Материал | Метод исследования | Результат |
Ликвор, слизь из зева, носа, гной, экссудат, СМ-жидкость | 1. Микроскопический 2. Бактериологический А. Посев на сывороточный МПА с ристомицином (для подавления сопутствующей флоры) Б. Пересев на скошенные сывороточные среды и МПА В. Микроскопия мазка из колоний Г. Посев на «пестрый ряд» 3. Серологический А. Типирование менингококков в РА с типоспецифическими сыворотками А, В, С Б. Реакция преципитации для обнаружения менингококкового антигена в материале | Гр–диплококки бобовидной формы Бесцветные, мелкие колонии (через 1 день, на 2 день) Рост Роста нет Гр–диплококки Ферментация глюкозы и мальтозы до кислоты Реакция положительная с одной из типоспецифических сывороток Положительная |
Сыворотка крови | РПГА | Положительная |
Культуральные и биохимические свойства патогенных видов
Рода Neisseria
Вид | ка-та-ла-за | окси-даза | глю-коза | маль-тоза | редукция | гомо-лиз | пиг-мент | лак-тоза | саха-роза | |
нитрат | нитрит | |||||||||
N. go- norr-haeae | + | + | + | – | – | + | – | – | – | – |
N. meningi-tidis | + | + | + | + | – | ± | – | – | – | – |
Вопросы для обсуждения
1. Морфологические, тинкториальные, культуральные свойства менингококков.
2. Токсины и ферменты агрессии.
3. Заболевания человека, вызываемые менингококками, значение бактерионосительства.
4. Лабораторная диагностика менингококковых заболеваний.
5. Специфическая профилактика менингококковых заболеваний.
Самостоятельная работа студентов
1. Познакомиться со схемой исследования при менингококковых инфекциях.
2. Микробиологический диагноз менингококковых заболеваний:
А. Изучить демонстрационные препараты менингококка. Зарисовать.
Б. Познакомиться с техникой забора материала при исследовании на менингококковое носительство (демонстрация).
В. Определить чувствительность к антибиотикам по демонстрационным посевам.
Протокол исследования гноя
День исследо-вания | Ход исследования | Результат |
I II III | 1. Приготовление, окраска по Граму и микроскопия мазков из гноя 2. Посев гноя на сывороточный МПА с ристомицином 1. Микроскопия мазков из колоний 2. Пересев на скошенные сывороточные среды 3.Определение чувствительности к антибиотикам методом стандартных дисков 1. Посев на «пестрый ряд» 2. Определение каталазной активности 3. Постановка оксидазного теста 4. Проведение серологической диагностики реакция агглютинации с типоспецифическими сыворотками А, В, С реакция преципитации |
Заключение:
из гноя больного _____________________________________________
выделен ____________________________________________________
с наибольшей чувствительностью к ______________________________
Гонококковые инфекции
Цель занятия: выработать навыки лабораторного анализа гонококковых инфекций.
Задачи:
1. Изучить биологические свойства возбудителя гонококковых инфекций.
2. Знать патогенетические факторы микроорганизмов.
3. Освоить методы лабораторной диагностики.
Уметь:
· интерпретировать результаты лабораторного анализа гонококковых инфекций;
· оценить результат антибиотикограммы и факторов персистенции.
Гонорея – инфекционное заболевание человека, вызываемое гонококком и характеризующееся воспалительным поражением преимущественно слизистых оболочек мочеполовых органов. К экстрагенитальным формам относятся эндокардиты, менингиты, стоматиты, бленоррея новорожденных и др.
Раздел | Вопросы для изучения |
Биология возбудителя | 1. Таксономия Возбудитель гонококковых инфекций относится к семейству Neisseriaceae, роду Neisseria, среди которого наиболее значимыми являются N . gonorrhaeae. 2. Основные биологические свойства: Морфологические – кокки, с диаметром клеток 0,7-0,8 мкм, располагающиеся попарно. Спор, капсул не образуют. Тинкториальные – грамотрицательные клетки. Культуральные: факультативные анаэробы. Температурный оптимум – 35-36°С, но рост происходит в диапазоне 30-38,5°С. Оптимальная реакция питательной среды pH = 7,2-7,6. Плoxo растет на обычных питательных средах, культивируется на средах, содержащих сыворотку, асцитическую жидкость или кровь. Лучшие среды для выращивания - сывороточный агар и среда Бейли. Гонококки образуют колонии двух видов: мелкие блестящие (Т1 и Т2) и большие плоские и тусклые (ТЗ, Т4). Биохимические свойства: гонококки ферментируют глюкозу с образованием кислоты, без газа. Оксидазоположительные. Редуцируют нитриты, каталазоположительные. Факторы патогенности: Пили (белок пилин) – прикрепление гонококков к эпителию влагалища, фаллопиевых труб и полости рта. Капсула – антифагоцитарная активность Белки наружной мембраны: Протеин I (Por-пориновый белок – способствует внутриклеточному выживанию бактерий, препятствуя слиянию лизосом с фагосомой нейтрофилов Протеин П (Ора – Opacity protein; Opacity – мутность), т.е. протеин мутности) – опосредует плотное прикрепление к эпителиальным клеткам и инвазию внутрь клеток Протеин Ш (Rmp – Reduction modifiable protein) – защищает поверхностные антигены (Por-белок, липоолигосахарид) от бактерицидных антител LOS (Lipooligosaccharide) – липоолигосахарид обладает свойствами эндотоксина IgA1 – протеаза – разрушает IgA1 Бета-лактамаза – гидролизует бета-лактамное кольцо пенициллинов Антигенное строение: в настоящее врется описаны разные антигенные популяции гонококков. По белковым антигенам мембраны гонококки распределены на 16 серотипов. Кроме того, микроорганизмы различаются по своим липополисахаридным антигенам. |
Эпидемиология | Единственным источников инфекции является человек. Заражение происходят половым путем, реже контактно-бытовым. |
Патогенез | Основным местом обитания гонококков является поверхность слизистой оболочки мочеполового тракта, реже –прямой кишки и глотки. Местом входных ворот у мужчин является слизистая оболочка уретры, у женщин – предверия влагалища, уретры и шейки матки. В случае проникновения через эпителиальный барьер микробы проникают в окружающие ткани: железы уретры и шейки матки, трубы, матку, предстательную железу, в кровь, синовиальные оболочки суставов, сердце, конъюнктиву, вызывая воспалительные процессы и иногда септицемию. |
Постинфекци-онный имму- нитет | Перенесенное заболевание не оставляет иммунитета, что связано с тем, что иммунитет носит типоспецифичный характер. |
Вопросы для обсуждения
1. Морфологические, тинкториальные, культуральные свойства гонококков.
2. Токсины и ферменты агрессии.
3. Заболевания человека, вызываемые гонококками.
4. Лабораторная диагностика острой гонореи.
5. Лабораторная диагностика хронической гонореи.
6. Лабораторная диагностика бленнореи.
Самостоятельная работа студентов
1. Познакомиться со схемой исследования при гонококковых инфекциях.
2. Микробиологический диагноз гонококковых заболеваний.
Возбудители бактериальных
Воздушно-капельных инфекций
Цель занятия: овладеть навыками микробиологической диагностики воздушно-капельных инфекций.
Знать:
- основных возбудителей бактериальных воздушно-капельных инфекций;
- патогенез заболевания, методы лабораторной диагностики.
Уметь:
- интерпретировать результаты лабораторных исследований;
- подобрать препараты для специфической профилактики и терапии указанных заболеваний.
Возбудители инфекций, передающихся воздушно-капельным путем, относятся к различным семействам, родам и видам микроорганизмов, которые отличаются друг от друга по морфологии, культуральным и биохимическим признакам и антигенной структуре.
Этиологически воздушно-капельные инфекции обусловливают стафилококки, стрептококки, клебсиеллы, коринебактерии дифтерии, бордетеллы коклюша, актиномицеты и др. они имеют одинаковый путь передачи, локализуются в эпителии дыхательных путей, но при этом вызывают избирательное поражение других органов и тканей.
