КАФЕДРА МИКРОБИОЛОГИИ, ВИРУСОЛОГИИ И ИММУНОЛОГИИ

Поможем в ✍️ написании учебной работы

Имя

Поможем с курсовой, контрольной, дипломной, рефератом, отчетом по практике, научно-исследовательской и любой другой работой

Нажимая кнопку "Продолжить", я принимаю политику конфиденциальности

ВОЛГОГРАДСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ МЕДИЦИНСКИЙ УНИВЕРСИТЕТ

ЧАСТНАЯ МИКРОБИОЛОГИЯ

ВОЗБУДИТЕЛИ

БАКТЕРИАЛЬНЫХ ИНФЕКЦИЙ

ЧЕЛОВЕКА

Волгоград

2013

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

ВОЛГОГРАДСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ МЕДИЦИНСКИЙ УНИВЕРСИТЕТ

КАФЕДРА МИКРОБИОЛОГИИ, ВИРУСОЛОГИИ И ИММУНОЛОГИИ

ЧАСТНАЯ МИКРОБИОЛОГИЯ

ВОЗБУДИТЕЛИ БАКТЕРИАЛЬНЫХ ИНФЕКЦИЙ ЧЕЛОВЕКА

Учебное пособие

Волгоград

2013

УДК 576.8/616 - 097(076.5)

ББК 28.4

Авторы:

д.м.н., профессор В.С. Крамарь

д.м.н., доцент Т.Н. Савченко

к.м.н., доцент Л.В. Михайлова

к.б.н., ассистент А.К. Рябинин

к.м.н., ассистент Г.А. Четвертнова

ст. преподаватель Л.А. Блинцова

Частная микробиология: учебное пособие. - Волгогр. гос. мед. университет. -Волгоград, 2013. – 142 с.

Под редакцией д.м.н., профессора О.Г. Крамарь.

В учебном пособии дана характеристика совокупности методов обнаружения и технических приемов, используемых для обнаружения и выделения патогенных и условно-патогенных бактерий от больных, носителей и объектов внешней среды; обоснована техническая подготовка, а также приобретение практических навыков по микробиологии, которые ориентированы на конечную цель - подготовку врачей в соответствии с квалификационными характеристиками.

Учебное пособие составлено в соответствии с программой по микробиологии, вирусологии и иммунологии для студентов вузов ГОУВУНМУ, 2009.

Рецензенты: зав. кафедрой микробиологии, вирусологии и иммунологии Саратовского государственного медицинского университета, д.м.н., профессор Г.М. Шуб; зав. кафедрой микробиологии, вирусологии и иммунологии Ростовского государственного медицинского университета, д.м.н., профессор Л.И. Васильева.

Учёт успеваемости и посещаемости

Студента___________________________курса__________

Факультета____________________________группы_____

Тема итогового занятия		Дата	Оценка	Подпись		Практические навыки		Подпись
Весенний семестр
I
II
III
Осенний семестр
I
II
УИРС					Пропуски и отработки
Рефераты			Самостоятельная исслед. работа (в баллах)		Практические занятия		Лекции
Тема	Оценка (в баллах)

ИТОГО БАЛЛОВ ____________

Оглавление

№№	Тема	стр.
1.	Введение в частный курс микробиологии. Цели и задачи частной микробиологии. Материалы и методы исследования. Бактерии, имеющие медицинское значение. Материал для исследования. Работа над материалом. Документация. Методы микробиологической диагностики	7
2.	Бактериальные инфекции, обусловленные энтеробактериями…..	16
	Дизентерия (шигеллез) ………………………………………..	23
	Холера…………………………………………………………..	28
	Эшерихиозы…………………………………………………….	36
	Пищевые токсикоинфекции и токсикозы……………………..	39
	Кишечные инфекции……………………………………………	40
	Ботулизм…………………………………………………	41
	Сальмонеллез ……………………………………………	43
	Возбудители кишечных иерсиниозов…………………………	53
3.	Микробиологические методы идентификации микробов – возбудителей гнойной кокковой инфекции ………………………	57
	Стафилококки …………………………………………………..	58
	Стрептококковые инфекции …………………………………...	69
	Пневмококки ……………………………………………………	75
	Менингококковые инфекции ………………………………….	79
	Гонококковые инфекции ……………………………………….	85
4.	Возбудители бактериальных воздушно-капельных инфекций….	88
	Дифтерия ………………………………………………………..	89
	Туберкулез ………………………………………………………	94
	Коклюш и паракоклюш ………………………………………..	99
5.	Возбудители бактериальных зооантропонозных инфекций ……..	104
	Чума ……………………………………………………………..	105
	Сибирская язва ………………………………………………….	108
	Туляремия ………………………………………………………	112
	Бруцеллез ………………………………………………………..	115
6.	Возбудители раневых инфекций. Этиологическая структура. Принципы диагностики. Материал для исследования: особенности взятия, хранения транспортировки. Общая схема бактериологического исследования при раневой инфекции …..	118
	Перечень экзаменационных вопросов ……………………………	123
	Дополнительный перечень вопросов для студентов педиатрического факультета……………………………………………………………	135
	Дополнительный перечень вопросов для студентов стоматологического факультета………………………………….	137
	Дополнительный перечень вопросов для студентов фармацевтического факультета…………………………………..	137
	Конечные цели обучения …………………………………………	138
	Практические навыки………………………………………………	140

ВВЕДЕНИЕ В ЧАСТНЫЙ КУРС МИКРОБИОЛОГИИ.

ЦЕЛИ И ЗАДАЧИ ЧАСТНОЙ МИКРОБИОЛОГИИ.

БАКТЕРИИ, ИМЕЮЩИЕ МЕДИЦИНСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ

Название рода и вида

Заболевания

ГРАМПОЛОЖИТЕЛЬНЫЕ КОККИ

Стафилококки Staphylococcus species Гнойно-воспалительные заболевания Стрептококки Streptococcus species Streptococcus pneumoniae То же, скарлатина, рожа Гнойно-воспалительные заболевания Энтерококки Enterococcus species To же Микрококки Micrococcus species Пептококки Peptococcus species Пептострептококки Peptostreptococcus species

ГРАМОТРИЦАТЕЛЬНЫЕ КОККИ

Гонококки Neisseria gonorhoeae Гонорея Менингококки Neisseria meningitidis Менингококковая инфекция Моракселлы Подроды Moraxella, Branhamella Гнойно-воспалительные заболевания Вейлонеллы Veillonella То же

И ВЕТВЯЩИЕСЯ БАКТЕРИИ

Коринебактерии Corynebacterium diphtheriae Дифтерия Микобактерии ( М. tuberculosis, M. bovis, M. africanum Условно-патогенные ми-кобактерии Mycobacterium Leprae Туберкулез Микобактериоз Проказа (лепра) Актиномицеты Actinomyces species Гнойно-воспалительные заболевания Нокардии Nocardia species То же Бифидобактерии Bifidobacterium species Представитель микрофлоры Эубактерии Eubacterium species Гнойно-воспалительные заболевания Пропионибактерии Propionibacterium species То же Мобилункусы Mobiluncus species - « -« -

Материал для исследования

Для проведения микробиологического исследования нужен материал, который, несомненно, или вероятно содержит микроорганизм.

Все биологические жидкости, мягкие и твердые ткани, продукты воспалительных процессов являются подходящим материалом для исследования.

Важным моментом считают распределение материала на:

нормально стерильный:	нормально нестерильный:
кровь	содержимое полости рта, желудка, кишечника, вагинальное содержимое
ликвор	наружное ухо
суставная жидкость	конъюнктива
плевральная и перитонеальная жидкость	поверхность кожных покровов
внутричерепное содержимое
внутренние органы, как: печень, селезенка, предстательная железа, яички, матка, железы внутренней секреции

Способы микробиологического исследования и толкования находок подчиняются вышеназванному распределению материалов. При соблюдении правил взятия нормально стерильного материала на исследование легче толковать микробную находку.

Выяснить микробный фактор в нормально нестерильных органах значительно труднее, так как:

- болезнетворность микроорганизмов нужно выявлять среди других несущественных микроорганизмов;

- микроорганизм-возбудитель может относиться к резидентной микрофлоре;

- микроорганизм-возбудитель может быть каким-нибудь слабо патогенным микроорганизмом, который часто обитает в организме человека, не вызывая заболевания.

Исследования и толкование находки микроорганизма могут быть значительно облегчены, если материал достоверен, достаточен по количеству, взят в подходящее время.

Достоверным материал бывает тогда, когда он взят из больного органа (мокрота, а не слюна, средняя порция мочи, а не начальная, секрет из глубины носа, а не из ноздрей, гнои из глубины, а не из отверстия свища и др.).

Полученный результат может быть недостоверным в силу того, что больной принимал до обследования антибиотики, которые могут обладать бактерицидным или бактериостатическим эффектом.

Достаточное количество материала дает возможность провести более расширенные исследования. Взятый в подходящее время материал содержит живые микроорганизмы в оптимальном количестве.

Работа над материалом

Сюда относятся: взятие, хранение, транспортировка, обработка.

Взятие материала осуществляется с помощью стерильного инструмента в стерильные сосуды. В некоторых случаях необходимо это проводить в стерильном помещении. Попадание микроорганизмов из внешней среды в материал может помешать развитию микроорганизмов-возбудителей заболевания, так как микроорганизмы-сапрофиты развиваются более активно. Это нередко уводит толкование находки в неправильном направлении.

Хранение материалов происходит при наиболее подходящей температуре, причем надо избегать их высушивания. Рекомендуется прибавлять поддерживающие средства (консерванты), обеспечивающие рН и другие условия для сохранения деликатных микроорганизмов и торможения развития побочных микроорганизмов.

Транспортировка представляет собой часть процесса хранения, к которым прибавляются дополнительные требования, чтобы не повредить материал и не загрязнить окружающую среду при транспортировке заразного материала.

Документация

Материал, посылаемый в лабораторию для исследования, должен иметь сопроводительный бланк, в котором необходимо отметить:

- учреждение, направляющее материал;

- дату направления;

- фамилию, имя, отечество обследуемого;

- возраст,

- адрес;

- где работает или какое учреждение посещает;

- характер материала: кал, мокрота, желчь, кровь и др.;

- цель исследования;

- дата заболевания, предварительный диагноз и др. указания к анализу;

- дата и время сбора материала.

В направлении должна быть точно указана цель исследования для того, чтобы в лаборатории были применены соответствующие методы обработки и питательные среды. Тесная связь между бактериологом, клиницистом и эпидемиологом, направляющим материал для анализа, обеспечивает сознательное, плодотворное отношение работе.

Таблица 1

БАКТЕРИАЛЬНЫЕ ИНФЕКЦИИ,

Вопросы для обсуждения

1. Биология возбудителя кишечных эшерихиозов.

2. Эпидемиология, патогенез, клиника.

3. Микробиологическая диагностика.

4. Специфическое лечение и профилактика.

Самостоятельная работа

1. Используя демонстрационный материал провести 2-й и 3-й этапы бактериологического исследования испражнений для выделения возбудителя кишечного эшерихиоза.

2. Оценить результаты посева испражнений на среду Эндо. Результат записать в протокол.

3. Поставить РА с поливалентной ОК – сывороткой.

4. Используя демонстрацию, оценить результаты посева агглютинирующихся ОК – сывороткой, лактозоположительных колоний на среде Клиглера.

5. Определить серогруппу выделенной на среде Клиглера культуры диареегенной кишечной палочки.

Заключение:

ДИЗЕНТЕРИЯ (ШИГЕЛЛЕЗ)

Дизентерия - инфекционное заболевание, характеризующееся общей интоксикацией организма, поносом и своеобразным поражением слизистой оболочки толстой кишки.

Цель занятия: выработать навыки лабораторного анализа шигеллеза.

Знать:

- возбудителей дизентерии;

- биологию возбудителей дизентерии;

- эпидемиологию заболевания;

- лабораторную диагностику дизентерии;

Уметь:

- интерпретировать полученные результаты бактериологического анализа копрокультуры;

- оценить результаты антибиотикограмм;

- подобрать препараты для специфической профилактики и терапии данной болезни.

Шигеллы (род Shigella )

Род получил название по имени К. Шига, который в 1898 г. летально изучил микроб, известный в настоящее время под названием S . dysenteriae , серовара 1.

Род Shigella включает 4 вида, которые различаются по биохимическим свойствам и антигенной структуре: S . dysenteriae - 12 сероваров; S . flexneri - 9 сероваров; S . Boydii - 18 сероваров; S . son nei - 1 серовар.

Морфология. Шигеллы - неподвижные палочки размером 0,5-0,7х2-3 мкм, спор и капсулу не образуют.

Культуральные свойства. Хорошо культивируются на простых питательных средах. На плотных средах образуют мелкие гладкие блестящие полупрозрачные колонии, на жидких - диффузное помутнение. Жидкой средой обогащения является селенитовый бульон. У S . sonnei отмечена при росте на плотных средах S-, R-диссоциация.

Биохимические свойства. Шигеллы обладают слабой биохимической активностью по сравнению с родами Escherihia и Salmonella .

Основные биохимические признаки, необходимые для идентификации при выделении чистой культуры:

• не образуют газ при ферментации глюкозы;

• не расщепляют лактозу;

• не продуцируют сероводород.

S . dysenteriae не расщепляет маннитол. S . sonnei способен ферментировать лактозу медленно, в течение 72 ч.

Антигенная структура. Все шигеллы обладают соматическим О-антигеном, в зависимости от строения которого происходит подразделение на серовары, a S . flexneri внутри сероваров подразделяется на подсеровары. Серовароспецифические О-антигены S . flexneri детерминируются конвертирующими бактериофагами. S . sonnei обладает антигеном фазы 1, который является К-антигеном.

Факторы патогенности. Вс вилы шигелл инвазируют слизистую оболочку толстой кишки с последующим межклеточным распространением. Эта способность связана с функционированием крупной плазмиды инвазии, которая имеется у всех 4 видов шигелл. Возбудители дизнтерии продуцируют экзотоксин – шигаподобный токсин. Эндотоксин защищает шигеллы от действия низких значений рН и желчи.

Патогенез и клиническая картина. Шигеллезы - это инфекционные заболевания, характеризующиеся поражением толстой кишки с развитием колита и интоксикацией организма. Заболевание характеризуется сложными начальными этапами патогенеза. Проникнув через М-клетки в подслизистую оболочку, шигеллы взаимодействуют с макрофагами, вызывая их апоптоз. В результате происходит выделение цитоксинов ИЛ-8, который инициирует развитие воспалительного процесса в подслизистой оболочке и как следствие воспалительной диареи.

Апоптоз фагоцитов позволяет шигеллам проникнуть в эпителиальные клетки с базальной стороны. Межклеточное распространение шигелл приводит к развитию эрозий. При гибели шигелл происходит выделение шига- и шигаподобных токсинов, действие которых вызывает появление крови в испражнениях. Патологический процесс ограничивается толстой кишкой.

Первый день исследования

Испражнения наносят на питательную среду и растирают стерильным шпателем на небольшой площадке среды в чашке Петри, затем шпатель отрывают от агара и не прижимая его, продолжают растирать по остальной поверхности среды. Этим достигается равномерный рост колоний по всей поверхности. Засеянные чашки Петри в перевернутом виде помещаются в термостат при 37 (на 18-24 часа). На дне каждой чашки проставляют номер анализа.

Второй день исследования

Чашки с посевом просматривают невооруженным глазом. Просмотр чашек и отбор подозрительных колоний является одним из ответственных этапов бактериологического исследования. На среде Плоскирева дизентерийные бактерии растут в виде мелких, нежных, прозрачных колоний. Подозрительные колонии с чашек пересевают на короткий пестрый ряд для определения основных свойств культур. Короткий пестрый ряд может состоять из сред Гисса с лактозой, глюкозой маннитом и сахарозой (полужидких или жидких сред). В зависимости от характера ферментации ингредиентов среды (лактоза, глюкоза, маннит и др.) различными представителями бактерий кишечной группы наблюдается различное окрашивание среды. При отсутствии на чашке подозрительных колоний дается отрицательный ответ.

