Поможем в ✍️ написании учебной работы

Имя

Поможем с курсовой, контрольной, дипломной, рефератом, отчетом по практике, научно-исследовательской и любой другой работой

Выберите тип работыЧасть дипломаДипломная работаКурсовая работаКонтрольная работаРешение задачРефератНаучно - исследовательская работаОтчет по практикеОтветы на билетыТест/экзамен onlineМонографияЭссеДокладКомпьютерный набор текстаКомпьютерный чертежРецензияПереводРепетиторБизнес-планКонспектыПроверка качестваЭкзамен на сайтеАспирантский рефератМагистерская работаНаучная статьяНаучный трудТехническая редакция текстаЧертеж от рукиДиаграммы, таблицыПрезентация к защитеТезисный планРечь к дипломуДоработка заказа клиентаОтзыв на дипломПубликация статьи в ВАКПубликация статьи в ScopusДипломная работа MBAПовышение оригинальностиКопирайтингДругое

Нажимая кнопку "Продолжить", я принимаю политику конфиденциальности

Билет № 1

Генетика микроорганизмов. Особенности генетического аппарата бактерий. Фенотипическая и генотипическая изменчивость бактерий. Понятие и генной инженерии.

Микроорганизмы – это невидим невооружен глазом представители всех царств жизни: эукар(гриб, простейш), прокариот(эубактерии, бактер),вирусы.

Генетика микроорг различна в зависимости от их царств. У эукариот генетический аппарат представ ДНК содерж в ядре и митохондриях, у прокариот ядро отсутствует ,а генетич аппарат в виде нуклеоида ,у вирусов либо ДНК, либо РНК находится в кристаллич виде. Передача генетич. наследствен происходит в результат деления и кроссинговера и самоудвоения ДНК.

Особен генетич аппарата бактерий явл. то, что в отличии от эукариот у них отсутств ядро. Ген. аппар. представлен нуклеоидом . Нуклеоид сост из одной свернутой в клубок хромосомы в виде кольца (он гаплоиден).Бактер способ изменять массу свой ДНК, регулир в зависимости от условий обитания – это позволяет им регулировать скорость своего размнож. Спиральная ДНК намотана вокруг центральн особого класса РНК. Так же у них могут находится плазмиды –дополнительные генетические структуры (они определяют генетич резистентность к антибиотикам). Фенеотипическая изменчивость не предполагает изменений в генетическом аппарате клетки. Фенотипич модификации возникают под воздействием различных факторов внешней среды и обычно наблюдаются при росте и размножении микроба на питательных средах. Эти изменения не наследуются и утрачиваются с прекращением действия вызвавшего их фактора. Модификации могут касаться многих свойств микроорганизма.Фенотипическая и генотипическая изменчивость бактерий необходимы для перенесен неблагоприят условий, действия антибиотиков и иммунитета. Например: образование эндоспор, создание микроклимата, способность изменять антигенную структуру своей оболочки, при блоке антибиотиками одних ферментов заменять их другими, «выбрасывать» или не пропускать антибиотики и т. д.

Генная инженерия – наука об искусств создании необходимых человеку свойств живых существ путем изменения генетич модификаций.

Биология возбудителей холеры. Организация и проведение микробиологической диагностики холеры.

Возбудители холеры. сем-во Vibrionicae, р. Vibrio. Vibrio cholerae asiatika и V . cholerae eltor.

Холера характеризуется поражением тонкой кишки, нарушением водно-солевого обмена (диареей, обезвоживанием) и интоксикацией. Антропоноз. Особо опасная карантинная инфекция. Механизм заражения фекально-оральный, среди путей передачи преобладает водный, однако возможны алиментарный и контактно-бытовой пути.

Морф: гр«-» палочка

Ф-ры патог: экзотоксин (холероген)- нарушение водно-солевого обмена, цитотоксическое действие, вызывающее гибель эпителия тонкой кишки , эндотоксин- угнетение фагоцитоза, понижение кровяного давления; инфекционно-токсические явления, пили- адгезия к клеткам слизистой, фибринолизин, гиалуронидаза(ферменты агрессии)

Токсин приводит к массив потере воды через кишечник и сгущению крови с последующим образован тромбов. Основным методом определения явл. бак.анализ. Материалы: испражнения, рвотные массы, труп материал, смывы с предметов. Материал исследуется не позже, чем через 2 часа после взятия. Все посевы инкубир при темп 37+- 0,5 на1% пептонной воде 6-8ч. Методы диагностики: бактериоскопический (ориентировочный), бактериологический (основной). Для экспресс-диагностики холеры используют РИФ, ИФА, ПЦР, тест Ермоловой.

Профилактика: обеззораживание воды, вакцинация. Лечение: тетрациклин, хлорамфеникол и возмещение потери жидкости и электролитов (р-р Рингера-Ланка и д.р.)

Билет № 2

Билет № 3

Преципитирующие сыворотки

Преципитирующие сыворотки применяются для постановки реакций преципитации с целями диагностики некоторых инфекционных заболеваний, для определения природы неизвестного белка при условии, если его можно получить в коллоидном состоянии, в судебно-медицинской практике для распознавания видовой принадлежности крови, в санитарии, химии и т.д.
Реакция преципитации характеризуется чрезвычайно высокой чувствительностью и специфичностью. Она позволяет обнаружить ничтожные следы антигена (до разведения 1:100000 и выше). Действие преципитирующих сывороток на антиген сходно с действием агглютинирующих.
Преципитирующие сыворотки получаются путем искусственной иммунизации животного живыми или убитыми микробами, а также разнообразными лизатами и экстрактами микробных клеток. Путем искусственной иммунизации можно получить преципитирующие сыворотки к любому чужеродному белку растительного и животного происхождения, а также к гаптенам при иммунизации животного полноценным антигеном, содержащим данный гаптен.

Гемолитическая сыворотка

Гемолитическая сыворотка представляет собой сыворотку кролика, иммунизированного отмытыми эритроцитами барана. Гемолитическая сыворотка самостоятельно для серологического диагноза инфекционных болезней не применяется, а используется как составная часть гемолитической системы при постановке реакции связывания комплемента.
Иммунизация кроликов проводится отмытыми эритроцитами барана с интервалами в 48 часов. Каждый кролик получает в ушную вену 4 инъекции бараньих эритроцитов в повышающейся концентрации:

1 инъекция-3 мл 25 % взвеси бараньих эритроцитов,
2 инъекция-3 мл 50 % взвеси бараньих эритроцитов,
3 инъекция-3 мл 75 % взвеси бараньих эритроцитов,
4 инъекция-3 мл 75 % взвеси бараньих эритроцитов.

Через 6 дней после последней инъекции у кроликов берется кровь из ушной вены в два приема с интервалом в один день в количестве 60-80 мл. Кровь оставляется при комнатной температуре на 1-2 часа, затем при температуре 3-6 °С на 20-24 часа. На следующий день сыворотку отсасывают после центрифугирования в стерильную колбу.
Полученная гемолитическая сыворотка инактивируется 30 минут при 55-56 °С и консервируется добавлением сухой борной кислоты из расчета 3 % или карбол-глицерина из расчета 100 мл консерванта на 1 литр сыворотки.

Люминесцирующие сыворотки

Люминесцирующие сыворотки применяются для микробиологической диагностики ряда инфекционных заболеваний, а именно для обнаружения бактерии, вирусов, риккетсий и простейших, для определения локализации антигенов в организме, тканевых срезах и пр. Во многих микробиологических исследованиях широко используется метод люминесцирующих антител. Этот метод, основанный на сочетании иммунологической специфичности реакции между антигеном и антителом и люминесцентной микроскопии, позволяет обнаруживать и идентифицировать бактерии, вирусы, риккетсии, грибки, простейшие и растворенные антигены в микроскопическом препарате.

Сыворотки монорецепторные иммунные сывороткики, содержащие Ат к видовым или вариантным Аг. Получают гибридомной технологией (моноклоналъные Ат) или из поливалентных с-к путем адсорбции групповых Ат (адсорбированные с-ки). Применяют для идентификации микробных к-р.

Билет № 4

Билет № 5

Билет № 6

Билет № 7

1. Спорообразование у бактерий. Биологическое значение спор. Особенности структуры спор, методы окраски.

Бактерии – мельчайшие из организмов, обладающих клеточным строением; их размеры составляют от 0,1 до 10 мкм.

Споры- форма покоящихся фирмикутных бактерий с грам + типом стрения клеточной стенки. Споры образуются при неблагоприятных условиях (высушивание, диффецит пит. веществ и др факторы) внутри бактериальной клетки образуется одна спора- эндоспора. Образование спор способствует сохранению вида, и не является способом размножения, как у грибов. Спорообразующие бактерии рода Bacillus имеют споры, не превышающие диаметр клетки. Бактерии у которых размер споры превышает размер бактериальной клетки, называют клостридиями. Споры кислотоустойчивы поэтому окрашиваются по методу АУЕСКИ или по методу Циля-Нильсона в красный а вегетативная клетка в синий.

Билет № 8

1. Методы стерилизации в микробиологии, применяемая аппаратура.. Значение в практической работе лечебных и противоэпидемических учреждений.

Методы стерилизации.

Существует три основных метода стерили­зации: тепловой, лучевой, химической.

Тепловая стерилизация основана на чувстви­тельности микробов к высокой температуре. При 60 "С и наличии воды происходит денату­рация белка, деградация нуклеиновых кислот, липидов, вследствие чего вегетативные фор­мы микробов погибают. Споры, содержащие очень большое количество воды в связанном состоянии и обладающие плотными оболоч­ками, инактивируются при 160—170 °С.

Для тепловой стерилизации применяют, в основном, сухой жар и пар под давлением.

Стерилизацию сухим жаром осуществля­ют в воздушных стерилизаторах (прежнее название — «сухожаровые шкафы или печи Пастера»). Воздушный стерилизатор пред­ставляет собой металлический плотно закры­вающийся шкаф, нагревающийся с помощью электричества и снабженный термометром. Обеззараживание материала в нем произво­дят, как правило, при 160 °С в течение 120 мин. Однако возможны и другие режимы: 200 °С - 30 мин, 180 "С - 40 мин.

Стерилизуют сухим жаром лабораторную посуду и другие изделия из стекла, инстру­менты, силиконовую резину, т. е. объекты, которые не теряют своих качеств при высокой температуре.

Обработка паром под давлением в паровых стерилизаторах (старое название — «автокла­вы») - создается повышенное давление, что приводит к увеличению температуры кипения.2 атм — 121 °С — 15—20 мин. Время стерилиза­ции уменьшается при повышении атмосфер­ного давления, а следовательно, и температуры кипения (136 °С — 5 мин). Стерилизуют в автоклаве бульшую часть предметов: перевязочный материал, белье, коррозионно-устойчивые металлические инструменты, питательные среды, растворы, инфекционный материал и т. д.

Химическая стерилизация предполагает ис­пользование токсичных газов: оксида этиле­на, смеси ОБ (смеси оксида этилена и бро­мистого метила в весовом соотношении 1:2,5) и формальдегида. Эти вещества являются алкилирующими агентами, их способность в присутствии воды инактивировать активные группы в ферментах, других белках, ДНК и РНК приводит к гибели микроорганизмов.

Стерилизация газами осуществляется в присутствии пара при температуре от 18 до 80 °С в специальных камерах. В больницах используют формальдегид, в промышленных условиях — оксид этилена и смесь ОБ.

Лучевая стерилизация осуществляется либо с помощью гамма-излучения, либо с помо­щью ускоренных электронов.

