Поможем в ✍️ написании учебной работы

Имя

Поможем с курсовой, контрольной, дипломной, рефератом, отчетом по практике, научно-исследовательской и любой другой работой

Выберите тип работыЧасть дипломаДипломная работаКурсовая работаКонтрольная работаРешение задачРефератНаучно - исследовательская работаОтчет по практикеОтветы на билетыТест/экзамен onlineМонографияЭссеДокладКомпьютерный набор текстаКомпьютерный чертежРецензияПереводРепетиторБизнес-планКонспектыПроверка качестваЭкзамен на сайтеАспирантский рефератМагистерская работаНаучная статьяНаучный трудТехническая редакция текстаЧертеж от рукиДиаграммы, таблицыПрезентация к защитеТезисный планРечь к дипломуДоработка заказа клиентаОтзыв на дипломПубликация статьи в ВАКПубликация статьи в ScopusДипломная работа MBAПовышение оригинальностиКопирайтингДругое

Нажимая кнопку "Продолжить", я принимаю политику конфиденциальности

Тема 3: Микробиологическая диагностика полиовирусной инфекции, Коксаки инфеции, бешенства, везикулярного стоматита.

Цель занятия: знать основные биологические свойства возбудителей; патогенез заболеваний; иммунитет; экологию и распространение вирусов; вирусологическую диагностику, методы индикации и идентификации вирусов; биопрепараты для специфической профилактики и терапии.

уметь: проводить индикацию - определять цитопатическое действие (ЦПД) в культуре тканей; обнаруживать вирусные включения; проводить идентификацию - учитывать и интерпретировать РСК в диагностике Коксаки-инфекции, РН в диагностике полиомиелита

Задание на дом:

I. Вопросы для самоподготовки:

Характеристика вирусов семейства Picornaviridae – энтеровирусов, вирусов полиомиелита, Коксаки-вирусов и семейства рабдовирусов - вируса бешенства, вируса везикулярного стоматита:

1. таксономия, классификация;

2. морфология, размеры, особенности генома;

3. этапы репродукции;

4. эпидемиология;

5. клинические проявления;

6. лабораторная диагностика, характер исследуемого материала;

7. особенности вирусологического метода диагностики (культивирование, индикация, идентификация вируса);

8. противовирусный иммунитет;

9. специфическая профилактика;

10. этиотропное лечение.

II. Базовый текст

ЭНТЕРОВИРУСНЫЕ ИНФЕКЦИИ

Энтеровирусные инфекции, в том числе полиомиелит, вирусные гастроэнтериты и вирусные гепатиты вызываются вирусами, имею­щими разное таксономическое положение, отличаются по патогенезу и клиническим проявлениям. Объединяет возбудителей этих инфек­ций, за исключением некоторых вирусных гепатитов, их способность размножаться в клетках кишечника, выделяться с фекалиями и пере­даваться преимущественно фекально-оральным путем, как бактери­альные ОКИ.

Эти инфекции, кроме большинства гепатитов, принято считать кишечными вирусными инфекциями, хотя зачастую кишечный синд­ром не выражен и характер поражений многообразен. В качестве при­меров таких инфекций в пособии более подробно разбираются полиомиелит, энтеровирусные инфекции, вызванные вирусами Коксаки и ECHO, ротавирусная инфекции, вирусные гепатиты А, В и С, имеющие важное значение в инфекционной патологии человека.

Таксономия, классификация

Энтеровирусные инфекции - большая группа инфекцион­ных заболеваний, вызываемых различными сероварами энтеровирусов, характеризующаяся полиморфизмом клинических проявлений в виде лихорадок, поражений слизистых (ОРВИ, герпангины, конъюнктивыты), различных отделов ЦНС (полиемиелитоподобные, менингеальные, энцефалитические формы), миокардита и других форм заболеваний.

Возбудители энтеровирусных инфекций входят в семейство Picornaviridae .

Пикорнавирусы - это РНК-геномные, мелкие, наиболее просто организованные вирусы, поражающие человека и животных. Они от­личаются по антигенным свойствам, по резистентности к различным значениям рН, по патогенности для человека и животных, по поража­емым ими органам и тканям (тропизму), патогенезу и клиническим проявлениям вызываемых ими заболеваний и некоторым другим свойствам. На основании этих отличий семейство Picornaviridae подразде­лено на 8 родов. Из них 5 родов - Rhinovirus , Cardiovirus , Aphthovirus , Hepatovirus , Enterovirus - содержат вирусы, патогенные для челове­ка и животных, а именно:

- Род Rhinovirus - включает более 100 серотипов. Вирусы характеризуются своим тропизмом к клеткам носоглотки человека и яв­ляются наиболее частыми возбудителями ОРВИ как у детей, так и у взрослых, протекающих, как правило, легко.