Третий день исследования

Изучение выделенных культур начинают с учета их ферментативной активности. Если все культуры от данного обследуемого сбраживают лактозу и глюкозу с газообразованием то, дается отрицательный ответ. Неподвижные культуры, не разлагающие лактозу и мочевину, и разлагающие ферментирующую глюкозу до кислоты без газа являются подозрительными на дизентерийную группу и подвергаются дальнейшему изучению. Культуры неподвижных грамотрицательных бактерий, ферментирующих глюкозу без газообразования, испытывают в опыте агглютинации на стекле с набором дизентерийных адсорбированных сывороток. Материалом для агглютинации является рост культуры на среде с мочевиной или на скошенном агаре. Вести испытание культур в реакции агглютинации на стекле рекомендуется сначала со смесью сывороток преобладающих видов (Флекснера, Зонне), а при наличии агглютинации со смесью сывороток – испытывают культуру отдельно с каждой из сывороток, входящих в данную смесь. Положительная реакция на стекле с типоспецифическими сыворотками является только ориентировочной, в связи с чем необходимо поставить развернутую реакцию агглютинации в пробирках до титра сыворотки указанного на этикетке, начиная с разведения 1:100 и физиологическом растворе. Контролем служат две пробирки: одна содержит взвесь микробов в физиологическом растворе (без сыворотки), другая – сыворотку в наименьшем разведении (без микробных тел). Все пробирки помещают в термостат при 37 ^оС до следующего дня.

Четвертый день исследования

Отмечают изменения во всех углеводных средах, образование индола, сероводорода, учитывается подвижность, каталазная проба. В этот же день учитывают результаты пробирочной реакции агглютинации. Основание для выдачи положительного ответа является обнаружение неподвижной грамотрицательной палочки, не сбраживающей лактозу и не образующей сероводород, ферментирующей глюкозу до кислоты. При этом обязательно указывают вид и тип выделенного штамма.

Самостоятельная работа студентов

1. Микробиологический диагноз дизентерии.

А. Познакомиться с классификацией шигелл, а также со схемой исследования при дизентерии.

Б. Изучить характер роста шигелл на средах Левина, Плоскирева, Олькеницкого.

В. Знать ход исследования испражнений при диагностике дизентерии:

а) 1-й день – сделать посев на среды Левина и Плоскирева;

б) 2-й день – изучить посевы на чашках, отобрать изолированные колонии, посеять на среду Ресселя или Клиглера;

в) изучить биохимическую активность культуры на среде Ресселя;

г) поставить ориентировочные реакции агглютинации со специфическими монорецепторными дизентерийными сыворотками;

д) полученные данные занести в протокол.

2. Серологическая диагностика дизентерии:

а) изучить серологический метод исследования при дизентерии;

б) полученные данные занести в протокол.

Выполненную работу и полученные результаты оформить в виде протокола по схеме:

Дата	Что сделано	Результаты исследования
1-й день	Посев исследуемого материала
2-й день	Бактериологическое исследование Серологическое исследование
3-й день

Заключение:

ХОЛЕРА

Холера – это острая антропонозная карантинная кишечная инфекция. Высокая заразительность приводит к развитию эпидемии и пандемии. Для их предотвращения проводят специальные санэпидемиологические мероприятия, устанавливают особый режим в очаге. Для холеры характерен тяжелый обезвоживающий понос с испражнениями в виде рисового отвара и нарушением водно-солевого обмена.

Цель занятия: выработать навыки лабораторного анализа холеры.

Знать:

- основных возбудителей холеры;

- биологию возбудителей;

- эпидемиологию заболевания;

- лабораторную диагностику;

- профилактику и терапию заболевания.

Уметь:

- оценить полученные лабораторные данные.

Раздел	Вопросы для изучения
Биология возбудителя холеры	1. Таксономическое положение: Семейство Vibrionaceae, род Vibrio, вид V.cholera, V.eltor 2. Морфологические свойства: Изогнутые палочки в виде запятой, подвижные. 3. Тинкториальные свойства: Гр- палочки. 4. Тип дыхания: аэробы. 5. Элективные питательные среды: а) щелочной агар; б) щелочная пептонная вода; 6. Культуральные свойства. Рост на щелочном агаре через 12 часов в виде голубоватых колоний, рост в пептонной воде через 5 часов в виде пленки. 7. Биохимические свойства: Оксидаза +, глюкоза К, разжижает желатин, на средах триады Хейберга (маннит К, сахарозаК, арабиноза -) относится к 1 группе. 8. Антигенные свойства: Групповой 0-соматический, общий для вида – Н жгутиковый антиген. 9. Определение серогруппы по 0-антигену. Возбудитель относится к 01 серогруппе. 10. Серовары холерного вибриона: Инаба, Огава, Гикошима. 11. Биовары холеровибриона: а) классический; б) Эль-Тор. 12. Факторы вирулентности: Экзотоксин (холероген) вызывает нарушения водно-солевого обмена, цитотоксическое действие, вызывающее гибель эпителия тонкой кишки. Эндотоксин – угнетение фагоцитоза, понижение кровяного давления; инфекционно-токсические явления Пили – адгезия к клеткам слизистой Фибринолизин, гиалуронидаза – ферменты агрессии.
Эпидемио-логия, патогенез	Источник инфекции – больной человек, носитель и реконвалесцент. Пути заражения: водный, алиментарный, контактно-бытовой. Клинические варианты болезни: 1) энтерит; 2) гастроэнтерит; 3) алгид (полное обезвоживание).
Микробио-логическая диагнос- тика	Основные методы диагностики 1. Бактериологическое исследование в лаборатории особо опасных инфекций (36 часов). 2. Иммуноиндикация – РИФ. 3. Генетические методы ДНК – зондирование. 4. Серологическое исследование – р. агглютинации, лизиса – ретроспективная диагностика. При подозрении на холеру от больного берут фекалии и рвотные массы. Из объектов окружающей среды обследуют воду и остатки пищи. 1 этап – первичный посев в пептонную воду и на щелочной агар. 2 этап – просмотр роста в пептонной воде (через 8 часов). При наличии пленки – микроскопия мазка по Граму и фазово-контрастная микроскопия препарата «висячей капли» (для оценки подвижности). Ориентировочная реакция агглютинации с 01-холерной сывороткой – выдача ориентировочного ответа. Если роста нет – повторный высев в щелочную пептонную воду – просмотр посева на щелочном агаре (через 12 часов). Отбор подозрительных колоний, микроскопия мазка по Граму, тест на оксидазу, реакция агглютинации с 01-холерной сывороткой, накопление чистой культуры. Если нет роста на щелочном агаре и в пептонной воде после повторного пересева или отрицательная реакция агглютинации с 01-холерной сывороткой, выдается отрицательный ответ. 3 этап – проверка чистоты накопленной культуры, постановка биохимических тестов и пробы с фагами, полимиксином, тест на гемолизин. 4 этап – окончательный учет результатов, постановка реакции агглютинации с сыворотками Инаба, Огава. Выдача окончательного ответа.

Полная схема идентификации включает дополнительно тесты на определение биоваров: гемагглютинации, чувствительности к лимиксину, гемолиза по Грейгу, реакции Фогеса-Проскауэра. Для подтверждения принадлежности холерных вибрионов к серогруппе 0139 достаточно положительного результата в слайд-агглютинации.

Культуры, имеющие признаки вибрионов по морфологии, тесту на индофенолоксидазу и ферментативной активности на полиуглеводной среде, не агглютинирующиеся на стекле холерными сыворотками 01 и 0139 серогрупп, выделенные от больных острыми кишечными инфекциями, изучают по тестам, определяющим принадлежность к роду Vibrio и виду V. choleiae и в пробе с диагностическими фагами.

Через 36-48 ч от начала исследования учитывают результаты идентификации и выдают окончательный ответ о выделении культуры холерного вибриона соответствующей серогруппы.. На культуры, имеющие характерные для вибрионов морфологические и культуральные признаки, относящиеся к первой группе по Хейбергу (манноз а +, сахароз а +, арабиноз а -), агглютинирующиеся сывороткой серогруппы 01 и вариантспецифическими сыворотками (Инаба, Огава) не менее чем до ½ титра, лизирующихся и нелизирующихся холерным и эльтор-фагами, а также на культуры, агглютинирующиеся сывороткой 0139, выдают окончательный ответ. Для холерных вибрионов 01 серогруппы указы вают биовар на основании чувствительности к одному из диагностических фагов(эльтор или холеры) и (или) по дополнительным признакам для фагорезистентных культур. Культуры холерных вибрионов 01 и 0139 изучают по гемолитической активности в пробе Грейга и чувствительности к антибиотикам, используемым в клинической практике для лечения холеры. Токсигенные штаммы холерных вибрионов 01 и 0139 серогрупп не лизируют эритроциты барана, в отличие от гемолизпозитивных нетоксигенных штаммов.

Вопросы для обсуждения

1. Классификация вибрионов.

2. Биология возбудителей.

3. Патогенез холеры.

4. Методы лабораторной диагностики холеры.

5. Бактериологический метод исследования холеры.

6. Ускоренная диагностика холеры.

7. Лечение и профилактика холеры.

Самостоятельная работа студентов

1. Познакомиться со схемой исследования при диагностике холеры.

2. Познакомиться с подготовкой материала к отправке в лабораторию (демонстрация).

3. Выписать направления для исследования испражнений.

4. Изучить ход исследования испражнений на наличие холерных вибрионов:

а) познакомиться с ускоренной диагностикой холеры;

б) познакомиться с методом иммобилизации и микроагглютинации, посмотреть демонстрационные препараты под микроскопом;

в) сделать посев испражнений на первую пептонную воду и щелочной агар.

5. Изучить дальнейший ход исследования испражнений:

а) приготовить мазки из колоний на щелочном агаре, окраска по Граму;

б) изучить подвижность микробов из колоний в раздавленной капле;

в) сделать посев культуры в пробирки с лактозо-сахорозной средой;

г) поставить агглютинацию с О-сывороткой.

6. Познакомиться с идентификацией выделенной чистой культуры (демонстрация):

а) рост на лактозо-сахарной среде;

б) проба на диастазу;

в) развернутая реакция агглютинации с О-холерной сывороткой;

г) биохимические свойства (среды Гисса);

д) нитрозо-индоловая реакция;

е) гемолиз;

ж) учесть результаты пробы с диагностическим холерофагом.

7. Познакомиться с препаратами, применяемыми для диагностики, лечения и профилактики холеры.

Выполненную работу и полученные результаты

оформить в виде протокола по схеме:

ЭШЕРИХИОЗЫ

Группа инфекционных заболеваний, вызываемых микроорганизмами рода Escherichia. При эшерихиозах наблюдается диарея с выраженны м болевы м синдромом.

Цель занятия: выработать навыки лабораторного анализа эшерихиоза.

Знать:

- возбудителей эшерихиозов;

- биологию возбудителей;

- эпидемиологию возбудителей;

- лабораторную диагностику.

Уметь:

- интерпретировать полученные результаты бактериологического анализа эшерихиозов;

- оценить результаты антибиотикограмм;

- подобрать препараты для специфической профилактики и терапии заболеваний.

Раздел	Вопросы для изучения
Биология возбудителя	Таксономическое положение 1. Таксономическое положение. Семейство Enterobacteriaceae, род Escherichiae 2. Морфологические свойства: Гр-палочки. Подвижны. 3. Тип дыхария: факультативные аэробы. 4. Культураутьные свойства: элективные питательные среды - Эндо, Плоскирева. 5. Биохимические свойства: оксидаз оотрицательны, активно ферментируют углеводы с образфанием К и Г индол + сероводород - 6. Антигенное строение: О – Аr - более 170 вариантов; К – Аr - более 100 вариантов; Н – Аr - около 60 вариантов.
Патогенез	Возбудителями являются четыре группы Е. coli 1) энтеротоксигенные (ЭТКП) 2) энтероинвазивные (ЭИКП) 3) энтеропатогенные (ЭПКП) 4) энтерогеморрагические (ЭГКП)
Лабораторная диагностика	Основной метод диагностики - бактериологический: 1 ) посев на дифференциально-диагностические среды; 2) выделение чистой культуры; 3) биохимическая идентификация; 4) сероидентификация. Определение принадлежности к серогруппам позволяет отличить условно-патогенные от диареегенных. Внутривидовая идентификация, имеющая эпидемиологическое значение, заключается в определении серовара с помощью диагностических адсорбированных иммунных сывороток.

Специфическая профилактика не разработана.

ВОПРОСЫ ДЛЯ ОБСУЖДЕНИЯ

1. Биология возбудителя фнпечных эшерихиозов.

2. Эпидемиология, патогенез, клиника.

3. Микробиологическая диагностика.

4. Специфическое лечение и профилактика.

САМОСТОЯТЕЛЬНАЯ РАБОТА

1. Используя демонстрационный материал, провести 2-й и З-й этапы бактериологического исследования испражнений для выделения возбудителя кишечного эшерихиоза.

2. Оценить результаты посеве испражнений на среду Эндо. Результат записать в протокол.

3. Поставить РА с поливалентной ОК - сывороткой.

4. Используя демонстрацию, оценить результаты посева агглютинирующихся ОК - сывороткой, лактозоположительных колоний на среде Клиглера.

5. Определить серогруппу выделенной на среде Клиглера культуры диареегенной кишечной палочки.

БОТУЛИЗМ

Раздел	Вопросы для изучения
Биология возбудителя	Возбудителем ботулизма является Clostridium botulinune. С.botulinum представляет подвижную спорообразующую палочку субтерминальным расположением споры. Строгий ага-эроб. Продуцирует сильный экзотоксин (смертельная доза для человека 0,3 м кг). По антигенной структуре выделяем ого ток-сина. С.botulinum подразделяется на 7сероваров: А, В, С, D, E, F. Для человека наиболее патогенны серовары А, В, Е.
Эпидемиоло-гия	Ботулизм являетcя типичной токсикоинфекцией. Возбудитель широко распространен в природе. Он обнаружен в почве, навозе, фруктах, овощах, рыбе и консервах. Он содержится в экстрементах теплокровных животных и человека. Ботулизм связан с употреблением продуктов, приготовленных дома без соблюдения правил санитарной обработки. Микроорганизмы при благоприятных условиях (анаэробные) образуют токсин.
Клиника	Типичная токсикоинфекция. Инкубационный период длится всего до 36 часов.
Иммунитет	Развивается антибактериальный и антитоксический иммунитет.
Лабораторная диагностика и лечение	Основная цель микробиологической диагностики ботулизма заключается в выявлении ботулотоксина и определении его серовара в материалах, взятых от больного (кровь, промывные воды желудка), а также пищевых продуктах. Ботулотоксин выявляется в реакции нейтрализации на мышах, а также методами серологического исследования: РНГА, ИФА, реакции преципитации.

Для лечения ботулизма обязательно используют антитоксическую противоботулинистическую сыворотку.

Специфическая профилактика применяется в виде анатоксинов, входящих в состав секстаанатоксина в комбинации с брюшнотифозной вакциной.

ВОПРОСЫ ДЛЯ ОБСУЖДЕНИЯ

1. Биология возбудителей пищевых токсикозов.

2. Эпидемиология, патогенез, клиника.

3. М икробиологическая диагностика.

4. Специфическое лечение и профилактика.

САМОСТОЯТЕЛЬНАЯ РАБОТА

1. Микроскопия препаратов S. aureus и С. botulism.

2. Методом РНГА по схеме, изложенной в таблице определить наличие ботулотоксина и его серовар в промывных водах желудка больного.

№ лунок ингридиенты	1	2	3	4	5	6	7
Физиологический раствор	0,2	0,2	0,2	0,2	0,2	0,2	0,2
Исследуемый материал 1:5	0,2	-	-	-	-	-	-
Разведение исследуемого материала	1:10	1:20	1:40	1:80	1:160	1:320	К
Эритроцитарный диагностикум	0,2	0,2	0,2	0,2	0,2	0,2	0,2
Результаты: Диагностикумы: Поливалентный
К серовару А
К серовару В
К серовару Е

Заключение:

Сальмонеллез

Род получил название по имени Сальмоне, который в 1885 г. описал микроб, выделенный из свиньи.

Сальмонеллез – острая инфекционная болезнь животных и человека, вызываемая бактериями рода Salmonellae, передающаяся в большинстве случаев через пищевые продукты и характеризующаяся преимущественным поражением желудочно-кишечного тракта.

Цель занятия: выработать навыки лабораторного анализа сальмонеллеза.

Знать:

- возбудителей сальмонеллеза;

- биологию возбудителей;

- эпидемиологию заболевания;

- лабораторную диагностику;

- профилактику сальмонеллеза.