Пастеризация-обеспложиварие многих пищепродуктов. Спор м/о не уничтожаются. проводят при 65-80С в течении 10-60мин

Факторы вирулентности

Факторы вирулентности	Биологический эффект
Ipa BCD-инвазины	Ipa (invasion plasmide antigen)-инвазины - белки наружной мембраны бактерий, которые прикрепляются к апикальной мембране M-клеток; вызывают апоптоз фагоцитов, лизис мембран эукариотических клеток, обеспечивая внутриклеточное и межклеточное распространение шигелл
Экзотоксин (шигатоксин)	Вызывает повреждение эндотелия, поражение почек с гемолитическим уремическим синдромом, нарушения водно-солевого обмена и ЦНС
Эндотоксин	Общая интоксикация, усиление перистальтики кишечника

Микробиологическая диагностика. 0сновной метод - бактериологический (с посевом на лактозо-содержащие среды), позволяющий идентифицировать вид, проводить внутривидовую идентификацию(определить серовар), определять его чувствительность к антибиотикам. При затяжном течении дизентерии можно использовать серологический метод (РНГА).

 

Шигеллы — кишечные патогены человека и приматов..

4 вида: Shigella dysenteriae , Shigellaflexneri , Shigella boydii и Shigella sonnei . Род образуют прямые неподвижные палочки, хемоорганотрофы, оксидаза-отрицательные, каталаза- положительные.аспространена повсеместно. Ественный природный резервуар шигелл — человек.

Основные механизмы передачи — фекально оральный и контактнобытовой.По морфологическим признакам шигеллы не отличимы от других представителей семейства Enterobacteriaeeae. Бактерии капсул не имеют, на твёрдых средах образуют гладкие (S-) и шероховатые (R-) колонии.

ДИАГНОСТИКА

Материалом для исследований служат испражнения.

1)Выполняют посев либо на дифференциально-диагностические среды Эндо и Плоскирева, либо на жидкую селенитовую среду накопления с последующим пересевом на дифференциально диагностические среды. 2)Определение антигенных свойств имеет эпидемиологическое значение. Об антигенной структуре судят по способности моно- и поливалентных антисывороток агглютинировать бактерии.

3)Для быстрого распознавания шигелл можно провести посев на агар Клиглера; бактерии ферментируют только глюкозу, не образуют газ при ферментации глюкозы .

4)Для выявления Аг шигелл в крови, моче и испражнениях используют РПГА, PC К, ИФА и реакцию коагглютинации (при исследовании мочи и испражнений). Для определения AT используют РПГА с соответствующими эритроцитарными диагностикумами и метод непрямой иммунофлюоресценции.

3. Методы бактериологического контроля за санитарным состоянием кухни (камбуза), столовой и продовольственного склада.

Санитарно-микробиологические исследования проводят:
а) при текущем санитарном надзоре за продовольственными объектами-
б) по эпидемиологическим показаниям (при расследовании пищевых отравлений и случаев инфекционных заболеваний);
в) при контроле качества дезинфекции.

способы отбора проб : тампонных смывов, отпечатков, агаровой заливки. Из них наиболее часто используют способ тампонных смывов.
Санитарно-микробиологический контроль основан на обнаружении в смывах бактерий группы кишечных палочек (БГКП) — показателей фекального загрязнения исследуемых предметов. Исследования на стафилококк, патогенные бактерии семейства кишечных, определение общей микробной обсемененноеTM проводят по показаниям.
Смывы с рук персонала, занятого обработкой сырых продуктов, забирают до начала работы. Смывы со специальной одежды, полотенец берут у поварского состава и лиц, соприкасающихся с чистой посудой и готовою. Предметами исследования являются: оборудование, инвентарь, посуда, специальная одежда и руки персонала.
Смывы берут с помощью стерильных увлажненных тампонов. Ватные тампоны на палочках, вмонтированных в пробирки с ватными пробками, заготовляют заранее в лаборатории
Смывы с крупного технологического оборудования и кухонного инвентаря берут с поверхности 100 см2.
В день взятия смывов в каждую пробирку с тампоном наливается стерильный раствора пептона или изотонического раствора натрия хлорида, чтобы тампон не касался жидкости. Перед взятием смыва тампон увлажняют наклонением пробирки или опусканием в жидкость. В процессе отбора смывов рекомендуется неоднократное смачивание тампонов.
После проведения смыва тампон вкладывают в ту же пробирку, погружая в жидкость. Смывы доставляются в лабораторию в течение 2 ч. Допускается не более 6 ч при температуре не выше +10°С.
В лаборатории производят посевы смывов на среды Кесслер с лактозой или КОДА и инкубируют при 37°С.
Через 18-24 ч из всех пробирок со средой Кесслер производят высев на секторы чашек со средой Эндо, со среды КОДА высев производят только в случае изменения окраски среды (из исходной фиолетовой до желтой или зеленой) или ее помутнения. Из колоний БГКП, готовят мазки, окрашивают по Граму, микроскопируют, идентифицируют по общепринятым тестам для БГКП. При оценке результатов санитарно-микробиологического обследования исходят из нормативов, что в смывах, взятых с объектов продовольственного назначения, БГКП должны отсутствовать.
Обнаружение БГКП в смывах с поверхностей чистых, подготовленных к работе предметов инвентаря, оборудования, рук и санитарной одежды персонала свиде-тельствует о нарушении санитарного режима.

Билет № 9

Открытие вирусов Д.И.Ивановским. Природа вирусов. Морфология и репродукция вирусов.

Д.И.Ивановский показал, что заболевание табака – табачная мозаика – может быть перенесено от больных растений к здоровым, если их заразить соком больных растений, предварительно пропущенным через специальный фильтр, задерживающий бактерии. Возбудитель мозаичной болезни называется Д. И. Ивановским то «фильтрующимися бактериями», то микроорганизмами, и это понятно, так как сформулировать сразу существование особого мира вирусов было весьма трудно. В 1898 году М. Бейеринк подтвердил данные Д.И.Ивановского и высказал гипотезу о том, что заболевание вызывается не бактерией, а принципиально новым, отличным от бактерий, инфекционным агентом. Он назвал его contagium vivum fluidum (жидкое заразное начало), другими словами – фильтрующийся вирус (термин «virus» - от лат. «яд», «ядовитое начало» - употребляли тогда для обозначения инфекционного начала любой болезни).

Гипотезы происхождения вирусов:

1.Вирусы потомки доклеточной формы жизни. 2.Вирусы - результат регрессивной эволюции одноклеточных организмов. 3.Вирусы произошли от определенных клеточных генов, приобревшие способность покидать клетку и в нее возвращаться.

Морфология вирусов:

Вирус находящиися внутри клетки-вирион. Выделяют:

Спир тип симметрии(рабдовирусы, вирусы гриппа, парагриппа, короновирусы),

Квазисфер.-кубический или икосаэдральн. тип симм,

Смешан. у т-четных бактериофагов(головка в виде многогранника, хвост в виде спирали).

Многие вирусы имеют суперкапсид-дополнительную оболочку сложных вирусов, или пеплос. Большинство вирусов, патогенны для человека,-сложные. Если у вируса нет суперкапсида-простые вирусы.

Репродукция вирусов: (ранняя и поздняя фазы)

Ранняя фаза включает: Адсорбция вириона на клетке , Проникновение в клетку-пенетрация ,Раздевание вириона .

Возбудитель чумы. Морфология, тинкториальные, культуральные и биохимические свойства, антигенная структура. Схема лабораторной диагностики чумы. Специфическая профилактика. Вклад отечественных ученых в изучение чумы.

Yersinia pestis относится к семейству Enterobacteriaceae, роду Yersinia, вызывает чуму - острую зооантропонозную природно-очаговую инфекцию. Чума характеризуется тяжелым течением с сильной интоксикацией, лихорадкой, поражением кожи, лимфатических узлов, легких и других органов, высокой летальностью. Относится к особо опасным, карантинным (конвенционным) болезням. Источником чумы являются около 250 видов диких животных, основное значение среди которых имеют грызуны (суслики, сурки и др.). Антропонозные очаги формируются вокруг больного легочной формой чумы. От животных к человеку возбудитель чаще всего передается через укусы блох.

Морфология

Y.pestis - мелкие (0,5 х 1,75мкм) грамотрицательные палочки овоидной формы с биполярной окраской. Неподвижные, спор не образуют. Могут иметь нежную капсулу.

Факультативные анаэробы. Психрофилы (оптимум роста иерсиний 28⁰С), хотя микробы могут расти в пределах от 2-40⁰С. Ферментативная активность высокая. Возбудитель имеет группу белково-полисахаридных и липо-полисахаридных антигенов: термостабильный соматический O-антиген и термолабильный капсульный, в том числе V- и W-антигены, с которыми связывают вирулентность бактерий. Другими факторами высокой вирулентности Y.pestis являются плазмокоагулаза, фибринолизин, эндотоксин, капсула. Y.pestis проявляет высокую цитотоксическую, антифагоцитарную и адгезивную активность, кодируемую плазмидными генами.

Микробиологический диагноз: РИФ, ПЦР, ИФА (ускоренные методы), а также, бактериоскопия, выделение чистой культуры и ее идентификация, биологическая проба на животных. Диагностику проводят в специальных лабораториях особо опасных инфекций.

 

 

Возбудитель чумы - Yersinia pestis . Открыт в 1894г швейцарским бактериологом А. Йерсеном.

Возбудители чумы представлены мелкими грамм – палочками, имеющими овоидную форму 1,5-0,5мкм. Жгутиков и спор нет.

Факторы патогенности:

Фракция1( F 1)-поверхн. гликопротеиновый капсульный аг защищает от фагоцитоза;

Мышиный токсин-особый белок антогонист адренергических рецепторов(вызывает шок и смерть)

V\W -антигены( V -фракция преставлена белком, W -липопротеином)защита от фагоцитоза

Активатор плазминогена-фермент протеаза, лизис сгустков фибрина,инакт. С3 иС5 компоненты коплемента.

Бактериоцины (пестицин1 и 2),антагонист других йерсиний и прочих бактерий

Метаболизм зависит от температуры, опт. 28, pH 6,9-7,1. Хорошо растет на обычных питат средах, для подавления микрофлоры- добавляют генцианвиолет. 1-сут.-на плотных питат средах-мелкие колонии-фаза битого стекла. Затем фаза платочков

Хорошо резист.-в трупе до полугода.

Диагностика в спец противочумных институтах, станциях, в ВС РФ-специальные противочумные отр. и отд. особоопасных инфекций ГСЭН а военных округов и флотов.

Диагностика- окр по Граму и Роман.-Гимзе. Р-я агглют., РНГ, РИФ, ИФА.

Б/Х свойства. По способности ферме6нтировать мелибиозу и глицерин выделяют биовары:

Orientalis (не фер-ют, встреч. повсемест.) ,Antigua (не фер-мелибиозу, но фер-глицерин: Центр Азия, Африка.) ,Medievalis (фер-ет,-Иран, Ср Азия)

Спец. Профил. - живой противочумной вакциной (штамм EV ).

Большой вклад-Д. Самойлович, Д. Заболотный, С. Златогоров.

