Микробиологическая диагностика. Специфическая профилактика..

Таксономия: Y.pestis вызывает чуму; отдел Gracilicutes, семейство Enterobacteriaceae, род Yersinia. Возбудитель – Yersinia pestis.

Морфология: грамотрицательные палочки, овоидной формы, окрашиваются биполярно. Подвижны имеют капсулу, спор не образуют.

Культуральные свойства. Факультативные анаэробы. Температурный оптимум +25С. Хорошо культивируются на простых питательных средах. Ферментируют большинство углеводов без образования газа. Психофилы - способны менять свой метаболизм в зависимости от температуры и размножаться при низких температурах. Вирулентные штаммы образуют шероховатые (R) колонии, переходные (RS) и сероватые слизистые гладкие авирулентные(S) формы.

Два типа колоний - молодые и зрелые. Молодые с неровными краями. Зрелые колонии крупные, с бурым зернистым центром и неровными краями. На скошенном агаре через двое суток при +28ºС образуют серовато - белый налет, врастающий в среду, на бульоне - нежную поверхностную пленку и хлопковидный осадок.

Биохимические свойства: фенментативная активнсть высокая:

ферментация до кислоты ксилозу, синтез плазмокоагулазы, фибринолизина, гемолизина, лецитиназу, сероводород. Рамнозу, мочевину не ферментирует.

Антигенная структура. Группа белково - полисахаридных и липополисахаридных антигенов: термостабильный соматический О-антиген и термолабильный капсульный V,W антигены. С W-антигеном связывают вирулентность бактерий. Продуцирует факторы патогенности: фибринолизин, плазмокоагулазу, эндотоксин, экзотоксин, капсулу, V, W антигены.

Резистентность чувствителен к антибиотикам (особенно стрептомицин), нестоек к окружающей среде при высокой температуре.

Патогенные свойства. Обладает патогенным потенциалом, подавляет функции фагоцитарной системы, подавляет окислительный взрыв в фагоцитах и беспрепятственно в них размножается. Факторы патогенности контролируются плазмидами трех классов. В патогенезе выделяют три основных стадии - лимфогенного заноса, бактеремии, генерализованной септицемии. Имеют адгезины и инвазины, низкомолекулярные

протеины (ингибируют бактерицидные факторы), энтеротоксин. Часть факторов контролируется плазмидами вирулентности.

Клинические особенности: инкубационный период – несколько часов до 8 суток. Различают локальные – кожно-бубонная, бубонная; внешнедиссеминированные – первично-легочная, вторично-легочная и кишечная; генерализованная – первично-септическая, вторично-септическая формы чумы. Региональная лимфоаденопатия, энтероколиты, реактивные артриты, спондилит, лихорадка.

Эпидемиология: чума - классический природно-очаговый зооноз диких животных. Основные носители в природе - сурки, суслики, в городских условиях - крысы. В передаче возбудителя - блохи животных, способные заражать человека.

Иммунитет: клеточно-гуморальный, ограничен по длительности и напряженности.

Микробиологическая диагностика:

Бактериоскопическое исследование. Из исследуемого материала готовят мазки, окрашивают по Граму и водным раствором метиленового синего. Бактерии чумы представляют собой грамотрицательные палочки овоидной формы Бактериологическое исследование. Исследуемый материал засевают на чашки с питательным агаром. Посевы инкубируют при 25ºС. Первичное изучение посевов производят через 10ч. К этому сроку появляются колонии, которые образованы вирулентными R-формами. Мало- и авирулентные бактерии формируют S-формы колоний. Идентификацию чистой культуры проводят по морфологии бактериальных клеток, характеру роста, антигенным и биохимическим свойствам, чувствительности к специфическому фагу и биопробе.

На бульоне бактерии образуют пленку; ферментируют многие сахара до кислоты, индола не образуют, желатин не разжижают. Содержат групповой термостабильный соматический антиген и специфический термолабильный капсульный антиген.