Раздел

Вопросы для изучения

Биология возбудителя

Таксономическое положение Семейство – Enterobacteriacea, род – Salmonella. 1. Морфологические свойства: палочки, перетрихи. 2. Тинкториальные свойства: Гр- тип дыхания. 3. Элективные питательные среды: Эндо, Плоскирева, желчный бульон. 4. Культуральные свойства: температурный оптимум роста 35-37^оС, через 24 часа роста образуют мелкие прозрачные колонии S, иногда R формы. 5. Биохимические свойства: не способны ферментировать адонит, лактозу, сахарозу, салицин, не расщепляют мочевину и не продуцируют индал, но образуют сероводород. 6. Антигенная структура: O-Ar - термостабильный, Н-Ar - термостабильный. По О антигену сальмонеллы делятся на серологические группы, а по Н - на серовары. Один из компонентов антигенной структуры - Vi антиген, или антиген вирулентности.

Принципы терапии пищевых токсикоинфекций:

- легкие формы лечат средствами патогенетической терапии, восстанавливающими водно-солевой баланс;

- при тяжелых формах назначают этиотропную терапию – антибиотики.

Вопросы для обсуждения

1. Сальмонеллы - возбудители сальмонеллезов.

2. Патогенез, роль энтеро и эндотоксинов в возникновении диарейного синдрома.

3. Методы лабораторной диагностики сальмонеллезов.

4. Лечение и профилактика сальмонеллезов.

Самостоятельная работа студентов

1. Произвести посев исследуемого материала на среду Плоскирева.

2. Изучить выросшие подозрительные колонии.

3. Сделать мазки из подозрительных колоний и окрасить их по Граму.

4. Изучить биохимическую активность на среде Олькеницкого.

5. Поставить ориентировочную реакцию агглютинации с сыворотками А, В, С, Д групп.

6. Поставить биологическую пробу (заражение белой мыши pes os).

7. Полученные данные занести в протокол.

Вопросы для обсуждения

1. Классификация и общая характеристика семейства энтеробактерий.

2. Патогенез брюшного тифа и паратифа А и В.

3. Методы лабораторной диагностики брюшного тифа и паратифа А и В в

различные сроки заболевания.

4. Бактериологический метод исследования брюшного тифа и

паратифа А и В в разные стадии патогенеза заболевания.

5. Выявление бактерионосительства при брюшном тифе.

6. Серологический метод диагностики брюшного тифа и паратифа А и В.

7. Лечение и профилактика брюшного тифа и паратифа А и В.

Самостоятельная работа

Бактериологическое исследование крови брюшнотифозного больного на гемокультуру:

1. Произвести посев исследуемого материала на среду Рапопорт.

2. Изучить изменение цвета среды (помутнение; наличие пузырьков газа в поплавке).

3. Пересеять на среду Эндо.

4. Занести полученные данные в протокол.

5. Изучить различия колоний на среде Эндо. Отобрать подозрительные колонии и произвести посев для накопления чистой культуры. Описать культуральные свойства.

6. Исследовать чистую культуру по морфологическим, тинкториальным, биохимическим, антигенным свойствам. Полученные данные занести в протокол.

7. Идентифицировать чистую культуру возбудителя.

ВОПРОСЫ ДЛЯ ОБСУЖДЕНИЯ

1. Биология возбудителей кишечного иерсиниоза.

2. Эпидемиология, патогенез, клиника.

3. Микробиологическая диагностика.

4. Специфическое лечение и профилактика.

САМОСТОЯТЕЛЬНАЯ РАБОТА

1. Определить фаговар выделенного возбудителя из гемокультуры.

2. По результатам посева на «Энтеротест» определить родовую принадлежность выделенного возбудителя. Результат записать в протокол.

3. Микроскопия мазков из культур Y.enterocolitica и Y.pseudotuberculosis.
По результатам проведенных исследований поставить диагноз:

а) по результатам биохимической идентификапии при помощи энтеротестов I и II определить вид выделенной из фекалий больного иерсинии, результат запротоколировать в таблице:

H₂S		Энтеротест 1
Ман
Лиз. Дк.
Индол
Орнитин
Цитрат
Уреаза
Онфг
Ф-П
Инозит
Липаза
Фенилаланин
Мал		Энтеротест 2
Адо
Цел
Рам
Аринин
Сах
Сор
Эскул
Тре
Дул
Глю

Заключение:

б) по результатам РПГА определить тигры антител в сыворотке больного иерсиниозом. Определить с каким из примененных эритроцитарных диагностикумов реакция прошла в диагностическом титре. Сделать заключение, результат запротоколировать в таблице:

Тип диагностикума	Титр реакции
Интегральный У. pseudotuberculosis
Y. enterocolitica О₃
Y. enterocolitica О₉

Заключение:

Стафилококки

Цель занятия: овладеть навыками микробиологической диагностики стафилококковых инфекций.

Знать:

- биологию возбудителей;

- эпидемиологию инфекции;

- организацию лабораторной диагностики.

Уметь:

- оценить полученные данные идентификации возбудителей;

- подобрать препараты для специфической профилактики и терапии гнойно-воспалительных инфекций, обусловленных стафилококками.

Раздел	Вопросы для обсуждения
Биология возбудителя	I . Таксономия. Возбудители стафилококковых инфекций относятся к семейству Micrococcaceae, роду Staphylococcus. Этот род включает в себя более 20 видов, которые подразделяются на две группы – коагулазоположительные и коагулазоотрицательные стафилококки, Наиболее значимыми являются: St aureus, St. epidermidis, St. saprophyticus. II . Основные биологические свойства: 1. Морфологические свойства – кокки с диаметром клеток от 0,6501 мкм, не образующие капсул и спор; 2. Тинкториальные свойства – грамположительные кокки; 3. Культуральные свойства – факультативные анаэробы. Температурный оптимум +37 °С, но могут расти в пределах температуры от +10 до +48 °С. Оптимальная реакция питательной среды рН = 7,2-7,4. Стафилококки хорошо растут на обычных питательных средах. На бульоне микробы образуют сильную муть и осадок на дне пробирки. Дифференциально-диагностическими средами являются желточно-солевой и молочно-солевой агар. 5–10 %-ная поваренная соль губительно действует на сапрофитные микробы и поэтому на солевом агаре стафилококки хорошо растут при посеве даже загрязненного материала. На молочно-солевом агаре выявляется пигмент из группы каротинидов – золотистых, кремовых, белых, лимонно-желтых. 4. Биохимические свойства: Стафилококки ферментизируют (без газа) лактозу, глюкозу, сахарозу, мальтозу, маннит, ксилозу, фруктозу, глицерин, быстро сбраживают молоко. При посеве уколом в столбик мясо-пептонной желатины на 2-3 день заметна зона разжижения. Стафилококки выделяют сероводород и не образуют индола, восстанавливают нитраты в нитриты. Каталазоположительные. 5. Факторы патогенности: А. Факторы адгезии, обусловленные полисахаридами, белком А, способностью связывать фибронектин; Б. Разнообразные ферменты, играющие роль факторов "агрессии и защиты": плазмокоагулаза (главный фактор патогенности), гиалуронидаза, ДНК-аза, лецитиназа, фосфатаза, протеиназа; В. Комплекс секретируемых экзотоксинов: а) мембраноповреждающие токсины: · гемолизины, · лейкоцидин, · фибронолизин, · летальный токсин, · некротоксин; б) эксфолиативныс токсины; в) экзотоксин, вызывающий синдром токсического шока (СТШ); г) энтеротоксин; Г. Факторы, угнетающие фагоцитоз: · капсула, · белок А, · пептидогликан, · тейхоевые кислоты. – 6. Антигенные свойства: у стафилококков обнаружено более 50 типов антигенов. По специфичности антигены подразделяются на: – - общие для всего рода Staphylococcus, антигены общие с изоантигенами эритроцитов, кожи и почек человека; – - видовые – типоспецифические антигены. По типоспецифическим антигенам стафилококки разделяются более чем на 30 серовариантов.
Эпидемио-логия	Стафилококки являются постоянными обитателями кожи и слизистых оболочек; заболевания, вызываемые ими, могут носить характер либо аутоинфекции, либо экзогенной инфекции, обусловленной контактно-бытовым, воздушно-капельным, воздушно-пылевым или алиментарным способами заражения.
Патогенез	Стафилококки легко проникают в организм через мельчайшие повреждения кожи и слизистых оболочек и могут вызвать самые различные заболевания – от юношеских угрей до тяжелейшего перитонита, эндокардита, сепсиса или септикопиемии, при которых летальность достигает 80 %. Стафилококки вызывают фурункулы, гидрадениты, абсцессы, флегмоны, остеомиелиты. Инфицирование стафилококками пищевых продуктов – частая причина пищевых отравлений. Стафилококки – главные виновники сепсиса, в том числе у новорожденных. В отличие от бактериемии (бактерии в крови), которая является симптомом болезни.
Постинфек-ционный иммунитет	Обусловлен как гуморальными, так и клеточными факторами. Важную роль играют антитоксины, антимикробные антитела, антитела простых ферментов, а также Т-лимфоциты фагоциты.

Для этиотропной терапии острых форм гнойно-воспалительных заболеваний стафилококковой этиологии используют противостафилококковый гамма-глобулин, стафилококковую плазму, поливалентные стафилококковые бактериофаги, а для иммунотерапии хронических форм – стафилококковый анатоксин, аутовакцины, стафилококковую убитую вакцину ВП-4, стафило-протейно-синегнойную вакцину.

При специфической иммунопрофилактике с помощью стафилококкового анатоксина можно создать активный антитоксический противостафилококковый иммунитет, а с помощью стафилококковой плазмы и противостафилококкового гамма-глобулина – пассивный антитоксический противостафилококковый иммунитет контактным лицам.

Идентификация стафилококков

Целью первичной идентификации является установление принадлежности выделенной культуры к семейству Micrococcaceae и роду Staphylococcus. Для установления принадлежности культур к семейству микрококков используют тест на каталазу.

Отмечают способность представителей семейства микрококков, имеющих фермент каталазу, расщеплять перекись водорода, образуя воду и газообразный кислород.

В отличие от микрококков представители родственного семейства стрептококков каталазы не имеют.

Реакция плазмокоагуляции

Принцип. Под действием фермента плазмокоагулазы активизируется естественная система свертывания крови (плазминогенротромбин).

Приготовление свежей плазмы. Стерильно взятую из сердца кровь кролика в количестве 3 мл вносят в пробирку с 2 мл стерильного 5 % раствора лимоннокислого натрия, смешивают и центрифугируют для осаждения форменных элементов крови в течение 10 минут при 1500 об/мин.

Плазму отсасывают, разводят в 5 раз стерильным физиологическим раствором и разливают в стерильные пробирки по 0,5 мл.

Ход исследования. В пробирку вносят 1 петлю суточной агаровой культуры исследуемого штамма, которую суспензируют в плазме. Штатив с пробиркой помещают в термостат при 37 °С и регистрируют результаты через 1, 2, 4 и 18 часов инкубации.

Оценка результатов. Появление на дне пробирки студнеобразного сгустка любого размера считается положительным результатом реакции. Отсутствие свертывания плазмы в течение 18 часов расценивается как отрицательный результат. В качестве контроля рекомендуется ставить реакцию с заведомо коагулирующим и некоагулирующим штаммами, а также оставлять одну пробирку с плазмой незасеянной.

Окончательная идентификация S . aureus требует постановки еще двух тестов. На первом этапе определяют наличие у штаммов плазмокоагулазы. Если после этого штамм идентифицировать не удается, дополнительно определяют один из двух следующих признаков: наличие ДНК-азы (что предпочтительнее) или способность ферментировать маннит в анаэробных условиях.

При наличии положительного результата в реакции плазмокоагуляции и хотя бы в одном из двух предварительных тестов (пигмент лецитиназа) исследуемый штамм может быть отнесен к виду S . aureus (варианты 2-3).

Отсутствие плазмокоагулазы и хотя бы одного из двух первых признаков дает основание считать, что штамм не принадлежит к S. aureus (варианты 5-7).

Расхождения между результатами реакции плазмокоагуляции, с одной стороны, и двух предварительных тестов – с другой (варианты 4 и 8), требует постановки одного из двух дополнительных тестов (ДНК-азы или ферментации маннита в анаэробных условиях). В случае совпадения результатов дополнительного теста с результатами реакции плазмокоагуляции штамм считается либо относящимся к виду S . aureus при положительных результатах (варианты 4а и 4в), либо не относящимся к нему (при отрицательных, варианты 8б и 8г), или отрицательных (принадлежность к другим видам, варианты 4б и 4г) результатов.

Проводить идентификацию S . aureus лишь на основании результата одного теста не рекомендуется.

Определение ДНК-азы

Принцип. Под действием ДНК-азы (дезоксирибонуклеазы) добавленная в плотную среду высокополимерная ДНК распадается на низкополимерные фрагменты. При этом мутная, среда становится прозрачной.

Вопросы для обсуждения

1. Общая характеристика патогенных кокков.

2. Морфология, тинкториальные и культуральные свойства стафилококков.

3. Токсины и ферменты "агрессии".

4. Классификация стафилококков.

5. Способы обнаружения токсинов и ферментов "агрессии".

6. Лабораторная диагностика.

7. Препараты, применяемые для специфического лечения и профилактики стафилококковых заболеваний.

Самостоятельная работа студентов

1. Познакомиться со схемой исследования при кокковых заболеваниях по таблице.

2. Микробиологический диагноз стафилококковых и стрептококковых заболеваний:

- изучить демонстрационный препарат из чистых культур стафилококков, стрептококка; зарисовать;

- изучить рост стафилококка на кровяном агаре, желточно-солевом агаре и МПБ, рост стрептококка на кровяном МПА и на МПБ;

- сделать посев гноя на чашку с кровяным МПА;

- изучить демонстрационный посев гноя на кровяном агаре;

- приготовить мазок из гноя, окрасить по Граму, зарисовать;

- сделать посев гноя на сахарный МПБ для определения чувствительности микрофлоры к антибиотикам;

- определить чувствительность к антибиотикам по демонстрационным посевам;

- посмотреть демонстрацию методики посева крови на сепсис;

- учесть результаты реакции плазмокоагуляции;

- познакомиться с исследованием пищевого продукта на наличие патогенных стафилококков – демонстрация преподавателем техники приготовления суспензии из исследуемого продукта (творога) и посева на чашки с кровяным МПА и желточно-солевым МПА;

- изучить препараты, применяемые для диагностики и лечения кокковых заболеваний.

Протокол исследования гноя

Цель исследования	Ход исследования	Результат
1	1. Приготовление, окраска по Граму и микроскопия мазков из гноя. 2. Посев гноя на молочно-солевой агар, на желточно-солевой агар, на кровяной агар.
2	3. Микроскопия мазков из колоний. 4. Посев материала из колоний на сахарный агар газоном и определение чувствительности к антибиотикам методом дисков. 5. Посев материала из колоний на скошенный агар.
3	6. Пересев со скошенного агара на плазму и на маннит. 7. Провести фаготипирование.

Заключение:

Из гноя больного ________________________________________________

выделен ________________________________________________________

с наибольшей чувствительностью к ________________________________

фаготип________________________________________________________

Стрептококковые инфекции

Цель занятия: выработать навыки лабораторного анализа стрептококковых инфекций.

Задачи:

1. Знать основных возбудителей стрептококковых инфекций.

2. Изучить патогенетические факторы микроорганизмов.

3. Ознакомиться с методами лабораторной диагностики.

Уметь:

· интерпретировать полученные результаты лабораторного анализа гнойных стрептококковых заболеваний,

· оценить результаты антибиотикограмм и факторов персистенции,

· подобрать препараты для специфической профилактики и терапии данных болезней.

Род Streptococcus объединяет обширную, широко распространенную в природе группу грамположительных, факультативно анаэробных микроорганизмов. Облигатно-патогенным для человека видом является S . pyogenes (группа А), являющийся причиной возникновения гнойно-воспалительных процессов различной локализации. S . pneumoniae – пневмококк является возбудителем острых пневмоний, часто сопровождающихся бактериемией, менингитов у детей, острых отитов, гнойных конъюнктивитов и др. Среди многочисленных условно-патогенных для человека видов стрептококка лидирующее место занимает S . agalactiae (группа В), S . faecalis и S . faecium (группа Д).