Билет № 10

1. Основные возбудители госпитальных инфекций, факторы риска их развития; Наиболее распространенные механизмы формирования антибиотикоустойчивости микроорганизмов. Санитарно-бактериологический контроль, проводимый в госпитальных учреждениях

Спектор возбудителей внутрибольничных инфекции охватывает вирусы, бактерии, грибы и простейших, представленных наиболее вирулентными «госпитальными» штаммами (см таб.2. Основные возбудители внутрибольничных инфекции). Ежегодно их число увеличивается, преимущественно за счёт условно-патогенных микроорганизмов. Основные возбудители бактериальных инфекций – стафилококки, пневмококки, грамотрицательные энтеробактерии, псевдомонады и анаэробы. Ведущую роль играют стафилококки (до 60% всех случаев внутрибольничных инфекции), грамотрицательные бактерии, респираторные вирусы и гривы рода Candida.Факторы риска их развития 1) Внешние факторы 2)Микрофлора пациента

3)Инвазивные медицинские манипуляции, проводимые в стационаре4)Медицинский персонал

Типы антибиотикоустойчивости:1) природная(устой­чивость грамотрицательных палочек к бензилпенициллину или грибов - к антибактериальным препаратам.2) приобретенная: а) первичная; б) вторичная.Ген мех антибиотикорезистентности: 1) хромосомная- появ-ся единичные клетки-мутанты, устойчивые к данному антибиотику 2) плазмидная-появление R-плазмидФен прояв антибиотикорезистентности. 1) образование специфических ферментов, разрушающих данный антибиотик.(фермент р-лактамаза разрушает р-лактамное кольцо пенициллинов и цефалоспоринов)2) снижение проницаемости клеточной стенки для данного антибиотика, или нарушение транспортного механизма цитоплазмагической мембраны;3) формирование обходного пути метаболизма взамен поврежден­ного антибиотиком;4) изменение структуры мишени действия антибиотика;5) превращение бактерий в L-формыв обыч­ные формы.Об иссл являются:воздушная среда;различные объекты внешней среды;хирургический инструментарий;шовный материал;руки хирургов,мед персонал и кожа операционного поля. Взятие смывов производят стерильным ватным тампоном на палочках, вмонтированных в пробирки, или марлевыми салфетками размером 5x5 см. Для увлажнения тампонов в пробирки с тампонами наливают по 2,0 мл стерильного физиологического раствора.Посев в обязательном порядке в 3 пит среды:сахарный бульон Хоттингера (0,5 и 1% глюкоза);тиогликолевую среду;бульон Сабуро.

Морфология

Бруцеллы - мелкие
(0,5-0,7х0,6-1,5мкм), неподвижные, грамотрицательные кокковидные палочки. Капсул не образуют. Строгие аэробы, некоторые штаммы нуждаются в повышенной концентрации CO₂. Характерен медленный рост на средах (неделя и более).

Представители: B. melitensis, B. abortus, и B. suis имеют два общих поверхностных антигена: A и M. B.melitensis (типовой вид) содержит больше М-антигена. B. abortus и B. suis - больше А-антигена. Наиболее вирулентным для человека является B.melitensis. На основании молекулярно-генетических методов идентификации появились данные, что существует один вид возбудителя бруцеллеза - B.melitensis, а остальные виды являются биоварами.

 

 

Характеристика бруцелл

Род	Виды	Болезнь
Brucella	Brucella melitensis (биовары 1-3)	Бруцеллез коз, овец, человека
	Brucella abortus (биовары 1-6,9)	Бруцеллез крупного рогатого скота, человека
	Brucella suis (биовары 1-5)	Бруцеллез свиней, человека
	Brucella canis	Бруцеллез собак
	Brucella ovis	Бруцеллез овец (эпидидимит у баранов)
	Brucella neotomae	Бруцеллез крыс, морских свинок, мышей

Билет № 11

Билет № 12

Микробиология сибирской язвы. Морфология, тинкториальные, культуральные и биохимические свойства возбудителя. Антигенная структура. Токсины. Схема лабораторной диагностики. Специфическая профилактика.

Bacillus anthracis (от греч. anthrax - злокачественный карбункул) - вызывает сибирскую язву - острую зоонозную инфекцию, характеризующуюся тяжелой интоксикацией, поражением кожи, лимфатических узлов и других тканей. Человек заражается контактным путем (при уходе за больными животными, убое, переработке животного сырья), реже алиментарным путем (при употреблении мяса и других животноводческих продуктов), воздушно-пылевым путем. Резервуар и источник инфекции: крупный и мелкий рогатый скот, лошади, верблюды, свиньи. Споры B.anthracis длительно сохраняются в почве и могут служит источником инфекции.

Морфология

Грамположительные спорообразующие прямые палочки (0,5-2,5 х 1,2-10 мкм) с обрубленными или слегка закругленными концами, образующие цепочки. Неподвижны. Аэробы или факультативные анаэробы. Могут образовывать капсулы. Споры располагаются центрально. Они чрезвычайно устойчивы и сохраняются в окружающей среде десятки лет.

 

Билет № 13

Микробиология дифтерии. Морфология, тинкториальные, культуральные и биохимические свойства возбудителей. Антигенная структура. Токсигенность, свойства токсина и методы его выявления. Схема лабораторной диагностики. Специфическая профилактика и терапия.

C. diphtheriae - палочковидные бактерии; вызывают дифтерию (греч. diphtheria - кожа, пленка) - острую инфекцию, характеризующуюся фибринозным воспалением в зеве, гортани, реже в других органах, и явлениями интоксикации (поражение сердечно-сосудистой, кортико-адреналовой систем и периферических нервов). Механизм передачи - респираторный.

Полиморфные прямые или слегка изогнутые палочки (0,3-0,8 х 1,5-8мкм), иногда с булавовидными концами (род Corynebacterium от греч. koryne - булава). Располагаются в виде буквы V. Грамположительные. По полюсам клеток видны метахроматические зерна полиметафосфата (зерна волютина), выявляемые при окраске метиленовым синим (темно-бордовые) или по Нейссеру (темно-коричневые). Неподвижны. Факультативные анаэробы.

C.diphtheriae могут быть токсигенными (продуцирующими экзотоксин) и нетоксигенными. Образование экзотоксина зависит от наличия в бактериях профага, несущего tox-ген, кодирующий образование токсина При заболевании все изоляты тестируются на токсигенность - продукцию дифтерийного экзотоксина.

Факторы вирулентности Corynebacterium diphtheriae

 

Фактор вирулентности	Биологический эффект
Белковый экзотоксин (состоит из A и B субъединиц)	Нарушает синтез белка, поражая клетки миокарда, надпочечников, нервных ганглиев
Гликолипид (6-6'-диэфир-трегалозы)	Нарушает фагоцитоз
Гиалуронидаза	Нарушают проницаемость ткани
Нейраминидаза

Микробиологическая диагностика.Бактериоскопический метод (имеет ориентировочное значение): мазок окрашивают щелочной метиленовой синькой Леффлера или уксуснокислой толуидиновой синькой, а другой мазок - по Граму. Зерна волютина метахроматически окрашиваются метиленовым синим в темно-бордовый цвет (клетка окрашивается в синий цвет). Бактериологический метод: Посев на среду Клауберга II, хинозольную среду Бучина, модифицированную среду Тинсдаля (цистин-теллурит-сывороточная среда), кровяной агар, на плотную сывороточную среду для выявления продукции цистиназы (проба Пизу - коричневый ореол вокруг посева "уколом"), на среды Гисса, на среду для определения токсигенности возбудителя (преципитация в геле) и др. Молекулярно-генетический метод: ПЦР.
Специфическая профилактика. В качестве вакцины применяют дифтерийный анатоксин, входящий в состав препаратов АКДС (адсорбированная коклюшно-дифтерийно-столбнячная вакцина), АДС и АД. Препарат вводится грудным детям, начиная с трехмесячного возраста. Ревакцинацию проводят с помощью АДС. Людям ранее иммунизированным, но не имеющим достаточно напряженного антитоксического иммунитета, при контакте с больными вводят дифтерийный анатоксин. Ранее неиммунизированным - дифтерийный анатоксин + антитоксическую сыворотку.
Для лечения дифтерии используют антитоксическую противодифтерийную сыворотку.

 

 

Дифтерия — острая инф болезнь, харак­ся фибринозным воспалением в зеве, гортани, Возбуд-Corynebacterium diphtheriae.

Таксономия. отделFirmicutes, род Corynebacterium.

Морф и тинкториальные св-ва. характеризуется полиморфизмом: тонкие, слегка изогнутые палочки Бактерии нередко располагаются под углом друг к другу. не образуют спор, не имеют жгутиков, выявляют микрокапсулу. Характерная особенность - наличие на концах палочки зерен волютина (обусловливает булавовидную форму). Возбудитель дифтерии по Граму окрашивается положи­тельно.Культ Св-ва. Факультативный анаэроб,. растет на спец пит средах, например на среде Клауберга (кровяно-теллуритовый агар), даёт колонии 3 типов: а) крупные, серые, с неровными краями, радиальной исчерченностью, напоминающие маргаритки; б) мелкие, чер­ные, выпуклые, с ровными краями; в) похожие на первые и вторые.3 биологических варианта C.diphtheriae: gravis, mitis и промежуточный intermedius.

Фермент активность. Высокая. Ферментируют глк и мальтозу с образованием кислоты, не разлагают сахарозу, лактозу и маннит. Не продуцируют уреазу и не образуют индол. Продуцирует фермент цистиназу, расщепляющую цистеин до H2S. Образует каталазу, сукцинатдегидрогеназу.

Антигенные св­ва. О-антигены – термостабильные полисахаридные, расположены в глубине клеточной стенки.К-антигены – поверхностные,термолабильные, серовароспецифические.

Факторы патогенности.Экзотоксин, нарушающий синтез белка и поражающий в связи с этим клетки миокарда, надпочечников, почек, нервных ганглиев. Способность вырабатывать экзотоксин обусловлена наличием в клетке профага, несущего tох-ген, ответственный за образование токсина.

Резистентность.Устойчив к высушиванию, действию низких температур,

 Эпидемиология. Источник дифтерии — больные люди Заражение происходит чаще через дыхательные пути. Основной путь передачи воздушно-капельный, возможен и контактный путь — через белье, посуду

.Патогенез. Бактерии вы­деляют экзотоксин, попадающий в кровь, — развивается токсинемия. Токсин поражает миокард, почки, надпочечники, нервную систему

.Клиника. Инкуба период от 2 до 10 дней. начинается с повышения температуры тела, боли при глотании, появления пленки на миндалинах, увеличения лимфатических узлов. Отека гортани, разви­вается дифтерийный круп, который может привести к асфик­сии и смерти.Осложнения токсический миокардит, паралич дыхательных мышц.

Иммунитет. стойкий, напряженный антитоксичный иммунитет.

Микроб диагностика. пленку и слизь из зева и носа. 1)бактериоскопического метода. 2)бактериологический(основной): посев на среду Клаубера II), на плотную сывороточную среду, на среды Гисса, на среду для определения токсигенности возбудителя.. Для ускоренного обнаружения РНГА,РНА,РИА ИФА.

Лечение. Введение специфической антитоксической противодифтерийной лошадиной жидкой сыворотки.

Профил Ассоциированные вакцины: АКДС (абсорбированная коклюшно – столбнячная вакцина), АДС(абсорбированный дифтерийно - столбнячный анатоксин).

Билет № 14

Билет № 15

Микробиология лептоспирозов. Морфология, тинкториальные и культуральные свойства возбудителя. Антигенная структура и классификация лептоспир. Схема лабораторной диагностики. Специфическая профилактика.

