СТОЛБНЯК
1.Антитоксическая сыворотка.
2.Столбнячный анатоксин – для профилактики(токсин + формалин + квасцы + фенол).
БОТУЛИЗМ
1. Фармолквасцовая вакцина против ботулизма норок.
2. Гидроокисьалюминиевый анатоксин.
3. Антитоксическая сыворотка для людей.
4. Ассоциированная вакцина против ботулизма и пастереллеза.
ЭМКАР
1.Гидроокись алюминиевая формолвакцина (ГОАФВ) против ЭМКАРА КРС и овец.
2. Ассоциированная вакцина против ЭМКАРА и лептоспироза.
3. Ассоциированная вакцина против ЭМКАРА и сибирской язвы.
ЗЛОКАЧЕСТВЕННЫЙ ОТЕК
1. Поливалентная анатоксическая сыворотка.
2. Концентрированная поливалентная вакцина против дизентерии, брадзота и энтеротоксимии.
АНАЭРОБНАЯ ДИЗЕНТЕРИЯ ЯГНЯТ
1. Концентрированная ГОА вакцина.
2. Сыворотка против дизентерии ягнят.
3. Сыворотка антитоксическая против дизентерии и энтеротоксимии.
БРАДЗОТ
1. Поливалентная концентрированная вакцина против брадзота, инфекционной энтеротоксемии, злокачественного отёка овец и анаэробной дизентерии ягнят.
2. Поливалентный анатоксин против клостридиозов овец.
Задания для самостоятельной работы
1. Изучить морфологию возбудителя под микроскопом и зарисовать в практикуме.
2. Изучить характер роста возбудителя на жидких и плотных питательных средах.
Контрольные вопросы
1. Какие поражения вызывают возбудители анаэробных инфекций?
2. Расскажите, какой патматериал направляют для исследования в лабораторию при подозрении на анаэробные инфекции.
3. Опишите морфологию возбудителей.
4. Опишите характер роста возбудителей на питательных средах.
5. Как дифференцируют в лабораториях возбудителей анаэробных инфекций?
6. Какие биопрепараты применяют для диагностики, лечения и профилактики болезней, вызываемых изучаемыми возбудителями?
Занятие № 12.
Возбудители ЛЕПТОСПИРОЗА и КАМПИЛОБАКТЕРИОЗА (вибриоза)
Цель занятия:
1. Ознакомить студентов с методами исследования пат материала на наличие возбудителя.
2. Изучить морфологию микроорганизма.
3.Изучить характер роста возбудителя питательных средах.
Материалы и оборудование : Набор готовых красок во флаконах в штативе, йодированный спирт, раствор Люголя, дистиллированная вода, предметные стекла, фильтровальная бумага, бактериологические петли, пинцеты, пробирки с микробными культурами в штативе. Микроскопы. Атлас.
ЛЕПТОСПИРОЗ
– природно-очаговая болезнь животных и человека. Характеризуется кратковременной лихорадкой, анемией, желтухой, гемоглобинурией, геморрагическим диатезом, некрозом слизистых оболочек и кожи, атонией органов пищеварения, абортами. Под действием эндотоксинов, повышается проницаемость сосудов, лизируются эритроциты, происходят кровоизлияния, развиваются гематурия и желтуха, поражается нервная система. Токсикоз может привести к гибели животного. Однако часто лептоспироз может протекать бессимптомно.
Основные носители лептоспир в природе - грызуны. Основной фактор передачи болезни – вода (в воде открытых водоемов патогенные лептоспиры сохраняются от 7 до 30 дней и более; во влажной почве выживают до 280 дней) Входные ворота инфекции - поврежденные кожа и слизистые оболочки. Наиболее восприимчивы: К.Р.С. свиньи, лисицы, песцы, менее - лошади, козы, овцы, буйволы, верблюды, олени, ослы, собаки, кошки, куры, утки. После переболевания у животных формируется иммунитет, характеризующийся серовариантной специфичностью, поэтому возможны реинфекции. Характерно длительное носительство. При вакцинации беременных животных - у молодняка формируется колостральный иммунитет.
