Материалы представленные на сайте исключительно с целью ознакомления пользователям Интернета и не преследуют коммерческих целей или нарушение авторских прав.
© 2018 - 2024
| Материал | Метод исследования | Результаты |
| Слизь из зева и носа, пленки, налеты с миндалин | Бактериоскопический. Материал берут двумя стерильными ватными тампонами, один используют для приготовления микропрепарата, другой для посева. Мазки окрашивают по Нейсеру и метиленовым синим. Метод имеет ориентировочное зна-чение. Бактериологический. Материал засевают на одну из из элективных сред: сывороточную Клауберга II хинозоловую. На этих средах задерживается рост кокков и др. микрофлоры зева. На второй день из подозрительных колоний делают мазки, окрашивают по Нейссеру и отсевают на скошенный сывороточный агар для выделения чистой культуры. На третий день проводят идентификацию чистой культуры по следующим тестам: 1. Определение токсигенности методом диффузной преципитации в агаре; 2. Определение фермента цистиназы (проба Пизу); 3. Определение уреазной активности – посев в среду с мочевиной и индикатором крезолрот (проба Закса). На этом этапе дают положительный ответ, но исследование продолжают. 4. Посев на углеводы: глюкозу, мальтозу, крахмал, гликоген. Выдача окончательного ответа. | Коринебактерии дифтерии располагаются под углом друг к другу в виде буквы «V» зерна волютина находятся по полюсам палочек. При окраске по Нейссеру тело палочки окрашивается в желтый цвет, а зерна волютина в черный цвет. Дифтероиды не имеют зерен волютина, а сами палочки расположены параллельно. На свернутой сыворотке мелкие круглые колонии кремового цвета с уплотнением в центре. На среде Клауберга тип gravis образует крупные с радиальной исчерченностью серого цвета колонии; тип – mitis круглые, выпуклые колонии черного цвета. Исследуемая культура образует линии преципитации в агаре. Расщепляет цистин – по ходу укола почернение среды. Не образует уреазу – среда не изменяет цвет. Дифтероиды выделяют уреазу, среда с мочевиной окрашивается в розовый цвет. Тип gravis расщепляет глюкозу, мальтозу, крахмал и гликоген до кислоты, тип mitis полисахариды не ферментирует. |
Определение токсикогенности дифтерийных коринебактерий
Токсигенность определяют методом диффузной преципитации в агаре по Оухтерлони. Для этого на чашку с сывороточным агаром накладывают полоску фильтровальной бумаги, пропитанную дифтерийной антитоксической сывороткой. Рядом с полоской бумаги засевают выделенную культуру в виде «бляшек». Если культура токсигенна, то через 24-48 часов диффундирующий в питательную среду токсин и антитоксическая сыворотка образуют линии преципитации белого цвета.
Ускоренные методы микробиологической диагностики дифтерии
В качестве ускоренного метода диагностики применяется реакция иммунофлюоресценции (РИФ).
Препараты для специфической профилактики и терапии
Плановая профилактика проводится дифтерийным анатоксином, который входит в состав вакцины АКДС.
Для экстренной профилактики и лечения используют противодифтерийную антитоксическую сыворотку.
Антибиотики: эритромицин, олеандомицин, тетрациклин.
Вопросы для обсуждения
1. Общая характеристика и классификация коринебактерий.
2. Источник заражения, пути передачи инфекции, патогенез заболевания.
3. Материал для исследования, методы лабораторной диагностики.
4. Бактериологический метод исследования дифтерии.
5. Характеристика экзотоксина и метод определения токсикогенности дифтерийной палочки.
6. Специфическая профилактика и терапия дифтерии.
Самостоятельная работа студентов
1. Микроскопия демонстрационного препарата дифтерийной палочки в чистой культуре, окрашенного по Нейссеру.
2. Окраска готовых микропрепаратов уксуснокислым метилвиолетом, микроскопия.
3. Изучение бактериологического метода исследования при дифтерии с последующей идентификацией возбудителя:
а) характер роста на сывороточных и теллуритовых средах;
б) определение токсигенности методом диффузной преципитации в агаре по Оухтерлони;
в) реакции на цистиназу (проба Пизу);
г) реакция на уреазу (проба Закса);
д) ферментация моно- и полисахаридов.
4. Изучение препаратов, применяющихся для диагностики, специфической профилактики и лечения дифтерии.
5. Выполненную работу оформить протоколом по следующей схеме, отметить полученные результаты.
Дата: 2019-03-05, просмотров: 186.