Лептоспиры (Leptospira) - спиральные бактерии (спирохеты) рода Leptospira, состоящего по антигенным свойствам из 2 видов (L.biflexa и L.interrogans). L.biflexa - свободно живущий сапрофит, не вызывающий у человека заболеваний, L.interrogans патогенен для многих животных и человека. Патогенные представители вызывают лептоспироз - зоонозную инфекцию, сопровождающуюся поражением капилляров печени, почек, ЦНС; развитием геморрагий, желтухи и лихорадки. Резервуар: грызуны, крупный рогатый скот, свиньи, собаки; возбудители выделяются с мочой в воду и почву. Пути передачи: водный, алиментарный, контактный. На основании ДНК-ДНК гибридизации выделено 7 поименованных видов патогенных лептоспир (L.interrogans, L.noguchii, L.weilii, L.santarosai, L.borgpetersenii, L.kirschneri, L.inadai) и 5 непоименованных (L.genomospecies 1, 2, 3, 4, 5). Типовой вид - L.interrogans.

Лептоспиры - тонкие спиральные бактерии размером 0,1 х 6-24мкм, слабо воспринимающие анилиновые красители. По Романовскому-Гимзе красятся в розовый цвет. Образуют 15-20 мелких завитков. Концевые части лептоспир крючкообразно загнуты в виде букв С или S, с пуговчатым утолщением на концах. Встречаются также бескрючковые формы лептоспир.

Микробиологическая диагностика. Микроскопия в темном поле мазков крови: метод мало чувствителен и недостаточно специфичен. Бактериологический метод: выделение гемокультуры в первые дни заболевания, уринокультуры и культуры из спинномозговой жидкости на 2 - 3 нед. Культивируют на средах с сывороткой при 28-30 С. Серологический метод: РСК, реакция микроагглютинации и лизиса с сывороткой пациента и стандартным набором микроорганизмов. Биологический метод: внутрибрюшинное заражение морских свинок кровью, взятых в первые дни заболевания; биопроба на кроликах-сосунках. Молекулярно-генетический метод: ПЦР для обнаружения лептоспир в исследуемом материале.

Специфическая профилактика. По эпидпоказаниям иммунизируют поливалентными вакцинами, содержащими антигены наиболее часто встречающихся сероваров лептоспир.

 

 

Лептоспиры являются возбудителями зоонозной бактериальной инфекции, характеризующейся волнообразной лихорадкой, интоксикацией, поражением капилляров печени, почек, ЦНС.семейство Leptospiraceae, poд Leptospira.Морф. тонкие спирохеты, с изогнутыми концами. Двигательный аппарат - фибриллы. Легко различимы при микроскопии в темном поле и фазово-контрасте. Цист не образуют.Культ и биохим св-ва. Аэробы. Источником углерода и энергии служат липиды. Каталаза- и оксидазаположительны. Культивируются на питательных средах, содержащих сыворотку или сывороточный альбумин, при темпера­туре 30С. Особенность роста на жидкой питательной среде — отсутствие помутнения. Делятся поперечным делением. Растут медленно. Цист не образуют.Антигенная структура. Содержат общеродовой антиген белковой природы, выявляемый в PCК, а также вариантоспецифический поверхностный антиген липополисахаридной природы, выявляемый в реакции агглютинации. Таксономическим критерием для лептоспир служит антигенный состав. Основным таксоном является серовар. Резистентность. L. interrhogans чувствительна к высыханию, нагреванию, низким зна­чениям рН, дезинфицирующим веществам. При нагревании до 56С погибает в течение 25—30 мин. Кипячение убивает микроб мгновенно.Патогенез и клиника Инкуб. период составляет 7—10 дней. Проникнув в организм, микроб с кровью разносится к органам ретикулоэндотелиальной системы (печень, почки), где размножается и вторично поступает в кровь, что совпадает с началом болезни.Иммунитет: Стойкий, гуморальный, серовароспецифический .Микробиологическая диагностика. Материа­лом для исследования служат кровь, спин­номозговая жидкость, моча, сыворотка кро­ви в зависимости от стадии заболевания. 1)бактериоскопический (обнаружение лептоспир в темнопольном микроскопе), 2)бактериологический 3)серологи­ческие методы (РА, РСК), а также применяют ПЦР. 4)Биопробу на кроликах.Профилактика и лечение. Специфическая про­филактика проводится вакцинацией по эпидемическим показаниям убитой нагреванием, корпускулярной вакциной, содержащей 4 основных серогруппы возбудителя. Для лечения используют антибиотики (пенициллин, тетрациклин) в сочетании с лептоспирозным гетерологичным иммуноглобулином.

Билет № 16

Билет № 17

Билет № 18

Билет № 19

Вирус бешенства - РНК-содержащий вирус, относится к семейству Rhabdoviride, роду Lyssavirus, включающему еще 5 других вирусов (Lagos, Mocola, Duvenhage, Kotonkan, Obodhiang), выделенных от различных животных, насекомых в Африке и сходных с вирусом бешенства. Вызывает бешенство (Rhabies, синоним - водобоязнь, гидрофобия), развивающееся после укуса или ослюнения раны инфицированным животным. Поражается центральная нервная система с развитием симптомов возбуждения, параличом дыхательной и глотательной мускулатуры; заканчивается летально.

Различают два вируса бешенства: дикий (уличный) вирус, циркулирующий среди животных, патогенный для человека; фиксированный (virus fixe), полученный Л.Пастером в качестве антирабической вакцины многократным пассированием дикого вируса через мозг кроликов, утративший патогенность для человека, не образующий включений, не выделяющийся со слюной. Оба вируса идентичны по антигенам.

Схема строения вируса бешенства

Вирион имеет форму пули, размером 75-180нм; состоит из сердцевины (рибонуклеопротеина спиральной симметрии и матриксного белка), окруженной липопротеиновой оболочкой.
Липопротеиновая оболочка изнутри выстлана М-белком (англ. matrix), а снаружи от нее отходят шипы гликопротеина G (длина 5-10нм, диаметр 3нм). Гликопротеин G отвечает за адсорбцию и внедрение вируса в клетку, обладает антигеннными (типоспецифический антиген) и иммуногенными свойствами. Антитела к нему нейтрализуют вирус и выявляются в РН. Рибонуклеопротеин состоит из однонитевой линейной минус РНК и белков: N-белок (англ. nucleocapsid), укрывающий как чехол геномную РНК; L- (англ. large) и NS-белок, являющиеся полимеразой вируса. Рибонуклеопротеин является группоспецифическим антигеном; выявляется в РСК, РИФ, РП.

Тельца Бабеша-Негри (цитоплазматические включения)

Вирус культивируют путем внутримозгового заражения лабораторных животных (кроликов, белых мышей, крыс, хомячков, морских свинок, овец и др.) и в культуре клеток: почек хомячка; нейробластомы мыши; фибробластов человека, куриного эмбриона; Vero-клетки почки обезьяны и др. В нейронах головного мозга, зараженных животных образуются цитоплазматические включения, содержащие антигены вируса. Эти включения впервые были описаны В.Бабешом (1892г.) и А.Негри (1903г.) и названы тельцами Бабеша-Негри (эозинофильные включения вируса овальной формы размером 1-15 мкм, состоящие из вирусного рибонуклеопротеина).

Микробиологическая диагностика. Постмортальная диагностика: обнаружение телец Бабеша-Негри в мазках, срезах из гиппокампа, пирамидальных клеток коры большого мозга или клеток Пуркинье мозжечка (окраска по Романовскому-Гимзе, Манну, Туревичу, Муромцеву); выделение вируса из мозга и подчелюстных слюнных желез путем интрацеребрального заражения белых мышей-сосунков. Вирус обнаруживают в ИФА, в реакции нейтрализации вируса антирабическим иммуноглобулином (на мышах).
Прижизненная диагностика: 1) выявление вируса с помощью РИФ в отпечатках роговицы, биоптатах кожи; 2) выделение вируса из слюны, цереброспинальной и слезной жидкости путем интрацеребрального заражения мышей-сосунков. 3) выявление антител в РСК, ИФА, РН, РПГА.
Специфическая профилактика. Вакцинацию проводят концентрированной культуральной антирабической вакциной, инактивированной УФ- или гамма-лучами: 1) условный курс прививок – 2-4 иньекции вакцины (с 10-дневным наблюдением за укусившим животным); 2) безусловный курс, согласно инструкции. Разрабатывается генно-инженерная вакцина, содержащая гликопротеин G вируса.

 

Вирусология бешенства. Методы лабораторной диагностики. Профилактика. Специфическая вакцинация.

Таксономия: возбудитель бешенства относится к семейству Rhabdoviridae, роду Lyssavirus.

Морфология: вирион имеет форму размером 180 нм. Геном представлен РНК. Состоит из нуклеокапсида, снаружи покрыт оболочкой с шиповидными образованиями. Различают 2 вируса бешенства: дикий вирус, циркулирующий среди животных, патогенный для человека; фиксированный – не патогенный для человека.

Культивирование: вирус культивируют путем внутримозгового заражения лабораторных животных (мышей, крыс) и в культуре кл-к: фибробластов человека, куриного эмбриона. В нейронах головного мозга зараженных животных образуются цитоплазматические включения, содержащие АГ вируса (тельца Бабеша-Негри-эозинофильные включения).

Резистентность: вирус бешенства неустойчив: быстро погибает под действием солнечных и УФ-лучей, а также при нагревании до 60 градусов. Чувствителен к дезинфицирующим веществам, жирорастворителям, щелочам и протеолитическим ферментам.

Эпидемиология: источниками инфекции в природных очагах явл. волки, грызуны. Вирус бешенства накапливается в слюнных железах больного животного и выделяется со слюной. Животное заразно в последние дни инкубационного периода (за 2-10 дней до клинических проявлений болезни). Механизм передачи возбудителя – контактный при укусах. Иногда заболевание развивается при употреблении мяса больных животных или при трансплантации инфицированных тканей. У собаки после инкубационного периода (14 дн.) появляются возбуждение, обильное слюнотечение, рвота. Она грызет место укуса, бросается на людей, животных. Через 1-3 дня наступают паралич и смерть животного.

Патогенез и клиника: вирус, попав со слюной больного животного в поврежденные наружные покровы, реплицируется и персистирует в месте внедрения. Затем возбудитель распространяется по аксонам периферич. нервов, достигает кл-к ГМ и СМ, где размножается. Кл-ки претерпевают дистрофические, воспалительные и дегенеративные изменения. Размножившийся вирус попадает из мозга по центробежным нейронам в различные ткани, в слюнные железы. Инкубационный период у человека при бешенстве – от 10 дней до 3 месяцев. В начале заболевания появляются недомогание, страх, беспокойство, бессонница, затем развиваются рефлекторная возбудимость, спазматические сокращения мышц глотки и гортани.

Иммунитет: человек относительно устойчив к бешенству. Постинфекционный иммунитет не изучен, т.к. больной обычно погибает. Введение людям, укушенным бешеным животным, инактивированной вакцины вызывает выработку АТ, интерферонов и активацию клеточного иммунитета.

Диагностика: обнаружение телец Бабеша-Негри в мазках-отпечатках или срезах из ткани мозга, а также выделение вируса из мозга и подчелюстных слюнных желез. Тельца Бабеша-Негри выявляют методами окраски по Романовскому – Гимзе. Вирусные АГ в кл-х обнаруживают с помощью РИФ. Выделяют вирус из патологического материала путем биопробы на мышцах: заражают интрацеребрально. Идентификацию вирусов проводят с помощью ИФА. Прижизненная диагностика основана на исследовании: отпечатков роговицы, биоптатов кожи с помощью РИФ; выделении вируса из слюны, цереброспинальной и слезной жидкости путем интрацеребрального инфицирования мышей. Возможно определение АТ у больных с помощью РСК, ИФА.