Материал для лабораторной диагностики: При жизни: кровь, моча. Мочу необходимо исследовать в течение 3 часов с момента взятия. Посмертно - абортированный плод, кусочки паренхиматозных органов, почку, транссудат из грудной и брюшной полостей, мочевой пузырь с мочой, отбирают не позже 2 часов после гибели животных.
КЛАССИФИКАЦИЯ ВОЗБУДИТЕЛЯ.
Род: Leptospira, Вид: Leptospira interrogans .
Наибольшее значение имеют серогруппы:
· Pomona,
· Tarassovi,
· Hebdomadis,
· Grippotyphosa,
· Icterohaemorrhagiae,
· Canicola.
Методы диагностики
БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКИЙ МЕТОД
Микроскопия. Лептоспиры плохо окрашиваются по Граму, хотя по строению клеточной стенки они Гр-. по Романовскому-Гимзе – также плохо красятся, розовые. Также их можно обнаружить в срезах из органов после импрегнации серебром по методу Левадити, но этот метод сложен и применяется только в научных целях. Поэтому основной метод микроскопирования лептоспирпроводятв живом виде, в раздавленной капле, с конденсором «темного поля». Лептоспиры - спиралевидные бактерии длиной 6-30 мкм, имеют около 20 мелких, первичных завитков и 1-2 вторичных, придающих клетке форму букв «г, s, с». В темном поле - вид тонких, серебристых нитей с утолщенными и загнутыми в виде крючков концами. Гр. «-», СПОРЫ «-». КАПСУЛЫ«-». ПОДВИЖНЫ «+-» .
Культивирование и культуральные свойства.
Посев на жидкие водно-сывороточные питательные среды: (Уленгута, Ферворта-Вольфа, Терских, Любашенко, и др.); факультативные анаэробы; оптимальная температура 28-30oС; культивирование от 7 суток до 1-2 мес. При культивировании среда не изменяется, и наличие роста определяют микроскопией в темном поле. На плотных средах (Кокса, ВГНКИ) лептоспиры образуют колонии S- и R-форм. S-форма - типичная для вирулентных лептоспир: колонии прозрачные, в виде диска с ровным краем.
Биохимические свойства.
Ферментация углеводов у лептоспир не доказана; обнаружены каталаза, оксидаза, липаза.
Биопроба . Заражают золотистых хомячков 20-30-суточного возраста и крольчат-сосунов в возрасте 10-20 суток. На каждую пробу берут 2 животных; на 4-5-й сутки убивают одно животное и из органов готовят препарат «раздавленная капля». Второе животное убивают на 14-16-й сутки. Из сердца, печени и почек убитого или павшего животного, проводят посевы на питательные среды, готовят препарат «раздавленная капля» и ставят РМА.
II . Серологический метод:
1. Реакция микроагглютинации (РМА). Пробы крови берут на 5-7-й день болезни, а при исследовании отдельных животных - повторно через
7-10 дней (парные сыворотки). РМА ставят в лунках агглютинационных планшет.Компоненты: Ат - исследуемая сыворотка в разведении 1:100, 1:500, 1:2500 (при необходимости - в разведениях 1:100, 1:200 и т. д. до титра) в объеме 0,1 мл; антиген - живые5-15-суточные культуры лептоспир 13-16 серогрупп в объеме 0,1 мл; контроль - антиген с физ. р-ром по 0,1 мл. Смесь выдерживают при t 30 oС 1 ч. PMA проявляется в склеивании лептоспир и образовании «паучков», включающих от 3-5 до нескольких десятков и более бактерий. Оценивается реакция в плюсах по 4-балльной системе под микроскопом в препарате «раздавленная капля». Положительная – РМА не менее ++.
РМА + в титре 1:50….1:100 и выше свидетельствуют об инфицированности данной особи лептоспирами и о возможном лептоспироносительстве.
2. РА ставят на стеклянной пластинке. Компоненты реакции: Ат-исследуемая сыворотка в разведении 1:100; Аг – лептоспирозные антигены 6 серогрупп.
3. МФА - для выявления лептоспир в крови, моче, паренхиматозных органах, в тканях абортированного плода, в воде и почве .
