Полимеразная цепная реакция (ПЦР) — экспериментальный метод молекулярной биологии, позволяющий добиться значи­тельного увеличения малых концентраций определенных фраг­ментов нуклеиновой кислоты (ДНК) в биологическом материа­ле (пробе).

Помимо амплификации ДНК, ПЦР позволяет проводить множество других манипуляций с нуклеиновыми кислотами (вве­дение мутаций, сращивание фрагментов ДНК) и широко исполь­зуется в биологической и медицинской практике, например для диагностики заболеваний (наследственных, инфекционных), для установления отцовства, для клонирования генов, выделения новых генов. Исследование методом ПЦР очень эффективно для обнаружения вируса иммунодефицита человека (ВИЧ).

Этот вирус опасен тем, что он блокирует защитные функции организма, открывая путь в тело человека для возбудителей са­мых разных болезней. Заражение ВИЧ происходит при половом контакте и при контакте с кровью инфицированного. Для обна­ружения ВИЧ используется как иммуноферментный анализ (ИФА), с помощью которой определяется наличие в крови чело­века антител на вирус, так и метод ПЦР-диагностики.

Иммунный статус

Иммунный статус — структурное и функциональное состоя­ние иммунной системы индивидуума, определяемое комплек­сом клинических и лабораторных иммунологических показате­лей. Иммунный статус (иммунный профиль, иммунореактивность) характеризует способность организма данного конкретного ин­дивидуума к иммунному ответу на определенный антиген в дан­ный момент времени. Оценка иммунного статуса организма на­чинается с ориентировочного клинического этапа: анамнез, ча­стота инфекционных заболеваний; лабораторные исследования в иммунологической лаборатории. Оценку иммунного статуса проводят в клинике при трансплантации органов и тканей, при аутоиммунных и других иммунопатологических заболеваниях, тяжелых аллергиях, онкологических, инфекционных и многих соматических болезнях.

Для заключения о состоянии иммунной системы необходи­мо руководствоваться:

1) данными общего клинического обследования;

2) состоянием факторов неспецифической резистентности;

3) показателями гуморального иммунитета;

4) показателями клеточного иммунитета;

5) результатами дополнительных тестов.

Данные общего клинического обследования включают жало­бы пациента, анамнез, описание клинического состояния. За­канчиваются клинические исследования общим анализом кро­ви, определением абсолютного числа лимфоцитов и фагоцитов.

Для оценки состояния факторов неспецифической резистент­ности выявляют состояние системы фагоцитоза и комплемента. При необходимости определяют содержание интерферона и лизоцима. Функциональную активность фагоцитов определяют по их подвижности, адгезии, способности к поглощению бакте­рий, дезгрануляции клеток, внутриклеточному килингу и образованию активных форм кислорода. С этой целью исполь­зуют такие тесты, как фагоцитарный индекс, НСТ-тест (нитро-синий тетразолий), хемилюминесценцию и др. Для оценки си­стемы комплемента обычно проводят титрование в реакции ге­молиза.

Гуморальное звено иммунитета оценивают по содержанию иммуноглобулинов разных классов в сыворотке крови, титру спе­цифических антител, ГНТ, количеству В-лимфоцитов в перифе­рической крови, их бласттрансформации под действием В клеточных митогенов. Состояние клеточного звена иммунитета определяют по количеству Т-лимфоцитов и их субпопуляций в периферической крови, бласттрансформации под действием Т-клеточных митогенов, содержанию гормонов тимуса, уровню секретируемых цитокинов, а также по кожным пробам с аллерге­нами. Для проведения кожных проб используют аллергены, к которым в норме должна быть сенсибилизация у большинства людей (например, проба Манту с туберкулином).

Кожные пробы, основанные на аллергических реакциях за­медленного типа, — наиболее простой и доступный способ оцен­ки клеточного иммунитета. В качестве дополнительных тестов для оценки иммунного статуса можно использовать определе­ние бактерицидности сыворотки крови, титрование комплемен­та, содержание С-рективного белка, ревматоидных факторов и других аутоантител в сыворотке крови.