Для лабораторной диагностики микоплазменных инфекций используют кулыпуральный, серологический и молекулярно-генетичес кий методы.

При урогенитальных инфекциях исследуют срединную порцию утренней мочи, соскобы со слизистой уретры, сводов влагалища, цервикального ка­нала, материал, полученный при лапароско­пии, амниоцентезе, мазки-отпечатки тканей органов мертворожденных и абортированных плодов. При простатите исследуют секрет простаты, при мужском бесплодии — сперму.

Наиболее оптимальна культуральная (бактериологическая) диагностика с использованием жидких и плотных питательных сред, особенно в сочетании с антибиотикограммой и определением титра микоплазм (уреаплазм) в нативных образцах. Преимущества этого подхода: быстрота (для уреаплазм 1-2 суток, для микоплазм - до 3 суток), простота (цветной пробирочный тест), достоверность (селективность сред, учет биохимизма возбудителей), возможность определения конценрации (титр 10000 цветообразующих единиц - ЦОЭ имеет диагностическое значение) и чувствительности к различным препаратам на основе антибиотикограммы (повышает эффективность лечения), возможность достоверного контроля эффективности лечения (растут только жизнеспособные микоплазмы).

Молекулярно-биологические методы диа­гностики включают гибридизацию на основе ДНК-зондов и ПЦР. Наиболее чувствительна ПЦР - диагностика. Метод позволяет идентифицировать виды микоплазм при нали­чии 10 000-100 000 клеток на пробу. ПЦР поз­воляет выявить единичные клетки микоплазм. Однако: возможны ложно - положительные и ложно - отрицательные результаты, длительность выявления положительных результатов контроля излеченности, невозможность определения титра микоплазм (не разработаны количественные методики ) и чувствительности к препаратам.

Серологические методы многочисленны, однако коммерческие препараты отсутствуют, существуют проблемы в интерпретации результатов. При серодиагностике материалом для иссле­дования служат мазки-отпечатки тканей, со­скобы из уретры, цервикального канала и вла­галища, секрет простаты и сперма, в которых можно обнаружить АГ микоплазм в прямой и непрямой РИФ. Микоплазмы и уреаплазмы окрашиваются в ярко-зеленый цвет и выяв­ляются на поверхности анализируемых клеток в виде зеленых гранул, расположенных груп­пами или по одиночке, окрашенные зеленые гранулы могут располагаться в неклеточном пространстве. Цитоплазма клеток окрашива­ется в красно-бурый цвет. Результат считается положительным, если в препарате обнаружи­вают не менее 10 светящихся зеленых гранул, расположенных на мембране клеток. Люминесцентная диагностика дает неудовлетворительные результаты чаще, чем при выявлении хламидий. Это связано с малыми линейными размерами возбудителей, серологической гетерогенностью и антигенной изменчивостью, возможностью перекрестных реакций между различными видами, наличием диагностических препаратов только для выявления уреаплазм и M.hominis.

АГ микоплазм могут быть обнаружены так­же в сыворотке крови больных. Для этого ис­пользуют реакцию агрегат-гемагглютинации (РАГА) и ИФА. Особенность РАГА заключается в том, что для сенсибилизации эритроцитов используют агрегированные глютаровым альдегидом бел­ки иммунной сыворотки, при этом AT вводят­ся в состав трехмерных белковых комплексов, вследствие чего часть активных центров AT отдаляется от поверхности эритроцита и ста­новится более доступной для детерминант АГ.

Лечение и профилактика

 Лечение должно быть основано на подборе чувствительных антибиотиков (чаще применяют макролиды, тетрациклины - доксициклин) и бактериологическом контроле эффективности лечения. Имеются устойчивые к тетрациклинам, макролидам и другим антибиотикам штаммы (связано с наличием плазмид устойчивости). Направленная этиотропная химиотерапия обычно дает хоро­ший эффект, однако исчезновение клиничес­кой симптоматики часто не означает полную элиминацию возбудителя. У микоплазм имеются специфические вирусы, в т.ч. бактериофаги. В лечебных и диагностических целях они до настоящего времени не используются.

Специфическая профилак­тика отсутствует. Не специфическая профи­лактика направлена на ликвидацию источни­ка инфекции; на разрыв механизма и путей передачи; а также на повышение невоспри­имчивости коллектива к инфекции.

Трихомонады (род Trichomonas)

Таксономия. Возбудитель относится к типу Sarcomastigophora, подтипу Mastigophora, клас­су Zoomastigophoreae, отряду Trichomonadida. Различают также комменсалы — ротовую (Т. tenax) и кишечную (Т. hominis) трихомонады.

Трихомоноз — антропонозная венерическое заболевание (инвазия), вызываемая мочеполовой трихомонадой ( Trichomonas vaginalis); проявляющееся комплексным воспалительным поражением различных участков мочеполовой системы.