Биопрепараты
Для специфической профилактики:
1. Депонированная поливалентная вакцина ВГНКИ против лептоспироза с/х животных (в т.ч. лошадей) из штаммов Pomona, Tarassovi, Icterohemorragiaе, Canicola, Grippotyphosa, Hebdomadis. Иммунитет после вакцинации наступает через 14-20 суток и длится у молодняка до 6 месяцев, у взрослых животных – до 1 года. Также имеется вакцина против лептоспироза лошадей концентрированная, изготовитель ООО"Ветбиохим", Россия. Иногда вакцины могут вызвать побочные реакции у животных: повышение температуры, отёк, болезненность в месте введения.
2. Для собак – инактивированные вакцины типа «Nobivaс», Биокан, «Vanguard 5/L», «Eurican» которые защищают животных от серовариантов L. icterohaemorrhagiae и L. сanicola. Особенно интересны с точки зрения профилактики лептоспироза собак такие вакцины, как «Duramune Max» (США). В связи с изменением эпизоотологической ситуации фракция лептоспир в этой вакцине была расширена: к прежним сероварам: Leptospira icterohaemorrhagiae и Leptospira canicola добавлены новые серовары: Leptospira grippotyphosa и Leptospira pomona.
Для специфической терапии: иммунная сыворотка против лептоспироза с/х и промысловых животных (из крови волов-продуцентов). Иммунитет сохраняется в течение 10-14 суток.
Прививка для собак против лептоспироза не является обязательной, но она одна из самых важных. Вакцинацию собак от этого заболевания делают внутримышечно через иглу, диаметром не менее 1,0 мм. Прививку для собак не делают беременным животным в первую неделю после родов, а также в течение 7 дней после дегельминтизации и 14 дней после обработки хлор-фосфорсодержащими препаратами, этих животных вакцинируют по истечении указанных сроков. Прививки для собак против лептоспироза делают животным, начиная с 1 месяца.
КАМПИЛОБАКТЕРИОЗ
1. Генитальный кампилобактериоз (энзоотический аборт). Болезнь поражает репродуктивную систему животных. Часто встречается у К.Р.С. реже у М.Р.С., иногда мелких животных – собак. У самцов кампилобактер длительное время сохраняется в организме и выделяется со спермой. Передаётся половым путём и при искусственном осеменении. Во влагалище у самок быстро размножается, попадает в матку, вызывая вагиниты и эндометриты, гибель эмбрионов в 2-4-недельном возрасте, аборты, бесплодие.
2. Кишечный кампилобактериоз. Болезнь молодняка животных (щенков, котят, телят, ягнят, поросят, жеребят) и людей, проявляется энтеритами. Передается фекально-оральным путём. У людей кампилобактериоз – острая кишечная инфекция, встречается очень часто, связана с потреблением воды и пищи (мяса, молока, птицепродуктов, овощей), обсемененой возбудителем.
Материал для лабораторной диагностики: при абортах - абортированный плод (желудок плода, печень, легкое), плодовые оболочки, часть плаценты. При бесплодии К.Р.С. у коров берут влагалищную слизь с помощью специальных приспособлений (полистироловых стерильных пипеток или стерильным марлевым тампоном при помощи инструментов Жабоедова, Павловского). От быков, баранов, кобелей – сперму, препуциальные смывы. Транспортировка смывов – в транспортных средах (тиогликолатном бульоне, среде Cary-Blair, щелочной пептонной воде). При подозрении на кишечный кампилобактериоз – фекалии, ректальные мазки.
КЛАССИФИКАЦИЯ ВОЗБУДИТЕЛЯ.
Возбудители генитального кампилобактериоза –
8 видов рода Campylobacter, в т.ч:
Вид Campylobacter fetus подвид venerealis,
Вид Campylobacter fetus подвид fetus.
Возбудители кишечного кампилобактериоза
Вид Са mpylobacter jejuni
Вид Са mpylobacter coli (коли-вибрион)
очень редко - Campylobacter fetus
Методы диагностики
I . Бактериологический метод
Морфология. Кампилобактеры имеют форму вибрионов или спирилл. Это Грам«-», полиморфные, тонкие, извитые микроорганизмы (спирально изогнутые палочки), имеют 1-2 крупных завитка, «~~»; «S» . Активно ПОДВИЖНЫЕ «+». СПОРЫ «-». КАПСУЛЫ «-». В мазке располагаются одиночно, беспорядочно или короткими цепочками: «крылья летящей чайки». Для ускоренной ориентировочной диагностики тонкий, фиксированный над пламенем мазок из пат. материала окрашивают водным раствором основного фуксина(1:5) 10-20с. Большая часть находящейся в мазке сопутствующей микрофлоры прокраситься за такой короткий срок не успевает, в отличие от кампилобактера.