Лечение: симптоматическое, эффективное лечение отсутствует.

Профилактика: 1)антирабическая люминесцирующая сыворотка; 2)антирабический гамма-глобулин, приготовленный из крови лошадей, иммунизированных фиксированным вирусом бешенства; 3)антирабическая инактивированная культуральная вакцина, полученная путем накопления вируса бешенства в первичной культуре кл-к сирийского хомяка или перевиваемых диплоидных кл-к легких человека. 

Билет № 20

Билет № 21.

Ортомиксовирусы (сем. Orthomyxoviridae от греч. orthos-прямой, myxa - слизь ) - семейство РНК-содержащих вирусов, обладающих сродством к муцину. Содержит вирусы гриппа типа А, поражающие человека и некоторые виды животных, и вирусы гриппа типов B и C, патогенные только для человека.

 

 

Характеристика семейства ortomyxoviridae

 

 

Род	Представители	Свойства вирусов
Influenza- virus	Influenzavirus тип A	Вирионы плеоморфные (диаметр 80-120 нм). Имеют оболочку и спиральный нуклеокапсид. Геном - однонитевая фрагментированная минус РНК. Синтез вирусной РНК - в ядре. Сборка вируса - в цитоплазме. Выход из клетки - почкованием.	Электронограмма вируса гриппа
	Influenzavirus тип B
	Influenzavirus тип C

Структура и схема строения вируса гриппа

Вирионы плеоморфные: имеют сферическую форму, диаметр 80-120 нм; могут встречаться палочковидные и нитевидные формы. Нуклеокапсид спиральный; содержит однонитевую, фрагментированную (8 фрагментов у типов A, B и 7 фрагментов у типа C), минус РНК, связанную с капсидными белками. Вирион окружен оболочкой, на которой выступают гликопротеиновые шипы - гемагглютинин (H) и нейраминидаза (N). Вирусы гриппа типа А человека представлены тремя гемагглютининами (H1, H2, H3) и двумя нейраминидазами (N1,N2). Гемагглютинины выявляются в реакциях гемагглютинации и гемадсорбции.

 

Различают 4 капсидных белка: 1) нуклеопротеин (NP), выполняющий структурную и регуляторную роль; 2) белок PB1-транскриптаза; 3) PB2-эндонуклеаза; 4) белок PA-репликаза. Нуклеокапсид окружен матриксным (М1) и мембранным (М2) белками: М1-белок взаимодействует с нуклеокапсидом и оболочкой. М2-белок формирует мембранный канал. Белки M1, M2 и NP типоспецифичны и используются для дифференциации A, B, и C типов вируса.

Репликация Influenzavirus тип A

Вирус, адсорбируется на мембране клетки в результате взаимодействия гемагглютинина с сиаловой кислотой поверхности клетки. Проникновение вируса в клетку происходит путем эндоцитоза - поглощения в покрытых везикулах (1) и перемещения в эндосому. После подкисления среды, оболочка вируса сливается с мембраной эндосомы (2). Освободившийся в цитоплазм клетки рибонуклеопротеин, состоящий из фрагментированной РНК и белков (NP,PB1, PB2, PA), проникает в ядро (3).Геномная минус-нить РНК трансформируется вирусной РНК-зависимой РНК-полимеразой в неполные и полные плюс-нити. Неполные плюс-нити являются иРНК для синтеза вирусных белков (5-7), а полные плюс-нити (4) - матрицей (промежуточная стадия) для синтеза геномных минус-нитей РНК (9). В цитоплазме клеток появляются неструктурные компоненты NS1 и NS2 (5). Капсидные белки (6) вируса (NP, PB1, PB2, PA) и белок M (7) синтезируются в цитоплазме на свободных полирибосомах. При этом капсидные белки перемещаются из цитоплазмы в ядро (8), где связываются с синтезированной геномной РНК, образуя рибонуклеопротеин (нуклеокапсид), мигрирующий из ядра в цитоплазму клетки (9). Белок M (10) движится к внутреннему слою мембраны клетки.Гемагглютинин (H) и нейраминидаза (N) синтезируются на рибосомах, связанных с мембранами эндоплазматического ретикулума. Затем они гликозилируются, транспортируются и превращаются в шипы, встроенные снаружи в мембрану клетки (напротив белка M, находящегося под мембраной). Гемагглютинин (H) подвергается протеолитическому нарезанию на HA1 и HA2. Выход вируса из клетки происходит почкованием.Сформированный нуклеокапсид, проходя через мембрану клетки, окружается белком М и измененной мембраной клетки, содержащей гемагглютинин (H) и нейраминидазу (N).

Микробиологическая диагностика. 1) Вирус выделяют из носоглоточного смыва или слизи после 48-72 ч. подращивания в культуре тканей или в амниотической полости куриного эмбриона. Для идентификации вируса применяют РИФ, РТГА. 2) Серологический метод: с помощью РТГА, РСК, ИФА определяют 4-х кратное увеличение титра антител в сыворотке крови больного.
Специфическая профилактика. Применяются различные вакцины: живые аттенуированные, убитые цельновирионные, субвирионные и субъединичные, содержащие только гемагглютинин и нейраминидазу.

 

Семейство ортомиксовирусов. Характеристика вирусов гриппа: морфология, репродукция, антигенная характеристика. Схема лабораторной диагностики. Специфическая профилактика.

Вирусы гриппа типов (сероваров)А,В и С относятся к семейству ортомиксовирусов (от греч. «ортос» - правильный, «микса» - слизь). Вирусы трипа типа А поражают человека, животных и птиц. Вирусы гриппа типов В и С патогенны только для людей. Вирус гриппа имеет сферическую форму, диаметр составляет 80-120 нм. Реже встречается нитевидные формы. Спиральносимметричный нуклеокапсид представляет собой рибонуклеопротеиновый тяж (РНП), уложенный в виде двойной спирали, кот. составляет сердцевину вириона. Сердцевина окружена мембраной, состоящей из белка М, кот. соединяет РНП с двойным липидным слоем внешней оболочки и шиповидными отростками, состоящими из гемагглютинина и нейраминидазы. Вирионы содержат около 1% РНК, 70% белков, 24% липидов и 5% углеводов. Геном вируса представлен минус-нитевой фрагментированной молекулой ДНК. Вирусы гриппа А,В и С отличаются друг от друга по типоспецифическому АГ, ассоциированному с РНП и М-матриксным белком, стабилизирующим структуру вириона. Более узкую специфичность вируса типа А детерминируют два др. поверхностных АГ – гемагглютинин Н и нейраминидаза N. Гемагглютинин явл. сложным гликопротеином, обладающим протективными свойствами. Изменчивость гемагглютинина и нейраминидазы определяет антигенный дрейф и шифт вирус гриппа. Антигенный дрейф – незначительные изменения Н-АГ, обусловленные точечными мутациями в гене, контролирующем его синтез. Это выражается в изменении свойств гемагглютинина, что ведет к смене подтипа гемагглютинина или нейраминидазы, а иногда обоих АГ, появляются новые антигенные варианты вируса, порождающие эпидемии. Вирусы гриппа культивируются в куриных эмбрионах и культурах кл-к. Первичная репродукция вируса происходит в эпителиальных кл-к дыхательных путей, через слизистую оболочку вирус попадает в кровь, вызывая вирусемию. Вирус гриппа быстро разрушается под действием температуры выше 56 градусов, УФ – изулчения, дезинфектантов, детергентов. Для профилактики гриппа используют ремантадин, кот. подавляет репродукцию вируса гриппа типа А. Для пассивной профилактики применяют противогриппозный иммуноглобулин человека, полученный из сыворотки крови доноров, иммунизированных гриппозной вакциной. Основным методом выделения вируса гриппа из носоглоточных смывов больных явл. заражение развивающихся 10-11-дневных куриных эмбрионов в амниотическую полость с последующей инкубацией при 35 градусов в течение 3 дней. При вскрытии зараженных эмбрионов определяют наличие вируса в реакции гемагглютинации с 1% взвесью эритроцитов кур в аллантоисной жидкости, а после ее сбора – амниотической; затем эти жидкости эмбриона с положительной гемагглютинацией смешивают и титруют в развернутом ряду в реакции гемагглютинации.

3. Специфическая индикация ПБА (патогенных биологических агентов). Схема и методы.

Специфическая индикация – определение с помощью лабораторных методов микробиологического анализа вида микроба, использованного противником в качестве средства (агента) бактериального нападения.

Специфическая индикация осуществляется в два этапа:

в сокращённом объёме, в полном объёме.

ЛАБОРАТОРНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ при ИНДИКАЦИИ БС проводятся в следующей очередности:

регистрация и сортировка всех поступающих в лабораторию проб;

первичная обработка и подготовка материала для анализа;

исследование материалов проб поэтапно (в сокращённом, в полном объёме);

Билет № 22

Билет № 23

1. Понятие о чувствительности микроорганизмов к антибиотикам. Методы определения чувствительности бактерий к антибиотикам. Значение для практической медицины.

Понятие о чувствительности микроорганизмов к антибиотикам. Методы определения чувствительности бактерий к антибиотикам. Значение для практической медицины.

Антибиотики – это продуцируемы живыми организмами вещества, способные избирательно убивать микроорганизмы или подавлять их рост и размножение.

Микроорганизмы распределяют на группы по степени чувствительности к антибиотикам:

1 группа – «чувствительные» микроорганизмы, когда обычно применяемые дозы антибиотика достаточны для достижения лечебного эффекта;

2 группа – «среднечувствительные» микроорганизмы, когда только повышенные дозы антибиотика могут обеспечить лечебный эффект;

3 группа – «умеренно устойчивые» микроорганизмы, когда лечебный эффект может быть достигнут только при возможности концентрации препарата в очаге или введении непосредственно в очаг инфекции;

4 группа – «устойчивые» микроорганизмы, когда нельзя рассчитывать на лечебный эффект.

Методы:

1.Диффзионный метод: с использованием дисков с антибиотиками; с помощью тестов.

2.Методы разведения: разведение в жидкой питательной среде (бульоне); разведение в агаре.

При определении чувствительности диско-диффузионным методом на поверхность агара в чашке Петри наносят бактериальную суспензию определенной плотности и затем помещают диски, содержащие определенное количество антибиотика. Диффузия антибиотика в агар приводит к формированию зоны подавления роста микроорганизмов вокруг дисков. После инкубации чашек в термостате при температуре 35-37 градусов в течение ночи учитывают результат путем измерения диаметра зоны вокруг диска в миллиметрах.

Определение чувствительности микроорганизма с помощью Е-теста проводится аналогично тестированию диско-диффузионным методом. Но вместо диска с антибиотиком используют полоску Е-теста, содержащую градиент концентраций антибиотика от максимальной к минимальной. В месте пересечения эллипсовидной зоны подавления роста с полоской Е-теста получают значение минимальной подавляющей концентрации (МПК).

Методы разведения основаны на использовании двойных последовательных разведений концентраций антибиотика от максимальной к минимальной. При этом антибиотик в различных концентрациях вносят в жидкую питательную среду (бульон) или в агар. Затем бактериальную суспензию опред. плотности помещают в бульон с антибиотиком или на поверхность агара в чашке. После инкубации в течение ночи при температуре 35-37 градусов проводят учет полученных результатов. Наличие роста микроорганизма в бульоне (помутнение бульона) или на поверхности агара говорит о том, что данная концентрация антибиотика недостаточна, чтобы подавить его жизнеспособность. По мере увеличения концентрации антибиотика рост микроорганизма ухудшается.