- Род Cardiovirus - вирусы поражают преимущественно грызунов, чаще всего мышей, заболевания относятся к природно-очаговым, у человека встречаются редко в виде миокардитов и других кли­нических появлений..

- Род. Aphthovirus - вирусы вызывают ящур у парнокопытных - опасное заболевание, часто принимающее массовый характер. В оча­ге эпизоотии человек может заразиться ящуром при контакте с больными животными, через сырое молоко и т.п.

- Род Hepatovirus - содержит возбудителя гепатита А (болезнь Боткина).

- Род Enterovirus - вирусы заселяют пищеварительный тракт человека, они обладают полиорганотропностью, способны поражать ЦНС, ЖКТ, кожу и слизистые оболочки, скелетные мышцы и миокард.

2.Морфология, размеры, особенности генома

Строение вириона. Вирион энтеровирусов (рис. 16), как и всех пикорнавирусов, имеет форму многогранника с диаметром 22-30 нм. Это про­стой вирус, не имеющей внешней оболочки (суперкапсида).

         Рис. 16 Схема энтеровируса

Капсид вириона, икосаэдрического типа симметрии, состоит из 60 протомеров (капсомеров), сгруппированных в 12 пентамеров. Каж­дый протомер образован 4 вирусными полипептидами: VP1, VP2, VP3, VP4. Белок VP1 и частично белкиVP2 и VP3 формируют наружную поверхность капсида, а самый маленький белок VP4 занимает внут­реннее положение. Он контактирует с остальными белками и тесно связан с находящейся внутри капсида геномной РНК.

Геном энтеровирусов представлен линейной, несегментированной, однонитевой плюс-РНК, которая функционирует в зараженной клетке также в качестве информационной РНК. На 5' конце геномной РНК находится ковалентно с ней связанный внутренний белок VPg, повидимому, выполняющий регуляторную функцию, а на 3'-конце -полиадениловый участок. У и-РНК, поступившей на рибосомы клет­ки, белок VPg отсутствует.

Изолированная геномная РНК, свободная от белков, обладает инфекционностью.

Антигены. Антигенность энтеровирусов связана с белками капсида и, прежде всего, с белком VP1. Вирусы содержат комплементсвязывающий (группоспецифический) антиген, общий для рода и типоспецифические (индивидуальные) для каждого серотипа (серовара) антигены. Определение серотипа у выделенного вируса проводится в РН, а у серотипа с гемагглютинирующими свойствами - в РТГА.

Всего, вместе с энтеровирусами, патогенными только для живот­ных, выявлено 113 серотипов. К патогенным для человека энтеровирусам относятся вирусы полиомиелита (3 серотипа), вирусы Коксаки А (24 серотипа), Коксаки В (6 серотипов), вирусы ECHO (34 сероти­па), а также энтеровирусы серотипов 68-71.

Этапы репродукции

Вирус взаимодействует с рецепторами на поверхности клетки. Геном вируса может поступить в клетку путем эндоцитоза (1') с последующим выходом нуклеиновой кислоты (2) из вакуоли или путем инъекции РНК через цитоплазматическую мембрану (1) клетки. На конце РНК имеется вирусный протеин (3) - VPg. Геном используется как иРНК для синтеза белка (4,5). Один большой полипротеин (4) транслируется с вирусного генома. Затем полипротеин расщепляется на индивидуальные вирусные протеины, включая РНК-зависимую полимеразу. Полимераза синтезирует минус нить-матрицу с поверхности плюс-нити и реплицирует геном. VPg ковалентно присоединяется к (5') концу вирусного генома. Структурные белки собираются в капсид (6), в него включается геном, образуя вирион. Вирионы освобождаются из клетки посредством ее лизиса. Репродукция происходит в цитоплазме клеток и сопровождается цитопатическим действием. В культурах клеток под агаровым покрытием вирусы образуют бляшки.

Рис. 17 Этапы репродукции энтеровируса

Цикл репродукции энтеровирусов длится 5-10 часов. Из одной клетки освобождается 25-100 тысяч вирионов, из них инфекционностью обладает, в среднем, 1%. Выход вирусов из клетки сопровождает­ся ее лизисом.

