Определение ферментации глюкозы в анаэробных условиях. Определение проводят аналогичным путем, в качестве субстрата используют 1% раствор маннита.
Идентификация S . epidermidis и S . saprophyticus
Те штаммы, которые после исследований, описанных выше, признаны не относящимися к S . aureus, подвергаются дальнейшей идентификации для установления их видовой принадлежности.
Дифференциацию S . epidermidis; и S . saprophyticus рекомендуется проводить в трех тестах:
1) определение устойчивости к новобиоцину;
2) наличие фосфатазы;
3) способность окислять маннит.
Для штаммов S . epidermidis характерны: чувствительность к новобиоцину, наличие фосфатазы, неспособность окислять маннит; для штаммов S . saprophyticus – противоположные свойства. Поскольку не все стафилококки по своим характеристикам укладываются в указанную схему, такие штаммы следует обозначать Staphylococcus Spp .
Вопросы для обсуждения
1. Общая характеристика патогенных кокков.
2. Морфология, тинкториальные и культуральные свойства стафилококков.
3. Токсины и ферменты "агрессии".
4. Классификация стафилококков.
5. Способы обнаружения токсинов и ферментов "агрессии".
6. Лабораторная диагностика.
7. Препараты, применяемые для специфического лечения и профилактики стафилококковых заболеваний.
Самостоятельная работа студентов
1. Познакомиться со схемой исследования при кокковых заболеваниях по таблице.
2. Микробиологический диагноз стафилококковых и стрептококковых заболеваний:
- изучить демонстрационный препарат из чистых культур стафилококков, стрептококка; зарисовать;
- изучить рост стафилококка на кровяном агаре, желточно-солевом агаре и МПБ, рост стрептококка на кровяном МПА и на МПБ;
- сделать посев гноя на чашку с кровяным МПА;
- изучить демонстрационный посев гноя на кровяном агаре;
- приготовить мазок из гноя, окрасить по Граму, зарисовать;
- сделать посев гноя на сахарный МПБ для определения чувствительности микрофлоры к антибиотикам;
- определить чувствительность к антибиотикам по демонстрационным посевам;
- посмотреть демонстрацию методики посева крови на сепсис;
- учесть результаты реакции плазмокоагуляции;
- познакомиться с исследованием пищевого продукта на наличие патогенных стафилококков – демонстрация преподавателем техники приготовления суспензии из исследуемого продукта (творога) и посева на чашки с кровяным МПА и желточно-солевым МПА;
- изучить препараты, применяемые для диагностики и лечения кокковых заболеваний.
Протокол исследования гноя
Цель исследования | Ход исследования | Результат |
1 | 1. Приготовление, окраска по Граму и микроскопия мазков из гноя. 2. Посев гноя на молочно-солевой агар, на желточно-солевой агар, на кровяной агар. | |
2 | 3. Микроскопия мазков из колоний. 4. Посев материала из колоний на сахарный агар газоном и определение чувствительности к антибиотикам методом дисков. 5. Посев материала из колоний на скошенный агар. | |
3 | 6. Пересев со скошенного агара на плазму и на маннит. 7. Провести фаготипирование. |
Заключение:
Из гноя больного ________________________________________________
выделен ________________________________________________________
с наибольшей чувствительностью к ________________________________
фаготип________________________________________________________
Стрептококковые инфекции
Цель занятия: выработать навыки лабораторного анализа стрептококковых инфекций.
Задачи:
1. Знать основных возбудителей стрептококковых инфекций.
2. Изучить патогенетические факторы микроорганизмов.
3. Ознакомиться с методами лабораторной диагностики.
Уметь:
· интерпретировать полученные результаты лабораторного анализа гнойных стрептококковых заболеваний,
· оценить результаты антибиотикограмм и факторов персистенции,
· подобрать препараты для специфической профилактики и терапии данных болезней.
Род Streptococcus объединяет обширную, широко распространенную в природе группу грамположительных, факультативно анаэробных микроорганизмов. Облигатно-патогенным для человека видом является S . pyogenes (группа А), являющийся причиной возникновения гнойно-воспалительных процессов различной локализации. S . pneumoniae – пневмококк является возбудителем острых пневмоний, часто сопровождающихся бактериемией, менингитов у детей, острых отитов, гнойных конъюнктивитов и др. Среди многочисленных условно-патогенных для человека видов стрептококка лидирующее место занимает S . agalactiae (группа В), S . faecalis и S . faecium (группа Д).