Распространение риккетсий

Представители Болезни людей Резервуар Переносчик

Группа сыпного тифа

R. prowazekii Эпидемический сыпной тиф (вшивый) Человек Вши R. typhi Эндемический крысиный (блошинный) сыпной тиф Крысы, мыши Блохи R. felis Калифорнийский крысиный тиф (тиф кошачьих блох) Опоссумы Блохи

Группа пятнистых лихорадок (клещевых риккетсиозов)

R. rickettsii Пятнистая лихорадка скалистых гор Грызуны Клещи R. conorii Марсельская (средиземноморская) лихорадка Клещи, грызуны Клещи R. australis Квинслендский клещевой тиф Клещи, грызуны Клещи R. akari Везикулярный осповидный риккетсиоз Грызуны Клещи R. sibirica Североазиатский клещевой риккетсиоз Суслики, хомяки, мыши, клещи Клещи R. japonica Японская восточная пятнистая лихорадка Клещи Клещи R. honei Пятнистая лихорадка острова Флиндерс Клещи, грызуны Клещи

Микробиологическая диагностика. Для диагностики риккетсиозов обычно применяют серологические реакции. Многие риккетсии имеют общий антиген, близкий к антигену некоторых штаммов протея. Поэтому для предварительной диагностики использовали реакцию Вейля-Феликса, в которой используют диагностикум из антигенов Proteus mirabilis. Для подтверждения диагноза применяют непрямой метод РИФ, реакцию агглютинации риккетсий, РПГА, РСК, ИФА. Используют методы ПЦР.
Специфическая профилактика осуществляется при некоторых риккетсиозах (сыпной тиф, пятнистая лихорадка скалистых гор) с помощью убитых и живых вакцин.

 

Риккетсии — обширная группа мелких полиморфных гр- бактерий, паразиты членистоногих, различных животных и человека; забол.-риккетсиозы.

порядок- Rickettsiales ,с 3 семействами (Rickettsiaceae , Bartonellaceae и Anaplasmataceae ). Семейство Rickettsiaceae состоит из 3 триб: Rickettsieae , Ehrlichieae и Wolbachieae . Триба Rickettsieae делится на 3 рода: Rickettsia , Rochalimaea , Coxiella .

Морфология: По морфологическим признакакам дифференцируют несколько форм: 1)Кокковидные – овал или эллипсоид диаметром 0,5 мкм. Возможно образование диплоформ (гантелей), цепочек, конгломератов. В ряде случаев обнаруживается зернистость; 2) Палочковидные образования длиной 1-1,5 мкм. Имеется зернистость на концах; 3)Удлиненные, изогнутые, тонкие образования длиной до 3-4 мкм; 4)Нитевидные (мицеллярные) формы длиной 10-40 мкм и более. Иногда это зернистые изогнутые нити. Капсул и спор не образуют(искл 1 вида).кроме вида Rochalimaea quintana, на обычных питательных средах риккетсии не растут, строгие внутриклеточн. паразиты. Жизненный цикл зависит от жизнедеятельности клетки-хозяина и склады­вается из 2 стадий — вегетативной и покоящейся. В вегетативной стадии-палочковидной формы, размножаются бинарным делением, обладают подвижностью, со жгутиками.. В покоящейся стадии-сферические, не размножаются. Риккетсии — типичные прокариоты, есть клеточная стенка, наруж­ная мембрана, цитоплазматическая мембрана, ядерный аппарат, не отграниченный - от цитоплазмы мембранами.

Выделяют токсические вещества белковой структуры, при инактивации превращаются в анатоксин( АГ функция).

Культивирование: заражение животных (морские свинки, белые мыши), либо куриных эмбрионов(риккетсии хорошо размножаются в клетках стенки желточного мешка), либо культур клеток, в которых некоторые виды риккетсий образуют, как и вирусы, бляшки. Род Rickettsia состоит из 10 видов, а заболевания, вызываемые ими, делят на следующие группы

1. Группа сыпного тифа: эпидемический и эндемический сыпные тифы.

2. Группа Клещевых пятнистых лихорадок: пятнистая лихорадка Скалистых гор, Марсельская лихорадка, осповидный (везикулярный) риккетсиоз.

3. Группа лихорадки цуцугамуши: лихорадка цуцугамуши (тропический клещевой сыпной тиф).

4. Группа Ку-лихорадки.

5. Группа пароксизмальных риккетсиозов: волынская лихорадка, клещевой пароксизмальный риккетсиоз.

Патологический процесс обусловлен паразитированием риккетсий в клетках эндотелия, выстилающих кровеносные сосуды с образованием гранулем. Риккетсиозы – острые лихорадки с циклическим течением, поражением ЦНС, сосудов.

Билет № 24

Источники антибиотиков.

Животные и растительные клетки также могут вырабатывать некото­рые вещества с селективным антимикробным действием (например, фитонциды)

Основными источниками получения природных и полусинтетических антибиотиков стали:

• Актиномицеты (особенно стрептомицеты) — ветвящиеся бактерии. Они синтезиру­ют большинство природных антибиотиков (80 %).

• Плесневые грибы— синтезируют природ­ные бета-лактамы (грибы рода Cephalosporium и Penicillium ) H фузидиевую кислоту.

•Типичные бактерии— например, эубактерии, бациллы, псевдомонады — продуцируют бацитрацин, полимиксины и другие вещества, обладающие антибактериальным действием.

Способы получения.

Существует три основных способа получе­ния антибиотиков:

• биологический синтез (так получают при­родные антибиотики — натуральные продук­ты ферментации, когда в оптимальных ус­ловиях культивируют микробы-продуценты, которые выделяют антибиотики в процессе своей жизнедеятельности);

• биосинтез с последующими химическими модификациями (полусинтетичес­кие антибиотики). Сначала путем биосинтеза получают природный антибиотик, а затем его первоначальную молекулу видоизменяют путем химических модификаций, например присо­единяют определенные радикалы, в результате чего улучшаются противомикробные и фарма­кологические характеристики препарата;

• химическисинтез (так получают синте­тические аналоги природных антибиотиков, например хлорамфеникол/левомицетин). Это вещества, которые имеют такую же структуру.

Спирохеты рода Borrelia

Вызывают: антропонозные (возвратный тиф), зоонозные (болезни Лайма) инфекционные болезни с трансмиссивным механизмом передачи воз­будителей (клещи, вши).

Морфологические свойства: тонкие спи­рали с крупными завитками, гр-. Двигательный аппарат фибриллы. Хоро­шо воспринимают анилиновые красители, по Романовскому—Гимзе окрашиваются в сине-фиолетовый цвет.

Фактор патогенности: эндотоксин

Культивируются на сложных питательных средах, со­держащих сыворотку, тканевые экстра­кты, а также в куриных эмбрионах.

Резистентность невелика.

Возвратные тифы — группа острых инфек­ционных заболеваний, вызываемых боррелиями, характеризующихся острым нача­лом, приступообразной лихорадкой, общей интоксикацией. Различают эпидемический и эндемический возвратные тифы.

Возбудителем эпидемического возвратного тифа является В. recurrentis .

Эпидемический возвратный тиф (вшивый) - антропоноз. Специфические пе­реносчики - платяная, головная вши. Заражение при втирании гемолимфы раздав­ленных вшей в кожу при расчесывания места укуса.

Эндемический возвратный тиф — зооноз. Возбудители - В. duttoni и В. persica . Резервуар - грызуны, клещи (р. Ormithodorus). Человек заражается через укусы клещей.

Патогенез: Попав во внутреннюю среду организма, боррелии внедряются в клетки лимфоидно-макрофагальной системы, где размножаются и поступают в кровь, вызывая лихорадку, головную боль, озноб. Взаимодействуя с АТ, боррелии образуют агрегаты, которые нагружаются тромбоцитами, вызывая заку­порку капилляров, следствием чего являет­ся нарушение кровообращения в органах.

Иммунитет: к эпидемическому возвратному тифу гуморальный, непродолжительный.

Микробиологическая диагностика. Бактериоскопический метод — обнару­жение возбудителя в крови, ок­рашенной по Романовскому—Гимзе. МФА, РНГА, РСК. Толстая капля.

Лечение: антибиотики тетрациклинового ряда, левомицетин, ампициллин.

Профилактика. Неспецифическая.

Билет № 25

1. Иммуноглобулины. Строение. Классы. Механизм образования. Значение в практике профилактики и терапии инфекционных болезней.

Иммуноглобулины (ИГ) представляют собой группу эволюционно и структурно родственных белков, обладающих свойствами антител. Основной структурной единицей молекул явл. гетеротетрамер, построенный из идентичных молекул, образованных тяжелыми и легкими полипептидными цепями и расположенных по обе стороны от оси симметрии. Тяжелые цепи содержат от 450 до 550 аминокислот. Легкие около 220. Различают 5 типов тяжелых цепей: a , g , m и d . В составе константных областей тяжелых и легких цепей иммуноглобулинов могут быть выявлены аллотипические антигенные детерминанты, определяющие антигенные различия в нутрии одного и того же изотопа антител. В нормальной сыворотке крови 80% всех ИГ составляют lgg , на долю lgm – 6%, lga – 13,5%, lge и lgd – все остальные. На N концах тяжелых и легких цепей расположены вариабельные области которые в сочетании образуют антигенсвязывающую структуру – паратоп в составе Fab фермента. Fab фермент участвует в реакциях антиген-антитело, но не во всех в виду того что обрезан FC фрагмент – обеспечивает побочный эффект антител: вз-ет с комплиментом, опсонинами, ревматоидным фактором, неспецифически взаимодействует с белком AS и G – белком стрептококков.

IgG – способен преодолевать плацентарный барьер и обеспечивать гуморальный иммунитет новорожденных, он составляет осн. массу антител при вторичном иммунном ответе. Обеспечивает антибактериальную и антитоксическую защиту. Продуцентами IgG явл. плазматические клетки, возникающие в ходе индуцированной антигеном дифференцировки В-лимфоцитов предшественников, несущих мембранные IgM и IgG или в результате клональной экспансии уже сформированных В – клеток памяти.

Ig М пентамер, состоящий из 5 4х цепочечных структур, его наз. макроглобулином. Он синтезируется раньше других классов в онтогенезе. Этот класс ИГ первым появляется на самых ранних стадиях гуморального иммунного ответа на инфекцию. В качестве фактора противоинфекционной защиты он функционирует в лимфе и межклеточной среде. В сыворотке норма от 0,5 до 1,5 мг/мл.

Ig А представлен 2 классами А1 и А2 и существует в 2х различных формах – секреторной и сывороточной. Является основным ИГ секретов слизистых и экзокринных желез. Его синтезируют лимфоидные ткани, связанные со слизистыми покровами кишечника, дыхательных и мочеполовых путей, а также с железистым эпителием молочных, слюнных и др. желез. В организме секреторный Ig А препятствует адгезии микроорганизмов на слизистых и реализации их патогенного потенциала. В сыворотке содержится в количестве 2-3 г/л.

Ig Е основное свойство состоит в способности сенсибилизировать в отношении определенного АГ мембраны тучных клеток и базофилов. Связывание молекул с мембранным Ig Е служит сигналом для освобождения из этих клеток ряда БАВ, вызывающих спазм гладкой мускулатуры. Повышение проницаемости сосудов, воспалительные реакции и др. сдвиги, лежащие в основе явлений гиперчувствительности немедленного типа. Концентрация в сыворотке крови 4,8 – 240 нг/мл. Увеличение его продукции наблюдается при аллергических заболеваниях, иммунодифецитах, паразитарных инвазиях.

