1. На лабораторно-практических занятиях по микробиологии следует находиться в белом халате с длинными рукавами и головном уборе (колпачок или косынка). Халат должен быть застёгнут на все пуговицы, волосы убирают под колпачок. Спецодежду надо хранить в специальном полиэтиленовом пакете, отдельно от других предметов (продуктов). Для практической работы с микробными культурами желательно иметь латексные перчатки.

2. При проведении лабораторно-практических занятий в учебной группе студентов назначается дежурный, который помогает преподавателю контролировать соблюдение правил техники безопасности, а также следит за порядком и чистотой на рабочих местах.

3. Следует пользоваться только своим рабочим местом и закреплённым за ним оборудованием.

4. Нельзя раскладывать посторонние вещи на лабораторных рабочих столах. Сумки, пакеты следует оставлять в специально выделенном месте.

5. Запрещается вносить в помещение лаборатории, раскладывать на столах и употреблять пищевые продукты, напитки, жевательную резинку; курить.

6. Приступать к практической работе следует только с разрешения ведущего преподавателя или врача-бактериолога кафедры.

7. Перед началом практической работы необходимо проверить исправность газового и электрического оборудования, наличие и целостность инструментов, лабораторной посуды, микроскопов. Обо всех обнаруженных недостатках надо немедленно сообщить преподавателю или лаборантам.

8. Микроскопы при необходимости переносят, поддерживая их снизу.

9. При выполнении лабораторно-практических работ необходимо строго соблюдать общепринятые в бактериологической практике правила и приёмы работы с микробными культурами. К исследуемым материалам и микробным культурам следует относиться как к патогенным.

10. Во время работы с культурами микроорганизмов не допускаются излишние разговоры, ненужные переходы, резкие движения.

11. Нельзя зажигать газовую горелку от горелки, приподнимать и переносить зажжённые горелки, гасить пламя спиртовки, задувая его (на спиртовку следует осторожно надеть колпачок).

12. Использованные пастеровские пипетки, предметные стёкла помещают в дезинфицирующий раствор.

13. Во время работы нельзя держать открытыми пробирки и чашки Петри с микробными культурами, дотрагиваться до питательной среды в чашках, класть на стол горизонтально пробирки и инструменты. Пробирки и инструменты ставят в штативы или специальные стаканчики (бактериологические петли - петлёй вверх).

14. О повреждении стеклянной посуды, случайном разбрызгивании, разливании исследуемого материала и бактериальных культур необходимо немедленно сообщить преподавателю. Стол, одежду, обувь и другие предметы, загрязнённые исследуемым материалом, подвергают дезинфекции.

15. После завершения лабораторно-практической работы рабочее место надо привести в порядок, микробные культуры, посевы и мазки сдать преподавателю или дежурному, руки вымыть с мылом и при необходимости дезинфицировать, затем снять халат.

Занятие № 1.
БАКТЕРИИ - ВОЗБУДИТЕЛИ ГНОЙНО-СЕПТИЧЕСКИХ

ПРОЦЕССОВ

Цель занятия:

1. Ознакомить студентов с методами исследования патматериала на наличие синегнойной палочки, протея.

2. Изучить морфологию возбудителей.

3. Изучить характер роста бактерий на питательных средах.

Материалы и оборудование : Набор готовых красок во флаконах в штативе, йодированный спирт, раствор Люголя, дистиллированная вода, предметные стекла, фильтровальная бумага, бактериологические петли, пинцеты, пробирки с микробными культурами в штативе. Микроскопы. Пробирки и чашки Петри с характерным ростом возбудителя на питательных средах.

СИНЕГНОЙНАЯ ПАЛОЧКА

Широко распространена в природе. Очень устойчива к дезинфектантам и антибиотикам. Поражает макроорганизм при снижении иммунитета. Вызывает септическую болезнь норок – псевдомоноз. Осложняет течение ожоговой болезни, онкологич. процессов, заживление ран у животных и людей. Вызывает отиты, экземы, маститы, эндометриты, пневмонии, сепсис. Может быть причиной пищевых токсикоинфекций. Возбудитель одной из наиболее опасных госпитальных инфекций.

