Лабораторная диагностика, характер исследуемого материала
Поможем в ✍️ написании учебной работы
Поможем с курсовой, контрольной, дипломной, рефератом, отчетом по практике, научно-исследовательской и любой другой работой

Лабораторную диагностику аденовирусной инфекции проводят с помощью экспресс-методов, вирусологических и серологических методов исследования.

Исследуемые материалы: отделяемое, смывы и мазки из носа, зева, задней стенки глотки и конъюнктивы, испражнения, кровь, сек­ционный материал. Как правило, клинический материал подвергают предварительной очистке и концентрации, а также добав­ляют антибиотики.

Экспресс-методы. Служат для быстрого непосредственного (пря­мого) обнаружения аденовирусов и их антигенов в испытуемых об­разцах, начиная с первых дней болезни. Используют следующие методы: МИФ, ИФА, ЭМ, ИЭМ, ПЦР.

ПЦР является наиболее современным, но еще недостаточно доступ­ным методом быстрого обнаружения любого серотипа аденовируса.

Серологический метод является доступным методом, применя­емым в поздние сроки заболевания или ретроспективно. Метод заклю­чается в исследовании парных сывороток больных, взятых в начале болезни и через интервал в 2-4 недели. Для подтверждения диагноза необходима сероконверсия в виде 4-х кратного и более повышения титра антител. Используют РСК, ИФА, РТГА или РН.

В зависимости от применяемых диагностикумов определяют ро­довую или типовую специфичность антител в испытуемых сыворотках

7. Особенности вирусологического метода диагностики (культивирование, индикация, идентификация вируса)

Вирусологический метод. Заключается в выявлении, изоляции и последующей идентификации выделенного аденовируса. Этот метод отличается трудоемкостью и длительностью и доступен не для всех ла­бораторий. Его используют, главным образом, для эпидемиологических, и научных целей, а также при диагностике нозокомиальных инфекций. Выделение вируса осуществляется путем заражения чувствитель­ных культур клеток как первичных (например, почки эмбриона чело­века), так и перевиваемых линий клеток (HeLa, KR, Нер-2 и др.).

Идентификацию аденовирусов проводят путем определения их родовой специфичности с помощью РСК, МИФ или ИФА. Серотипы определяют в РТГА или реакции нейтрализации (РН) на культурах клеток, используя набор типоспецифических сывороток или моноклональных типоспецифических антител.

Противовирусный иммунитет

После перенесения аденовирусной инфекции фор­мируется постинфекционный типоспецифический иммунитет гумо­рального и клеточного характера.

Специфическая профилактика

В России вакцины для активной профилактики аденовирусных инфекций не применяются. Эпидемиологические мероприятия в оча­ге инфекции проводят такие же, как при гриппе.

Этиотропное лечение

Лечение аденовирусных инфекций при легких формах заболева­ния проводят симптоматическое, при средних и тяжелых формах симптоматическое, патогенетическое и этиотропное. Применяют про­тивовирусные препараты, такие как интерферон или индукторы ин­терферона и местно мази с оксолином, теброфеном, флюриналом.

ГЕРПЕТИЧЕСКИЕ ИНФЕКЦИИ

1. Таксономия, классификация

Герпетические инфекции - группа инфекционных болезней, с разнообразными клиническими проявлениями, вызываемых возбуди­телями, принадлежащими к семейству Herpesviridae . В состав семей­ства включено более 100 вирусов, поражающих человека, многие виды животных и птиц. Семейство Herpesviridae содержит три подсемейст­ва, которые различаются по целому ряду признаков: структуре гено­ма, тканевому тропизму, цитопатическому действию (ЦПД) на пораженную клетку и локализации латентной инфекции.

2.Морфология, размеры, особенности генома

Строение вириона. Вирус герпеса (ВПГ-1 и ВПГ-2) является крупным сложным ДНК-геномным вирусом, имеющим сферическую форму с диаметром 150-200 нм. В составе его фосфолипидного суперкапсида находятся гликопротеиновые шипики, которые выступают над поверхностью суперкапсида (рис. 10).