IgD Находится на поверхности В – лимфоцитов, выполняя фунцию иммуноглобулиновых АГ- распознающих рецепторов. В процессе дифференцировке В лимфоцитов эти рецепторы.

Характеристика гепатита G

Семейство	Геном	Размер вириона	Механизм заражения	Диагностические маркеры
Flaviviridae	РHK	60	Парентеральный	anti-HGV E2, HGV РНК

 

Микробиологическая диагностика. В сыворотке, плазме крови определяют: РНК вируса (HGV RNA) - с помощью ПЦР с предварительным этапом обратной транскрипции (RT-PCR); Антитела против вирусного белка Е2 (анти-HGV Е2) - в ИФА.
Дифференциация проводится с учетом маркеров других возбудителей вирусных гепатитов.

 

Вирус гепатита B

Гепаднавирусы (сем. Hepadnaviridae) - семейство оболочечных ДНК-содержащих вирусов; представлены родом Hepadnavirus, включающим возбудителя гепатита B - вирус гепатита B (HBV), который инфицирует только человека и шимпанзе, поражая печень, в меньшей мере почки и поджелудочную железу. Вирус гепатита B характеризуется парентеральным механизмом передачи.

Характеристика

Вирус	Семейство	Геном	Размер вирионов	Механизм заражения	Диагностические маркеры
HBV	Hepadnaviridae	ДНК	42нм	Парентеральный	HBsAg, anti-HBs, anti-HBc IgM, anti-HBcIgG, HBeAg, anti-HBe, HBV ДНК

Структура

HBV - мелкий вирус с геномом в виде кольцевой, неполной двунитевой ДНК, образованный минус-нитью и более короткой неполной плюс-нитью. Каждая нить имеет разрывы. Геном кодирует обратную транскриптазу и реплицируется через промежуточное звено РНК.
Вирион, называемый частицей Дейна (1), имеет диаметр 42 нм. Он включает ДНК-полимеразу и протеин Р, прикрепленные к геному, который окружен сердцевинным (core) антигеном HBcAg. Снаружи вирион имеет оболочку с гликопротеиновым поверхностным (surface) антигеном-HBsAg, состоящим из S, preS1, preS2 полипептидов.
Антиген e (HBeAg) находится в сердцевине вириона и вместе с HBcAg представлен в основном общим полипептидом. HBeAg в отличие от HBcAg выделяется в кровь из гепатоцитов при репликации HBV. Наименее изучен HBxAg (трансактиватор-регуляторный белок), который возможно в результате нарушения механизма деления, приводит к развитию первичного рака печени.
Кроме частиц Дейна в кровь инфицированных людей попадают HBsAg-содержащие частицы (неполные вирионы). Эти частицы (2,3) могут быть сферическими или нитевидными. HBsAg включает три гликопротеина (L, M, S), содержащие группоспецифический (a) и типоспецифические детерминанты HBV (d или y и w или r). Комбинации этих антигенов (например, ady, adw) создают 8 подтипов HBV, используемые как эпидемиологические маркеры. HBV обладает строгим тропизмом к печени.

Микробиологическая диагностика. 1) Серологический метод - в сыворотке, плазме крови с помощью ИФА, РПГА определяют антигены вируса и противовирусные антитела : поверхностный антиген (HВsAg), антитела к поверхностному антигену (анти-HВsAg); антитела к сердцевинному антигену (анти-HВсAg IgM, антиHВcAg IgG);“антиген инфекционности” (HВеAg); антитела к “антигену инфекционности” (анти-HВеAg); антитела к антигену Х (HВхAg). 2) Молекулярно-генетический метод: с помощью ПЦР или метода гибридизации определяют ДНК вируса (HBV DNA) в крови и в биоптатах печени.
Дифференциация проводится с учетом маркеров других возбудителей вирусных гепатитов.
Специфическая профилактика осуществляется вакцинацией рекомбинантной генно-инженерной вакциной, содержащей HBs-антиген (субъединичная вакцина). Прививаются новорожденные от матерей-носителей HBsAg, а также взрослые из группы риска. Для неспецифической профилактики необходимо исключить заражение вирусом при парентеральных манипуляциях (переливание крови, инъекции и т.п.)

 

Вирус гепатита D (HDV) один из возбудителей парентеральных вирусных гепатитов (гепатит D, или дельта).

Структура HDV

HDV имеет сферическую форму (35-40 нм) и маленький РНК-геном, представленный однонитевой кольцевой РНК. По структуре генома (кольцевая РНК) HDV напоминает вироиды. Геном заключен в дельта-антигенную сердцевину, снаружи которой имеется HBsAg-содержащая оболочка, кодируемая вирусом гепатита B (HBV). Вирионы HDV образуется с помощью HBsAg. Сердцевинный дельта-антиген представлен малой (24кД) или большой (27кД) формой; преобладает малая форма. Различают три генотипа HDV.

Микробиология иерсиниозов.

Иерсинии - бактерии, относящиеся к семейству Enterobacteriaceae, роду Yersinia. Род состоит из 11 видов : Y.aldovae, Y.bercovieri, Y.enterocolitica, Y.frederiksenii, Y.intermedia, Y.kristensenii, Y.mollaretii, Y.pestis, Y. pseudotuberculosis, Y.rohdei, Y.ruckeri. Типовой вид Y.pestis. Иерсинии - возбудители зоонозных инфекций, передающиеся от животных к человеку и непередающиеся, как правило, от человека к человеку (за исключением возбудителя чумы). Наибольшую роль в патологии человека играют энтеропатогенные иерсинии Y. enterocolitica (возбудитель кишечного иерсиниоза), Y. pseudotuberculosis (возбудитель псевдотуберкулеза) и Y.pestis (возбудитель чумы). Все 3 вида имеют плазмиду, несущую гены вирулентности. Остальные виды изредка могут вызывать оппортунистические инфекции у человека. Чувствительны к тетрациклинам, хлорамфениколу, аминогликозидам, сульфонамидам, налидиксовой кислоте. Устойчивы к эритромицину и новобиоцину.

Иерсинии — прямые грамотрицательные палочки, иногда имеют сферическую форму (0,5-0,8 х 1-3мкм). Подвижны при температуре ниже 300С (перитрихи), кроме Y.pestis, которые всегда неподвижны. Спор не образуют, могут иметь нежную капсулу. Факультативные анаэробы. Психрофилы (оптимум роста иерсиний 280С). Факторы вирулентности патогенных иерсиний

Детерминанты вирулентности Биологический эффект Ген адгезии (yadA) Адгезия (прикрепление) Ген (yop) Цитотоксичность, ингибирование миграции и активности фагоцитов, аггрегации тромбоцитов     Микробиологическая диагностика. Микроскопический метод (предварительная диагностика). Бактериологический метод. Серологический метод - РПГА, ИФА. Биологический метод. Молекулярно-генетический метод (ПЦР, гибридизация). Ускоренная диагностика - РИФ, ПЦР, ИФА.

 

Иерсинии обладают перитрихиальными жгутиками, но неподвижны при температуре +37 градусов, поскольку сократительная активность жгутиков резко снижена, зато при температуре нижу +30 градусов активно подвижны.

Род Yersinia входит в семейство энтеробактерий и включает 11 видов: Y. Pestis – вызывает чуму; Y. Pseudotuberculosis – вызывает псевотуберкулуз; Y. Enterocolitica – вызывает кишечный иерсиниоз; Y. Ruckeri – вызывает болезнь «красного рта» у рыб; Y. Aldovae, Y. Bercovieri, Y. Frederiksenii, Y. Intermedia, Y. Kristensenii, Y. Mollaretii, Y. Rohdei – условная патогенность.

Антигенные различия иерсиний определяются видо- и типоспецифическими O-АГ (соматическими). Выделяют 2 соматических О-АГ – S и R. Жгутиковый Н-АГ термолабилен и явл. родоспецифическим. В наружной м-не имеются V- и W-АГ, особенно выраженные при культивировании иерсиний при температуре больше +22 градусов. Это АГ вирулентности. R-АГ Y. Pseudouberculosis – общий с АГ возбудителя чумы. Общие АГ обнаружены у Y. Pseudotuberculosis и сальмонелл серогрупп B и D. Иерсинии относятся к гетеротрофным и факультативным анаэробам, температурный оптимум +28 градусов, оксидазоотрицательны и каталазопожительны, отличаются выраженными психрофильными и олиготрофными свойствами, могут развиваться при отсутствии азота и углерода, усваивая эти химические элементы из аммиака т летучих соединений углерода в атмосфере. Иерсинии не образуют сероводород. Хемоорганотрофы, хорошо растут на простых питательных средах, углеводы сбраживают без образования газа. В жидкой среде иерсинии образуют равномерное помутнение, при дальнейшем культивировании среда просветляется и образуется слизистый или порошковидный осадок. На плотных питательных средах образуют гладкие колонии в S-форме, реже – шероховатые R-формы. Для дифференциации видов иерсений используются биохимические тесты.

Эпидемиология. Заражение человека иерсиниями в основном происходит алиментарным путем. Факторами передачи явл. пищевые продукты, вода. Сезонность связана со значительным накоплением иерсиний в овощах за время длительного их хранения при относительно низких температурах. Роль грызунов при этом ничтожна, т.к. овощи м.б. первично инфицированы иерсиниями через корневую систему.

Клиника и патогенез. Иерсинии проникаю в организм через рот с пищей или водой. Инкубационный период при кишечном иерсиниозе составляет 2-3 суток, при псевдотуберкулезе – около недели. В патогенез иерсиниозов первостепенную роль играет адгезия бактерий к слизистой оболочке кишечника и их последующая инвазия внутрь эпителиальной кл-ки. Из-за множественности и неспецифичности симптомов иерсиниозы проходят под другими диагнозами: скарлатина, энтероколит, пищевая токсикоинфекция, аппендицит, ревматизм и др. Псевдотуберкулез протекает в виде скарлатиноподобной, абдоминальной, желтушной, артралгической и смешанной форм. Кишечный иерсиниоз включает в себя клинические формы: гастроинтестинальную, абдоминальную, генерализованную, вторично-очаговую. Только микробиологическое исследование позволяет выявить эти часто встречающиеся заболевания.

Микробиологическая диагностика. Диагностика основана на бактериологическом (культуральном) и иммунологическом исследовании. Возбудители иерсиниозов выделяются из организма с испражнениями, где они обнаруживаются как во время болезни, так и в период рецидивов. Основным материалом для диагностического лабор. исследования явл. фекалии, в зависимости от формы заболевания м.б. исследованы удаленные мезентериальные лимфатические узлы, аппендикс, гной из полостей и абсцессов, моча и смывы из зева. По эпидемиологическим показаниям исследуют материалы от диких животных и грызунов: содержимое кишечника, печень, селезенку, лимфатические узлы. Овощи исследуются на наличие иерсиний путем взятия смывов с поверхности (на границе здоровой и пораженной частей). Исследуют также мясные, рыбные продукты и молоко. Фекалии рекомендуется исследовать ежедневно в течение первых 3 суток болезни, а затем через 3-5 суток для контроля эффективности лечения. Посев делают на плотную питательную среду. Плотными средами служит дифференциально-диагностическая среда Серова, дифференциально-диагностическая питательная среда для выделения возбудителей иерсиниоза и псевдотуберкулеза, среда Эндо, питательный агар. Для выявления специфических Ат в сыворотке крови и их динамики используют развернутую РА. Также используют РНГА. РСК рекомендуют для серологической диагностики иерсиниозов при отсутствии положительных результатов в др. иммунологических тестах. 

