М. tuberculosis (человеческий тип) (палочка Коха)
M. b ovis (бычий тип),
M. a vium (птичий тип).
и другие.
Методы диагностики
I. Бактериологический метод
Метод окраски мазка: по Цилю-Нильсону, по Граму, МФ по Бойю. Морфология: Прямые или слегка изогнутые палочки 1,5 до 4мкм. Грам «+», СПОРЫ «-», КАПСУЛЫ «-», ПОДВИЖНОСТЬ «-» ; кислото-спирто-щелочеустойчивые, в мазках часто располагаются скоплениями.
При окраске по Цилю-Нильсону - красные палочки на синем фоне.
Культивирование. Патматериал измельчают и обрабатывают химическим способом – 6-10%-м раствором серной кислоты, отмывают физ.раствором, затем делают мазки и посевы на питательные среды (метод Гона, метод Аликаевой и т.д.). Для жидкого материала используют метод флотации с NaОН и ксилолом.
Для выделения из патматериала используют специальные элективные яично-картофельно-глицериновые плотные среды: Петраньяни, Гельберга, Левенштейна-Йенсена, а также синтетические среды типа «ФИНН-1». Для пересева и сохранения культуры применяют Мясо-пептонный глицериновый бульон (МПГБ), глицериновый картофель.
Микобактерии - строгие аэробы; Первые признаки роста возбудителя птичьего типа появляются на средах через 15-25 дней, человеческого типа – через 25-35 дней, бычьего типа – через 40-70 дней.
При культивировании приходится дифференцировать патогенные и непатогенные микобактерии. Имеется группа быстрорастущих непатогенных микобактерий (рост за 24-72 часа). Имеется группа непатогенных микобактерий, образующих на свету различные пигменты, и др.
Культуральные свойства : На жидких питательных средах - рыхлая, матовая, морщинистая пленка. На плотных питательных средах колонии R-формы: сухие, шероховатые, цвета слоновой кости или сплошной сухой налёт. У Mycobacterium avium – колонии гладкие, слизистые, светло-жёлтого цвета.
Метод Прайса: Было установлено, что возбудитель может размножаться и образовывать микроколонии на стекле. Для этого пат.материал наносят на узкие длинные стерильные предметные стекла, обрабатывают H2SO4 и погружают мазки в жидкую кровяную среду. После инкубирования при 37оС на 1-е, 15-е и 30-е сутки мазки вынимают из пробирки, высушивают, фиксируют, окрашивают по Цилю-Нильсену, микроскопируют.
Выявляют микроколонии, в которых бактерии расположены в виде «жгутов» или «кос». Это явление получило название «корд-фактор», его образуют только патогенные микобактерии.
 |  | ||||
 | |||||
Биохимические свойства определяют только при углублённом изучении свойств микобактерий. Учитывают такие показатели, как рост на среде с салицилатом натрия, устойчивость к 5 %-ному NaCl, пикриновой кислоте, сахаролитическая активность, а также синтез уреазы, редукция нитратов, синтез каталазы и др.
Биопроба. Определение вирулентности культуры проводят параллельно для морских свинок, кроликов и птиц. Лабораторных животных используют и для идентификации видов возбудителей туберкулёза.
Таблица №5
| Возбудитель | Морские свинки | Кролики | Птицы |
| M.tuberculosis | Генерализованная форма | Очаговая форма | Непатогенен |
| M.bovis | Генерализованная форма | Генерализованная форма | Непатогенен |
| M.avium | Непатогенен | Сепсис | Генерализованная форма |
II Серологический метод:
Используют реакцию связывания комплемента (РСК); реакцию пассивной или непрямой гемагглютинации (РНГА); реакцию кольцепреципитации; реакцию диффузионной преципитации в геле (РДП).
Аллергическая диагностика. Для изготовления аллергенов-туберкулинов для млекопитающих используют штаммы вида Mycobacterium bovis. Применяют сухой очищенный туберкулин (протеин-пурифитед-дериват-ППД). Это сухой очищенный экстракт из туберкулёзных бактерий бычьего вида. Сухой очищенный туберкулин (ППД) для птиц готовят по той же технологии, из культурального фильтрата микобактерий туберкулеза птичьего вида. Его применяют для диагностики туберкулёза у птиц и свиней. Туберкулин инъецируют КРС, верблюдам, оленям в толщу кожи в области средней трети шеи, свиньям на наружной поверхности основания уха, курам в толщу кожи бородки. Учитывают реакцию через 72 ч. по результатам измерения толщины кожной складки с помощью кутиметра. Положительная реакция проявляется в виде разлитого отека.
Парааллергические реакции на туберкулин – результат сенсибилизации крупного рогатого скота атипичными микобактериями, живущими в торфяной подстилке.
Псевдоаллергические реакции – результат воздействия возбудителей паразитарных болезней и других факторов.
Для дифференциации таких реакций животным одновременно с туберкулинизацией (с другой стороны шеи) внутрикожно вводят «КАМ» - комплексный аллерген на микобактерии. Если на КАМ реакция будет сильнее – это парааллергическая реакция.
