Перед посевом материал должен быть в жидком состоянии.

Стерильной градуированной пипеткой набирают 0,1, 0,5 или

1,0 мл материала и выливают его в стерильные чашки Петри. После

этого материал заливают 15−20 мл растопленного и охлажденного до

45−50 °С МПА. Осторожно покачивая чашку, круговыми движения-

ми по поверхности стола перемешивают в ней материал, достигая его

равномерного деления в среде. Чашку оставляют закрытой до полно-

го застывания агара, а затем переворачивают вверх дном.

Для того, чтобы выделить чистую культуру микроорганизмов,

следует отделить многочисленные бактерии, которые находятся в ма-

териале, одна от другой. Это можно достичь с помощью методов,

которые основаны на двух принципах – механическом и биологиче-

ском разобщении бактерий .

Методы выделения чистых культур,

Основанные на механическом принципе

Метод последовательных разведений, предложенный Л. Па-

стером, был одним из самых первых, который применялся для меха-

нического разъединения микроорганизмов. Он заключается в прове-

дении последовательных серийных разведений материала, который

содержит микробов, в стерильной жидкой питательной среде. Этот

прием достаточно кропотлив и несовершенен в работе, поскольку не

позволяет контролировать количество микробных клеток, которые

попадают в пробирки при разведениях.

Этого недостатка не имеет метод Коха (метод пластинчатых

разведений). Р. Кох использовал плотные питательные среды на ос-

нове желатина или агар-агара. Материал с ассоциациями разных видов

бактерий разводился в нескольких пробирках с растопленным и

охлажденным желатином, содержимое которых позже выливалось на

стерильные стеклянные пластины. После культивирования в его тол-

ще образовывались изолированные колонии микроорганизмов, кото-

рые легко могут быть перенесены на свежую питательную среду с по-

мощью платиновой петли для получения чистой культуры бактерий.

Метод Дригальского является более совершенным методом,

который широко распространен в повседневной микробиологической

практике. Сначала на поверхность среды в чашке Петри пипеткой

или петлей наносят исследуемый материал. С помощью металличе-

ского или стеклянного шпателя его тщательным образом втирают в

среду. Чашку во время посева держат прикрытой и осторожно вра-

щают, чтобы равномерно распределить материал. Не стерилизуя шпа-

теля, проводят им посев материала во второй чашке Петриа, затем 

в третьей. Только после этого шпатель погружают в дезинфицирую-

щий раствор или прожигают в пламени горелки. На поверхности сре-

ды в первой чашке наблюдаем, как правило, сплошной рост бактерий,

во второй – густой рост, а в третьей – рост в виде изолированных ко-

лоний (рис. 12).

Рис. 12. Метод Дригальского

Метод посева истончающим штрихом сегодня используется

в микробиологических лабораториях чаще всего. Существует

нескольько способов посева штрихом (рис. 13).

 Схемы метода посева истончающим штрихом