Специальной комиссией ВОЗ была установлена стандартная номенклатура. Весь комплекс называется HLA. На сегодняшний день представлена полная карта генов короткого плеча 6-й хромосомы, где находятся гены, кодирующие пептиды системы HLA. Эти гены объединены в локусы и составляют три региона, каждый из которых имеет характерные генные продукты и функции. Продуктами данных регионов являются белки HLA классов I, II и III.

К классу I относятся классические HLA-A, -B, -C гены и их серологически выявляемые антигены, неклассические гены: HLA-E, -F, -G; гены, связанные классом I, – MICA и MICB, а также псевдогены. Продуктом классических генов класса I являются гликопротеиновые молекулы, экспрессированные на мембранах почти всех ядросодержащих клеток организма. Особенно плотно они представлены на мембранах Т-лимфоцитов.

Регион класса II (D-регион) состоит из пяти субрегионов: классические гены DR, DQ, DP, неклассические гены, кодирующие минорные антигены, – DO и DM, а также псевдогены. Более плотно продукты этих генов представлены на мембранах В-лимфоцитов и АПК. Продукты генов HLA, расположенные на клеточных мембранах вместе с HLAрецепторами, составляют эпитопы.

Семейство генов HLA II класса DR включает один ген, кодирующий α-цепь, и до девяти (в том числе и псевдогены), кодирующих цепь β: DRB1-9. При этом все HLA-DR содержат продукты гена DRB1, однако некоторые варианты также включают добавочную β-цепь.

Регион класса III содержит гены структуры компонентов комплемента С2 и С4, а также факторов некроза опухоли и белков теплового шока, вовлеченных в иммунологическую функцию.

В развитии реакции отторжения наибольшее значение имеют молекулы МНС I и II классов. Гены, содержащиеся в ядре клетки и кодирующие белки HLA, составляют генотип системы MHC, в то время как HLA-cпецифичности, выявляемые на клеточных мембранах, образуют фенотип.

Помимо крайне выраженного полиморфизма гены HLA обладают еще одной особенностью. Наследование таких генов происходит по кодоминантному типу, т.е. у потомства в одинаковой степени проявляются HLA-аллели, полученные от каждого из родителей (рис. 2). Комбинация аллелей из разных локусов на одной хромосоме называется гаплотипом и наследуется блоком. В ряде случаев кроссинговера блоковое наследование нарушается и образуется рекомбинантный гаплотип. Такие случаи крайне редки из-за близкого расположения генов на хромосоме.

HLA-специфичности могут быть выявлены с помощью типирующих сывороток, полученных из крови многократно рожавших женщин. Метод называется «серологическое HLA-типирование», выполняется в микролимфоцитотоксическом тесте с последующим микроскопированием. С разработкой и внедрением новых биотехнологий, а именно получения моноклональных сывороток, были выявлены как новые HLA-специфичности, так и аллели уже известных генов.

46 Характеристика ДНК-содержащих онкогенных вирусов на примере вируса SV40.

Онкогенные вирусы, обладающие ДНК-геномом, распределяются по нескольким группам, некоторые члены которых обладают свойствами, позволяющими рассматривать их как действительно онкогенные. Такие вирусы способны индуцировать опухоли у позвоночных, а также трансформировать культуры клеток. К ДНК-содержащим онкогенным вирусам относятся:

1. Полиомавирусы – обезьяний вирус SV40, вирус полиомы мышей и вирусы человека ВК и JC.

2. Папилломавирусы – 16 вирусов папилломы человека и множество папилломовирусов животных.

3. Аденовирусы – 37 вирусов человека, множество аденовирусов животных (например, 24 вируса обезьян и 9 вирусов крупного рогатого скота).

4. Герпесвирусы – вирусы простого герпеса человека, цитомегаловирус человека, вирус Эпштейна–Барр и онкогенные вирусы приматов, лошадей, кур, кроликов, лягушек.

5. Вирусы, подобные вирусу гепатита В, – вирус гепатита В человека, гепатита североамериканского сурка, гепатита земляных белок и гепатита уток.

Репликация ДНК этих вирусов представляет собой полуконсервативную репликацию по типу «глазков» с образованием двух репликативных вилок. Детально изучена репликация обезъяньего полиомавируса SV40, где вовлеченные репликативные белки были идентифицированы в бесклеточной системе in vitro. Установлено, что в репликации ДНК SV40 принимают участие 10 белков. Девять из них имеют клеточное происхождение. Единственный вирусный белок, который требуется для репликации ДНК SV40 – это большой T-антиген, который обладает свойствами хеликазы и обеспечивает расплетение двунитевой структуры в репликативной вилке. В общих чертах репликация включает несколько этапов:

• вирусоспецифический неструктурный белок (большой Т-АГ), обладающий хеликазной активностью, связывается с ДНКпоследовательностью в точке ori и расплетает двунитевую структуру;

• праймаза синтезирует две РНКзатравки. Образуются две репликативные вилки (2 лидирующие и 2 отстающие цепи), которые в процессе комплементарного синтеза удаляются друг от друга, двигаясь в разных направлениях, т.е. репликация двунаправленная. Все белки репликативного комплекса (9 белков) имеют клеточное происхождение, и только 1 (Т-АГ) – вирусное. В результате двунаправленного синтеза наблюдается образование тета-молекул (θ);

• сбрасывание внутримолекулярного напряжения обеспечивает топоизомераза I путем внесения точечных однонитевых разрывов, которые тут же лигируются. Образуются два двунитевых кольца, где родительские цепи соединены друг с другом. Разъединение осуществляет топоизомераза II, которая вносит разрывы в двунитевые кольца. Затем разрывы лигируются. Образуются два двунитевых кольца, где одна нить – материнская, другая синтезирована вновь.