1 - оболочка, 2 - капсид, 3 - тегумент.  

Рис. 10 Электронограмма ультротонкого среза ВПГ (по А.Ф. Быковскому и др.)

Непосредственно под суперкапсидом расположен тегумент, со­держащий липопротеины, под которым находится нуклеокапсид. Капсид имеет кубический тип симметрии.

Геном представлен линейной двунитевой ДНК, состоящей из двух фрагментов - короткого S и длинного L, каждый из которых располо­жен между двумя наборами инвертированных повторов. Геном вируса герпеса является протяженным и кодирует, по крайней мере, 100 раз­личных белков как структурных, так и функциональных (это регуляторные белки и ферменты, участвующие в репликации вируса в пораженной клетке).

Антигены. Поверхностный гликопротеин gpC является группоспецифическим антигеном, общим для вирусов ВПГ-1 и ВПГ-2, а по­верхностные гликопротеины gpB и gpD - типоспецифическими антигенами.

Этапы репродукции

Прикрепившись к рецепторам мембраны клетки (рис. 11), оболочка вириона сливается с ней (1,2). Освободившийся нуклеокапсид (3) доставляет в ядро клетки ДНК вируса. Далее происходит транскрипция части вирусного генома с помощью клеточной ДНК-зависимой РНК-полимеразы; образовавшиеся иРНК(4) проникают в цитоплазму, где синтезируются (трансляция) самые ранние альфа-белки(I), обладающие регулирующей активностью. Затем происходит синтез ранних бета-белков(II)-ферментов, включая ДНК-зависимую ДНК-полимеразу и тимидинкиназу, участвующие в репликации геномной ДНК вируса. Поздние гамма-белки(III) являются структурными белками, включая капсид и гликопротеины (A,B,C,D,E,F,G,X) вируса. Гликопротеины диффузно прилегают к ядерной оболочке (5). Формирующийся капсид(6) заполняется вирусной ДНК(7) и почкуется через модифицированные мембраны ядерной оболочки(8). Перемещаясь через аппарат Гольджи, вирионы транспортируются через цитоплазму и выходят путем экзоцитоза (9) или лизиса клетки (10).

               Рис. 11 Этапы репродукции ВПГ

Продолжительность цикла репродукции герпесвирусов варьиру­ет от 18 часов для ВПГ-1 и ВПГ-2 до 48-96 - для цитомегаловирусов. Проникновение вируса герпеса в некоторые клетки, например, в нейроны, не всегда сопровождается репродукцией вируса и гибелью пораженной клетки. Присутствие вируса в клетке может быть совмес­тимым с ее нормальной жизнедеятельностью. Это явление получило название латентность, или персистенция вирусов. В инфицирован­ной клетке вирусные геномы могут свободно располагаться в виде циркулярных молекул ДНК, то есть плазмид (около 20 копий на клет­ку) или же интегрировать в геном клетки. Через какое-то время в клет­ке может произойти реактивация вирусного генома с последующей репродукцией вируса и гибелью пораженной клетки.

Резистентность. Вирус герпеса термолабилен (при 50°С гиб­нет через 30 минут), быстро инактивируется под воздействием ульт­развука, ультрафиолетовых и рентгеновских лучей, этанола, эфира, желчных солей, различных детергентов. Хорошо сохраняется при -70°С и в высушенном состоянии.

Эпидемиология

Простой герпес - хроническое заболевание, характеризуется полиморфизмом клинических проявлений. Наиболее частыми симп­томами являются везикулярные высыпания на коже и слизистых обо­лочках. При генерализации инфекции могут поражаться многие органы и системы: ЦНС (энцефалиты, миелиты, энцефаломиелиты), лимфа­тическая система, внутренние органы.

Источником инфекции являются больные и вирусоносители. Меха­низм передачи возбудителя - контактный (прямой и непрямой) и воздуш­но-капельный - для ВПГ-1; половой и трансплацентарный - для ВПГ-2.

Клинические проявления

Входными воротами инфекции служат травмированная кожа и слизистые оболочки. Инкубационный период составляет 2-14 дней.