Биопроба. Проводится для выделения чистой культуры из материала, загрязненного посторонней микрофлорой. Наиболее чувствительными лабораторными животными являются морские свинки, которым материал вводят подкожно. Внутрибрюшинно материал вводят в том случае, если он не загрязнен другими бактериями. После гибели животных отмечают патологические изменения органов и проводят бактериологическое исследование

Экспресс-методы лабораторной диагностики:

1.Иммунофлюоресцентный метод позволяет обнаружить присутствие возбудителя, как в патологическом материале, так и в объектах окружающей среды (вода, воздух), а также в пищевых продуктах и эктопаразитах. С этой целью используют люминесцентную видоспецифическую противочумную сыворотку, люминесцентные противокапсульную и противосоматическую сыворотку.

2.РПГА - для обнаружения антигенов бактерий в материале с помощью стандартной противочумной сыворотки, антитела которой нагружены на эритроциты.

Лечение: антибиотики – стрептомицин, препараты тетрациклинового ряда.

Профилактика: специфическая профилактика - живая ослабленная чумная вакцина EV. Имеется сухая таблетированная вакцина для перорального применения. Для оценки иммунитета к чуме (естественного постинфекционного и вакцинального) может применяться внутрикожная аллергическая проба с пестином.

Чумной бактериофаг – при идентификации Y.pestis.

Чумная сухая вакцина – высушенная живая культура Y.pestis вакцинного штамма EV, используется для профилактики чумы.

.Возбудитель псевдотуберкулез (родентиоз)

Межзональная природно-очаговая инфекционная болезнь, преимущественно грызунов птиц, характеризуется узелковым поражением паренхиматозных органов, сходным с изменениями при туберкулезе. В медицинской практике эту нозологическую единицу иначе называют ДСЛ (дальневосточная скарлатино-подобная лихорадка).

Морфология. Возбудитель Y.pseudotuberculosis –по морфологии и тинкториальным свойствам практически не отличим от Yersinia pestis. Гр- короткие, с закругленными концами. Выделяют 6 серогрупп (I-YI).

Культуральные свойства. Y.pseudotuberculosis - факультативный анаэроб, температурный оптимум 28-30 С. К питательным средам нетребователен. На плотных средах через 24 часа образует мелкие, круглые, выпуклые, прозрачные, серовато-желтые, блестящие колонии. При температуре 37°С может проявляться полиморфизм колоний появляются R- формы. При низких температурах (ниже 22ºС) образует жгутики, чем отличается от Yersinia pestis. В МПБ – равномерное помутнение с последующим выпадением осадка.

Резистентность. Микроорганизмы сохраняют жизнеспособность в почве и сене 180 суток, в подстилке, опилках и воде – 60 дней, на шифере – 20, на бетоне, стекле-60 суток.

Патогенез. Проникнув алиментарным или аэрогенным путем через поврежденную кожу или пуповину, бактерии оседают в регионарных лимфоузлах, либо с током крови разносятся по всем органам и тканям и вызывают септицемию. В результате пиогенного и токсигенного действия возбудителя на организм происходит гнойное воспаление лимфоузлов, появляются гнойно-некротические фокусы в органах, поражается ЦНС, может наступить гибель животного.

Лабораторная диагностика. Материалом для исследования являются паренхиматозные органы, лимфатические узлы, трупы грызунов и птиц.

Бактериологический метод. Дифференцируют Y.pseudotuberculosis от коринебактерий Corynebacterium pseudotuberculosis –возбудителя казеозного лимфаденита (псевдотуберкулеза) овец.

Биопроба. В/брюшинно заражают белых мышей, морских свинок, кроликов. Мыши погибают через 2-4 дня, свинки и кролики через 2-35 дней в зависимости от вирулентности культуры. Из органов павших животных делают посевы на питательные среды для выделения возбудителя, готовят мазки отпечатки и микроскопируют.