Инсулин исп-ся для больных сахарным диабетом. Со времен первых опытов лечения сахарного диабета инсулином этот гормон выделяли из поджелудочной железы коровы или свиньи. Инсулин коровы и свиней отличается от инсулина человека, особенно близки инсулин человека и свиньи (у свиньи С-концевой треонин В-цепи заменен на аланин). Инсулин коровы и человека отличается по трем аминокислотным остаткам. Именно из-за этих отличий возникает высокая иммуногенная реакция. Больных, ко-х лечат инсулином коровы, появляются антитела к инсулину, в следствии чего возникают побочные эффекты – атрофия подкожной жировой прослойки в месте  повторного введения препарата. В случае введения инсулина свиньи такой эффект отсутствует.

Т.к число больных СД увелич-тся, то потребность в инсулине растет. Для усовершенствования медици-х препаратов и снижения риска побочных эффектов используют инсулин человека. Его получают методом рекомбина-х ДНК по следующим этапам:

1) Сначала воссоздается последовательность ДНК по аминокислотной последовательности инсулина, раздельно синтезируя искусственные гены А и В- цепей.

2) Каждый из генов встраивают в ген β-галактозидазы плазмид, а их вводят в клетки Е.соli

3) После лизиса бактерий и обработки бромцианом, кот-й специфически расщепляет белки по остатку метионина, цепи инсулина отделяют от β-галактозидазы.

4) затем проводят очистку цепей и их объедеинение, в результате чего образуется нативный 2х цепочечный инсулин.

Он не содержит белков Е.соli, эндотоксинов, пирогенных веществ и проявляет полную биологическую активность.

Также существует метод, по которому синтезировали ген молекулы-предшественника проинсулина, который вводили в Е.соli. После очистки проинсулина его расщепляли трипсином и β -карбопептидазой и получали нативный инсулин.

Интерферон (ИФ)

ИФ - это группа белков, открытых в ходе изучения вещ-в, вырабат-х клетками, зараж-ми вирусами. Они индуцируют как локальные, так и системные противови­русные реакции в других клетках. Кроме того, ИФ об­ладают еще 2 мя важными свойствами: подавляют пролифе­рацию клеток (и, таким образом, потенциально явл-ся про­тивоопухолевым средством) и модулируют иммунную систему.

Классификация интерферонов: лейкоцитарные, интерфероны фибробластов и иммунные интерфероны.

Синтезирован ген лейкоцитарного ИФ человека длиной 514 пар нуклеотидов; его включали в плазмиду и клонирова­ли затем в Е. coli. Удалось достичь экспрессии гена ИФ человека в клетках дрожжей, а ген фибробластного ИФ был включен в Е. coli. За его экспрессией можно проследить по образованию продукта с противовирусной ак­тивностью.

Гормон роста (ГР).

 ГР образ-ся и секретируется передней долей гипофиза и необходим для роста костей. ГР, синтезир-й в специально сконструированных клет-х бактерий, имеет очевидные преимущества: доступен в больших колич., его препараты явл-ся биохимически чистыми и свободными от вирусных загрязнений.

1)На первом этапе клонировали двухнитиевую ДНК-копию мРНК и расщеплением рестрикционными эндонуклеазами получили последов-сть, кот-я кодирует всю аминокислотную последоват-сть гормона, за исключением первых 23 аминокислот.

2) Затем клонировали синтет-й полинуклеотид, соответств-й аминокислотам от 1-й до 23-й и два получ-х фрагмента объединили вместе, и «подстроили» к паре промоторов и участку связывания рибосом. Конечный выход гормона состав-ет 1 % от растворенных белковых клеток этого генетически сконструированного штамма E.coli.

Синтезиро-й в бактер-х гормон обладает нужной молекулярной массой и не связан с каким-либо бактериальным белком, от которого его необходимо было бы отщепить. Однако синтетический гормон содержал на N-конце полипептидной цепи дополнительный остаток метионина. Эта лишняя аминокислота удалялась при длительном выращивании кишечной палочки.