Эта оценка производится путем просматривания спермы под микроскопом при увеличении в 120–400 раз. На чистое подогретое предметное стекло дозатором пипеточным (стерильной стеклянной палочкой или пипеткой) наносят капельку спермы и накрывают ее покровным стеклом. Желательно, чтобы каждый раз величина капельки была одинаковой, так как от этого в значительной мере зависит объективность и точность оценки. Это условие в полной мере можно выдержать при использовании дозатора пипеточного регулируемого или калиброванного на 0,03 мл. Чтобы капля равномерно растеклась под покровным стеклышком (без пузырьков воздуха) и не выходила за его края, поступают следующим образом. Держа двумя пальцами за грани (ребрышки) покровное стеклышко, касаются одной его гранью предметного стекла возле края капли под углом 45–50°. Когда капля расплывется по всей ширине стеклышка, медленно его опускают. Покровное стеклышко должно быть тщательно вытерто. Протирают его марлевой салфеткой между большим и указательным пальцами, поворачивая за ребрышки пальцами другой руки.
Исследование проводят при температуре 38–40оС, для чего пользуются специальными термостатами или обогревательными столиками (конструкции Морозова или Пакенаса) с автоматическим регулированием температуры. Обогревательный столик помещают на предметный столик микроскопа. При помощи макровинта приближают объектив (увеличение 80 – 120х) к предметному столику микроскопа на расстояние 4–5 мм и устанавливают необходимое освещение. Обычно пользуются электрическим осветителем ОИ-35, либо МКИ-11, а при отсутствии осветителя – осветительным зеркалом. В таких случаях микроскоп необходимо расположить напротив хорошего источника света (окно помещения, лампа дневного света и т. д.). Равномерность и сила освещения достигается за счет приподнимания или опускания конденсора микроскопа и прикрытия диафрагмы. Для улучшения видимости сперматозоидов желательно использовать конденсор темного поля ОИ-10, в поле зрения отчетливо просматриваются ярко светящиеся контуры половых клеток на темном фоне.
После подготовки микроскопа готовят мазок и помещают его на обогревательный столик. Глядя в окуляр, при помощи макровинта медленно приподнимают тубус до появления изображения в поле зрения. Затем, вращая микровинтом в ту или другую сторону, добиваются четкого изображения.
Густота спермы определяется по количеству сперматозоидов, наблюдаемых в поле зрения микроскопа. Такая оценка проводится с целью получения предварительных данных о содержании половых клеток в сперме и о необходимости дальнейшей ее оценки. Наиболее хорошо она разработана для спермы быка и барана. Имеет самостоятельное значение лишь в том случае, когда по какой-либо причине не определяют концентрацию сперматозоидов. Классифицируют сперму как густую, среднюю и редкую (табл. 3).
Т а б л и ц а 3. Зависимость густоты спермы от концентрации сперматозоидов
Вид производителя | Концентрация сперматозоидов в сперме, млрд. мл | ||
в густой | в средней | в редкой | |
Баран | > 2 | 1–2 | < 1,0 |
Бык | > 1 | 0,7–1 | < 0,7 |
Жеребец | > 25 | 0,15–0,25 | < 0,15 |
Хряк | > 0,2 | 0,1–0,2 | < 0,1 |
Кролик | 0,2 | ||
Петух | 3,8 | ||
Индюк | > 8,0 | 6 – 8 | < 6 |
Гусак | 0,5 |
Густая сперма – все поле зрения заполнено сперматозоидами без промежутков между ними (обозначается буквой Г). Средняя сперма – промежутки между сперматозоидами имеются, но они не превышают размеров одного сперматозоида (обозначается буквой С). Редкая сперма – промежутки между сперматозоидами превышают размеры спермия (обозначается буквой Р). Олигоспермия – в поле зрения имеются единичные сперматозоиды (обозначается буквой О). Аспермия – в поле зрения сперматозоиды отсутствуют (обозначается буквой А). По густоте спермы приблизительно судят о концентрации сперматозоидов.
К использованию допускается сперма быка, жеребца и хряка с оценкой “густая” и “средняя”, сперма барана – только “густая”.
Дата: 2018-11-18, просмотров: 524.