Первичная репродукция вируса происходит непосредственно в области входных ворот. В одних случаях развивается бессимптомная инфекция, в других - в местах поражения возникают герпетические высыпания. В дальнейшем развитие герпетической инфекции зависит от вирулентности штамма возбудителя и состояния иммунной систе­мы макроорганизма.

При локализованных формах процесс заканчивается местными проявлениями. Очень редко при первичном инфицировании наступа­ет генерализация процесса.

При генерализованных формах вирус заносится гематогенно во внутренние органы (легкие, печень, почки, селезенку и др.) и вызыва­ет их поражение.

Вирус герпеса проникает в нервные окончания и затем ретроград­но транспортируется вдоль по аксону вплоть до нервных узлов, где может длительно (иногда в течение всей жизни пациента) сохранять­ся в клетке нейрона в виде провируса, интегрированного в геном клет­ки. В периоды между обострениями инфекции у больного вирус выявить невозможно.

Для ВПГ-1 характерно поражение ганглиев тройничного нерва, тогда как для ВПГ-2 - крестцовых ганглиев.

Рецидивы герпетической инфекции обусловлены активацией ви­руса с помощью пускового фактора (переохлаждение, УФ-облучение, травма кожи, эмоциональный стресс, иммуносупрессия и т.д.). Важ­ное значение имеет исходный иммунный статус организма. Именно в случае слабого местного иммунного ответа и дефицита клеточного им­мунитета индуцируется репродукция вируса в местах первичного по­ражения, что приводит к выраженным клиническим проявлениям на коже и слизистых оболочках.

Рецидивирующий простой герпес и его генерализованные фор­мы рассматривают как СПИД-индикаторное состояние, что требует обследования больного на наличие ВИЧ-инфекции.

Клиника. Инкубационный период составляет 2-14 дней. Класси­фикация клинических форм основана на локализации патологическо­го процесса.

А. Для ВПГ-1:

1. Поражения слизистых оболочек (гингивит, стоматит, тонзиллит и т.д.).

2. Поражения кожи (герпес губ, носа, век, лица, рук и др. участков кожи).

3. Герпетическая экзема.

4. Поражения глаза (конъюнктивит, блефароконъюнктивит, кератит, увеит, неврит зрительного нерва и др.).

5. Поражения ЦНС (энцефалит, менингоэнцефалит, неврит и др.).

6. Висцеральные формы (гепатит, пневмония и др.).

Б. Для ВПГ-2:

1. Генитальный герпес (поражения полового члена, вульвы, влага­лища, цервикального канала, промежности, уретры и др.).

2. Герпес новорожденных.

3. Доказана этиологическая роль ВПГ-2 в возникновении рака шейки матки и простаты.

Представленная классификация клинических проявлений по серотипу ВПГ является достаточно условной. Известно, что в 10% слу­чаев генитальный герпес обусловлен ВПГ-1, в 5% случаев герпетической инфекции ЦНС выделяется ВПГ-2.

Клинически инфекции, вызванные ВПГ-1 и ВПГ-2, неразличи­мы. Однако частота последующих реактиваций инфекции зависит от анатомической локализации и серотипа вируса. Так, реактивация ин­фекции половых путей, вызванная ВПГ-2, происходит в 2 раза чаще, чем при возбудителе ВПГ-1. Напротив, рецидивы поражений полости рта и лица при ВПГ-1 происходят гораздо чаще, чем при ВПГ-2.

Патологические изменения зависят от локализации герпетичес­кой инфекции. Характерным гистопатологическим признаком служит баллонирующая дегенерация инфицированных клеток, формирование внутриядерных включений Каудри I типа и формирование многоядер­ных гигантских клеток (синцития). Ранние включения полностью за­нимают все ядро пораженной клетки, тогда как поздние включения формируют бесцветный ободок вокруг вирусного материала и, таким образом, отделяя включение вируса от хроматина. Слияние клеток обеспечивает эффективное распространение вируса герпеса от клет­ки к клетке, даже в присутствии нейтрализующих антител.

Дата: 2019-07-24, просмотров: 244.