Раздел | Вопросы для изучения |
Биология возбудителя | 1. Taкcoнoмия Возбудители стрептококковых инфекций относятся к семейству streptococcaceae, роду Streptococcus. Этот род включает в себя несколько десятков видов, которые подразделяются на: А. β-гемолитические; Б. α-гемолитические; В. α1-гемолитические; Г. γ-негемолитические стрептококки. |
2. Основные биологические cвойства: Морфологические – кокки с диаметров клеток 0,6-1,0 мкм, располагающиеся в виде цепочек различной длины. Спор не образуют, патогенные виды образуют капсулу. Тинкториальные – грамположительные клетки. Культуральные: факультативные анаэробы, температурный оптимум – 37°С, оптимальная реакция питательной среды при pH=7,2-7,6. На обычных питательных средах не растут, или растут очень скудно. На бульоне рост придонно-пристеночный в виде крошковатого осадка, бульон прозрачен. Для культивирования стрептококков используют кровяной агар, содержащий 5% дефибринированной крови. На плотных питательных средах стрептококки группы А образуют колонки 3-х типов: мукоидные, шероховатые, гладкие. Биохимические свойства: ферментируют глюкозу, мальтозу, сахарозу до кислоты, без образования газа. Молоко не свертывают. Протеолитическими свойствами не обладают, каталазонегативные. Патогенность I. Факторы адгезии: а) белок М – главный фактор патогенности, представляющий собой фибриллярные молекулы, которые образуют фимбрии на поверхности клеточной стенки стрептококков группы А. б) капсула, состоящая из гиалуроновой кислоты, маскирующая стрептококк от фагоцитов. II. Токсины и ферменты агрессии: гемолизин О (стрептолизин), гемолизин S, стрептокиназа, гиалуронидаза, ДНК-аза, аминопептитаза. Антигенные свойства: В настоящее время выявлено 20 серогрупп стрептококков, в зависимости от группоспецифичных полисахаридных антигенов, локализованных в клеточной стенке. Помимо общего для всего роде антигена и группоспецифичных у гемолитических видов обнаружены типоспецифические антигены: M, T и R, а также перекрестно реагирующие антигены. | |
Эпидемиология | Стрептококки являются постоянными обитателями слизистых оболочек верхних дыхательных путей, пищеварительного тракта. Источником экзогенной инфекции служат больные острыми стрептококковыми болезнями (ангина, скарлатина), а также реконвалесценты после них. Основной способ заражения – воздушно-капельный, в других случаях – прямой контакт, и очень редко – алиментарный. |
Патогенез | Проникнув через поврежденную кожу микробы распространяются из местного очага через лимфатическую и кровеносную системы. Заражение воздушно-капельным или воздушно-пылевым путем приводит к поражению лимфоидной ткани (тонзиллиты), в процесс вовлекаются регионарные лимфоузлы, откуда возбудитель распространяется лимфогенно и гематогенно. Стрептококки могут вызывать самые различные заболевания: раневые инфекции, рожистое воспаление, пуэрперальный сепсис, инфекции дыхательных путей. Сенсибилизирующие свойства микробов определяют такие осложнения как нефрозонефриты, артриты, поражение сердечно-сосудистой системы, ревматизм. |
Постинфекци-онный имму- нитет | После перенесенного заболевания формируется антитоксический и антимикробный иммунитет, который носит прочный и длительный характер |
Этиотропная терапия. Стрептококки сохраняют чувствительность к бета-лактамным антибиотикам, которые относят к препаратам выбора при лечении стрептококковых инфекций. Для профилактики скарлатины контактным лицам эффективно используется человеческий нормальный иммуноглобулин.
Схема лабораторной диагностики гнойных стрептококковых инфекций
Материал | Метод исследования | Результат |
Слизь из зева, с миндалин, отделя-емое ран | 1. Микроскопический 2. Бактериологический посев на 5% кровяной агар А. Микроскопия мазков из колонии Б. Выделение чистой культуры Установление принадлежности культуры к роду Streptococcaceae Микроскопический Культуральное определение Биохимическая активность (среды Гисса) Каталазный тест Определение признаков патогенности: 1. Гемолизин 2. Стрептокиназа 3. Гиалуронидаза 4. ДНК-аза | Гр+ кокки Рост колоний с зоной гемолиза Гр+ кокки Цепочки кокков Гемолитические колонии Ферментация до кислоты Каталазонегативные |
Идентификация стрептококков
Целью первичной идентификации является установление принадлежности выделенной культуры к семейству Streptococcaceae и роду Streptococcus. Для установления принадлежности культур к семейству Streptococcaceae используют тест на каталазу.
В отличие от родственного семейства микрококков представители семейства стрептококков не имеют фермента каталазы, и не способны расщеплять перекись водорода с образованием воды и газообразного кислорода.
Дата: 2019-03-05, просмотров: 483.