Вирус бешенства - РНК-содержащий вирус, относится к семейству Rhabdoviride, роду Lyssavirus, включающему еще 5 других вирусов (Lagos, Mocola, Duvenhage, Kotonkan, Obodhiang), выделенных от различных животных, насекомых в Африке и сходных с вирусом бешенства. Вызывает бешенство (Rhabies, синоним - водобоязнь, гидрофобия), развивающееся после укуса или ослюнения раны инфицированным животным. Поражается центральная нервная система с развитием симптомов возбуждения, параличом дыхательной и глотательной мускулатуры; заканчивается летально.

Различают два вируса бешенства: дикий (уличный) вирус, циркулирующий среди животных, патогенный для человека; фиксированный (virus fixe), полученный Л.Пастером в качестве антирабической вакцины многократным пассированием дикого вируса через мозг кроликов, утративший патогенность для человека, не образующий включений, не выделяющийся со слюной. Оба вируса идентичны по антигенам.

Схема строения вируса бешенства

Вирион имеет форму пули, размером 75-180нм; состоит из сердцевины (рибонуклеопротеина спиральной симметрии и матриксного белка), окруженной липопротеиновой оболочкой.
Липопротеиновая оболочка изнутри выстлана М-белком (англ. matrix), а снаружи от нее отходят шипы гликопротеина G (длина 5-10нм, диаметр 3нм). Гликопротеин G отвечает за адсорбцию и внедрение вируса в клетку, обладает антигеннными (типоспецифический антиген) и иммуногенными свойствами. Антитела к нему нейтрализуют вирус и выявляются в РН. Рибонуклеопротеин состоит из однонитевой линейной минус РНК и белков: N-белок (англ. nucleocapsid), укрывающий как чехол геномную РНК; L- (англ. large) и NS-белок, являющиеся полимеразой вируса. Рибонуклеопротеин является группоспецифическим антигеном; выявляется в РСК, РИФ, РП.

Тельца Бабеша-Негри (цитоплазматические включения)

Вирус культивируют путем внутримозгового заражения лабораторных животных (кроликов, белых мышей, крыс, хомячков, морских свинок, овец и др.) и в культуре клеток: почек хомячка; нейробластомы мыши; фибробластов человека, куриного эмбриона; Vero-клетки почки обезьяны и др. В нейронах головного мозга, зараженных животных образуются цитоплазматические включения, содержащие антигены вируса. Эти включения впервые были описаны В.Бабешом (1892г.) и А.Негри (1903г.) и названы тельцами Бабеша-Негри (эозинофильные включения вируса овальной формы размером 1-15 мкм, состоящие из вирусного рибонуклеопротеина).

Микробиологическая диагностика. Постмортальная диагностика: обнаружение телец Бабеша-Негри в мазках, срезах из гиппокампа, пирамидальных клеток коры большого мозга или клеток Пуркинье мозжечка (окраска по Романовскому-Гимзе, Манну, Туревичу, Муромцеву); выделение вируса из мозга и подчелюстных слюнных желез путем интрацеребрального заражения белых мышей-сосунков. Вирус обнаруживают в ИФА, в реакции нейтрализации вируса антирабическим иммуноглобулином (на мышах).
Прижизненная диагностика: 1) выявление вируса с помощью РИФ в отпечатках роговицы, биоптатах кожи; 2) выделение вируса из слюны, цереброспинальной и слезной жидкости путем интрацеребрального заражения мышей-сосунков. 3) выявление антител в РСК, ИФА, РН, РПГА.
Специфическая профилактика. Вакцинацию проводят концентрированной культуральной антирабической вакциной, инактивированной УФ- или гамма-лучами: 1) условный курс прививок – 2-4 иньекции вакцины (с 10-дневным наблюдением за укусившим животным); 2) безусловный курс, согласно инструкции. Разрабатывается генно-инженерная вакцина, содержащая гликопротеин G вируса.

Вирусология бешенства. Методы лабораторной диагностики. Профилактика. Специфическая вакцинация.

Таксономия: возбудитель бешенства относится к семейству Rhabdoviridae, роду Lyssavirus.

Морфология: вирион имеет форму размером 180 нм. Геном представлен РНК. Состоит из нуклеокапсида, снаружи покрыт оболочкой с шиповидными образованиями. Различают 2 вируса бешенства: дикий вирус, циркулирующий среди животных, патогенный для человека; фиксированный – не патогенный для человека.

Культивирование: вирус культивируют путем внутримозгового заражения лабораторных животных (мышей, крыс) и в культуре кл-к: фибробластов человека, куриного эмбриона. В нейронах головного мозга зараженных животных образуются цитоплазматические включения, содержащие АГ вируса (тельца Бабеша-Негри-эозинофильные включения).

Резистентность: вирус бешенства неустойчив: быстро погибает под действием солнечных и УФ-лучей, а также при нагревании до 60 градусов. Чувствителен к дезинфицирующим веществам, жирорастворителям, щелочам и протеолитическим ферментам.

Эпидемиология: источниками инфекции в природных очагах явл. волки, грызуны. Вирус бешенства накапливается в слюнных железах больного животного и выделяется со слюной. Животное заразно в последние дни инкубационного периода (за 2-10 дней до клинических проявлений болезни). Механизм передачи возбудителя – контактный при укусах. Иногда заболевание развивается при употреблении мяса больных животных или при трансплантации инфицированных тканей. У собаки после инкубационного периода (14 дн.) появляются возбуждение, обильное слюнотечение, рвота. Она грызет место укуса, бросается на людей, животных. Через 1-3 дня наступают паралич и смерть животного.

Патогенез и клиника: вирус, попав со слюной больного животного в поврежденные наружные покровы, реплицируется и персистирует в месте внедрения. Затем возбудитель распространяется по аксонам периферич. нервов, достигает кл-к ГМ и СМ, где размножается. Кл-ки претерпевают дистрофические, воспалительные и дегенеративные изменения. Размножившийся вирус попадает из мозга по центробежным нейронам в различные ткани, в слюнные железы. Инкубационный период у человека при бешенстве – от 10 дней до 3 месяцев. В начале заболевания появляются недомогание, страх, беспокойство, бессонница, затем развиваются рефлекторная возбудимость, спазматические сокращения мышц глотки и гортани.

Иммунитет: человек относительно устойчив к бешенству. Постинфекционный иммунитет не изучен, т.к. больной обычно погибает. Введение людям, укушенным бешеным животным, инактивированной вакцины вызывает выработку АТ, интерферонов и активацию клеточного иммунитета.

Диагностика: обнаружение телец Бабеша-Негри в мазках-отпечатках или срезах из ткани мозга, а также выделение вируса из мозга и подчелюстных слюнных желез. Тельца Бабеша-Негри выявляют методами окраски по Романовскому – Гимзе. Вирусные АГ в кл-х обнаруживают с помощью РИФ. Выделяют вирус из патологического материала путем биопробы на мышцах: заражают интрацеребрально. Идентификацию вирусов проводят с помощью ИФА. Прижизненная диагностика основана на исследовании: отпечатков роговицы, биоптатов кожи с помощью РИФ; выделении вируса из слюны, цереброспинальной и слезной жидкости путем интрацеребрального инфицирования мышей. Возможно определение АТ у больных с помощью РСК, ИФА.

Лечение: симптоматическое, эффективное лечение отсутствует.

Профилактика: 1)антирабическая люминесцирующая сыворотка; 2)антирабический гамма-глобулин, приготовленный из крови лошадей, иммунизированных фиксированным вирусом бешенства; 3)антирабическая инактивированная культуральная вакцина, полученная путем накопления вируса бешенства в первичной культуре кл-к сирийского хомяка или перевиваемых диплоидных кл-к легких человека. 

Билет № 20