Материал для лабораторной диагностики : гной и экссудат из очагов поражения, моча, сперма, молоко, паренхиматозные органы, трубчатая кость, трупы мелких животных и т.д.

КЛАССИФИКАЦИЯ

сем. Pseudomonadaceae, род Pseudomonas,

· вид Pseudomonas aeruginоsa

         Методы диагностики

Бактериологический метод

Морфология : Мелкая полиморфная, Гр «–» - палочка, располагается одиночно, или беспорядочно, СПОРЫ «–», КАПСУЛА «–», ПОДВИЖНОСТЬ «+».

Культивирование.Аэроб. Растёт при температуре от 20 до 44^оС на простых питательных средах. Очень неприхотлива, растёт даже при пересеве на физиологический раствор.

           Культуральные свойства. При росте выделяет водорастворимые пигменты: сине-зелёный - пиоцианин; флуоресцирующий желтый - пиовердин; красный - пиорубин; чёрно-коричневый - пиомеланин. Выделяет запах жасмина или земляничного мыла.

    На МПБ интенсивное помутнение, постепенное окрашивание среды в зеленоватый цвет. На дне слизистый осадок, при встряхивании он поднимается в виде косички. На поверхности может быть пленка.

    На МПА средние и крупные, серые, плоские колонии с матовой поверхностью, неровными краями. Колонии и среда прокрашиваются в зелёный цвет, иногда с радужным отблеском.

Биохимические свойства. Синегнойная палочка обладает оксидазной активностью. Имеет протеолитическую активность (вызывает порчу пищевых продуктов). Выделяет аммиак. Н₂S и индол не образует. МПЖ – разжижает воронкой. Молоко – свертывает и пептонизирует. На кровяном агаре часто гемолиз. Сахаролитическая активность слабая – окисляет  глюкозу, а большинство других сахаров не изменяет, поэтому относится к группе так называемых  «неферментирующих» микробов.

ДИФФЕРЕНЦИРУЮЩИЕ ТЕСТЫ

· рост при 44^оС и отсутствие роста при 4^оС.

· тест с хлороформом (в МПБ хлороформ растворяет пиоцианин и опускается на дно в виде голубой жидкости);

· положительный тест на окисление глюкозы в аэробных условиях и отрицательный - на ферментацию глюкозы в анаэробных условиях  (О/Ф тест).

Биопроба : заражение белых мышей (п/к, в дозе 0,2 мл) смывом с МПА – гибель.

II . Серологический метод:

РА на стекле с поли- и моновалентными сыворотками и живой культурой.

БИОПРЕПАРАТЫ: Псевдомонозная формолвакцина для норок; Диагностические сыворотки. Псевдомонозный лечебный бактериофаг, пиобактериофаг.

ПРОТЕЙ

Широко распространён в природе. Типичный гнилостный микроорганизм. Вызывает гниение органических веществ, порчу пищевых продуктов. При ослаблении защитных сил макроорганизма может вызывать гнойно-септические процессы (у новорожденных, недоношенных, у старых животных, при онкологических процессах). Выделяется при циститах, пиелонефритах, эндометритах, энтероколитах, при запущенных раневых процессах (гниение ран). При употреблении в пищу несвежих, испорченных пищевых продуктов может быть причиной токсикоинфекций. Является санитарно-показательным микроорганизмом – индикатором гнилостного загрязнения воды, почвы.

Материал для лабораторной диагностики: раневой экссудат, моча, истечения из влагалища, фекалии, содержимое кишечника, паренхиматозные органы, аборт. плод. Пищевые продукты – при исследовании на свежесть. Корма. Смывы с поверхностей.

КЛАССИФИКАЦИЯ: сем. Enterobacteriaceae, род. Proteus, виды:

· Proteus vulgaris (протей обыкновенный)

· Proteus mirabilis (протей удивительный)

· Proteus mixofaciens

             Методы диагностики