При работе в бактериологической лаборатории, особенно с па-
тогенными микроорганизмами, необходимо соблюдение следующих
правил:
1. Все лица, находящиеся в бактериологической лаборатории,
должны быть в халатах.
2. В помещении запрещаются прием пищи и курение.
3. Каждый работник должен пользоваться только своим рабо-
чим местом.
4. Все операции должны производиться с соблюдением правил
стерильности: все посевы проводят вблизи пламени горелки, перели-
вание зараженных жидкостей производят над лотком с дезинфици-
рующим раствором и т.п.
5. Весь инвентарь, находившийся в контакте с заразным мате-
риалом, подлежит стерилизации или уничтожению.
6. Все культуры, а также зараженные животные учитываются и
регистрируются в журнале по специальной форме.
Лабораторный стол
Рабочее место сотрудника бактериологической лаборатории.
Для проведения микробиологического исследования лаборанту
необходимо иметь соответствующим образом оборудованное рабочее
место. Лабораторный стол должен иметь определенную высоту, что-
бы, сидя за ним, легко было микроскопировать. По возможности стол
должен быть покрыт линолеумом, а каждое рабочее место − оцинко-
ванным подносом или зеркальным стеклом. Рабочее место должно
быть снабжено микроскопом, штативами для пробирок и красок, пла-
тиновой петлей и иглой для посевов, чашкой с мостиком для препа-
ратов, промывалкой, песочными часами, предметными и покровными
стеклами, пипетками, набором красок, фильтровальной бумагой,
спиртовой или газовой горелкой и банкой с дезинфицирующим рас-
твором (лизол, карболовая кислота, сулема, хлорамин или лизоформ),
куда опускают для обеззараживания бывшие в употреблении пред-
метные и покровные стекла, пипетки, стеклянные палочки и т.д. По-
суда, в которой выращиваются микробы, обеззараживанию химиче-
скими веществами не подлежит. Следы дезинфицирующих веществ
на такой посуде делают ее в дальнейшем непригодной для роста и
размножения микроорганизмов. После использования посуду скла-
дывают в металлические бачки или ведра с крышкой, пломбируют и
стерилизуют в автоклаве. Мелкий инструментарий (пинцеты, скаль-
80
пели, ножницы) после его использования помещают в стерилизатор и
кипятят в течение 30−60 мин или погружают в 3−5 % мыльно-
карболовый раствор хлорамина на 30−60 мин.
Рабочее место должно содержаться в абсолютной чистоте. Недо-
пустимо, чтобы стол был загрязнен исследуемым заразным материалом
(моча, кал, гной и т.д.). В последнем случае заразный материал со стола
может попасть на другие окружающие предметы, и тогда возможна
внутрилабораторная инфекция. После окончания работы лаборант
должен привести в порядок рабочее место, за которое он отвечает, и с
целью профилактики стекло на рабочем месте протереть кусочком
ваты, смоченным 5 % раствором карболовой кислоты или хлорамина
(рис. 39, 40).
Рис. 39. Техника микроскопирования
бактериологических объектов
Рис. 40. Рабочее место сотрудника бактериологической лаборатории
81
СОВРЕМЕННЫЕ СИСТЕМЫ
БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКОГО АНАЛИЗА
Система ВАСТЕС460 − радиометрический метод быстрого
определения роста МБТ (Mycobacterium tuberculosis) путем регистра-
ции уровня меченого СО2, образующегося в процессе утилизации
субстрата с пальмитиновой кислотой, содержащей радиоактивный
С14. Для роста МБТ в данной системе используют флаконы с жидкой
питательной средой, которая представляет собой обогащенную среду
Middlebrook 7H9, содержащую радиоактивный С14. При размноже-
нии МБТ утилизируют С14 и выделяют С1402; в этом случае учет
идет по нарастанию С1402. Применение ВАСТЕС 460 позволило
сократить сроки получения результатов выявления микобактерий до
14 дней, система оказалась пригодной для быстрой идентификации
М. tuberculosis complex и определения лекарственной чувствительно-
сти возбудителя туберкулеза.
Система ВАСТЕС MGIT960 − индикаторные пробирки MGIT (М.
Growth Indicator Tube) с той же средой Middlebrook 7Н9; содержат в
придонной части флюоресцирующий индикатор (трис-4,7-дифенил-1,
10-фенантролин рутениум хлорид пентагидрат), «погашенный» высо-
кими концентрациями 02. В процессе роста МБТ поглощают 02, что
сопровождается усилением свечения индикатора, интенсивность
которого оценивают с помощью трансиллюминатора.
Полностью автоматизированный комплекс позволяет одновре-
менно исследовать лекарственную чувствительность МБТ в 960 ис-
следуемых образцах. Наличие роста МБТ в системе ВАСТЕС реги-
стрируется на 4−5-й день от момента посева. В системе ВАСТЕС, где
используют те же абсолютные концентрации противотуберкулезных
препаратов, учет лекарственной устойчивости идет в течение 6 нед.
В последние годы для быстрого определения лекарственной
устойчивости используют метод микрочипов, основанный на моле-
кулярно-генетическом анализе (ПЦР) выявления точечных мутаций в
гроВ гене, ответственном за устойчивость к рифампицину, и в katG
гене, ответственном за лекарственную устойчивость к изониазиду.
Установлено, что более 95 % устойчивых к рифампицину штам-
мов МБТ содержат точечные мутации (делеции и вставки в гроВ гене,
кодирующих Р-субъединицу РНК-полимеразы) и более 70 % устойчи-
вых к изониазиду штаммов МБТ имеют делеции и вставки в katG
гене, кодирующих каталазу/пероксидазу. Результаты метода микро-
чипов могут быть получены на 3−4-й день исследования
Бактериологическое и паразитологическое исследования проводятся для диагностики и осуществления контроля над распространением инфекции.
Емкости для проб получают накануне в бактериологической (паразитологической) лаборатории.
Подготовка к взятию пробы биологического материала
Дата: 2019-03-05, просмотров: 310.