Раздел	Вопросы для изучения
Биология возбудителя	1. Taкcoнoмия Возбудители стрептококковых инфекций относятся к семейству streptococcaceae, роду Streptococcus. Этот род включает в себя несколько десятков видов, которые подразделяются на: А. β-гемолитические; Б. α-гемолитические; В. α₁-гемолитические; Г. γ-негемолитические стрептококки.
	2. Основные биологические cвойства: Морфологические – кокки с диаметров клеток 0,6-1,0 мкм, располагающиеся в виде цепочек различной длины. Спор не образуют, патогенные виды образуют капсулу. Тинкториальные – грамположительные клетки. Культуральные: факультативные анаэробы, температурный оптимум – 37°С, оптимальная реакция питательной среды при pH=7,2-7,6. На обычных питательных средах не растут, или растут очень скудно. На бульоне рост придонно-пристеночный в виде крошковатого осадка, бульон прозрачен. Для культивирования стрептококков используют кровяной агар, содержащий 5% дефибринированной крови. На плотных питательных средах стрептококки группы А образуют колонки 3-х типов: мукоидные, шероховатые, гладкие. Биохимические свойства: ферментируют глюкозу, мальтозу, сахарозу до кислоты, без образования газа. Молоко не свертывают. Протеолитическими свойствами не обладают, каталазонегативные. Патогенность I. Факторы адгезии: а) белок М – главный фактор патогенности, представляющий собой фибриллярные молекулы, которые образуют фимбрии на поверхности клеточной стенки стрептококков группы А. б) капсула, состоящая из гиалуроновой кислоты, маскирующая стрептококк от фагоцитов. II. Токсины и ферменты агрессии: гемолизин О (стрептолизин), гемолизин S, стрептокиназа, гиалуронидаза, ДНК-аза, аминопептитаза. Антигенные свойства: В настоящее время выявлено 20 серогрупп стрептококков, в зависимости от группоспецифичных полисахаридных антигенов, локализованных в клеточной стенке. Помимо общего для всего роде антигена и группоспецифичных у гемолитических видов обнаружены типоспецифические антигены: M, T и R, а также перекрестно реагирующие антигены.
Эпидемиология	Стрептококки являются постоянными обитателями слизистых оболочек верхних дыхательных путей, пищеварительного тракта. Источником экзогенной инфекции служат больные острыми стрептококковыми болезнями (ангина, скарлатина), а также реконвалесценты после них. Основной способ заражения – воздушно-капельный, в других случаях – прямой контакт, и очень редко – алиментарный.
Патогенез	Проникнув через поврежденную кожу микробы распространяются из местного очага через лимфатическую и кровеносную системы. Заражение воздушно-капельным или воздушно-пылевым путем приводит к поражению лимфоидной ткани (тонзиллиты), в процесс вовлекаются регионарные лимфоузлы, откуда возбудитель распространяется лимфогенно и гематогенно. Стрептококки могут вызывать самые различные заболевания: раневые инфекции, рожистое воспаление, пуэрперальный сепсис, инфекции дыхательных путей. Сенсибилизирующие свойства микробов определяют такие осложнения как нефрозонефриты, артриты, поражение сердечно-сосудистой системы, ревматизм.
Постинфекци-онный имму- нитет	После перенесенного заболевания формируется антитоксический и антимикробный иммунитет, который носит прочный и длительный характер

Этиотропная терапия. Стрептококки сохраняют чувствительность к бета-лактамным антибиотикам, которые относят к препаратам выбора при лечении стрептококковых инфекций. Для профилактики скарлатины контактным лицам эффективно используется человеческий нормальный иммуноглобулин.

Схема лабораторной диагностики гнойных стрептококковых инфекций

Материал	Метод исследования	Результат
Слизь из зева, с миндалин, отделя-емое ран	1. Микроскопический 2. Бактериологический посев на 5% кровяной агар А. Микроскопия мазков из колонии Б. Выделение чистой культуры Установление принадлежности культуры к роду Streptococcaceae Микроскопический Культуральное определение Биохимическая активность (среды Гисса) Каталазный тест Определение признаков патогенности: 1. Гемолизин 2. Стрептокиназа 3. Гиалуронидаза 4. ДНК-аза	Гр+ кокки Рост колоний с зоной гемолиза Гр+ кокки Цепочки кокков Гемолитические колонии Ферментация до кислоты Каталазонегативные

Идентификация стрептококков

Целью первичной идентификации является установление принадлежности выделенной культуры к семейству Streptococcaceae и роду Streptococcus. Для установления принадлежности культур к семейству Streptococcaceae используют тест на каталазу.

В отличие от родственного семейства микрококков представители семейства стрептококков не имеют фермента каталазы, и не способны расщеплять перекись водорода с образованием воды и газообразного кислорода.

Бактериоскопический метод

В мазках, окрашенных по Граму, стрептококки располагаются цепочками, или по четыре. Размеры микробных клеток стрептококков 0,6-1, мкм. Грамположительные кокки.

Культуральный метод

По виду гемолиза на кровяном агаре стрептококки делятся на 3 группы: гемолитические стрептококки, обусловливающие лизис эритроцитов с образованием вокруг колоний прозрачной зоны. При этом колонии могут быть мукоидные, шероховатые, гладкие. Зеленящие стрептококки образующие на кровяном агаре альфа-реакцию в виде полупрозрачной, зеленоватого оттенка зоны, обусловленной превращением гемоглобина в мет-гемоглобин. Негемолитические стрептококки, не реагирующие с эритроцитами и в процессе своего роста не вызывающие изменений кровяного агара.

Вопросы для обсуждения

1. Морфология, тинкториальные и культуральные cвойства стрептококков.

2. Токсины и ферменты стрептококков.

3. Классификация стрептококков по гемолитическому признаку и антигенной структуре.

4. Заболевания, вызываемые патогенными стрептококками.

5. Лабораторная диагностика.

6. Препараты, используемые для лечения и профилактики стрептококковых инфекций.

Самостоятельная работа студентов

1. Познакомится со схемой исследования при кокковых заболеваниях.

2. Микробиологический диагноз стрептококковых заболеваний:

а. изучить демонстрационный препарат из чистой культуры стрептококка; зарисовать;

б. изучить рост стрептококка на кровяном МПА и на МПБ;

в. сделать посев гноя на чашку с кровяным МПА;

г. изучить демонстрационный посев гноя на кровяном агаре;

д. приготовить мазок из гноя, окрасить его по Граму, зарисовать;

е. определить чувствительность к антибиотикам по демонстрационным посевам.

Схема лабораторного исследования при ангине и скарлатине

Материал для исследования: мазок из зева.

День исследования	Ход исследования	Результат
1 день 2 день	1. Бактериоскопия мазка из зева, окраска по Граму 2. Посев мазка из зева на кровяной агар 1. Микроскопия мазка из колонии	В поле зрения грамположительные цепочки стрептококков Нa агаре мелкие точечные колонии в виде капелек росы с зоной гемолиза Цепочки стрептококка

Заключение: В мазке обнаружен Streptococcus pyogenes.

Пневмококки

Раздел	Вопросы для изучения
Биология возбудителя	I. Таксономия Пневмококки относятся к семейству Streptococcaceae, роду Streptococcus
	2. Основные биологические свойства: Морфологические – кокки, напоминающие пламя свечи: один конец клетки заострен, другой уплощен, располагаются парами, иногда в виде коротких цепочек. Спор не образуют. В организме человека и животных, а также на средах, содержащих кровь или сыворотку образуют капсулу. Тинкториальные – грамположительные кокки, но в молодых и старых культурах нередко грамотрицательны. Культуральные: факультативные анаэробы, температурный оптимум – 37°С., оптимальная рН = 7,2-7,6. Для культивирования используют кровяной агар, где колонии мелкие, круглые, окруженные зоной гемолиза (альфа-гемолиз), рост на сахарном бульоне не сопровождается помутнением и выпадением небольшого осадка. Биохимические свойства. Ферментация углеводов: глюкозы, сахарозы с образованием кислоты, без газа. Факторы патогенности: 1. Амилаза – активизирующуюся под влияющем желчных кислот, разрывающая связь между аланином и муравьиновой кислотой пептидогликана. 2. Капсула – главный фактор патогенности бескапсульные пневмококки утрачивают вирулентность. Антигенные свойства: кроме соматического 0-антигена, пневмококки имеют капсульный полисахаридный антиген, по которого разделяют на 83 сероварианта, 56 из них разбиты на 19 групп, 27 представлены самостоятельно.
Эпидемио-логия	Источником пневмококковой инфекции является больной человек или реконвалесцент. Заражение происходит воздушно-капельным или воздушно-пылевым путем.
Патогенез	Пневмококки являются основным возбудителем острых и хронических воспалительных заболеваний легких. Кроме того, они вызывают ползучую язву роговицы, отиты, эндокардит, перитониты, менингиты, септицемии и другие гнойно-воспалительные процессы.
Постинфек-ционный иммунитет	Типоспецифический, обусловлен появлением антител, против типового капсульного полисахарида.

Для специфической профилактики пневмококковых пневмоний у пожилых и ослабленных людей, а также лиц с иммунодепрессией можно использовать химическую пневмококковую вакцину, содержащую типоспецифические полисахариды нескольких типов пневмококков. В последнее время для специфической профилактики различных, в том числе и стрептококковой этиологии, поражений верхних дыхательных путей очень часто рекомендуется вакцина IR S19.

И зеленящих стрептококков

Вид	Ферментация инулина	Признак растворяющее действие 10-40% раствора желчи	Ингибирующее действие оптохина 1:500 000
Пневмококки Стрептококки	+ –	+ –	+ –

Оптохиновый тест

Чистую культуру засевают на агар, содержащий 1:50000-1:100000 оптохина. На следующие сутки учитывают результат. Пневмококки не растут в присутствии оптохина. Можно использовать бумажные диски 6 мкг оптохина, которые накладываются после посева на поверхность среды (посев лучше производить секторами). У пневмококков вокруг диска образуется зона задержки роста не менее 5 мм.

Тест с желчью

Основан на способности 10% желчи и 2% раствора оксидолатов лизировать пневмококк.

Вопросы для обсуждения

1. Морфология, тинкториальные и культуральные свойства пневмококков.

2. Заболевания человека, вызываемые пневмококками.

3. Антигенная структура пневмококков.

4. Лабораторная диагностика пневмококковых заболеваний.

5. Специфическая профилактика пневмококковых инфекций.

Самостоятельная работа студентов

1. Познакомиться со схемой исследования при пневмококковых инфекциях.

2. Микробиологический диагноз пневмококковых инфекций:

а. изучить демонстрационный препарат из чистой культуры пневмококка, зарисовать;

б. изучить рост пневмококка на кровяном агаре и МПБ;

в. сделать посев мокроты на чашку с кровяным МПА;

г. приготовить мазок из мокроты, окрасить его по Граму, зарисовать;

д. определить чувствительность к антибиотикам по демонстрационным посевам.

Менингококковые инфекции

Цель занятия: выработать навыки лабораторного анализа менингококковых инфекций.

Задачи:

1. Изучить биологические свойства возбудителя менингококковых инфекций.

2. Знать патогенетические факторы микроорганизмов.

3. Освоить методы лабораторной диагностики.

Уметь:

· интерпретировать полученные результаты лабораторной диагностики менингококковых заболеваний;

· оценить результаты антибиотикограммы и факторов персистенции;

· подобрать препараты для профилактики и лечения заболеваний.

Семейство Neisseriaceae объединяет группу аэробных парных кокков и парных палочек, семейство включает 4 рода: Neisseria , Moraxella , Branhamella , Acinetobacter .

В род нейссерия включено 6 видов, которые выделяются от человека: патогенные виды N . meningitidis , N . gonorrhaeae и непатогенные N . mucosa , N . sicea , N . subflava , N . flavescens. Непатогенные нейссерии являются кoмвeнcaлaми. У ослабленных больных признана их роль в развитии менингитов, эндокардитов, сепсиса, пневмоний, отитов и синуситов, бронхиальной астмы.

Раздел	Вопросы для изучения
Биология возбудителя	1. Таксономия Возбудитель менингококковых инфекций относится к семейству Neisseriaceae, роду Neisseria, включающему 6 видов. 2. Основные биологические свойства: Морфологические – бобовидные клетки диаметром 0,6-0,8 мкм, располагающиеся парами или тетрадами, нередко внутри лейкоцитов – незавершенный фагоцитоз. Спор не образуют, способны образовывать капсулу. Тинкториальные – грамотрицательные клетки. Культуральные: строгие аэробы. Температурный oптимyм –37⁰C, оптимальная реакция среда pH = 7,2-7,4. На обычных питательных средах не растут, для роста необходимо добавление сыворотки. Колонии на плотных питательных средах нежные, прозрачные, размером 2-3 мм. На сывороточном бульоне образуют помутнение и небольшой осадок на дне. Биохимические свойства. Ферментируют глюкозу, мальтозу с образованием кислоты без газа. Не разжижают желатин, оксидазоположительны. Патогенность 1. Факторы адгезии и колонизации: пили, белки наружной мембраны, капсула, которая является главным фактором патогенности менингококков. 2. Токсины и ферменты агрессии, гиалуронидаза, нейраминидаза, протеазы, плазмокоагулаза, фибринолизин, гемолизин, антилизоцимная активность. Антигенные свойства: У менингококков имеются 4 антигенные системы: 1. Капсульные полисахаридные антигены; 2. Белковые антигены наружной мембраны; 3. Белковый антиген, общий для всего рода; 4. Липополисахаридный антиген, включающий 8 серотипов. В соответствии с этим антигенная формула менингококков имеет следующий вид: серогруппа: серотип по белку: субтип по белку: серотип по ЛПС.
Эпидемиология	Источником инфекции может быть только человек: больной, реконвалесцент или бактерионоситель. Распространение инфекции происходит воздушно-капельным путем.
Патогенез	Входными воротами инфекции является носоглотка, откуда менингококкоки проникают в лимфатические сосуды и кровь, развивается бактериемия. Затем микроорганизмы внедряются в мозговые оболочки. Менингококки могут вызывать следующие формы болезни: нозофарингит, менингококцемия (менингококковый сепсис), эпидемический цереброспинальный менингит (гнойное воспаление мозговых оболочек головного и спинного мозга)
Постинфекци-онный иммунитет	После перенесенной болезни формируется прочный длительный антимикробный иммунитет против всех серогрупп менингококков. Видоспецифический.

Этиотропная терапия менингококковой инфекции проводится сульфа-ниламидами или пенициллином G, а у людей с аллергией к пенициллину - хлорамфениколом.

Если быстрые методы диагностики не позволяют предварительно идентифицировать возбудителя или по каким-либо причинам происходит задержка с выполнением люмбальной пункции, то антибактериальная терапия назначается эмпирически, не позднее 2-3 часов с момента установления диагноза. Выбор антибиотиков в данной ситуации диктуется необходимостью перекрыть весь спектр возможных возбудителей.

Специфическая профилактика проводится по эпидемиологическим показаниям или военнослужащим – химической менингококковой вакциной, содержащей полисахаридные антигены серогрупп А и С (активный антимикробный иммунитет), или человеческим нормальным иммуноглобулином (пассивный антимикробный иммунитет).

В отношении инфекционных заболеваний менингококковой этиологии в настоящее время действует приказ М3 РФ № 375 от 23.12.98 г., «О мерах по усилению эпидемиологического надзора и профилактики менингококковой инфекции и гнойными бактериальными менингитами», в соответствии с которым и осуществляется специфическая профилактика менингококковой инфекции.

Рода Neisseria

Вид	ка-та-ла-за	окси-даза	глю-коза	маль-тоза	редукция		гомо-лиз	пиг-мент	лак-тоза	саха-роза
					нитрат	нитрит
N. go- norr-haeae	+	+	+	–	–	+	–	–	–	–
N. meningi-tidis	+	+	+	+	–	±	–	–	–	–

Вопросы для обсуждения

1. Морфологические, тинкториальные, культуральные свойства менингококков.

2. Токсины и ферменты агрессии.

3. Заболевания человека, вызываемые менингококками, значение бактерионосительства.

4. Лабораторная диагностика менингококковых заболеваний.

5. Специфическая профилактика менингококковых заболеваний.

Самостоятельная работа студентов

1. Познакомиться со схемой исследования при менингококковых инфекциях.

2. Микробиологический диагноз менингококковых заболеваний:

А. Изучить демонстрационные препараты менингококка. Зарисовать.

Б. Познакомиться с техникой забора материала при исследовании на менингококковое носительство (демонстрация).

В. Определить чувствительность к антибиотикам по демонстрационным посевам.

