Смыв из носоглотки,                                          обработанный антибиотиками
Заражение куриных эмбрионов в аллантоисную или амниотическую полости.	Заражение культуры ткани.	Заражение белых мышей.
Вирус обнаруживают путем реакции гемагглютинации, типируют с помощью РТГА	В культуре ткани вирус обнаруживают по цитопатическому эффекту, по изменению цвета среды и по реакции гамадсорбции; типируют по РТГА, нейтрализации ЦПЭ и реакции  нейтрализации гемадсорбции.	Вирус типируют реакцией нейтрализации со специфическими сыворотками.

Методы микробиологической диагностики острых

Респираторных вирусных инфекций

А. Вирусоскопический

Материал со слизистой носа, зева эмульгируют в физиологическом растворе, осаждают и из осадка готовят мазки.

Мазки после высушивания обрабатывают типоспецифическими люминесцирующими сыворотками и микроскопируют с помощью люминесцентного микроскопа. Клетки, содержащие соответствующий вирус, адсорбируют специфические люминесцирующие антитела и светятся.

Б. Вирусологический (см. схему выше)

В. Серологический

Определяют нарастание титра специфических антител в исследуемых парных сыворотках с помощью РТГА, РСК и РН (см. схему).

Контрольные вопросы

1. Какие вирусы вызывают острые респираторные заболевания?

2. Какие вирусы относятся к семейству ортомиксовирусов?

3. Дайте общую характеристику ортомиксовирусов?

4. Какую структуру имеет вирион гриппа?

5. Какие микробиологические методы применяются для диагностики вирусных респираторных инфекций?

6. В чем особенность серологических методов диагностики вирусных респираторных инфекций?

7. Как производится выделение вируса гриппа?

8. Как обнаруживается вирус гриппа в курином эмбрионе?

9. Как производится выделение и идентификация аденовирусов?

10. В чем сущность РТГА? Каковы особенности ее постановки и учета результатов при обнаружении противогриппозных антител?

11. В чем заключается сущность иммунофлуоресцентного метода диагностики гриппа?

ПРИЛОЖЕНИЕ К ЗАНЯТИЮ13

А. Возбудители острых респираторных вирусных инфекций (ОРВИ).

Возбудителями ОРЗ (кроме бактерий) являются следующие вирусы:

РНК-содержащие

1. Ортомиксовирусы (вирусы гриппа А, В и С).

2. Парамиксовирусы – парагриппозные вирусы, вирус эпидемического паротита, вирус ньюкаслской болезни, вирус кори, респираторно-синцитиальный вирус).

3. Пикорнавирусы (более 110 серотипов риновирусов, а также некоторые серотипы вирусов Коксаки А и В и вирусов ECHO).

4. Реовирусы (3-й серотип).

5. Коронавирусы ( в том числе возбудители SARS и MERS).

ДНК-содержащие вирусы

6. Аденовирусы (41 серотип, из них 8 являются возбудителями ОРВИ).

По частоте в порядке убывания: риновирусы – коронавирусы – респираторно-синцитиальный вирус – парагриппозные вирусы – аденовирусы – вирусы гриппа. Однако основную роль играют вирусы гриппа, вызывающие частые сезонные вспышки, эпидемии и пандемии.

Вирусы гриппа обозначают по однородной кодированной системе. Указывают тип рибонуклеопротеида (род вируса) - А, В, С, географическое место выделения штамма; порядковый номер; год; в круглых скобка - подтип гемагглютинина (Н1-Н13) и нейрамидазы (NI - N10). Например, А /Сингапур/ 1/57 (Н2 N2); А /Гонконг/ 1/68 (НЗ N2); А /утка/ СССР/ 695/ 76 (Н3N2).

Б. Особенности вируса гриппа А

Вирион имеет сферическую форму и диаметр 80–120 нм, его молекулярная масса 250 МД. Геном вируса представлен однонитевой фрагментированной (8 фрагментов) не­гативной РНК с общей м. м. 5 МД. Тип симметрии нуклеокапсида спиральный. Вирион имеет суперкапсид (мембрану), содержащий два гликопротеида — гемагглютинин и нейраминидазу, которые выступают над мембраной в виде шипов.

В. Для диагностики ОРВИ применяют следующие методы:

1. Вирусологический - заражение культур клеток и/или куриных эмбрионов.

2. Иммунофлуоресцентный (метод ускоренной диагностики).

3. Серологические реакции – как для обнаружения антител, так и для обнаружения вирусспецифического антигена – РТГА, РПГА, РСК, ИМФ.

4. Использование ПЦР.

З А Н Я Т И Е 14

Дата ______________

Тема: Микробиологическая диагностика полиовирусных инфекций, Коксаки-инфекции, ротавирусных инфекций, бешенства,

Клещевого энцефалита

План занятия: