2019-07-30, просмотров: 308.