Протокол исследования гноя

День исследо-вания	Ход исследования	Результат
I II III	1. Приготовление, окраска по Граму и микроскопия мазков из гноя 2. Посев гноя на сывороточный МПА с ристомицином 1. Микроскопия мазков из колоний 2. Пересев на скошенные сывороточные среды 3.Определение чувствительности к антибиотикам методом стандартных дисков 1. Посев на «пестрый ряд» 2. Определение каталазной активности 3. Постановка оксидазного теста 4. Проведение серологической диагностики реакция агглютинации с типоспецифическими сыворотками А, В, С реакция преципитации

Заключение:

из гноя больного _____________________________________________

выделен ____________________________________________________

с наибольшей чувствительностью к ______________________________

Гонококковые инфекции

Цель занятия: выработать навыки лабораторного анализа гонококковых инфекций.

Задачи:

1. Изучить биологические свойства возбудителя гонококковых инфекций.

2. Знать патогенетические факторы микроорганизмов.

3. Освоить методы лабораторной диагностики.

Уметь:

· интерпретировать результаты лабораторного анализа гонококковых инфекций;

· оценить результат антибиотикограммы и факторов персистенции.

Гонорея – инфекционное заболевание человека, вызываемое гонококком и характеризующееся воспалительным поражением преимущественно слизистых оболочек мочеполовых органов. К экстрагенитальным формам относятся эндокардиты, менингиты, стоматиты, бленоррея новорожденных и др.

Раздел	Вопросы для изучения
Биология возбудителя	1. Таксономия Возбудитель гонококковых инфекций относится к семейству Neisseriaceae, роду Neisseria, среди которого наиболее значимыми являются N . gonorrhaeae. 2. Основные биологические свойства: Морфологические – кокки, с диаметром клеток 0,7-0,8 мкм, располагающиеся попарно. Спор, капсул не образуют. Тинкториальные – грамотрицательные клетки. Культуральные: факультативные анаэробы. Температурный оптимум – 35-36°С, но рост происходит в диапазоне 30-38,5°С. Оптимальная реакция питательной среды pH = 7,2-7,6. Плoxo растет на обычных питательных средах, культивируется на средах, содержащих сыворотку, асцитическую жидкость или кровь. Лучшие среды для выращивания - сывороточный агар и среда Бейли. Гонококки образуют колонии двух видов: мелкие блестящие (Т1 и Т2) и большие плоские и тусклые (ТЗ, Т4). Биохимические свойства: гонококки ферментируют глюкозу с образованием кислоты, без газа. Оксидазоположительные. Редуцируют нитриты, каталазоположительные. Факторы патогенности: Пили (белок пилин) – прикрепление гонококков к эпителию влагалища, фаллопиевых труб и полости рта. Капсула – антифагоцитарная активность Белки наружной мембраны: Протеин I (Por-пориновый белок – способствует внутриклеточному выживанию бактерий, препятствуя слиянию лизосом с фагосомой нейтрофилов Протеин П (Ора – Opacity protein; Opacity – мутность), т.е. протеин мутности) – опосредует плотное прикрепление к эпителиальным клеткам и инвазию внутрь клеток Протеин Ш (Rmp – Reduction modifiable protein) – защищает поверхностные антигены (Por-белок, липоолигосахарид) от бактерицидных антител LOS (Lipooligosaccharide) – липоолигосахарид обладает свойствами эндотоксина IgA1 – протеаза – разрушает IgA1 Бета-лактамаза – гидролизует бета-лактамное кольцо пенициллинов Антигенное строение: в настоящее врется описаны разные антигенные популяции гонококков. По белковым антигенам мембраны гонококки распределены на 16 серотипов. Кроме того, микроорганизмы различаются по своим липополисахаридным антигенам.
Эпидемиология	Единственным источников инфекции является человек. Заражение происходят половым путем, реже контактно-бытовым.
Патогенез	Основным местом обитания гонококков является поверхность слизистой оболочки мочеполового тракта, реже –прямой кишки и глотки. Местом входных ворот у мужчин является слизистая оболочка уретры, у женщин – предверия влагалища, уретры и шейки матки. В случае проникновения через эпителиальный барьер микробы проникают в окружающие ткани: железы уретры и шейки матки, трубы, матку, предстательную железу, в кровь, синовиальные оболочки суставов, сердце, конъюнктиву, вызывая воспалительные процессы и иногда септицемию.
Постинфекци-онный имму- нитет	Перенесенное заболевание не оставляет иммунитета, что связано с тем, что иммунитет носит типоспецифичный характер.

Вопросы для обсуждения

1. Морфологические, тинкториальные, культуральные свойства гонококков.

2. Токсины и ферменты агрессии.

3. Заболевания человека, вызываемые гонококками.

4. Лабораторная диагностика острой гонореи.

5. Лабораторная диагностика хронической гонореи.

6. Лабораторная диагностика бленнореи.

Самостоятельная работа студентов

1. Познакомиться со схемой исследования при гонококковых инфекциях.

2. Микробиологический диагноз гонококковых заболеваний.

Возбудители бактериальных

Воздушно-капельных инфекций

Цель занятия: овладеть навыками микробиологической диагностики воздушно-капельных инфекций.

Знать:

- основных возбудителей бактериальных воздушно-капельных инфекций;

- патогенез заболевания, методы лабораторной диагностики.

Уметь:

- интерпретировать результаты лабораторных исследований;

- подобрать препараты для специфической профилактики и терапии указанных заболеваний.

Возбудители инфекций, передающихся воздушно-капельным путем, относятся к различным семействам, родам и видам микроорганизмов, которые отличаются друг от друга по морфологии, культуральным и биохимическим признакам и антигенной структуре.

Этиологически воздушно-капельные инфекции обусловливают стафилококки, стрептококки, клебсиеллы, коринебактерии дифтерии, бордетеллы коклюша, актиномицеты и др. они имеют одинаковый путь передачи, локализуются в эпителии дыхательных путей, но при этом вызывают избирательное поражение других органов и тканей.

Для микробиологического подтверждения диагноза используются, главным образом, бактериоскопический и бактериологический методы, иногда – биологические пробы на животных и аллергический метод.

В данном методическом пособии рассмотрены биология возбудителя, патогенез и методы лабораторной диагностики наиболее важных воздушно-капельных инфекций (дифтерия, коклюш, туберкулез).

Дифтерия

Это острое инфекционное заболевание, которое характеризуется общей интоксикацией организма с поражением периферической нервной системы, миокарда, надпочечников и воспалительным процессам в месте внедрения микроба с образованием фибринозных пленок.

Раздел	Вопросы для изучения
Биология возбудителя	1. Таксономия. Возбудители дифтерии относятся к роду Corynebacterium, который включает виды: а) Corynebacterium diphtheriae – возбудители дифтерии у человека. Возбудитель включает варианты: gravis, mitis, intermedius. б) Corynebacterium ulcerans – возбудители мастита у коров, могут вызывать ангины у людей. в) Corynebacterium xerosis, Hoffmani – дифтероиды, ложнодифтерийные палочки – непатогенны для человека, вегетируют на коже и слизистых оболочках здоровых людей. 2. Основные биологические свойства: Морфологические – длинные, тонкие палочки с утолщениями на концах, в которых располагаются зерна волютина. В мазках из чистой культуры располагаются под углом друг ко другу. Спор, капсул не образуют, неподвижны. Тинкториальные: Гр+, специфической является окраска по Нейссеру. При этом палочка окрашивается в желтый цвет, зерна волютина – в черный или темно-синий. Культуральные: факультативные анаэробы, на простых средах не растут. Культивируются на сложных среда, содержащих сыворотку, кровь, теллурит калия. (Среда Ру – свернутая лошадиная сыворотка, среда Лефлера – 3 части бычьей сыворотки и 1 часть сахарного бульона, теллуритовая среда (Клауберга II), хинозоловая (Бучина). На сывороточных средах мелкие, выпуклые, кремового цвета колонии разной формы в зависимости от варианта: на хинозоловых -–голубого цвета, на Клауберга колонии var.gravis образует крупные серые с неровным краем колонии, mitis – мелкие, влажные, выпуклые черного цвета. Биохимические: все три варианта расщепляют глюкозу, мальтозу до кислоты, ферментируют цистин, не образуют уреазу. Крахмал и гликоген ферментирует только вариант – gravis. Антигенная структура: имеют группоспецифический соматический антиген и типоспецифический протеиновый поверхностный К-антиген е) патогенность: продуцируют экзотоксин (гистотоксин) белковой природы, который является продуктом незавершенного синтеза цитохрома. Легко проникает через мембраны клеток, оказывает избирательное действие – вызывает отек и некроз тканей в месте введения, поражает миокард, надпочечники и нервную систему. Экзотоксин состоит из двух компонентов А и В. А – собственно экзотоксин; В – комплекс токсинов: гемолизин и некротоксин, фибринолизин. Ферменты агрессии: гиалуронидаза, нейраминидаза.
Эпидемиоло- гия, патогенез заболевания	Источник инфекции – больной, бактерионоситель. Пути передачи – воздушно-капельный, контактный, редко алиментарный. Патогенез. Входные ворота: слизистые оболочки зева, носа, трахеи, глаз, раневая поверхность. Возбудитель остается на слизистых оболочках, размножается, выделяет экзотоксин, который поступает в кровь и разносится по организму – токсинемия. Местно вначале действует фракция В, которая некротизирует клетки слизистой, вызывает дифтеритическое воспаление и способствует проникновению в клетки фракции А. Фракция А нарушает внутриклеточный обмен в клетках миокарда (миокардиты), нервных клеток (полиневриты), надпочечников и паренхиматозных органов (токсический нефроз) и др. на миндалинах образуются грязно-белые налеты (пленки), которые снимаются шпателем с трудом, и развивается отек. Фибринозное воспаление и отек иногда приводит к развитию асфиксии.

Вопросы для обсуждения

1. Общая характеристика и классификация коринебактерий.

2. Источник заражения, пути передачи инфекции, патогенез заболевания.

3. Материал для исследования, методы лабораторной диагностики.

4. Бактериологический метод исследования дифтерии.

5. Характеристика экзотоксина и метод определения токсикогенности дифтерийной палочки.

6. Специфическая профилактика и терапия дифтерии.

Самостоятельная работа студентов

1. Микроскопия демонстрационного препарата дифтерийной палочки в чистой культуре, окрашенного по Нейссеру.

2. Окраска готовых микропрепаратов уксуснокислым метилвиолетом, микроскопия.

3. Изучение бактериологического метода исследования при дифтерии с последующей идентификацией возбудителя:

а) характер роста на сывороточных и теллуритовых средах;

б) определение токсигенности методом диффузной преципитации в агаре по Оухтерлони;

в) реакции на цистиназу (проба Пизу);

г) реакция на уреазу (проба Закса);

д) ферментация моно- и полисахаридов.

4. Изучение препаратов, применяющихся для диагностики, специфической профилактики и лечения дифтерии.

5. Выполненную работу оформить протоколом по следующей схеме, отметить полученные результаты.

Туберкулез

Туберкулез - инфекционное заболевание человека и животных с наклонностью к хроническому течению, характеризующееся образованием специфических воспалительных изменений (бугорков) с преимущественной локализацией в легких.

Цель занятия: овладеть навыком оценки микробиологической диагностики туберкулеза.

Знать:

- биологию возбудителей;

- патогенез заболевания;

- эпидемиологию туберкулеза;

- лабораторную диагностику заболевания.

Уметь:

- интерпретировать результаты лабораторных исследований;

- подобрать препараты для специфической профилактики и терапии туберкулеза.

Раздел	Вопросы для изучения
Таксономия	Семейство Mycobacteriaceae род Mycobacterium. Виды микобактерий – возбудители туберкулеза человека: M.tuberculesis, M.bovis, M.avium, M.muris.
Биологические свойства	Морфологические свойства – палочки. Тинкториальные свойства. Окраска по Цилю-Нильсену. Особенность строения стенки – большое количество липидов, что придает кислотоустойчивость. Культуральные свойства – растут очень медленно: M.tuberculesis 28 дней, M.bovis и M.avium до 35 дней и M.muris – 26 дней. Возбудители туберкулеза дают преимущественно R-формы колонии (шероховатые, приподнимающиеся, с неровным краем, беспигментные) Биохимические тесты: пероксидазная активность, каталазная активность, ниациновый тест, редукция нитратов, никотинамидная активность.
Факторы вирулентности	Токсические компоненты клетки возбудителей туберкулеза: (воск Д, мураминопептид, тригалозодимиколат, фтионовые кислоты, сульфатиды) и протеин имеют значение в развитии специфических поражений тканей, гликопептид (корд-фактор) разрушает митохондрии клеток.
Патогенез, клиника. Что такое первичный туберкулезный комплекс и когда он образуется? Что такое вторичный туберкулез?	Клинические формы туберкулеза: а) по локализации – туберкулез легких, туберкулез почек, костно-суставной туберкулез, туберкулезный менингит; б) по характеру поражения: миллиарный, инфильтративный, лобарная пневмония, диссеминированный, кавернозный, фиброзно-кавернозный туберкулез.
Иммунитеты	Типы иммунного ответа при туберкулезе: а) клеточный – основной механизм защиты; б) гуморальный – выработка АТ не коррелирует с напряженностью иммунитета; Особенности иммунитета при туберкулезе: а) нестерильный; б) неустойчивый; в) клеточный; г) аллергический. Большое значение имеет антимикробная резистентность при туберкулезе: активность фагоцитов и система комплемента.
Микробиоло-гическая диагностика	Методы микробиологической диагностики туберкулеза: Бактериоскопический: а) иммерсионная микроскопия мазков, окрашенных по Цилю-Нильсену; б) люминесцентная микроскопия мазков, обработанных флюорохромами. Бактериологический: Посев на питательные среды (Петрова, Павловского, Сотона, Гельбера). Метод микрокультур Прайса. Серологический. Аллергический (проба Манту с туберкулином). Какой из методов используют для широкого обследования населения? Аллергический. Какой из методов наиболее прост в условиях лаборатории? Бактериоскопический, но имеет ориентировочное значение. Ускоренным методом является метод Прайса (метод микрокультур). Серодиагностика. Используются: а) непрямая РИФ; б) РПГА с эритроцитарным диагностикумом из фосфатидных антигенов микобактерий; в) РПГА с протеиновыми эритроцитарными диагностикумами. У кого может быть положительная проба Манту? У больных, у вакцинированных, при бытовом инфицировании.
Специфическая профилактика	Специфическая профилактика туберкулеза проводится живой вакциной БЦЖ. Ранние сроки первичной вакцинации необходимы, чтобы авирулентный штамм живой вакцины прижился в организме и создал нестерильный иммунитет. Ревакцинацию проводят лицам с отрицательной реакцией Манту.
Этиотропная терапия	Средства противотуберкулезной терапии: а) ПАСК; б) ГИНК; в) тубазид и фтивазид; г) антибиотики резерва (рифампицин и др.).

Самостоятельная работа студентов.

Вопросы для обсуждения

1. Характеристика возбудителей туберкулеза.

2. Биологические типы микобактерий туберкулеза.

3. Судьба микроба в организме при туберкулезе.

4. Особенности иммунитета при туберкулезе.

5. Методы лабораторной диагностики туберкулеза.

6. Туберкулин, его применение. Специфическая профилактика туберкулеза.

Коклюш и Паракоклюш

Коклюш - острое инфекционное заболевание, характеризующееся цикличностью течения и приступообразным спазматическим кашлем.

Цель занятия: овладеть навыком микробиологической диагностики инфекции.

Знать:

- биологию возбудителей;

- эпидемиологию заболевания;

- лабораторную диагностику.

Уметь:

- интерпретировать результаты лабораторных исследований;

- подобрать препараты для профилактики и терапии коклюша.