Резистентность. Энтеровирусы обладают значительной устой­чивостью ко многим факторам внешней среды. Они выживают при значениях рН в пределах 2,5-11,0. Устойчивость в кислой среде отли­чает их от большинства других пикорнавирусов (что позволяет им выживать в ЖКТ). Энтеровирусы длительно сохраняются в воде, поч­ве, фекалиях. Они устойчивы к действию многих дезинфектантов, жирорастворителей и поверхностно-активных веществ. Несколько лет сохраняются в замороженном состоянии.

В то же время, энтеровирусы инактивируются УФ-лучами, при нагревании до 50°С гибнут за 30 минут, а при кипячении почти мгно­венно. Губительное действие на вирусы оказывают формалин, хлорсодержащие дезинфектанты, окислители, а также высушивание.

Эпидемиология

Энтеровирусные инфекции имеют повсеместное, широкое рас­пространение (кроме полиомиелита), часто встречается вирусоносительство у практически здоровых людей. Энтеровирусы преимущественно поражают детей младшего возраста, у которых от­сутствует иммунитет. Но болеют также и более старшие дети и взрос­лые. Инфекции часто протекают бессимптомно, при этом вирусы выделяются с фекалиями. Клинически выраженные, манифестные формы инфекции могут быть спорадическими или давать эпидемиче­ские вспышки. На начальных этапах инфекции (1-2 недели от момен­та инфицирования) вирусы выделяются во внешнюю среду с носоглоточной слизью, далее с фекалиями. Вспышки энтеровирусных инфекций чаще всего отмечаются летом, что связано с употреблением некипяченой воды, купанием в открытых водоемах, употреблением в пищу немытых фруктов и овощей, а также не прошедших техничес­кую обработку молочных продуктов.

Таким образом, источником инфекции является больной человек или бессимптомный вирусоноситель. Основной механизм инфициро­вания - фекально-оральный. Пути заражения — контактно-бытовой, водный, алиментарный, возможно, и через мух.

Клинические проявления

Инкубационный период, продолжительностью 2-7 дней, перехо­дит в острое начало болезни с резким повышением температуры до 38-40°С, головной болью, головокружением, общей слабостью гипе­ремией лица, тошнотой, иногда рвотой.

Входными воротами инфекции являются слизистые оболочки носоглотки и пищеварительного тракта. Вирусы репродуцируются в эпителиальных клетках, клетках лимфоидной ткани глоточного коль­ца и, главным образом, в лимфоидных структурах тонкого кишечника. При достаточной сопротивляемости организма, репродукция вирусов происходит ограниченно, в месте входных ворот, и протекает бессимп­томно или с поражением только слизистых оболочек.

Низкая сопротивляемость организма, большая инфицирующая доза вируса или его высокая вирулентность способствуют генерализа­ции инфекции. Вирусы проникают в кровяное русло, что приводит к первичной вирусемии. С кровью они заносятся в различные органы, вызывая их поражения в зависимости от тканевого тропизма возбуди­теля. Этим объясняется многообразие клинических проявлений энтеровирусных инфекций (таблица2)

Энтеровирусные инфекции могут протекать в виде изолирован­ных форм с поражением одного органа, например, ЦНС или комбини­рованных форм с вовлечением в инфекционный процесс разных органов и систем.

Вирусы, размножающиеся в отдельных органах, вновь могут по­ступать кровь, вызывая повторную вирусемию, поэтому течение энтеровирусных инфекций часто имеет волнообразный характер. Вирусемия прекращается после появления специфических антител.

Таблица 2

 Органы-мишени для энтеровирусов и вызываемые ими заболевания

Органы мишени	Заболевания	Коксаки А	Коксаки В	ECHO	68-71 серотипы
ЦНС	Серозный менингит, энцефалит, полиемиелитоподобное заболевание	+ + +	+ + +	+ + +	+ + +
Кожа, слизистые оболочки	Энтеровирусная экзантема, HFMD (Hand-fool-mouth disease) форма экзантемы,  герпангина, острый геморрагический конъюнктивит	+ + + +	- - + -	+ - + -	- + - +
Сердце	Миокардит, перикардит	+	+	+	+
Мышцы	Эпидемическая миалгия (плевродиния), миозит	+	+	+	-
Дыхательная  система	Катаральная       форма (ОРВИ) Пневмонии новорожденных	+ +	+ +	+ +	+ +
Пищеварительный тракт	Гастроэнтерит, диарея	-	+	+	+
Разные органы	Панкреатит, диабет, нефрит, орхит, увеит и др.	+	+	-	-
Лимфатическая система	Лимфаденопатия, мезаденит	-	+	+	+
Генерализованное поражение	Энтеровирусная             I лихорадка	-	+	+	-
Неонатальная патология	Различные клинические проявления	-	+	+	-

 

Вирусы Коксаки являются наиболее кардиотропными из всех энтеровирусов, поэтому они очень часто вызывают поражения серд­ца в виде миокардитов. Они также поражают различные паренхима­тозные органы, в первую очередь поджелудочную железу, вызывая панкреатит с последующим развитием диабета. У новорожденных вирусы Коксаки вызывают тяжелую форму пневмонии с большим процентом летальных исходов.

