Санитарно-бактериологическое исследование воды. Отбор проб воды. Пробу воды рекомендуют брать на глубине 10-15 см от поверхности и на расстоянии 1,5 м от берега. Для отбора проб водопроводной воды используют стерильные флаконы вместимостью 500 мл, закрытые ватно-марлевыми пробками и покрытые бумажными колпачками. Кран предварительно обжигают тампоном, смоченным спиртом, после чего воду спускают в течение 10—15 минут и набирают во флаконы. Заполненные флаконы закрывают стерильными пробками. Стандартные методы исследования регламентированы для воды центрального водоснабжения и предусматривают:

1) определение общего числа м/о (в 1 мл исследуемой воды должно быть не более 100);

2) определение коли-индекса и коли-титра;

3) исследование по эпидемиологическим показаниям на патогенную микрофлору (патогенных м/о не должно быть обнаружено).

Определение общего числа бактерий — это количество м/о, которое содержится в 1 мл исследуемой воды, способных в течение суток при температуре 37 °С образовывать колонии, видимые невооруженным глазом.

1-й день. Засевают 2 чашки (в 1-й — 1 мл неразведеннои воды, во 2-й — 1 мл разведенной воды в 10 раз) и заливают тонким слоем растопленного и остуженного до 45 °С питательного агара. Посевы ставят в термостат и инкубируют при температуре 37 °С в течение 24 часов.

2-й день. Чашки с посевом вынимают из термостата и подсчитывают число выросших колоний. Учитывают те чашки, где число колоний находится в пределах 30-300. Подсчитанное количество колоний умножают на разведение и узнают число микробов в 1 мл исследуемой воды.

Определение БГКП. Наличие БГКП является показателем фекального загрязнения, интенсивность которого характеризуют: коли-индекс — количество кишечных палочек, обнаруженных в 1 литре воды; коли-титр — наименьшее количество воды, в котором обнаруживают присутствие кишечной палочки.

Санитарно-бактериологический анализ почвы. Включает определение микробного числа и содержания санитарно-показательных микроорганизмов почвы.

Микробное число почвы — это общее количество микроорганизмов, содержащихся в 1 г почвы. Для определения микробного числа берут в асептических условиях пробы почвы, измельча­ют, растирают и приготавливают несколько десятикратных разведений (1:100, 1:1000, 1:10 000, 1:100 000) для последующего посева.

Посев можно производить двумя методами:

1) в глубину питательного агара, когда 1 мл соответствующего разведения почвенной суспензии вносят в пустую стериль­ную чашку Петри и заливают 10 мл расплавленного и охлажденного до 45 °С МПА или сусло-агара; среду пере­мешивают, осторожно вращая чашку Петри в горизонталь­ной плоскости. После застывания среды чашки с суслом- агаром помещают в термостат при 24 °С, чашки с МПА — при 37 °С;

2) на поверхность питательного агара, когда 0,1 мл соответ­ствующего разведения суспензии распределяют шпателем по поверхности плотной питательной среды (МПА или сусло-агара). Посев инкубируют в течение 48 часов, после чего подсчитывают количество выросших колоний для каж­дого разведения почвы, а затем вычисляют средний пока­затель микробного числа почвы.

Для определения коли-титра почвы используют элективные питательные среды, содержащие желчь и генциановый фиоле­товый, подавляющие рост многочисленных микроорганизмов, населяющих почву, но не препятствующие росту кишечной па­лочки.

Перфрингенс-титр почвы — то наименьшее ее количество, выраженное в граммах, в котором содержится одна жизнеспо­собная клетка С. Perfringens .

Методы отбора проб воздуха. Микробиологический контроль воздуха проводится с помощью методов естественной или при­нудительной седиментации микробов. Седиментационный ме­тод — механическое оседание м/о; аспирационный — активное просасывание воздуха.

Седиментационный метод — чашки Петри с питательной сре­дой МПА устанавливают в открытом виде горизонтально, на раз­ном уровне от пола. Чашки со средой экспонируют от 10 до 20 минут, чашки закрывают, доставляют в лабораторию и ставят в термостат на 24 часа при температуре 37 °С. На следующий день изучают выросшие колонии. Метод используют в закрытых помещениях.

Аспирационный метод — исследование воздуха основано на фильтрации или аспирации (просасывании) его через специаль­ные фильтры, жидкости, порошки, адсорбирующие микрофло­ру. Принудительная седиментация микробов осуществляется путем «посева» проб воздуха на питательные среды с помощью специальных приборов (импакторов, импинджеров, фильтров).

Импакторы — приборы для принудительного осаждения мик­робов из воздуха на поверхность питательной среды (прибор Кротова, пробоотборник аэрозоля бактериологический и др.).

Импинджеры — приборы, с помощью которых воздух прохо­дит через жидкую питательную среду или изотонический раствор хлорида натрия.

Санитарно-бактериологическое исследование смывов. В отде­лениях хирургического профиля определяют количественную обсемененность м/о, наличие синегнойной палочки и протея.

Отбор проб. Взятие проб осуществляют методом смывов. Ис­пользуют ватные тампоны или салфетки 5x5 см, которые захва­тывают стерильным пинцетом. Тампоны и салфетки увлажняют, помещая их в пробирки с 2 мл изотонического раствора натрия хлорида. Смыв с рук делают в следующей последовательности: начинают с левой руки — протирают тыльную сторону руки от кисти к пальцам, затем ладонную сторону, между пальцами и под ногтевым ложем. Также производят смывы с правой руки.

Исследование на БГКП. В 1 -й день взятые смывы засевают на среду Кода. При росте кишечной палочки среда изменяет цвет. При изменении цвета среды исследуемый материал пересевают на среду Эндо. Во 2-й день изучают колонии на среде Эндо. Из подозрительных колоний делают мазки и микроскопируют.