Биопрепараты:
При туберкулезе иммунитет нестерильный. Фагоцитоз имеет незавершенный характер, и фагоцитированные микобактерии не погибают.
В 1924 г. французские ученые Кальметт и Герен предложили вакцину против туберкулеза. Этот штамм назван культурой BCG (Bacterium Calmett - Guerin),в русской транскрипции – БЦЖ, им вакцинируют людей. Биопрепараты для специфической профилактики и терапии у животных не разработаны.
ПАРАТУБЕРКУЛЕЗ
- хроническая инфекционная болезнь, характеризующаяся сначала периодическим, затем постоянным расстройством деятельности желудочно-кишечного тракта, истощением и летальным исходом.
Восприимчивые животные. M. paratuberculosis поражает КРС (особенно молодняк), буйволов, верблюдов, овец, коз. Заражение происходит алиментарным путем; возбудитель проникает в ворсинки кишечника, где фагоцитируется (фагоцитоз незавершенный), вызывает деструктивные изменения, приводит к нарушениям функции желез кишечника. Основные факторы вирулентности - эндотоксины.
Патологический материал для лабораторной диагностики: при жизни - фекальные массы, комки слизи, посмертно -пораженные участки слизистой тонкого отдела кишечника, брыжеечные лимфатические узлы.
КЛАССИФИКАЦИЯ ВОЗБУДИТЕЛЯ.
Сем. Mycobacteriaceae Род: Mycobacterium.
· Вид: Myc. p aratuberculosis (палочки Ионе)
Методы диагностики
I. Бактериологический метод
Морфология: Методы окраски: по Цилю-Нильсену (красные на синем фоне) и по Граму. (+). Myc. paratuberculosis – мелкие кислотоспиртощелочеустойчивые палочки длиной 0,5-1,5. Располагются в виде скоплений, кучек, редко поодиночке или по 2-4 клетки. СПОРЫ «-», КАПСУЛЫ «-», ПОДВИЖНОСТЬ «-».
Культуральные свойства.
На простых питательных средах палочка Ионе не растёт! Посев на специальные пит. среды с добавлением особого стимулятора роста - экстракта бактерийной массы микобактерий тимофеевой травы (M y c. phlei). Экстракт добавляют к средам для возбудителя туберкулёза - Петраньяни, Гельберга, Левенштейна-Йенсена, но лучше использовать специальные среды Данкина, Вишневского.
Myc. paratuberculosis - аэроб. Оптимальная температура роста - 38o С; срок культивирования - от 6 недель до 7 месяцев. Поэтому данный микроорганизм культивируют только в специализированных лабораториях.
На плотных питательных средах вначале возникают изолированные серовато-желто-белые маленькие колонии. С течением времени появляется складчатое наложение. На жидких средах Myc. paratuberculosis образует нежную беловато-сероватую пленку, которая через 3-4 мес культивирования увеличивается в объеме и опускается на дно пробирки.
Дифференциация. Для дифференциации Myc. paratuberculosis от других кислотоустойчивых микобактерий патологический материал, после обработки 5 %-м раствором серной кислоты, высевают также на элективные среды для возбудителей туберкулёза без экстракта M y c. phlei и обычные питательные среды (МПА, МПБ). Культуры атипичных сапрофитных быстрорастущих микобактерий вырастают на простых средах в течение первых 3-10 суток. Микобактерии туберкулеза растут на элективных средах, таких, как среда Петраньяни. Микобактерии паратуберкулёза не растут на средах без добавления экстракта палочки тимофеевой травы.
Биопроба
Лабораторные животные невосприимчивы. Биопроба нерезультативна.
II Серологический метод: РСК с ионином или птичьим альттуберкулином.
Аллергический метод
Для постановки аллергической пробы применяют паратуберкулин(ионин) – фильтрат убитой кипячением 2-3-х месячной культуры паратуберкулёзных микобактерий.
Крупный рогатый скот исследуют внутрикожной аллергической пробой (2 раза). Реакцию учитывают через 48 ч с помощью измерения величины кожной складки кутиметром.
Биопрепараты:
для специфической профилактики и терапии: не разработаны.
ПСЕВДОТУБЕРКУЛЕЗ
- болеют до 60 видов млекопитающих (грызуны, пушные звери), 27 видов птиц (куры, индейки, голуби). К.р.с., лошади, собаки, кошки – менее восприимчивы. Переносчиками являются грызуны.
К псевдотуберкулезу относится ряд заболеваний, вызываемых некислотоустойчивыми микроорганизмами, в отличие от типичных туберкулезных палочек Инфекционная болезнь характеризуется цикличным течением и интоксикацией.
При этом заболевании на лимфатических узлах, легких, печени, селезенке отмечают узелковые поражения.
Материал для лабораторной диагностики: трупы грызунов и птиц целиком, лимфатические узлы, измененные участки паренхиматозных органов погибших животных
КЛАССИФИКАЦИЯ ВОЗБУДИТЕЛЯ.
1.Yersinia pseudotuberсulosis
2. Corinebacterium pseudotuberculosis.
Методы диагностики.
I. Бактериологический метод
Микроскопия.
Yersinia – полиморфная палочка из семейства
Дата: 2019-07-30, просмотров: 385.