Раздел	Вопросы для изучения
Таксономия	Род Bordetella. Представители патогенные для человека: B.pertussis – возбудитель коклюша, B.parapertusuis – возбудитель паракоклюша.
Биология возбудителя	Морфологические и тинкториальные свойства: бордетеллы – мелкие, Гр- палочки, неподвижны. Спор, капсул не образуют. Культуральные признаки: B.pertussis нетребовательна к питательным средам. Культивируется на картофельно-глицериновом агаре с кровью (среда Бордс – Жангу) и казеиново-угольном агаре (среда КУА). Рост медленный – 48-72 часа. Колонии мелкие, круглые, блестящие как капельки ртути. Ферментативная активность слабая: не расщепляют белки и углеводы, не восстанавливают нитраты, образуют каталазу.
Антигенная структура	В структуре B.pertusis выделено 12 антигенов. Основные из них: - агглютиноген, расположен не поверхностно, не токсичен, индуцирует выработку антител, не имеющих защитного значения; - гемагглютинин, агглютинирует эритроциты человека и животных; - протективный – не обладает токсическими свойствами, вызывает синтез защитных антител; - нуклеопротеин – обладает свойствами аллергена.
Патогенность	Факторы вирулентности: Филаментозный гемагглютинин связывается с гликолипидами мембран клеток мерцательного эпителия дыхательных путей, с R3 - гликопротеиновым рецептором поверхности полиморфно-ядерных лейкоцитов и инициирует фагоцитоз Коклюшный токсин(токсин пертуссин)-S1 - субъединица пертуссина. АДФ - рибозилирует мембранный белок Gi; токе активность фагоцитов и миграцию моноцитов. S2 - субъединица пертуссина, связывается гликолипидом поверхности клеток респираторного тракта; S3 - субъединица пертуссина связывается с ганглиозидами поверхности фагоцитов. Пили-адгезия к мерцательном у эпителию дыхательных путей Пертактин-адгезия к мерцательному эпителию дыхательных путей Аденилатциклаза - подавляет киллинг-активность фагоцитов и миграцию моноцитов. Дерматонекротоксин - повреждает кожу и является летальным фактором для лабораторных животных. Трахеальный токсин - пептидогликановый фрагмент, разрушающий реснитчатые клетки дыхательных путей; стимулирует реализацию интерлейкина-1 (лихорадка). Эндотоксин (липополисахарид) активирует комплемент и стимулирует выработку цитокинов.
Эпидемиоло-гия, патогенез	Болеют, в основном, дети в возрасте от трех месяцев до 5-7 лет. Источник заражения – больной или носитель. Путь передачи – воздушно-капельный. Патогенез: возбудитель заселяет слизистые дыхательных путей, токсическое действие компонентов его клеток приводит к раздражению нервных рецепторов, спазму мелких бронхов, голосовой щели, сосудов, судорогам скелетных мышц, постоянному раздражению дыхательного центра.
Микробиоло-гическая диагностика	Методы лабораторной диагностики: а) бактериологический; б) серологический; Взятие материала для бактериологического исследования производят двумя методами: а) методом кашлевых пластинок (открытую чашку Петри с КУА держат во время приступа кашля на расстоянии 10 см от лица ребенка в течении 8-10 кашлевых толчков); б) носоглоточным изогнутым тампоном. Ход бактериологического исследования при коклюше: 1 этап – первичный посев на КУА. 2 этап (через 72 часа) – учет роста, приготовление мазка из подозрительных колоний, постановка реакции агглютинации на стекле с коклюшной и паракоклюшной сыворотками, пересев на скошенный КУА для выделения чистой культуры. Выдается предварительный ответ. При отсутствии роста отрицательный ответ выдается после повторного помещения посева в термостат на 24-48 часов, т.е. на 5 суток. 3 этап (через 5 суток от начала исследования). Изучение чистой культуры и ее идентификация проводится с целью дифференцировки коклюшной и паракоклюшной палочки по следующим тестам: а) изучение подвижности (подвижна B.parapertussis, неподвижна B.pertussis; б) рост на МПА (B.pertussis не растет, B.parapertussis растет); в) рост на среде с тирозином (B.parapertussis дает коричневый пигмент); г) определение уреазной активности (уреазу выделяет только B. parapertussis); д) остановка реакции агглютинации со специфической коклюшной сывороткой (реакция положительная с культурой B. pertussis). В качестве серологических реакций используют: а) реакцию связывания комплемента; б) РПГА (с эритроцитами коклюшным и паракоклюшным диагностикумами); в) РИФ (вспомните правила постановки и учета этих реакций). У переболевших – стойкий антибактериальный иммунитет.
Специфичес-кая профилактика	Активная иммунопрофилактика коклюша проводится вакцино АКДС (адсорбированная коклюшно-дифтерийная столбнячная вакцина) с 3 месяца (вспомните к какому классу иммунопрепаратов относится АКДС и какой иммунитет формируется).
Этиотропная терапия	Антибиотики, коклюшный иммуноглобулин.

Вопросы для обсуждения

1. Общая характеристика и классификация бордетелл.

2. Антигенная структура и факторы патогенности возбудителя коклюша.

3. Источник инфекции, пути передачи, патогенез заболевания.

4. Методы лабораторной диагностики:

а) бактериологический: правило взятия материала, отличия возбудителя

коклюша и паракоклюша;

б) серологический: реакции, применяемые для серологической диагностики

коклюша.

5. Препараты для специфической профилактики и лечения коклюша.

День исследо-вания

Чума

Возбудитель чумы – Yersinia pestis

Чума представляет собой особо опасное заболевание, которое проявляется в следующих формах:

1) кожно-бубонной,

2) первично – и вторично –септической,

3) первично – и вторично легочной,

4) кишечной.

Раздел

Вопросы для изучения

Биология возбуди-теля Эпидеми-ология, патогенез заболе-вания

1. Таксономия Род Yersinia содержит 7 видов, среди которых Yersinla pestis – возбудитель чумы. 2. Основные биологические свойства: Морфологические – грамотрицательные, полиморфные мелкие, неподвижные палочки с закругленными концами. Спор не образуют. В организме больного и при размножении на специальных средах образуют капсулу. Характерной морфологической особенностью является овоидная форма микроба и биполярная окрашиваемость, когда средняя часть клетки почти не окрашивается, а концы окрашены интенсивно. Культуральные: палочки чумы – факультативные анаэробы размножаются на простых питательных средах. Оптимальная температура для их роста 25-30 градусов. В жидких питательных средах палочки чумы образуют пленку на поверхности, от которой опускаются вниз нити. На плотных средах образуют шероховатые R – формы колонии с неровным краем – “кружевной платочек”. Биохимические: сбраживают некоторые углеводы с образованием кислоты. Антигенные свойства: антигенная специфичность иерсиний связана с капсулами (вещество – F1). Патогенность: палочки чумы очень вирулентны для человека, грызунов (мыши, крысы, суслики и т.д.), для верблюдов. Возбудители чумы образуют токсин, который называется “мышиный яд”. Источник инфекции – больные чумой грызуны (суслики, мыши, крысы, зайцы и т.д.), верблюды, а также больные люди легочной формой чумы. Путь передачи – контактный, трансмиссивный (переносчики блохи), алиментарный, воздушно-капельный. Патогенез Возбудитель чумы проникает в организм человека через слизистые оболочки, дыхательные пути, желудочно-кишечный тракт, через кожу. В зависимости от вирулентности микроба, места и пути его проникновения, а также состояние организма человека чума может развиваться по-разному, давая различные формы: кожно-бубонную, первично – и вторично легочную и кишечную.

Вопросы для обсуждения

1. Возбудитель чумы, источник, инфекции, пути передачи, клинические формы.

2. Методы лабораторной диагностики чумы (микроскопический, бактериологический, биологический, ускоренный).

3. Лечение и профилактика чумы.

Самостоятельная работа студентов

1. Познакомиться со схемой исследования при диагностике чумы и записать ее.

2. Микроскопировать и зарисовать готовые мазки из исследуемого материала, поставить предварительный диагноз, наметить ход дальнейшего исследования.

3. Изучить лечебно-профилактические препараты при чуме.

Сибирская язва

Возбудитель сибирской язвы – Bacillus anthracis

Сибирская язва – острая зоонозная инфекция. Ею болеют животные и люди.

Раздел	Вопросы для обсуждения
Биология возбуди-теля	1. Таксономия Bacillus anthracis относят к семейству Bacillaceae. 2. Основные биологические свойства: Морфологические – грамположительная, крупная, неподвижная палочка, располагается цепочкой. В организме больных образует капсулу, в почве – споры. Культуральные – в жидкой питательной среде растет в виде рыхлого осадка, на плотной среде – образует колонии R – формы и под малым (объектив в) увеличением микроскопа колонии имеют вид “львиной гривы” или “головы медузы”.
Эпидеми-ология Патогенез	Биохимические: разлагают глюкозу и мальтозу с образованием кислоты, разжижает желатину (в виде елочки верхушкой вниз). Антигенные свойства: сибиреязвенные бациллы имеют 2 антигена – капсульный (белковой природы), расположенный в капсуле и соматический (полисахаридной природы), который находится в клеточной стенке. Соматический антиген, в отличие от капсульного, термостабильный (не разрушается при кипячении). Патогенность: сибиреязвенные бациллы образуют токсин, который состоит из 3 компонентов: I – “отечный фактор”, II – летальный токсин, III – протективный антиген. Патогенность возбудителя обеспечивается также и капсулой. Источник инфекции – крупный и мелкий рогатый скот: лошади, свиньи, олени, верблюды. Они заражаются алиментарным путем, поглощая вместе с кормами споры возбудителя. Возможен перенос возбудителя кровососущими насекомыми (слепни, мухи-жигалки). Человек заражается от больных животных при непосредственном контакте, а также через изделия из шерсти), мясо больных животных. Сибирская язва у человека проявляется в 3-х клинических формах: кожной (в месте локализации возбудителя образуется карбункул), кишечной (жидкий стул с кровью), легочной (тяжелая бронхопневмония).

Вопросы для обсуждения

1. Возбудитель сибирской язвы, источник инфекции, пути передачи, клинические формы.

2. Методы лабораторной диагностики сибирской язвы (микроскопический, бактериологический, биохимический, экспресс-диагностика).

3. Лечение и профилактика сибирской язвы.

Самостоятельная работа студентов

1. Микроскопия и зарисовка готовых препаратов Вас. anthracis в культуре и в органах, окрашенных по Граму.

2. Изучение колонии спорового аэроба (Вас. cereus) под малым (объектив 8) увеличением микроскопа. Зарисовка.

3. Постановка реакции Асколи.

4. Изучение лечебно-профилактических препаратов при сибирской язве.

Выполненную работу и полученные результаты оформить в виде протокола по схеме:

Дата	Что сделано	Результаты исследования
1 день 2 день 3 день	Микроскопия материала Бактериологическое исследование Серологическая р. Асколи

Туляремия

Раздел	Вопросы для изучения
Биология возбудителя	1. Таксиномическое положение: род Francissella, вид F. еualarensis. 2. Морфолого-тинкториальные свойства: Гр.- - коккобактерии мелкие, неподвижные, образуют капсулы, нет спор. 3. Тип дыхания – аэробы 4. Культуральные свойства: не растут на простых питательных средах, на желточном агаре рост в виде бесцветного нежного налета, на кровяном агаре – беловатые колонии, гладкие с ровным краем (как жемчуг) на 2-5 день (иногда через 10-12). 5. Биохимические свойства: расщепляет глюкозу, мальтозу, маннит до кислоты. Наиболее распространены 2 биовара: F. tularensis holactica, F. tularensis mediasiatica. 5. Антигены: ВИ –А и О-А-Т
Эпидемиология Иммунитет Патогенез Клинические формы Микробиологи-ческая диагностика Специфическая профилактика и терапия	6. Факторы вирулентности: капсула, эндотоксин, нейраминидаза. 7. Источник инфекции – могут быть кровососущие и членистоногие. 8. Пути передачи – контактный, контактно-бытовой, алиментарный, трансмиссивный, воздушно-пыльевой. 9. Инкубационный период – 3-7 дней. 10.Особенности инфекции: это особо опасная зоонозная инфекция с природной очаговостью, характерна высокая восприимчивость к ней людей, тяжесть течения болезни. Возбудитель способен проникать через неповрежденную кожу и слизистые оболочки. В процессе заболевания развивается выраженная клеточная аллергия замедленного типа (РЗТ) и сохраняется длительные годы. Гуморальный и клеточный, высоконапряженный. Проникает через неповрежденную кожу и слизистые оболочки, попадает в регионарные лимфоузлы, не вызывает воспаления, прорывает лимфатические барьеры, проникает в кровь и таким образом разносится в паренхиматозные органы, где размножается (вторичные очаги локализации). Бубонная, язвенно-бубонная, легочная, абдоминальная, генерализованная. Основные методы диагностики Бактериологический: заражение морских свинок для получения чистой культуры. Серологический (ретроспективный) – с 3 недели: РИФА, ориентировочная реакция. Иммуноидикация: РИФА, РИФ, РИЛ, РПГА, с АТ – эритроцитарным диагностикумом и ее разновидность. Аллергический – в/к диагностическая аллергическая проба с тулярином с 3-5 дня болезни (положительная у больных переболевших и вакцинированных). Методы генетического анализа (ДНК-зондирование). Активная иммунопрофилактика для создания активного антибактериального иммунитета проводится живой туляремийной вакциной или химической вакциной и протективным туляремийным антигеном.
	Средства этиотропной терапии – антибиотики (хлорамфеникол, тетрациклин, стрептомицин).

Вопросы для обсуждения

1. Возбудитель туляремии. Биологические свойства Franciselle tualarensis.

2. Методы лабораторной диагностики туляремии: бактериологический, серологический и биологический.

Самостоятельная работа студентов

1. Микроскопия окрашенных мазков с туляремийными бактериями.

2. Постановка и предварительный учет реакции агглютинации (РА) для диагностики туляремии.

3. Техника постановки аллергических проб.

Бруцеллез

Раздел	Вопросы для изучения
Биология возбуди-теля Эпидеми-ология, патогенез, клиника	1. Таксономическое положение: род Brucella, виды, вызывающие заболевание и у животных и у человека. B. melitensis, B. suis, B. abortus 2. Морфолого-тинкториальные свойства: Гр-коккобактерии или короткие палочки, неподвижны. Спор нет. Могут образовывать капсулу. 3. Тип дыхания – аэробы. 4. Культуральные свойства: растут на простых питательных средах. Элективными средами являются печеночный бульон и печеночный агар. 5. Биохимические свойства: биохимически инертны, но обладают каталазой и уреазой. Требователен к СО2 при первой генерации роста, продукции H2S и чувствительности к анилиновым красителям, дифференцируются на виды. 6. Антигены: видоспецифические A, M, G, R дополнительный термостабильный VI-АГ. 7. Факторы вирулентности: капсула (у капсульных штаммов) эндотоксин, гиалуронидаза. 8. Источник инфекции – больной крупно – и мелкорогатый скот, свиньи (от людей передается). 9. Пути передачи: алиментарный, контактно-бытовой. 10.Инкубационный период – 1-3 недели. 11.Это зоонозная инфекция. Относят ее к особо опасным инфекциям, т.к. возбудитель способен проникнуть через неповрежденную кожу и слизистые оболочки. В клинике преобладает вялое затяжное течение, характерно развитие ГЗТ. В процессе инфекции формируется перекрестный для разных видов бруцелл, клеточный нестерильный инфекционный иммунитет. Постинфекционный иммунитет недостаточно напряженный. 12.Патогенез: возбудители проникают через кожу, слизистые, желудочно-кишечный тракт и попадают в регионарные лимфоузлы, прорывают лимфатический барьер и выходят в кровь, током крови заносятся в костный мозг, селезенку, почки, печень. 13.Клинические формы: острая и хроническая (хрониосепсис) может быть латентная, по тяжести – тяжелые, легкие, бессимптомные.
Микроби-ологичес-кая диагностика Иммуно-индика-ция Аллерги-ческий Специфи-ческая терапия и профилак-тика	14. Основные методы диагностики: Бактериологический – материал для исследования: кровь, костный мозг, моча (реже ликвор, синовиальная жидкость). Серологический – РПГА, диагностическая реакция агглютинации (реакция Райта), реакция Кумбса по обнаружению неполных АГ, ориентировочный метод – реакция Агглютинации на стекле Хеддельсона. РИФ, РИФА, РНАГ. в/к проба Бюрне с бруцеллином ставится с 1-2 недели заболевания, положительная при хронических, латентных формах и у вакцинированных лиц. 15. Этиотропная терапия: острая форма – лечение сульфаниламидными препаратами и антибиотиками (хлорамфениколом и аминоглюкозидами), хронические формы – иммунотерапия лечебной убитой бруцеллезной вакциной. 16. Специфическая профилактика – активная иммунопрофилактика живой вакциной для создания активно антибактериального нестерильного иммунитета.

Вопросы для обсуждения

1. Режим работы с особо опасными микроорганизмами.

2. Биологическая характеристика бруцеллеза.

3. Лабораторная диагностика бруцеллеза.

4. Специфическая профилактика бруцеллеза.

