Определение группы крови АВ0 производится стандартными изогемагглютинирующими сыворотками на плоскости при комнатной температуре.
Стандартные сыворотки наносят на белую пластинку со смачиваемой поверхностью по одной большой капле (0,1 мл) У предварительно надписанного обозначения. Во избежание ошибки при каждом определении группы крови применяют по два образца сывороток каждой группы (разные серии), так что они образуют два ряда капель в следующем порядке по горизонтали: ОaВ (анти-(А+В», Аb (антиВ) и Вa (анти-А).
Исследуемую кровь наносят по одной маленькой капле, которая приблизительно в 10 раз меньше капли сыворотки (0,01 мл), рядом с каждой каплей сыворотки. Кровь тщательно перемешивают с сывороткой стеклянной палочкой или углом предметного стекла, который промывают и досуха вытирают перед размешиванием каждой капли.
Наблюдение за ходом реакции производят при легком покачивании пластинки в течение 5 мин. Результат реакции в каждой капле может быть положительным (+) или отрицательным (-). Положительный результат (+) выражается в агглютинации (склеивании) эритроцитов - агглютинаты видны не вооруженным глазом сначала в виде мелких красных зернышек, постепенно сливающихся в более крупные хлопья. При этом сыворотка постепенно обесцвечивается. При отрицательной реакции (-) капля остается равномерно окрашенной. Агглютинация наступает обычно в течение 10-30 с, однако наблюдение проводят не менее 5 мин, так возможно позднее наступление агглютинации в случае слабой агглютинабельности эритроцитов (А2 или А2B).
По мере наступления агглютинации, но не ранее 3 мин, в эти капли добавляют по одной большой капле (0,1 мл) изотонического раствора NaCl для разрушения иногда наступающей ложной агглютинации - неспецифического склеивания эритроцитов, в том числе в так называемые «монетные столбики».
В тех случаях, когда положительный результат получается со стандартными сыворотками всех групп (во всех каплях), для исключения неспецифической агглютинации производится дополнительное контрольное исследование испытуемых эритроцитов со стандартной сывороткой группы АВоIV), не содержащей групповых агглютининов. Лишь отсутствие агглютинации с сывороткой группы ABo(IV) позволяет учесть положительный результат реакции с сыворотками Oaв(I) (анти-(А+В», Ар(lI) (анти-В) и Ва(lIl) (анти-А) как истинный.
Оценка результатов определения групп крови при помощи изогемагглютинирующих сывороток двух серий каждой группы*.
| Изогемагглютинирующие сыворотки группы | Исследуемая кровь принадлежит группе | ||
| 0 ab(I) Анти-(А+В) | Ab(II) Анти-В | Вa((III) Анти-А | |
| - | - | - | 0(I) |
| - | - | - | |
| + | - | + | А(II) |
| + | - | + | |
| + | + | - | В(III) |
| + | + | - | |
| + | + | + | |
| + | + | + | |
| Контроль с сывороткой группы AВ0(IV) − | AВ(IV) | ||
* Знаком плюс (+) обозначено наличие агглютинации, знаком минус (-) - ее отсутствие.
Дата: 2019-03-05, просмотров: 221.
