Принцип метода: Колориметрический метод определения билирубина основан на способности давать с диазореактивом Эрлиха розовую окраску, интенсивность которой пропорциональна концентрации присутствующего в крови билирубина.
Материальное обеспечение: центрифужные пробирки, негемолизированной сыворотка, диазореактив, 96% раствор спирта, насыщенный раствор сульфата аммония, ФЭК.
Ход работы: в центрифужную пробирку наливают 2 мл негемолизированной сыворотки, 1 мл диазореактива, 5,8 мл 96% раствора спирта и 1 мл насыщенного раствора сульфата аммония. Хорошо встряхивают и центрифугируют при 4000-5000 об/мин до тех пор пока надосадочная жидкость не станет прозрачной. Надосадочную жидкость осторожно сливают в кювету и калориметрируют на ФЭКе с зеленым светофильтром против спирта. Затем по заранее построенной калибровочной кривой находят содержание общего билирубина в сыворотке крови.
В норме концентрация общего билирубина в плазме (сыворотке) крови составляетбилирубин : 8,5- 20,5 мкмоль/л
75 % его количества приходится на долю свободного билирубина.
Данные, полученные в г/л умножают на 100 и на пересчетный коэффициент 17,104 систему СИ. Норма билирубина в системе СИ 1,7-20,5 мкмоль/л.
РАСЧЕТ:
ВЫВОД:
Подпись преподавателя:
Клинико-диагностическое значение исследования пигментного обмена.
Один из важних субъективных признакою нарушения пигментного обмена – появление желтухи, которое отмечается обычно при уровне билирубина в крови 27-34 мкмоль/л и более.
Причины гипербилирубинемий и их классификация:
1) усиление гемолиза эритроцитов –гемолитическая желтуха (предпеченочная);
2) нарушение функции печеночных клеток – паренхиматозная (печеночная), может быть вызвана также наследственно обусловленными дефектами в процессах транспорта билирубина и образования диглюкуронида билирубина;
3) задержка оттока желчи - механическая (или обтурационная, постпеченочная) желтуха. Тяжесть желтухи обычно соответствует уроню билирубинемии.
Принято считать, что желтуха протекает в легкой форме, если содержание билирубина в плазме (сыворотке) не превышает 85 мкмоль/л; уровень его 86-169 мкмоль/л свидетельствует о среднетяжелой, а свыше 170 мкмоль/л – о тяжелой форме желтухи.
ТЕМА 2.14. БИОХИМИЯ ПЕЧЕНИ. МИКРОСОМАЛЬНОЕ ОКИСЛЕНИЕ. ЦИТОХРОМЫ Р-450
Актуальность темы
Печень является самым крупным из внутренних органов человека и самой крупной железой пищеварительного тракта. Печень стоит на пути движения веществ из желудочно-кишечного тракта в общий кровоток, и эта особенность ее расположения позволяет печени регулировать в крови концентрацию многих метаболитов. По системе воротной вены в печень с кровью поступают продукты переваривания пищи и другие вещества. Печень не только принимает, но и распределяет эти вещества.
В гепатоцитах некоторые вещества накапливаются и затем либо в неизменном виде, либо в виде метаболитов поступают из печени в общий кровоток.
Считается, что печень является биохимической лабораторией организма. Ей принадлежит ведущая роль в обмене углеводов, липидов, белков. Кроме того, в печени происходит метаболизм гормонов, билирубина. В печени депонируются гликоген, витамины А и В12, железо. Одной из главных функций печени является детоксицирующая или барьерная функция, имеющая самое непосредственное значение для сохранения жизни. В печени обезвреживаются и инактивируются не только субстраты эндогенного происхождения, но и лекарственные вещества, токсические вещества экзогенного происхождения.
Следовательно, необходима оценка функционального состояния печени с использованием различных биохимических тестов, особенно в случаях заболеваний печени.
Цели обучения
Общаяцель
Уметь интерпретировать биохимические процессы, проходящие в печени, для понимания их функционирования в норме и при патологии, а также для обоснованного применения методов диагностики и лечения патологических процессов, затрагивающих печень.
Конкретные цели: Цели исходного уровня:
Уметь:
| 1. Интерпретировать роль печени в метаболизме углеводов, липидов, белков | 1. Интерпретировать особенности морфологии печени (кафедра нормальной физиологии) |
| 2. Интерпретировать механизмы деток-сикации ксенобиотиков и эндогенных токсинов в печени | 2. Интерпретировать типы реакций введения различных функциональных групп в молекулы химических соединений с целью увеличения гидрофильности этих соединений (кафедра фармацевтической и медицинской химии) |
| 3. Интерпретировать особенности структуры и функционирования электроннотранспортных цепей эндоплаз-матической сети | |
| 4. Интерпретировать механизм развития толерантности к лекарственным препаратам | |
| 5. Интерпретировать причины и механизм развития химического канцерогенеза |
Дата: 2018-12-21, просмотров: 298.
