1. Оценить герметичность упаковки:

· Упаковка должна быть абсолютно целостной;

· Никакие следы нарушения целостности недопустимы, при их наличие кровь непригодна для переливания.

2. Оценить правильность паспортизации:

· Наличие этикетки с номером;

· Даты заготовки;

· Обозначения группы крови и резус принадлежности;

· Наименование консерванта;

· Фамилии и инициалы донора;

· Наименование учреждения-заготовителя;

· Подпись врача;

· Штампа о проверке на ВИЧ и вирусный гепатит.

3. обратить внимание на срок годности крови, сопоставить его с датой переливания, оценить визуально кровь во флаконе:

· Кровь должна быть разделена на три слоя (внизу – красные эритроциты, выше – узкая серая полоска лейкоцитов и тромбоцитов, над ней – желтая прозрачная плазма);

· Плазма должна быть прозрачна;

· Хлопья, пленки, сгустки в плазме свидетельствуют о ее инфицированности и непригодности к переливанию;

· Розовое окрашивание плазмы говорит о гемолизе эритроцитов и непригодности крови к переливанию.

Определение группы крови со стандартными сыворотками:

1. Проверить качество стандартных гемагглютинирующих сывороток по:

· Цветовой маркировке;

· Внешнему виду (светлая, прозрачная);

· Сохранности ампулы;

· Наличию правильно оформленной этикетки с указанием группы крови, титра, срока годности, места приготовления.

2. Разместить на столе:

· 2 комплекта стандартных гемагглютинирующих сывороток трех групп (О, А, В) двух серий и 1 ампулу с сывороткой АВ (IV), каждая ампула должна иметь пипетку;

· Флакон с изотоническим раствором, пипетку;

· Стерильный маркированный планшет;

· Предметные стекла;

· Пипетку для взятия крови;

· Песочные часы.

3. Написать на планшете ФИО пациента, группу крови.

4. Нанести на планшет по одной капле (0,1 мл) стандартных гемагглютинирующих сывороток трех групп двух серий в соответствующие гнезда планшета.

5. Нанести каплю крови из пальца или из пробирки пипеткой в соответствующую ячейку.

6. Поместить в каждое гнездо планшета, рядом с сывороткой, по одной маленькой капле (0,1 мл) исследуемой крови в соотношении кровь: реагент 1: 10 (кровь берется из большой капли).

7. Смешать кровь с реагентом, после смешивания планшет осторожно покачать в руках.

8. Добавить по одной капле 0,9% раствора натрия хлорида к каплям сыворотки с эритроцитами, где наступила агглютинация, но не ранее, чем через 3 минуты.

9. Оценить результаты через 5 минут после начала реакции. Если сыворотки дали положительную реакцию, значит кровь содержит оба агглютиногена АВ, в этом случае следует провести дополнительное контрольное исследование со стандартной сывороткой группы АВ (IV).

Оценка результатов реакции.

Определение группы крови с помощью моноклональных антител (цоликлонов) антиА и антиВ.

Цоликлоны – это искусственно созданные человеком реагенты для определения группы крови в системе АВО. Цоликлоны выпускаются в жидкой форме во флаконах или ампулах со специальными добавками, гарантирующими стерильность и сохранение активности в течение 2 лет, а также красителями, позволяющими легко различать их. Цоликлоны антиА окрашены в розовый цвет, антиВ – в синий.

1. Необходимо определить пригодность реагента для исследования:

· Должен быть прозрачным;

· Без хлопьев;

· Срок годности не истек;

· Соответствие маркировке на этикетке.

2. Разместить на столе:

· Стерильный маркированный планшет;

· Пипетку для взятия крови;

· Цоликлоны антиА и антиВ;

· Стеклянные палочки;

· Песочные часы.

3. На пластину под соответствующими надписями (антиА и антиВ) наносят по одной большой капле (0,1мл) реагента.

4. Рядом с каплями антител на пластину помещают по одной маленькой капле (0,01мл) исследуемой крови.

5. Разными палочками кровь тщательно смешивают с реагентами.

6. Агглютинация крови с цоликлонами антиА и антиВ обычно наступает в первые 3-5 секунд, но наблюдение следует проводить в течение 2-3 минут, т.к. при слабых антителах возможна поздняя агглютинация.

7. Оценивают результат: положительный характеризуется появлением агглютинатов, видимых невооруженным глазом, - красных комочков, быстро сливающихся в крупные хлопья. При отрицательной реакции капля остается равномерно окрашенной в красный цвет, агглютинатов в ней нет.