Самостоятельная работа

1. Микроскопия окрашенных мазков с бруцеллами.

2. Постановка и учет реакции Райта и Хеддельсона.

3. Техника постановки аллергических проб для диагностики бруцеллеза.

4. Изучение препаратов, применяемых для диагностики, лечения и профилактики бруцеллеза.

Постановка реакции Райта (схема)

Компонент	1	2	3	4	5	Контроль сыворотки	Контроль диагностикума
Физиологический раствор	0,5	0,5	0,5	0,5	0,5	0,5	0,5

Сыворотка больного в разведении 1:25	0,5	0,5	0,5	0,5	0,5	0,5
Бруцеллезный диагностикум (мл)	0,5	0,5	0,5	0,5	0,5		0,5
Окончательное раз-ведение сыворотки	1:50	1:100	1:200	1:400	1:80 0
Заключение:

ВОЗБУДИТЕЛИ РАНЕВЫХ ИНФЕКЦИЙ. ЭТИОЛОГИЧЕСКАЯ СТРУКТУРА. ПРИНЦИПЫ ДИАГНОСТИКИ. МАТЕРИАЛ ДЛЯ ИССЛЕДОВАНИЯ: ОСОБЕННОСТИ ВЗЯТИЯ, ХРАНЕНИЯ ТРАНСПОРТИРОВКИ. ОБЩАЯ СХЕМА БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКОГО ИССЛЕДОВАНИЯ ПРИ РАНЕВОЙ ИНФЕКЦИИ

Цель занятия:

– освоить принципы диагностики раневой инфекции;

– знать биологию возбудителей;

– причину возникновения раневой инфекции;

– освоить лабораторную диагностику.

Уметь:

– интерпретировать полученные результаты бактериологического исследования раневого отделяемого;

– оценить данные антибиотикограммы;

– назначить соответствующую терапию.

Раневая инфекция – процесс, возникающий в ране вследствие инвазии в нее патогенной микрофлоры при условии недостаточности защитных реакций поврежденных тканей. Инфекция развивается при инфицировании раны вирулентными, особенно госпитальными, штаммами, в окружающих тканях развивается гнойная инфекция.

Инфицирование операционной раны чаще всего вызывается золотистым стафилококком, кишечной и синегнойной палочками, протеем, клебсиеллами.

Внегоспитальные раны ( боевые, производственные, бытовые) инфицируются в момент ранения и после него. Микробы в них проникают с ранящим оружием, кусочками одежды, почвы, пыли, кожи. Кроме перечисленных в эти раны также возбудители гнойной анаэробной инфекции – клостридии.

Раздел	Вопросы для изучения
Этиологичес-кая структура раневой инфекции	Аэробы и факультативные анаэробы: Кокки: St. aureus St. epidermidis Strep. pyogenes Enterococcus Палочки : Escherichia Klebsiella Proteus Pseudomonas Анаэробы : Clostridium perfringens Cl. septicum Cl. hystolyticum Cl. tetani Bacteroides Peptococcus Peptostreptococcus
Биология возбудителя Патогенез Иммунитет Лабораторная диагностика Лечение Профилакти-ка	Аэробные представители – см. методические пособия по кишечным инфекциям и коккам Анаэробы: Бациллы, образующие овальные или круглые споры, располагающиеся терминально, центрально или субтерминально. Clostridium perfringens – толстая, неподвижная палочка, образует капсулу. Тинкториальные свойства – грамположительна. Культуральные свойства – анаэроб. Биохимические свойства: ферментирует: лактоза, сахароза до КГ. Створаживает молоко за 3-5 часов. Разжижает желатин. Вирулентность: экзотоксин – гемолизин, некротоксин, летальный токсин, а также ферменты “агрессии”– гиалуронидаза, лецитиназа. Антигенные свойства: 6 серологических типов: A, B, C, D, E, F. Clostridium novyi – полиморфная палочка (перитрих). На жидких средах образует осадок. Биохимическая активность: расщепляет глюкозу до Г. Молоко свертывает медленно. Разжижает желатин. Вирулентность: экзотоксин – летальные, некротические свойства, отечный и гемолитический токсин. Антигенное строение : A, B, C серотипы Clostridium septicum : тонкая, длинная полиморфная палочка. Грамположительная. Перитрих. Культуральные свойства – равномерное помутнение среды. Ферментирует глюкозу мальтозу до К и Г. Вирулентность: экзотоксин с летальными, гемолитическими, некротическими свойствами. Clostridium hystolyticum Палочка, перитрих, споры расположены субтерминально или центрально. Культуральные свойства: равномерное помутнение среды. Углеводы не ферментирует. Молоко не пептонизирует Гидролизует желатин. Вирулентность: экзотоксин с некротическими, летальными и гемолитическими свойствами. Сильное протеолитическое действие. Характерен прогрессирующий некроз тканей, отек, газообразование в тканях и отравление токсинами возбудителя и продуктами распада тканей. Клостридии – некропаразит, благоприятной средой для его размножения служат мертвые и поврежденные ткани. В патогенезе различают 2 стадии: 1) образование отека; 2) развитие газовой гангрены. Антитоксический. Цель исследования: – доказать наличие возбудителя; - доказать наличие экзотоксина. Методы диагностики: 1. Микроскопический. 2. Бактериологический. 3. Биологический. – антибиотики; – антитоксические иммунные сыворотки; – специфический иммуноглобулин. Активная: анатоксин Пассивная: антитоксические сыворотки

Вопросы для обсуждения

1. Этиология раневой инфекции.

2. Биология возбудителя.

3. Патогенез газовой гангрены.

4. Лабораторная диагностика газовой гангрены.

5. Профилактика и лечение раневой газовой гангрены.

Самостоятельная работа

1. Бактериологическое исследование отделяемого раны.

2. Из отделяемого раны приготовить мазок, окрасив по методу Грама, микроскопировать, наметить ход исследования.

3. Провести посев отделяемого раны на среду Вильсона-Блера, молоко и тиогликолевую среду.

4. Оценить результаты посевов на тиогликолевую и Вильсона-Блера средах, а также молоко.

Микроскопия препаратов.

Сделать заключение.

ОБЩАЯ ЧАСТЬ

1. Место микробиологии и иммунологии в современной медицине. Роль микробиологии и иммунологии в подготовке врачей- клиницистов и врачей профилактической службы.

2. Основные этапы развития микробиологии и иммунологии. Работы Л. Пастера, Р. Коха и их значение для развития микробиологии и иммунологии.

3. Роль И .И. М ечникова в формировании учения об иммунитете. Значение открытия Д.И. Ивановского, роль отечественных ученых(Н.Ф. Гамалея, П.Ф. Здродовский, А.А. Смородинцев, М.П. Чумаков, З.В. Ермольева, В.М. Жданов и др.) в развитии микробиологии и иммунологии.

4. Основные принципы классификации микробов.

I . Морфология микробов

1. Морфологические и тинкториальные свойства бактерий. Методы окраски.

2. Структура и химический состав бактериальной клетки. Особенности строения грамположительных и грамотрицательных бактерий.

3. Морфология грибов.

4. Морфология простейших.

5. Особенности биологии вирусов.

6. Структура и химический состав бактериофагов.

7. Методы микроскопии (люминесцентная,темнопольная, фазовоконтрастная, электронная).

II . Физиология микробов

1. Рост и размножение бактерий. Фазы размножения.

2. Способы получения энергии бактериями (дыхание, брожение). Методы

культивирования анаэробов.

3. Типы и механизмы питания бактерий.

4. Основные принципы культивирования бактерий.

5. Искусственные питательные среды, их классификация. Требования, предъявляемые к питательным средам.

6. Принципы и методы выделения чистых культур бактерий.

7. Ферменты бактерий. Идентификация бактерий по ферментативной активности.

8. Внутривидовая вдентифижация бактерий (эпидемическое маркирование).

9. Особенности физиологии грибов.

10. Особенности физиологии простейших.

11. Типы взаимодействия вируса с клеткой. Стадии репродукции вирусов.

12. Бактериофаги. Взаимодействие фага с бактериальной клеткой. Умеренные и вирулентные бактериофаги. Лизогения.

13. Применение фагов в биотехнологии, микробиологии и медицине.

14. Методы культивирования вирусов.

III . Экология микробов.

VI . Инфекция и иммунитет

1. Понятие об инфекции. Условия возникновения инфекционного процесса.

2. Формы инфекции.

3. Стадии развития и характерные признаки инфекционной болезни.

4. Патогенность и вирулентность. Факторы патогенности.

5. Токсины бактерий, их природа, свойства, получение.

6. Иммунитет. Виды и формы иммунитета.

7. Роль И.И. Мечникова в формировании учения об иммунитете. Неспецифические факторы защиты организма.

8. Комплемент, его структура, функции, пути активации, роль в иммунитете.

9. Интерфероны, природа. Способы получения и применения.

10. Видовой (наследственный) иммунитет.

11. Структура и функции иммунной системы. Кооперация иммунокомпетентных клеток.

12. Иммунокомпетентные клетки. Т-и В- лимфоциты, макрофаги, их кооперация.

13. Иммуноглобулины, структура и функции.

14. Классы иммуноглобулинов, их характеристика.

15. Антигены: определение, основные свойства. Антигены бактериальной клетки.

16. Классификация антигенов.

17. Иммунный ответ: гуморальный, клеточный.

18. Антителообразование: первичный и вторичный ответ.

19. Иммунологическая память. Иммунологическая толерантность.

20. Классификация гиперчувствительности по Джейлу и Кумбсу.

21. Механизмы гиперчувствительности замедленного типа. Клинико-диагностическое значение.

22. Аллергические пробы, их сущности, применение.

23. Гиперчувствительность немедленного типа. Механизмы возникновения, клиническая значимость.

24. 0собенности противовирусного, противогрибкового, противоопухолевого, трансплантационного иммунитета.

25. Понятие о клинической иммунологии. Иммунный статус человека и факторы, влияющие на него.

26. Оценка иммунного статуса: основные показатели и методы их определения. Тесты 1-го, 2-го уровней.

27. Расстройства иммунной системы: первичные и вторичные иммунодефициты.

28. Иммунологические методы исследования: общие закономерности, основные группы.

VII. Реакции иммунитета

1. Реакция агглютинации. Компоненты, механизм, способы постановки. Применение.

2. Реакция Кумбса. Механизм. Компоненты. Применение.

3. Реакция пассивной гемагглютинации. Компоненты. Применение.

4. Реакция коагглютинации. Механизм. Компоненты. Применение.

5. Реакция торможения гемагглютинации. Механизм. Компоненты. Применение.

6. Реакция преципитации. Механизм. Компоненты. Применение. Способы постановки.

7. Реакция связывания комплемента. Механизм. Компоненты. Применение.

8. Реакция нейтрализации токсина антитоксином. Механизм. Способы постановки. Применение.

9. Реакция иммунофлюоресценции. Механизм. Компоненты. Применение.

10. Иммуноферментный анализ, иммуноблоттинг. Механизм. Компоненты.

Применение.

11. Серологические реакции, используемые для диагностики вирусных инфекций.

12. Диагностикумы. Получение. Применение.

13. Моноклональные антитела. Получение. Применение.

14. Методы приготовления и применения агглютинирующих, адсорбированных сывороток.

СПЕЦИАЛЬНАЯ ЧАСТЬ

При ответе на вопросы по частной микробиологии рекомендуем придерживаться следующего плана:

1. Таксономия возбудителя: для бактерий - отдел (GraciIicutes, Firmicutes, Tenericutes), семейство, род, вид; для эукариотов - классы, виды; для вирусов – ДНК- или РНК- геномные вирусы, семейство, род, вид, серогруппа.

2. Характеристика возбудителя: морфологические, тинкториальные, культуральные, биохимические, антигенные свойства, факторы патогенности, резистентность к различным факторам; биологические модели.

3. Вызываемые заболевания – краткая эпидемиологическая характеристика (источники инфекции, механизм, пути и факторы передачи, восприимчивый коллектив), патогенез, основные клинические проявления, особенности иммунитета.

4. Микробиологическая диагностика: исследуемый материал, применяемые методы диагностики.

5. Специфическая профилактика и этиотропное лечение (вакцины, сыворотки, фаги, химиотерапия).

ЧАСТНАЯ МИКРОБИОЛОГИЯ

1. Методы микробиологической диагностики инфекционных болезней.

2. Возбудители брюшного тифа и паратифов.Таксономия и характеристика. Микробиологическая диагностика. Специфическая профилактика и лечение.

3. Возбудители эшерихиозов. Таксономия и характеристика. Роль кишечной палочки в норме и патологии. Микробиологическая диагностика эшерихиозов. Лечение.

4. Возбудители кишечного иерсиниоза. Таксономия и характеристика. Микробиологическая диагностика. Лечение.

5. Возбудители шигеллеза. Таксономия и характеристика. Микробиологическая диагностика. Специфическая профилактика и лечение.

6. Возбудители сальмонеллезов. Таксономия и характеристика. Микробиологический диагноз сальмонеллезов. Лечение.

7. Возбудители холеры. Таксономия и характеристика. Микробиологический диагноз сальмонеллезов. Лечение.

8. Стафилококки. Таксономия и характеристика. Микробиологическая диагностика заболеваний, вызываемых стафилококками. Специфическая профилактика и лечение.

9. Стрептококки. Таксономия и характеристика. Микробиологическая диагностика стрептококковых инфекций. Лечение.

10. Менингококки. Таксономия и характеристика. Микробиологическая диагностика менингококковой инфекции. Лечение.

11. Гонококки. Таксономия и характеристика. Микробиологическая диагностика гонореи. Лечение.

12. Возбудитель туляремии. Таксономия и характеристика. Микробиологическая диагностика. Специфическая профилактика и лечение.

13. Возбудитель сибирской язвы. Таксономия и характеристика. Микробиологическая диагностика. Специфическая профилактика и лечение.

14. Возбудитель бруцеллеза. Таксономия и характеристика. Микробиологическая диагностика. Специфическая профилактика и лечение.

15. Возбудитель чумы. Таксономия и характеристика. Микробиологическая диагностика. Специфическая профилактика и лечение.

16. Особенности микробиологического диагноза при карантинных инфекциях. Экспресс-диагностика.

17. Возбудители анаэробной газовой инфекции. Таксономия и характеристика. Микробиологическая диагностика. Специфическая профилактика и лечение.

18. Возбудитель ботулизма. Таксономия и характеристика. Микробиологическая диагностика. Специфическая профилактика и лечение.

19. Возбудитель столбняка. Таксономия и характеристика. Микробиологическая диагностика. Лечение.

20. Возбудитель дифтерии. Таксономия и характеристика. Условно-патогенные коринебактерии. Микробиологическая диагностика. Выявление антитоксического иммунитета. Специфическая профилактика и лечение.

21. Возбудитель коклюша и паракоклюша. Таксономия и характеристика. Микробиологическая диагностика. Специфическая профилактика и лечение.

22. Возбудитель туберкулеза. Таксономия и характеристика. Условно-пато-генные микобактерии. Микробиологическая диагностика.

23. Возбудитель проказы. Таксономия и характеристика. Микробиологическая диагностика. Лечение.

24. Актиномицеты. Таксономия и характеристика. Микробиологическая диагностика. Лечение.

25. Возбудитель сыпного тифа. Таксономия и характеристика. Болезнь Брилля-Цинссера. Микробиологическая диагностика. Специфическая профилактика и лечение.

26. Возбудитель лихорадки. Таксономия и характеристика. Микробиологическая диагностика. Специфическая профилактика и лечение.

27. Возбудитель хламидиозов. Таксономия и характеристика. Микробиологическая диагностика. Лечение.

28. Возбудитель легионеллезов. Таксономия и характеристика. Микробиологическая диагностика. Лечение.

29. Возбудитель сифилиса. Таксономия и характеристика. Микробиологическая диагностика. Лечение.

30. Возбудитель лептоспирозов. Таксономия и характеристика. Микробиологическая диагностика. Лечение. Специфическая профилактика.

31. Возбудитель бореллиозов. Таксономия и характеристика. Микробиологическая диагностика.

32. Микоплазмы. Таксономия и характеристика. Микробиологическая диагностика. Лечение.

33. Роль условно-патогенных микроорганизмов в возникновении внутренних инфекций. Клиническая микробиология, ее задачи.

34. Синегнойная палочка.Таксономия и характеристика. Микробиологическая диагностика. Лечение.

35. Неспорообразующие анаэробы. Таксономия и характеристика. Микробиологическая диагностика. Лечение.