Для микробиологического подтверждения диагноза используются, главным образом, бактериоскопический и бактериологический методы, иногда – биологические пробы на животных и аллергический метод.
В данном методическом пособии рассмотрены биология возбудителя, патогенез и методы лабораторной диагностики наиболее важных воздушно-капельных инфекций (дифтерия, коклюш, туберкулез).
Дифтерия
Это острое инфекционное заболевание, которое характеризуется общей интоксикацией организма с поражением периферической нервной системы, миокарда, надпочечников и воспалительным процессам в месте внедрения микроба с образованием фибринозных пленок.
Раздел | Вопросы для изучения |
Биология возбудителя | 1. Таксономия. Возбудители дифтерии относятся к роду Corynebacterium, который включает виды: а) Corynebacterium diphtheriae – возбудители дифтерии у человека. Возбудитель включает варианты: gravis, mitis, intermedius. б) Corynebacterium ulcerans – возбудители мастита у коров, могут вызывать ангины у людей. в) Corynebacterium xerosis, Hoffmani – дифтероиды, ложнодифтерийные палочки – непатогенны для человека, вегетируют на коже и слизистых оболочках здоровых людей. 2. Основные биологические свойства: Морфологические – длинные, тонкие палочки с утолщениями на концах, в которых располагаются зерна волютина. В мазках из чистой культуры располагаются под углом друг ко другу. Спор, капсул не образуют, неподвижны. Тинкториальные: Гр+, специфической является окраска по Нейссеру. При этом палочка окрашивается в желтый цвет, зерна волютина – в черный или темно-синий. Культуральные: факультативные анаэробы, на простых средах не растут. Культивируются на сложных среда, содержащих сыворотку, кровь, теллурит калия. (Среда Ру – свернутая лошадиная сыворотка, среда Лефлера – 3 части бычьей сыворотки и 1 часть сахарного бульона, теллуритовая среда (Клауберга II), хинозоловая (Бучина). На сывороточных средах мелкие, выпуклые, кремового цвета колонии разной формы в зависимости от варианта: на хинозоловых -–голубого цвета, на Клауберга колонии var.gravis образует крупные серые с неровным краем колонии, mitis – мелкие, влажные, выпуклые черного цвета. Биохимические: все три варианта расщепляют глюкозу, мальтозу до кислоты, ферментируют цистин, не образуют уреазу. Крахмал и гликоген ферментирует только вариант – gravis. Антигенная структура: имеют группоспецифический соматический антиген и типоспецифический протеиновый поверхностный К-антиген е) патогенность: продуцируют экзотоксин (гистотоксин) белковой природы, который является продуктом незавершенного синтеза цитохрома. Легко проникает через мембраны клеток, оказывает избирательное действие – вызывает отек и некроз тканей в месте введения, поражает миокард, надпочечники и нервную систему. Экзотоксин состоит из двух компонентов А и В. А – собственно экзотоксин; В – комплекс токсинов: гемолизин и некротоксин, фибринолизин. Ферменты агрессии: гиалуронидаза, нейраминидаза. |
Эпидемиоло- гия, патогенез заболевания | Источник инфекции – больной, бактерионоситель. Пути передачи – воздушно-капельный, контактный, редко алиментарный. Патогенез. Входные ворота: слизистые оболочки зева, носа, трахеи, глаз, раневая поверхность. Возбудитель остается на слизистых оболочках, размножается, выделяет экзотоксин, который поступает в кровь и разносится по организму – токсинемия. Местно вначале действует фракция В, которая некротизирует клетки слизистой, вызывает дифтеритическое воспаление и способствует проникновению в клетки фракции А. Фракция А нарушает внутриклеточный обмен в клетках миокарда (миокардиты), нервных клеток (полиневриты), надпочечников и паренхиматозных органов (токсический нефроз) и др. на миндалинах образуются грязно-белые налеты (пленки), которые снимаются шпателем с трудом, и развивается отек. Фибринозное воспаление и отек иногда приводит к развитию асфиксии. |
Дата: 2019-03-05, просмотров: 238.