Билет № 26

Микробиология менингитов. Морфология, тинкториальные, культуральные и биохимические свойства менингококков. Антигенная структура. Основы патогенеза. Схема лабораторной диагностики. Специфическая профилактика.

Билет № 27

МИКРОБИОЛОГИЯ: ТЕОРЕТИЧЕСКАЯ ЧАСТЬ ЭКЗАМЕНА

Билет № 1

1. Генетика микроорганизмов. Особенности генетического аппарата бактерий. Фенотипическая и генотипическая изменчивость бактерий. Понятие и генной инженерии.

2. Биология возбудителей холеры. Организация и проведение микробиологической диагностики холеры.

3. Характеристика микрофлоры молока и молочных продуктов. Пути заражения молока и молочных продуктов патогенными микроорганизмами. Методы санитарно-микробиологического анализа.

 

Билет № 2

1. Понятие об инфекционном процессе. Роль микроорганизмов в инфекционном процессе. Пути проникновения микроорганизмов в организм человека.

2. Микробиология туляремии. Морфология, культуральные, биохимические свойства и антигенная структура возбудителя. Микробиологическая диагностика. Характеристика вакцины.

3. Методы санитарно-бактериологического исследования питьевой воды. Правила отбора проб воды.

 

Билет № 3

1. Понятие о патогенности и вирулентности микроорганизмов. Факторы патогенного действия микробов.

2. Микробиология стафилококковой инфекции. Характеристика свойств стафилококков. Схема и методы лабораторной диагностики.

3. Диагностические сыворотки. Методы получения, очистки и хранения. Видовые, типовые и монорецепторные сыворотки.

 

Билет № 4

1. Понятие об антигене. Свойства антигенов. Антигены бактерий. Локализация в микробной клетке.                         

2. Вирусология арбовируснх инфекций. Общая характеристика арбовирусов. Принципы вирусологической диагностики, специфическая профилактика.

3. Санитарно-показательные микроорганизмы. Общие требования к ним. Характеристика эшерихий как санитарно-показательных бактерий.

 

Билет № 5

1. Микробные токсины. Химический состав и свойства эндотоксинов и экзотоксинов. Анатоксины, методы получения и назначение.

2. Микробиология гонореи. Схема и методы лабораторной диагностики гонококковой инфекции.

3. Схема и методы индикации патогенных микроорганизмов в объектах внешней среды.

 

Билет № 6

1. Размножение бактерий. Методы выделения чистых культур бактерий.                         

2. Микробиология столбняка. Морфология, культуральные и биохимические свойства возбудителя. Характеристика токсина. Схема лабораторной диагностики. Специфическая профилактика.

3. Методы флюоресцирующих антител. Применение в микробиологии.

 

Билет № 7

1. Спорообразование у бактерий. Биологическое значение спор. Особенности структуры спор, методы окраски.       

2. Микробиология брюшного тифа и паратифов. Морфология, тинкториальные и культуральные свойства, антигенная структура возбудителей. Материал для микробиологического исследования. Микробиологическая диагностика. Препараты для специфической профилактики.

3. Применение РНГА при специфической индикации ПБА. Принцип реакции и методика выполнения.

 

Билет № 8

1. Методы стерилизации в микробиологии, применяемая аппаратура.. Значение в практической работе лечебных и противоэпидемических учреждений.

2. Микробиология дизентерии. Классификация возбудителей, морфология, тинкториальные, культуральные и биохимические свойства. Схема лабораторной диагностики.

3. Методы бактериологического контроля за санитарным состоянием кухни (камбуза), столовой и продовольственного склада.

 

Билет № 9

1. Открытие вирусов Д.И.Ивановским. Природа вирусов. Морфология и репродукция вирусов.

2. Возбудитель чумы. Морфология, тинкториальные, культуральные и биохимические свойства, антигенная структура. Схема лабораторной диагностики чумы. Специфическая профилактика. Вклад отечественных ученых в изучение чумы.

3. Иммуноферментный метод в микробиологии.

 

Билет № 10

1. Основные возбудители госпитальных инфекций, факторы риска их развития; Наиболее распространенные механизмы формирования антибиотикоустойчивости микроорганизмов. Санитарно-бактериологический контроль, проводимый в госпитальных учреждениях

2. Микробиология бруцеллеза. Морфология, тинкториальные, культуральные и биохимические свойства возбудителей. Антигенная структура. Схема лабораторной диагностики. Специфическая профилактика.

3. Санитарно-бактериологическое исследование почвы.

 

Билет № 11

1. Этиология ВИЧ-инфекции. Свойства вирусов иммунодефицита человека. Особенности эпидемиологии, диагностики и профилактики ВИЧ-инфекции.

2. Микробиология газовой гангрены. Морфология, тинкториальные, культуральные и биохимические свойства возбудителей. Схема лабораторной диагностики. Специфическая профилактика.

3. Правила отбора материалов от инфекционных больных и бактерионосителей для лабораторных исследований. Сохранение их и особенности доставки в бактериологическую лабораторию.

 

Билет № 12

1. Патогенные грибы. Общая характеристика, классификация. Роль в патологии человека. Патогенез, иммунитет, диагностика кандидозов.

2. Микробиология сибирской язвы. Морфология, тинкториальные, культуральные и биохимические свойства возбудителя. Антигенная структура. Токсины. Схема лабораторной диагностики. Специфическая профилактика.

3. Нормальная микрофлора тела человека и ее значение. Дисбиоз и причины его возникновения, принципы коррекции.

 

Билет № 13

1. Микробиология хламидиозов. Классификация, тинкториальные, культуральные и морфологические свойства. Микробиологическая диагностика орнитоза и урогенитальных хламидиозов.

2. Микробиология дифтерии. Морфология, тинкториальные, культуральные и биохимические свойства возбудителей. Антигенная структура. Токсигенность, свойства токсина и методы его выявления. Схема лабораторной диагностики. Специфическая профилактика и терапия.

3. Методы микробиологического исследования воздуха.

 

Билет № 14

1. Взаимодействие вируса с восприимчивой клеткой. Особенности противовирусного иммунитета. Интерфероны. Принципы химиотерапии вирусных инфекций.

2. Микробиология туберкулеза, их морфология, тинкториальные, культуральные и биохимические свойства. Схема и методы микробиологической диагностики. Специфическая профилактика.

3.Санитарно-микробиологическое исследование воды. Оценка результатов по бактериологическим показателям.

 

Билет № 15

1. Экологическая группа анаэробов. Классификация. Неспоробразующие анаэробы, роль в патологии человека. Принципы диагностики анаэробных инфекций.

2. Микробиология лептоспирозов. Морфология, тинкториальные и культуральные свойства возбудителя. Антигенная структура и классификация лептоспир. Схема лабораторной диагностики. Специфическая профилактика.

3. Микробиология ботулизма. Морфология, тинкториальные, культуральные свойства возбудителя. Токсигенность. Схема лабораторной диагностики. Специфическая профилактика и терапия.

 

Билет № 16

1. Трепонемы. Трепонематозы. Этиология, патогенез, методы диагностики сифилиса.

2. Вирусология клещевого энцефалита.

3. Питательные среды для культур клеток, общие требования к ним.

 

Билет № 17

1. Микробиология стрептококковой инфекции. Морфология, тинкториальные, культуральные и биохимические свойства стрептококков. Антигенная структура. Схема лабораторной диагностики.

2. Микробиология эшерихиозов. Энтеропатогенные, энтероинвазивные, энтеротоксигенные, энтерогеморрагические и энтероадгерентные эшерихии, их свойства. Микробиологическая диагностика эшерихиозов.

3. Задачи санитарной микробиологии. Ее значение для медицинской службы ВС страны.

 

Билет № 18

1. Вакцины. Определение. Классификация. Практическое применение.

2. Микробиология сыпного тифа. Морфология, тинкториальные и культуральные свойства возбудителя. Антигенная структура. Основы патогенеза. Схема лабораторной диагностики. Специфическая профилактика.

3. Условно-патогенные микроорганизмы. Их роль в возникновении пищевых токсикоинфекций. Схема лабораторной диагностики.

 

Билет № 19

1. Иммунологические реакции. Применение в диагностике инфекционных болезней.

2. Характеристика вируса натуральной оспы: морфология, репродукция, антигенная структура. Схема вирусологической диагностики. Специфическая профилактика.

3. Вирусология бешенства. Методы лабораторной диагностики. Профилактика. Специфическая вакцинация.

 

Билет № 20

1. Живые вакцины. Методы получения, хранения, применения.

2. Вирусы энтеральных гепатитов. Морфология, репродукция, устойчивость к факторам внешней среды, экология, лабораторная диагностика, профилактика.

3. Стафилококковая пищевая интоксикация. Характеристика токсина. Схема лабораторной диагностики.

 

Билет № 21.

1. Питательные среды для выделения и идентификации бактерий. 

2. Семейство ортомиксовирусов. Характеристика вирусов гриппа: морфология, репродукция, антигенная характеристика. Схема лабораторной диагностики. Специфическая профилактика.

3. Специфическая индикация ПБА. Схема и методы.

 

Билет № 22

1. Методы культивирования вирусов. Практическое применение.

2. Микробиология паратифов. Морфология, тинкториальные, культуральные и биохимические свойства возбудителей. Антигенная структура. Схема лабораторной диагностики.

3. Пути инфицирования мяса и мясных продуктов патогенными микроорганизмами. Методы санитарно-бактериологического исследования мяса.

 

Билет № 23

1. Понятие о чувствительности микроорганизмов к антибиотикам. Методы определения чувствительности бактерий к антибиотикам. Значение для практической медицины.

2. Микробиология риккетсиозов. Классификация риккетсий. Морфология, тинкториальные и культуральные свойства. Антигенная структура. Токсигенность. Значение в инфекционной патологии.

3. Микробиология консервов. Понятие и промышленной стерильности консервов. Схема санитарно-микробиологического исследования консервов.

 

Билет № 24

1. Понятие об антибиотиках. Классификация антибиотиков. Механизмы антимикробного действия.  

2. Микробиология возвратных тифов. Морфология, тинкториальные и культуральные свойства возбудителей. Патогенность для животных. Схема лабораторной диагностики.

3. Микробиология пищевых токсикоинфекций. Возможные возбудители. Особенности их биологии, важные для профилактики пищевых токсикоинфекций. Схема лабораторной диагностики.

 

Билет № 25

1. Иммуноглобулины. Строение. Классы. Механизм образования. Значение в практике профилактики и терапии инфекционных болезней.

2. Этиология парентеральных вирусных гепатитов. Характеристика вирусов. Методы лабораторной диагностики.

3. Микробиология иерсиниозов.

 

Билет № 26

1. Бактериофаги. Морфология, основные свойства и механизм репродукции. Практическое применение.

2. Микробиология менингитов. Морфология, тинкториальные, культуральные и биохимические свойства менингококков. Антигенная структура. Основы патогенеза. Схема лабораторной диагностики. Специфическая профилактика.

3. Принцип организации лаборатории для работы с возбудителями особо опасных инфекций. Режим работы.

 

Билет № 27

1. Этиология, патогенез, иммунитет и диагностика малярии, трихомониаза.    

2. Микробиология Ку-риккетсиозов. Морфология, тинкториальные и культуральные свойства возбудителя. Антигенная структура. Схема лабораторной диагностики. Специфическая профилактика.

3. Микробиологическая диагностика ботулизма.

Билет № 1