Инфекционный мононуклеоз документируется обнаружением атипичных лимфоцитов, лимфоцитозом (моноциты составляют 60-70% белых кровяных клеток с 30% атипичных лимфоцитов). Применяют также вспомогательные реакции (агглютинация эритроцитов барана сывороткой крови больного и др.). Недавняя ВЭБ-инфекция выявляется по различным показателям: выявление IgM-антител к вирусному капсидному антигену (VCA); повышение титра EBNA и др.

7. Особенности вирусологического метода диагностики (культивирование, индикация, идентификация вируса) -нет

Противовирусный иммунитет

Гуморальный, клеточный пожизненный. Повторные заболевания не описаны.

Специфическая профилактика

Специфическая профилактика не разработана

Этиотропное лечение

Этиотропное лечение не разработано

III. План практической работы

1. Учесть и зарисовать реакцию нейтрализации в вирусологической диагностике аденовирусной инфекции по цветной пробе.

Антитела иммунной сыворотки способны нейтрализовать повреждающее действие микробов или их токсинов на чувствительные клетки и ткани, что связано с блокадой микробных антигенов антителами, т.е. их нейтрализацией.

Реакцию нейтрализации (РН) проводят (рис. 13) путем введения смеси антиген — антитело животным или в чувствительные тест-объекты (культуру клеток, эмбрионы). При отсутствии у животных и тест-объектов повреждающего действия микроорганизмов или их антигенов, токсинов говорят о нейтрализующем действии иммунной сыворотки и, следовательно, о специфичности взаимодействия комплекса антиген — антитело.

Рис. 13 Реакция нейтрализации вирусов в культуре клеток:
А - цитопатогенный эффект (ЦПЭ) в результате размножения вирусов;
Б - ЦПЭ отсутствует в результате нейтрализации вирусов антителами.

Метод диагностики: вирусологический

Компоненты: вирусологический исследуемый материал, культивируемый в клетках культуры тканей, типоспецифические аденовирусные сыворотки (содержащие антитела к аденовирусу типа 1, 2, 3, 4, 5), культура клеток в питательной среде №199 с индикатором pH среды.

Постановка: Вирусологический материал смешивается с соответствующими типоспецифическими аденовирусными сыворотками в 5-ти пробирках. Оставляется на 1 час при комнатной температуре. Затем в каждую пробирку вносят культуру клеток с питательной средой №199 и индикатор pH среды. Инкубация в течение 4-9 дней при температуре 37 °C.

Учет: Положительная реакция «+»– пробирка с желтой средой (вирус нейтрализовался типоспецифической сывороткой, а клетки остались жизнеспособными, вырабатывающими кислые продукты метаболизма, изменяющие pH среды в кислую сторону, при этом цвет жидкости меняется с красного на желтый). Отрицательная реакция «-»- пробирка с красной средой (реакции нейтрализации не произошло). Вирус вызвал остановку метаболизма клеток

Заключение: Вирусологический материал содержит аденовирус типа ­I.

2. Учесть РСК в диагностике герпетической инфекции

Метод диагностики: серологический

Компоненты: исследуемая сыворотка больного человека (в которой ищут антитела к герпесвирусу), герпетичекий диагностикум (взвесь инктивированных герпесвирусов), система комплимента в рабочей дозе и гемолитическая система (состоящая из гемолитической сыворотки и эритроцитов барана).

Постановка: в рабочую пробирку вносят исследуемую сыворотку больного человека, герпетичекий диагностикум и систему комплимента в рабочей дозе. Инкубация в течение 30 минут при температуре 37 °C. Далее в рабочую пробирку добавляют гемолитическую систему. Инкубация в течение 30 минут при температуре 37 °C.

Учет: Положительная реакция «+» – пробирка с ровным осадком в виде «красной пуговки» (Герпесвирус и антитело образуют иммунный комплекс, к которому через Fс-фрагмент антител присоединяется комплемент (С), т.е. происходит связывание комплемента комплексом антиген — антитело (рис. 14,15). При добавлении гемолитической системы гемолиз сенсибилизированных антителами эритроцитов не произойдет, т.к. комплимент весь израсходован на формирование первоначального иммунного комплекса). Отрицательная реакция «-» – пробирка равномерно красного цвета - гемолиз эритроцитов (если антиген и антитело не соответствуют друг другу, т.е. в исследуемом образце нет антитела, комплемент остается свободным и присоединится к комплексу эритроцит — антиэритроцитарное антитело, вызывая гемолиз).

Рис. 14 Схема РСК с сывороткой больного Рис. 15 Схема РСК с сывороткой здорового

Заключение: Исследуемая сыворотка содержит антитела к герпесвирусу.

IV. Примеры ситуационных задач

Ситуационная задача № 1:

Вечером, мать обратила внимание, что у ее ребенка, девочки 3-х лет, появилась бледность, вялость, высокая температура (38,0⁰С), покраснение красной каймы губ. Вечером была два раза рвота, утром ребенок стал жаловаться на зуд в области губ, появились мелкие везикулы в области углов рта. Педиатр, посетивший больного ребенка, поставил диагноз: «ВПГ 1 типа».

1. Для подтверждения герпетической инфекции исследуемым материалом служит:

1. содер­жимое пузырьков и герпетических везикул
2. соскобы роговой оболочки глаз
3. носоглоточный смыв
4. моча, кровь, ликвор
5. всё вышеперечисленное

2. Вирионы вируса герпеса транспортируются через цитоплазму и выходят следующими путями:

1. экзоцитоза

2. лизиса клетки

3. эндоцитоза

4. виропексиса

1. транскрипции

3. Вирус герпеса длительное время сохраняется в клетке нейрона в виде::

1. неовируса

2. поливируса

3. провируса

4. альфа-вируса

5. бета-вируса