Одним из характерных свойств вирусов ECHO является их высо­кий тропизм к лимфоидной ткани.

Вирусы Коксаки А, В и вирусы ECHO, в отличие от полиовирусов, чаще поражают мозговые оболочки, в ряде случаев и мозг, и лишь изредка затрагивают клетки передних рогов спинного мозга, поэтому чаще наблюдаются асептические менингиты и энцефали­ты и значительно реже спинальная (полиомиелитоподобная) фор­ма заболевания.

Среди других энтеровирусов наиболее вирулентным является серотип 71, который вызывает ОРЗ, может поражать ЦНС в виде асеп­тического менингита, энцефалита, вызывать заболевание, подобное полиемиелиту, а также ящуроподобное заболевание с поражением сли­зистой ротовой полости, кожи рук и ног. Серовариант 70 вызывает ге­моррагический конъюнктивит, а сероварианты 68 и 69 поражают слизистые оболочки верхних дыхательных путей или ЖКТ.

Клинические формы энтеровирусных инфекции. Энтеровирусные инфекции могут протекать абортивно, в острой форме, иногда они приобретают затяжное или хроническое течение, что объясняется персистенцией вируса в организме.

По частоте клинических проявлений они подразделяются на ти­пичные и более редкие, или атипичные. К типичным относятся гер­пангина, серозный менингит, эпидемическая миалгия и инфекционная экзантема.

Редко встречаются катаральная форма (ОРЗ), гастроэнтерит, эпи­демический геморрагический конъюнктивит, поражения ЦНС в виде энцефалитической или спинальной форм (полиомиелитоподобная форма), поражения отдельных органов (миокардит, панкреатит, неф­рит, гепатит, орхит, увеит и др.), энтеровирусная лихорадка.

Герпетическая ангина (герпангина). Па фоне характерных симп­томов энтеровирусной инфекции у больного отмечается гиперемия задней стенки глотки, небных дужек, мягкого неба, язычка, миндалин. На гиперемированной слизистой появляются красные папулы диамет­ром 1-4 мм, вскоре превращающиеся в везикулы, а затем в язвочки, которые быстро и без следа заживают. Заболевание при отсутствии генерализации инфекции протекает легко и продолжается 3-6 дней.

Серозный менингит. На 1-3 день заболевания на фоне сильной лихорадки появляются клинические симптомы менингита - резкая головная боль, повторная рвота, нарушение сознания, возможны судо­роги, менингеальные симптомы (ригидность затылочных мышц, по­ложительные симптомы Кернига и Брудзинского). Спинномозговая жидкость вытекает под давлением, содержит 100-300 кл/мл (нейтрофилы, лимфоциты). Менингеальные симптомы могут держаться 3-5 дней. Часто серозный менингит возникает на фоне других клиничес­ких проявлений энтеровирусной инфекции, например при герпанги-не, миалгии, экзантеме и др.

Эпидемическая миалгия (плевродиния, болезнь Борнхольма) За­болевание начинается внезапно с резкого подъема температуры и ха­рактеризуется мучительными, сильными приступообразными мышечными болями различной локализации (мышцы груди, верхней половины живота, спины, конечностей), усиливающимися при дви­жении. Болевые приступы возникают и исчезают внезапно, могут по­вторяться в течение суток несколько раз, их продолжительность различна от 30-40 секунд до 15 минут. Боли сохраняются 1-2 дня. Заболевание часто протекает волнообразно в виде рецидивов: через 1-3 дня после падения температуры следует ее подъем, возобновляются приступы болей.

Болезнь продолжается 3-7 суток и часто сопровождается други­ми симптомами энтеровирусных инфекций в виде герпангины, сероз­ного менингита и др.

Энтеровирусная экзантема. Через 1-2 дня после начала заболева­ния при характерных симптомах энтеровирусной инфекции на высоте лихорадки или после ее снижения на коже лица, туловища, реже на ко­нечностях, появляется полиморфная пятнистая или пятнисто-папулез­ная сыпь, напоминающая краснуху, корь или скарлатину. На слизистой рта часто появляется пятнистая энантема. Сыпь держится от несколь­ких часов до 3 суток и исчезает без пигментации и шелушения.