36. Классификация грибов. Характеристика. Роль в патологии человека. Лабораторная диагностика. Лечение.

37. Возбудитель малярии. Таксономия и характеристика. Микробиологическая диагностика. Лечение.

38. Возбудитель токсоплазмоза. Таксономия и характеристика. Микробиологическая диагностика. Лечение.

39. Возбудитель лейшманиозов. Таксономия и характеристика. Микробиологическая диагностика. Лечение.

40. Возбудитель амебиаза. Таксономия и характеристика. Микробиологическая диагностика. Специфическое лечение.

41. Значение открытия Д.И. Ивановского. Этапы развития вирусологии. Роль отечественных ученых в развитии вирусологии.

42. Возбудитель ОРВИ. Таксономия и характеристика. Микробиологическая диагностика. Специфическая профилактика и лечение.

43. Возбудитель гриппа. Таксономия и характеристика. Микробиологическая диагностика. Специфическая профилактика и лечение.

44. Возбудитель полиомиелита. Таксономия и характеристика. Лабораторная диагностика. Специфическая профилактика.

45. Возбудители гепатитов А и Е. Таксономия и характеристика. Лабораторная диагностика. Специфическая профилактика.

46. Арбовирусы. Таксономия и характеристика. Лабораторная диагностика заболеваний, вызываемых арбовирусами. Специфическая профилактика.

47. Возбудитель клещевого энцефалита. Таксономия и характеристика. Лабораторная диагностика. Специфическая профилактика.

48. Возбудитель бешенства. Таксономия и характеристика. Лабораторная диагностика. Специфическая профилактика.

49. Возбудитель натуральной оспы. Таксономия и характеристика. Лабораторная диагностика. Специфическая профилактика оспы на современном этапе.

50. Возбудитель краснухи. Таксономия и характеристика. Лабораторная диагностика. Специфическая профилактика.

51. Вирус кори. Таксономия и характеристика. Лабораторная диагностика. Специфическая профилактика и лечение.

52. Герпес-инфекция. Таксономия и характеристика. Лабораторная диагностика. Специфическая профилактика и лечение.

53. Возбудители гепатитов В, С, D. Таксономия и характеристика. Лабораторная диагностика. Специфическая профилактика.

54. ВИЧ-инфекция. Таксономия и характеристика. Лабораторная диагностика, профилактика.

55. Классификация и характеристика онкогенных вирусов.

САНИТАРНАЯ МИКРОБИОЛОГИЯ

1. Учение о санитарно-показательных микроорганизмах.

2. Микрофлора воздуха и методы ее исследования.

3. Патогенные микробы в воздухе, механизм распространения и пути передачи инфекции.

4. Санитарно-показательные микроорганизмы воздуха.

5. Санитарно-бактериологическое исследование воздуха. Методы, аппаратура.

6. Микрофлора воды. Факторы, влияющие на количество микробов в воде.

7. Методы санитарно-бактериологического исследования воды.

8. Показатели качества воды: микробное число, коли-индекс.

9. Отбор, хранение, транспортировка проб воды для санитарно-микробиологического исследования.

10. Исследование питьевой воды на присутствие возбудителей брюшного тифа, холеры и лептоспирозов.

11. Микрофлора почвы. Факторы, влияющие на количественный и видовой состав микробов почвы.

12. Почва как фактор передачи инфекционных болезней.

13. Санитарное микробиологическое исследование почвы. Микробное число,

коли-титр, перфрингенс - титр почвы.

14. Санитарно-бактериологическое исследование предметов окружающей среды. Исследование смывов с рук, инвентаря, оборудования.

15. Контроль перевязочного материала на стерильность.

16. 3начение условно-патогенных микробов в этиологии пищевых токсикоинфекций.

17. Санитарно-микробиологическое исследование при пищевых токсикоинфекциях и бактериальных токсикозах.

18. Санитарно-микробиологическое исследование пищевых продуктов.

19. Санитарно-бактериологическое исследование молока и молочных продуктов.

20. Санитарно-бактериологическое исследование мяса и мясных продуктов.

21. Вирусы, циркулирующие в сточной воде, методы индикации.

22. Роль воздушной среды в распространении вирусных заболеваний, методы отбора воздуха и индикации вирусов.

ДОПОЛНИТЕЛЬНЫЙ ПЕРЕЧЕНЬ ВОПРОСОВ ДЛЯ СТУДЕНТОВ ПЕДИАТРИЧЕСКОГО ФАКУЛЬТЕТА

1. Возрастные особенности микрофлоры человека. Динамика микрофлоры кишечника у новорожденных детей. Влияние естественного искусственного вскармливания на характер микрофлоры кишечника ребенка.

2. Применения бактериальных препаратов для профилактики дисбактриоза и лечения кишечных заболеваний у детей.

3. Санитарно-бактериологическое исследование продуктов детского питания: молока, молочных смесей и молочнокислых продуктов.

4. Санитарно-бактериологическое обследование детских учреждений и предметов ухода за ребенком. Значение микрофлоры воздуха для родильных отделений и палат новорожденных.

5. Внутриутробная инфекция, пути заражения плода. Инфекционный процесс в организме плода, у новорожденных и детей раннего возраста.

6. Возрастные особенности неспецифической резистентности (гуморальные факторы, клеточные механизмы неспецифической защиты).

7. Развитие клеточных неспецифических механизмов защиты. Особенности воспалительной реакции у детей раннего возраста. Незавершенность фагоцитоза.

8. Возрастные особенности иммунологической реактивности. Динамика антителообразования в развивающемся организме.

9. Возрастные особенности противовирусного иммунитета. Значение плацентарного иммунитета в защите новорожденного от некоторых вирусных инфекций (корь и др.).

10. Особенности проявления кожно-аллергических проб у детей раннего возраста. Их значение в оценке диагностических реакций.

11. Иммунологические взаимоотношения в системе мать-плод. Изоантигены эритроцитов АВО. Резус-антиген и егозначение в патологии беременности.

12. Плановые профилактические прививки. Оценка поствакцинального иммунитета.

13. Проблема стафилококковой инфекции в педиатрической практике. Возрастные особенности чувствительности детей к стафилококковым токсинам. Значение носительства стафилококков у лиц, работающих в детских учреждениях.

14. Роль стрептококков при скарлатине. Иммунитет после перенесенного заболевания. Определение его напряженности.

15. Гонококки - возбудители бленореи.

16. Возбудители эшерихиозов у детей. Особенности патогенеза, иммунитета. Лабораторная диагностика.

17. Применение бактерийных препаратов и значение естественного вскармливания при лечении кишечных инфекций у детей младшего возраста.

18. Врожденный сифилис. Особенности лечения и лабораторной диагностики сифилиса.

19. Роль хламидий в патологии беременности и поражения плода.

20. 3начение микоплазм в патологии беременности и заболеваниях у детей.

21. Дрожжеподобные грибы рода кандида. Заболевание у новорожденных (молочница). Возбудители дерматомикозов. Значение в детской патологии.

22. 0собенности ВИЧ-инфекции у детей.

23. Проблема госпитальной инфекции, вызванной бактериями из семейства кишечны х бактерий (сальмонеллы, клебсиелла) в педиатрической практике. Пути профилактики.

24. Значение медицинской микробиологии в практической деятельности врача-педиатра.

ДОПОЛНИТЕЛЬНЫЙ ПЕРЕЧЕНЬ ВОПРОСОВ ДЛЯ СТУДЕНТОВ СТОМАТОЛОГИЧЕСКОГО ФАКУЛЬТЕТА

1. Микроэкология ротовой полости. Микрофлора полости рта в норме и патологии.

2. Неспецифическая резистентность полости рта.

3. Механизмы специфического иммунитета в полости рта. Иммуноглобулины.

4. Аллергические реакции в полости рта. Механизмы.

5. Стрептококки полости рта в развитии кариеса и его осложнений.

6. Актиномикоз в полости рта. Лабораторная диагностика.Этиотропное лечение.

7. Роль неспорообразующих анаэробов в осложнениях в челюстно-лицевой

хирургии.

8. Кандидоз полости рта. Этиотропное лечение. Лабораторная диагностика.

9. Герпетическая инфекция в полости рта. Персистенция вирусов. Лабораторная диагностика. Этиотропное лечение.

10. Вирусные инфекции полости рта.

ДОПОЛНИТЕЛЬНЫЙ ПЕРЕЧЕНЬ ВОПРОСОВ ДЛЯ СТУДЕНТОВ ФАРМАЦЕВТИЧЕСКОГО ФАКУЛЬТЕТА

1. Действие физических факторов на микроорганизмы. Методы стерилизации, аппаратура.

2. Дезинфекция. Методы. Дезинфицирующие препараты, механизм действия.

3. Методы контроля микробной загрязненности растительного лекарственного сырья.

4. Санитарно-бактериологический контроль дистиллированной воды.

5. Методы бактериологического контроля нестерильных лекарственных форм.

6. Стерильные лекарственные формы и методы бактериологического контроля.

КОНЕЧНЫЕ ЦЕЛИ ОБУЧЕНИЯ

Студент должен знать:

1. Правила работы и техники безопасности в микробиологической лаборатории; методы микроскопии, используемые в микробиологии; принципы классификации микробов, бинарную номенклатуру; структуру и химический состав микробов, функции отдельных структур.

2. Основные функции микробов: питание, дыхание, размножение, ферментативную активность; влияние окружающей среды на микробы; питательные среды; методы выделения чистых культур аэробных и анаэробных бактерий. Методы культивирования вирусов.

3. Роль микроорганизмов в круговороте веществ в природе; использование микробов в промышленности, сельском хозяйстве и биотехнологическом производстве; состав микрофлоры организма человека и ее значение; са-нитарно-показательные микроорганизмы воды; воздуха, почвы и их значение для санитарного состояния окружающей среды.

4. Роль микробов в жизни растений; фитопатогенную микрофлору и ее роль в порче лекарственного растительного сырья; источники и пути микробного загрязнения растительного сырья и лекарственных средств; микробиологические методы исследования качества лекарственного сырья и готовых лекарственных форм в соответствии с требованиями нормативных документов.

5. Действие на микробы химических и физических факторов; понятие "асептика", ''антисептика", методы стерилизации и аппаратуру; механизм действия дезинфицирующих веществ, дезинфектанты.

6. Химиотерапевтические вещества; антибиотики, классиф икацию антибиотиков по способу получения, химической структуре, механизму и спектру действия; осложнения антибиотикотерапии; антибиотикорезистентность микроорганизмов, ее механизмы.

7. Основы генетики микробов, виды генетических рекомбинаций у бактерий и использование генетических рекомбинатов для получения вакцинных штаммов, продуцентов антибиотиков, ферментов, гормонов. Механизмы формирования лекарственной устойчивости.

8. Понятия и принципы генетической инженерии. Сущность биотехнологии и решаемых ею проблем.

9. Понятия "инфекция", "инфекционная болезнь"; виды инфекций; роль микробов в развитии инфекционногопроцесса; механизмы и пути развития.

10. Иммунную систему человека; неспецифические факторы защиты организма; механизм реакций иммунитета, используемых для диагностики инфекционных заболеваний, диагностические препараты.

11. Иммунобиологические препараты, применяемые для лечения и профилактики инфекционных заболеваний: вакцины, лечебно-профилактические сыворотки, иммуномодуляторы, эубиотики, пробиотики, лечебные бактериофаги.

12.Таксономию, морфологические и биологические свойства возбудителей инфекционных заболеваний, эпидемиологию, механизмы и пути передачи возбудителей, патогенез, основные клинические проявления и иммунитет при этих заболеваниях; принципы диагностики, неспецифическую и специфическую профилактику и препараты для лечения.

Студент должен уметь:

1. Приготовить и окрасить микропрепараты простыми методами и методом Грама, микроскопировать с помощью иммерсионной системы.

2. Сделать посев на плотные, жидкие и полужидкие питательные среды; идентифицировать выделенную чистую культуру.

3. Сделать посев для определения микробного числа воздуха, воды, почвы, смывы с предметов, аптечной посуды; определять микробную чистоту различных лекарственных форм, проводить микробиологический контроль стерильности лекарственных средств.

4. Выполнять работу в асептических условиях: дезинфицировать и стерилизовать аптечную посуду, инструменты, рабочее место и др.

5. Определять чувствительность бактерий к антибиотикам методом диффузии в агаре и методом серийных разведений, оценить полученные результаты.

6. Оценить результаты реакций иммунитета, используемых для диагностики инфекционных заболеваний.

ПРАКТИЧЕСКИЕ НАВЫКИ

3.1. Практические навыки и умения, выработанные у студентов лечебного и педиатрического факультетов на кафедре микробиологии, вирусологии и иммунологии Волгоградского государственного медицинского университета

1. Приготовить микропрепараты, окрашивать их простыми и сложными методами; микроскопировать с иммерсионной системой.

2. Сделать посев на питательные среды для получения чистых культур аэробных и анаэробных бактерий, идентифицировать выделенную культуру; провести эпидемиологическое маркирование.

3. Сделать посев для определения микробного числа воды, воздуха; определять бактерии группы кишечной палочки, общую микробную обсемененность воды, воздуха, смывов с рук, предметов.

4. Выполнять работу в асептических условиях: дезинфицировать и стерилизовать лабораторную посуду, медицинские инструменты и др.

5. Определять чувствительность бактерий к антибиотикам: расшифровать антибиограмму и определить минимально-подавляющую концентрацию антибиотиков.

6. Поставить опыты по конъюгации, трансформации, трансдукции.

7. Проводить заражение и вскрытие лабораторных животных; определять вирулентность микробов.

8. Использовать основные реакции иммунитета для идентификации выделенной микробной культуры и обнаружения антител в сыворотке больных при диагностике инфекционных болезней.

9. Проводить взятие материала для бактериологических и вирусологических исследований.

10. Выделять и идентифицировать патогенные и условно-патогенные микроорганизмы.

11. Проводить заражение биологических моделей для культивирования вирусов с последующей индикацией и идентификацией.

12. Проводить серологическую диагностику инфекционных болезней.

13. Интерпретировать результаты микробиологических, вирусологических и иммунологических исследований.

3.2. Практические навыки и умения, выработанные у студентов стоматологического факультетана кафедре микробиологии, вирусологии и иммунологии Волгоградского государственного медицинского университета

1. Провести взятие исследуемого материала от больного.

2. Приготовить мазок из разного рода исследуемого материала.

3. Провести микроскопирование мазков с использованием иммерсионной системы светового микроскопа.

4. Выделить чистую культуру микроба.

5. Стерильно провести пересев бактериальных культур.

6. Определить биохимические свойства микробов с использованием сред пестрого ряда.

7. Определить чувствительность выделенной культуры к антибиотикам. Расшиф ровать антибиограмму и определить минимально-подавляющую концентрацию антибиотиков.

8. Провести идентификацию выделенной чистой культуры микроба по его антигенной структуре.

9. Осуществить постановку и оценить результаты серологических реакций, используемых в диагностике инфекционных болезней.

10. Определить тактику применения основных групп антибактериальных препаратов с учетом характера патологии челюстно-лицевой области и данных микробиологического исследования.

11. Воспользоваться системой микробиологических, вирусологических и иммунологических методов обследования больного с патологией челюстно-лицевой области.

3.3. Практические навыки и умения, выработанные у студентов фармацевтического факультетана кафедре микробиологии, вирусологии и иммунологии Волгоградского государственного медицинского университета

1. Приготовить и окрасить микропрепараты простыми методами и методом Грама. Провести микроскопирование мазков с использованием иммерсионной системы светового микроскопа.

6. Оценить результаты реакций иммунитета, используемых для диагностики инфекционных заболеваний.

ВОЛГОГРАДСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ МЕДИЦИНСКИЙ УНИВЕРСИТЕТ

ЧАСТНАЯ МИКРОБИОЛОГИЯ

ВОЗБУДИТЕЛИ

БАКТЕРИАЛЬНЫХ ИНФЕКЦИЙ

ЧЕЛОВЕКА

Волгоград

2013

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

ВОЛГОГРАДСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ МЕДИЦИНСКИЙ УНИВЕРСИТЕТ

КАФЕДРА МИКРОБИОЛОГИИ, ВИРУСОЛОГИИ И ИММУНОЛОГИИ

ЧАСТНАЯ МИКРОБИОЛОГИЯ

Дата: 2019-03-05, просмотров: 209.

12 3 4 5 6 7 8 9 10 Следующая ⇒