Необходимое оснащение: два комплекта стандартных сывороток 0 (I), А (II), В (III) групп двух различных серий и одна ампула сыворотки АВ (IV), набор пипеток для каждого группового флакона, флакон с изотоническим раствором хлорида натрия с пипеткой, тарелка, стекла предметные или стеклянные палочки – 8 штук, комплект «Резус» или кастрюля, песочные часы на 3 мин. и 5 мин., пластырь. Определение группы крови проводят в помещении с хорошим освещением и температурой от +15^оС до +25^оС. Сыворотки хранят в холодильнике при температуре от + 4 ^оС до +10 ^оС.

                            Техника определения группы крови

 На тарелку в соответствующий сектор нанесите крупную каплю сыворотки двух серий I(0), II(А), III(В) групп. Затем последовательно внести в капли сыворотки подготовленную исследуемую кровь уголком предметного стекла или стеклянной палочкой и тщательно перемешать, капля вносимой крови должна быть в 5-10 раз меньше капли сыворотки. Затем путем покачивания тарелки тщательно перемешать кровь с сывороткой. Предварительные результаты оценивают через 3 мин., после чего добавляют каплю изотонического раствора хлорида натрия, вновь смешивают и через 5 мин. проводят окончательную оценку реакции агглютинации (смешивание крови больного и стандартных сывороток). Реакцию агглютинации определяет врач. Результат реакции вносится в бланк направления или отмечается на лицевой стороне истории болезни, где ставится дата определения группы крови и личная подпись врача и медсестры, определявших группу крови.

Далее исследуемая кровь отправляется в клиническую лабораторию для повторного определения группы крови (во избежание ошибки) и резус-фактора.

 По этой же системе определяется группа донорской крови из флакона и сверяется с записью на этом флаконе.

Оценка реакции агглютинации:

- положительная – хлопья и зернышки из склеившихся эритроцитов не расходятся при добавлении изотонического раствора хлорида натрия и перемешивании;

- отрицательная – капли сыворотки на тарелке прозрачные, равномерно розового цвета, не содержат хлопьев и зерен.

                            Комбинации реакций агглютинации:

1)все три сыворотки в обеих сериях не дают агглютинации – исследуемая кровь 0 (I) группы;

2)реакция агглютинации отрицательная с сывороткой А (II) группы обеих серий и положительная с сывороткой 0 (I) и В (III) – исследуемая кровь А (II) группы;

3)реакция агглютинации отрицательная с сывороткой В (III) группы обеих серий и положительная с сывороткой 0 (I) и А (II) – исследуемая кровь В (III) группы;

4)сыворотка 0 (I), А (II), В (III) групп дают положительную реакцию в обеих сериях - кровь принадлежит АВ (IV) группе.

Прежде чем дать такое заключение, необходимо провести реакцию со стандартной сывороткой АВ(IV) группы по той же методике. Окончательная реакция агглютинации позволяет отнести исследуемую кровь к АВ ( IV) группе.

Наиболее типичные ошибки при определении групповой принадлежности крови:

- слабая активность стандартной сыворотки;

- избыточное количество исследуемой крови, добавляемой к стандартной сыворотке при высокой температуре окружающей среды;

- ложная агглютинация при подсыхании капли сыворотки и образование «монетных» столбиков эритроцитов или проявление холодовой агглютинации (температура окружающей среды ниже 15^о С).

Во всех сомнительных случаях проводят повторное исследование групповой принадлежности со стандартными сыворотками других серий.

Добавление капли изотонического раствора хлорида натрия к исследуемой крови при температуре выше 15^о С позволяют избежать указанных ошибок.

Групповая принадлежность крови больного, независимо от ранее определенной принадлежности, определяется каждый раз при переливании крови и ее компонентов. Отмечать групповую принадлежность на основании отметки в паспорте, выписки из истории болезни или других справок не разрешается.

       Правила хранения групповых стандартных сывороток

Срок годности групповых сывороток определяется на этикетке флаконов и предусмотрен БРСПК НИИПК при хранении в холодильнике (t + 4^о С). С момента вскрытия флаконы групповых сывороток можно использовать в течение 10 дней при хранении в холодильнике (t + 4^о С). При появлении во флаконах групповых сывороток хлопьев и наличия мути, сыворотки необходимо заменить.

                            Проба на групповую совместимость

Выполняется с сывороткой больного. На белую пластинку нанести 2-3 капли сыворотки больного, к которой добавить каплю крови донора, в 5 раз меньшую. Кровь перемешать, периодически покачивая, в течение 5 мин., одновременно наблюдая результат реакции. Отсутствие агглютинации эритроцитов донора свидетельствует о совместимости крови донора и реципиента в отношении групп крови АВО. Появление агглютинации указывает на их несовместимость и на недопустимость переливания данной крови. Если больному переливается кровь из нескольких флаконов, проба на совместимость должна быть сделана с кровью из каждого флакона, даже если кровь получена от одного донора.