Иммунологические исследования
Поможем в ✍️ написании учебной работы
Поможем с курсовой, контрольной, дипломной, рефератом, отчетом по практике, научно-исследовательской и любой другой работой

Данные методы исследований имеют дополнительное значение, и лишь в отдельны х случаях результаты  их могут  быть решающими  в ретроспективной  диагностике заболеваний. Для этиологической диагностики используют иммунологические реакции, выявляющие в сыворотке больных, переболевших, вибриононосителей, вакцинированных специфические антитела: агглютинины, вибриоцидины, антитоксины. У больных  холерой на 5-7-й день заболевания  появляются агглютинины и вибриоцидные антитела в высоких титрах. Титры ан­титоксинов нарастают медленнее. Исследуют парные сыворотки.

Определение агглютининов методом развернутой реакции агглюти нации.  Исследуемую сыворотку разводят 1% пептонной водой (рН 7,5) в объе­ме 1 мл от 1:30 до 1:640, в качестве антигена используют 3-часовую бульонную культуру. .В пробирки с раститрованной сывороткой вносят по 1 капле культу­ры-антигена и ставят на час в термостат, затем до утра в холодильник при 40,5 °С, после чего отмечают результаты. Реакция сопровождается контролями антигена и сыворотки.  Результат в разведении 1:40 и выше считается ориенти­ровочно положительным. Диагностическое значение имеет 4-кратное нараста­ние титра антител.                                                                    •

Реакция непрямой гемагглютинации (РНГА) с антигенным холерным эритроцитарным диагностикумом. Ставится по методике, изложенной в наставлении к препарату.

Реакция нейтрализации антигена (РНАг) для выявления антител с   использованием холерного иммуноглобулинового эритроцитарного диагно стикума. Методика ее постановки изложена в наставлении к диагностакуму. Диагностическое значение имеет не менее чем 4-кратное нарастание титров ан­тител при исследовании парных сывороток в РИГА и РНАг.

Определение вибриоцидных антител в сыворотке крови (РВА). Прин­цип метода во всех его вариантах заключается в том, что в присутствии вибриоцидных антител не происходит размножения холерных вибрионов.

РИГА с эритроцитарным холерным энтеротоксическим диагностикумом . Предназначена для определения в сыворотке больных холерой, вибрионосителей и привитых холерогенанатоксином антител, нейтрализующих холерный токсин. Токсиннейтрализующие антитела появляются на 5-6-й день болезни, достигают максимума на 14-21 день. Диагностическим титром следует считать 1:160. Этой реакций можно также выявлять токсиннейтрализирующие антитела в сыворотке крови больных и вибриононосителей, у которых инфицирование обусловлено холерными вибрионами серогруппы 0139.

Для этиотропной терапии используют антибиотики.

Специфическая профилактика не разработана.

 

Вопросы для обсуждения

1. Классификация вибрионов.

2. Биология возбудителей.

3. Патогенез холеры.

4. Методы лабораторной диагностики холеры.

5. Бактериологический метод исследования холеры.

6. Ускоренная диагностика холеры.

7. Лечение и профилактика холеры.

Самостоятельная работа студентов

1. Познакомиться со схемой исследования при диагностике холеры.

2. Познакомиться с подготовкой материала к отправке в лабораторию (демонстрация).

3. Выписать направления для исследования испражнений.

4. Изучить ход исследования испражнений на наличие холерных вибрионов:

    а) познакомиться с ускоренной диагностикой холеры;

    б) познакомиться с методом иммобилизации и микроагглютинации, посмотреть демонстрационные препараты под микроскопом;

    в) сделать посев испражнений на первую пептонную воду и щелочной агар.

5. Изучить дальнейший ход исследования испражнений:

    а) приготовить мазки из колоний на щелочном агаре, окраска по Граму;

    б) изучить подвижность микробов из колоний в раздавленной капле;

    в) сделать посев культуры в пробирки с лактозо-сахорозной средой;

    г) поставить агглютинацию с О-сывороткой.

6. Познакомиться с идентификацией выделенной чистой культуры (демонстрация):

    а) рост на лактозо-сахарной среде;

    б) проба на диастазу;

    в) развернутая реакция агглютинации с О-холерной сывороткой;

    г) биохимические свойства (среды Гисса);

    д) нитрозо-индоловая реакция;

    е) гемолиз;

    ж) учесть результаты пробы с диагностическим холерофагом.

7. Познакомиться с препаратами, применяемыми для диагностики, лечения и профилактики холеры.

 

Выполненную работу и полученные результаты

оформить в виде протокола по схеме:

 

Дата: 2019-03-05, просмотров: 184.