Культивирование. Микроаэрофилы. Любят 10% концентрацию СО2. На простых питательных средах не растут. Используют ПЖА на печеночной и сердечной воде, эритрит-агар с 5% гемолизированной крови барана, специальные фирменные среды с селективными добавками типа «Campylobac Аgar Skirrow (среда Скирроу)». Посев обильный, уколом.
На ПЖА рост кампилобактеров проявляется в виде серо-голубоватого диска или кольца на 0,1-0,4 см ниже поверхности среды. Со временем диск поднимается вверх, образуя на поверхности пленку. Сама среда остается прозрачной. На плотных специальных средах мелкие - (1мм) округлые, прозрачные, бесцветные влажные колонии.
Чистую культуру получить очень трудно. Для ограничения роста посторонней микрофлоры применяют специальные методики:
1. Используют элективные среды различных фирм с селективными добавками-ингибиторами (рифампицин, фузидин и др.), сафранино-железо-новобиомициновую среду СЖН). Если культура кампилобактера чистая – СЖН розового цвета, если нет - желтого.
2. Используют способность кампилобактеров проходить через мембранные фильтры с диаметром пор 0,5-0,6 мкм. Стерильные мембранные фильтры помещают на поверхность плотной питательной среды и наносят на них несколько капель 10%-й суспензии исследуемого материала. Через 30 мин фильтры убирают, чашки инкубируют.
3. «Метод пастеровских пипеток»: стерильной пастеровской пипеткой набирают в капилляр ПЖА и немного смешанной культуры. Нижнюю часть пипетки запаивают. Инкубируют. Через 3-4 суток кампилобактеры растут в пипетке под поверхностью среды в виде кольца. Затем полученную ЧК, берут другой пипеткой и пересевают на МППА.
4. Метод Шаталова. В пробирку помещают стеклянную трубку и заливают ПЖА. В трубку вносят смешанную культуру кампилобактеров. Вследствие подвижности кампилобактеры проникают из трубки в среду и растут в ПЖА в виде кольца, остальные микробы останутся в трубке.
Биопроба
Выделенной ЧК заражают морских свинок, хомячков, кроликов (у беременных самок – аборт).Для освежения, выделенной ЧК заражают куриные эмбрионы, после чего кампилобактер восстанавливает свои свойства.
II . Серологический метод:
1. Серологическая идентификация культур – в пластинчатой, а затем в пробирочной РА со стандартными моноспецифическими сыворотками.
2. Для обнаружения кампилобактеров в патматериале и культуре – МФА
3. Для обследования коров - РАВС (РА с влагалищной слизью). Влагалищную слизь берут тампоном и помещают в пробирку с формалинизированным 3% раствором NaCl. Тампон отжимают, а жидкость центрифугируют. С полученным экстрактом ставят РА (в слизи ищут Ат), используя биофабричные антигены-диагностикумы. (у овец так же ставят реакцию с сывороткой крови).
4. У людей при кишечной форме кампилобактериоза применяют РСК, РДСК.
БИОПРЕПАРАТЫ
Диагностические сыворотки и антигены.
Для профилактики:
1.Эмульсининактивированная вакцина против кампилобактериоза К.Р.С. и овец.
2.Ассоциированные вакцины против кампилобактериоза, лептоспироза и сальмонеллёза.
Задания для самостоятельной работы
1. Изучить морфологию возбудителей по атласу и зарисовать в практикуме.
2. Используя атлас изучить характер роста возбудителей на питательных средах.
Контрольные вопросы
1.Какие поражения вызывают возбудители лептоспироза и кампилобактериоза?
2. Расскажите, какой патматериал направляют в лабораторию для исследования.
3. Опишите морфологию возбудителей.
4. Опишите характер роста возбудителей на питательных средах.
Занятие № 13. МОРФОЛОГИЯ И КЛАССИФИКАЦИЯ МИКРОСКОПИЧЕСКИХ ГРИБОВ
Дата: 2019-07-30, просмотров: 376.
