Вирус европейского и дальневосточного клещевого энцефалита - РНК-содержащий вирус рода Flavivirus семейства Flaviviridae. Вызывает арбовирусную инфекцию (переносится клещами) - клещевой энцефалит в виде лихорадки, энцефалита, вялых парезов и параличей.

Микробиологическая диагностика. 1) Вирусологический метод: вирус выделяют (из цереброспинальной жидкости, крови, мочи, реже из носоглоточных смывов, фекалий) при заражении культуры клеток или мышей-сосунков в мозг. Вирус обнаруживают с помощью реакции биологической нейтрализации или ПЦР. 2) Серологический метод: для определения в сыворотке крови антител или антигенов вируса применяют РТГА, РСК, РПГА, ИФА, РН.

Специфическая профилактика. Применяется инактивированная культуральная вакцина.

Вирусы клещевого энцефалита и омской гемарогической лихорадки являются членами комплекса вирусов клещевого энцефалита семейства Flaviviridae .Оба возбудителя имеют общие детерминанты с другими флавивирусами и тесное антигенное родство между собой.Единственным резервуаром вируса в природе являются грызуны и птицы у которых инфекция протекает бессимптомно.Переносчиком и основным хозяином вируса являются клещи.Заражение человека происходит при укусе инф клещей,при прямом контакте с инф животными,а также алиментарным путем через инфицированную воду.Вирус клещевого энцефалита был выделен от больных людей в1937 сотрудником кафедры микры ВМедА Н.В.Рыжковым при участии МП Чумакова ЕН Павловский ЛА Зильбер.Вирус поражает двигательные нейроны передних рогов шейного сегмента спинного мозга мозжечка мягкую оболочку головного мозга.До проникновения в мозг вирус репродуцируется в лимфоцитах в клетках печени селезенке эндотелии кровеносных сосудов.Могутпри хронической форме энцефалита вирусный геном сохраняться в хромасомах нейронах головного мозга.После перенисения заболевания формируется напряженный гуморальный эммунитет.Заболевание распростронено на большой территории от таежныч районов Дальнего Востока до Центральной Европы в весеннее-летний период.Вирус клещевого энцефалита способен сохраняться у клещей на всех стадиях их развития а также передаваться потомству трансовариально. Сельскохозяйственные домашние животные тоже подвергаются нападению клещей.У них возникает инфекция бессимптомов с вирусемией. У коров и коз вирус проникает в молоко с которым передается человеку.Клещевой энцефалит протекает в двух формах Штаммы вируса циркулирующие в восточных регионах страны,вызывают, тяжелый энцефалит с развитием остаточных явлений в виде вялых атрофических параличей мышц шеи и плечевого пояса и летальностью 30%»Западные» штаммы возбудителя чаще всего обуславливают течение инфекции в виде двухволнового менингоэнцефалита редко наблюдаются легкие абортивные формы инфекции.Вирусы выделяют из крови больных,взятой в первые 3 суток болезни или из мозговой ткани павших от клещевого энцефалита.Пробу крови предварительно целесообразно заморозить что способствует разрушению сгустка.Выявление вируса клещевого энцефалита в суспензии мозга возможно лишь при ранней гибели больного(не больше 7 суток).Для выведения возбудителей используют культуры перевиваемых линий клеток СПЭВ, LLC - MK 2 Vero ВНК-21 HeLa и др.Мнослой клеток через 48-72 ч после контакта с исследуемым материалом изучают с помощью МФА.Вирусный антиген в цитоплазме пораженных клеток имеет вид ярко зеленой диффузной массы или гранул различной величины.Для индикации и индентификации вирусов применяют видоспецифические иммуноглобулиновые препараты для иммунофлюресцентного анализа.Через 4-5 суток после контакта с исследуемым материалом вирусы могут быть выявлены в питательной среде культуры с помощью РНГА или ИФА

3. Питательные среды для культур клеток, общие требования к ним.

Питательные среды предназначены для накопления выделения изучения сохранения микроорганизмов.По своей сущности пит. среды являются искусственной средой обитания микробов поэтомупри их составлении учитываются как потребности микроорганизмов в веществах необходимых для жизни так и физико-хим условия в к-ых микроорганизмы могут осуществлять обмен между клеткой и средой.для обеспечения разнообразных типов метаболизма микроорганизмов пит. среды должны соответствовать следующим требованиям:

1-содержать все элементы из к-ых строится клетка:макроэлементы и микроэлементы.Все элементы должны находиться в удобоусвояемых конкретных микроорганизмом соединениях.Источником углерода может быть разнообразные органические соединения:углеводы спирты орг кислоты а/к белки.Источником азота служит аммонийные соединения а/к белки пептиды.Источником других макросоединений являются другие неорганические соединения-соли фосфорной и др кислот.Микроэлементы поступают в питательную среду с органическими субстратами солями водой.Витамины и другие факторы роста вносят в среду в составе орг субстратов или в виде чистых веществ.

2-Иметь достаточную влажность не менее 20%воды

3-концентрация солей в среде должна обеспечивать изотонию т.е.концентрацию солей в микробной клетке.

4-Концентрация водородных ионов среды должны быть оптимальной для выращиваемого микроорганизмами диапазон Ph 4,5-8,5.

 5-Окислительно-востановительный потенциал среды должен соответствовать потребностям микроорганизма:для анаэробов-0,120-0,060В, для аэробов-более 0,080В

6-питательная среда должна быть стерильной. По составу питательные среды могут быть синтетическими и натуральными.Различают среды общего назначения(универсальные) и специальные пит среды.

Разлечают следующие виды специальных сред:

· элективные(избирателбные)

· дифференциально-диагностические

· консервирующие.

Избирателбность пит среды для определения видов микробов достигается путем создания оптимальных для них условий.

Билет № 17