Возбудитель — Trichomonas vaginalis, впервые его выделил А. Доннк (1837). Трихомонады выделяют из влагалища и мочеиспускательного канала женщин, мочеиспускательного канала и предстательной железы мужчин (человек — единственный природный хозяин).

В организме человека также обитают трихомонады-комменсалы. В полости рта — T. tenax (T. elongata), выделяемая из зубных камней и кариозных дефектов зубов; в толстом кишечнике — T. hominis, выделяемая при диспептических расстройствах. Трихомоноз распространён повсеместно. До 25% женщин, ведущих активную половую жизнь, инфицированы трихомонадами. Риск заражения коррелирует с частотой половых контактов. Частота трихомоноза у мужчин и женщин одинакова.

Характеристика возбудителя. Trichomonas vaginalis цист не образует. Существует только как трофозоит, размножается делением. Возбудитель имеет грушевидное тело 14–30 мкм длиной, вытянутое ядро, смещённое в передний конец, и вакуолизированную цитоплазму. На переднем конце расположены четыре жгутика и ундулирующая мембрана, доходящая только до середины тела. Сквозь всё тело проходит осевая нить — аксостиль, выступающая на заднем конце в виде шипика. T. vaginalis можно культивировать на питательных средах, на клеточных культурах и куриных эмбрионах. Наиболее пригодная среда для культивирования — печёночная среда с цистеином, пептоном и мальтозой. Трихомонады предпочитают анаэробные условия, рН 5,5–6,0, температуру культивирования 35–37 °С.

Эпидемиология. Заболевание передается по­ловым путем, через родовые пути (младенцу), редко — через предметы личной гигиены.

Резистентность. В окружающей среде быс­тро погибает; на банных губках и мочалках сохраняется 10—15 мин, а в слизи, сперме и моче — 24 ч.

Патогенез и клиника.

Попав на слизистую оболочку мочеполовых путей, T. vaginalis вызывает воспалительную реакцию. Клинически характерны зуд, жжение, дизурические расстройства, боли при половых актах. Выраженность симптомов варьирует в течение недель и месяцев. Примерно в 75% случаев «свежего» трихомоноза наблюдают серозно-гнойные выделения. У женщин T. vaginalis вызывает острый или подострый вагинит. У мужчин обычны поражения мочеиспускательного канала и предстательной железы, иногда эпидидимит. Хронизация процесса почти в 100% случаев приводит к развитию хронического простатита.

Trichomonas vagi­ nalis вызывает вагинит, уретрит, простатит. Воспалительный процесс сопровождается бо­лью, зудом, гнойно-серозными выделениями. Часто болезнь протекает бессимптомно.

Иммунитет. Не изучен.

Микробиологическая диагностика. При микро­скопическом методе выявляют трихомонады в нативных и окрашенных мазках из отделяемого мочеиспускательного канала, секрета предста­тельной железы или осадка мочи, окрашенных метиленовым синим или по Романовскому— Гимзе. При фазово-контрастной микроскопии нативных препаратов наблюдается подвиж­ность трихомонад. Нативный препарат готовят на предметном стекле, смешивая отделяемое с каплей теплого изотонического раствора хло­рида натрия. При приготовлении препарата «висячая капля» наносят каплю исследуемого материала на покровное стекло со смазанными вазелином краями, после чего его переворачи­вают каплей вниз и помещают на предметное стекло с лункой. Препараты исследуют с объ­ективом х40 и окуляром х10. Трихомонады по размеру близки к лейкоцитам и имеют харак­терные толчкообразные движения ундулирующей мембраны и жгутиков.

При хронических формах трихомонады вы­ращивают на питательных средах, например СКДС (солевой раствор с гидролизатами ка­зеина, дрожжей и с мальтозой).

 Лечение. Препарат выбора — метронидазол (флагил, трихопол). Препарат назначают внутрь, внутривенно или внутривагинально. Эффективность химиотерапии достигает 95%. Основное условие эффективного лечения — одновременное лечение обоих партнёров.

Профилактика. Аналогична проводимой при венерических заболеваниях.

Ы Рисунок 37–03

I План самостоятельной работы:

1. Микроскопировать с масляной иммерсией демонстрационные микропрепараты, приготовленные из уретры, окрашенные метиленовой синью, зарисовать, дать заключение.

2. Микроскопировать с масляной иммерсией демонстрационные микропрепараты, приготовленные из отделяемого влагалища, окрашенные метиленовой синью, зарисовать, дать заключение.

3. Разобрать схему постановки и учесть РСК в серодиагностике хронической гонореи.

4. Разобрать схему постановки и учесть реакцию Вассермана (РСК) в серодиагностике сифилиса.

5. Изучить постановку и учет ИФА в с целью диагностики урогенитального хламидиоза и микоплазмоза

6. Решение ситуационных задач.