ВВЕДЕНИЕ
В этой главе рассматриваются животные модели toxoplas-MOSIS с особым вниманием к фармакологическому приме-катионов, и, таким образом, пытается обновить существующие обзоры (Darcy и ZENNER, 1993; Derouin и др., 1995).
Практически у всех млекопитающих могут быть инфицированы Тохо-plasmosis. Тем не менее, различные виды животных заметно различаются по их устойчивости к Toxoplasma Infec-ции - например, крысы обладают высокой устойчивостью, но мышей в целом очень чувствительны (Фуджи и соавт., 1983). Кроме того, исход инфекции зависит не только от вида животного, но и от штамма животного. Генетический фон, кажется, имеет важное значение, поскольку после заражения токсоплазмозом, наблюдаются значительные различия в чувствительности различных штаммов инбредных и беспородных мышей (Araujo и др, 1976;. Williams и др, 1978;.. Маклеод и др 1984, 1989,. Suzuki и др, 1991, 1994;. Браун и др, 1995). Сегодня мы знаем, что, по крайней мере частично, такое животное напряжения в зависимости от различия в восприимчивости
может быть отнесены к определенным регионам хромосомных и даже при наличии определенных отдельных генов, которые могут влиять на паразит нагрузку резко (Brown и Маклеод, 1990; Deckert-Шлютер и др, 1994;. Brown и соавт., 1995; Johnson и соавт. , 2002). Тем не менее, многие вопросы в этом отношении все еще остаются нерешенными, которые могут быть иллюстративно подчеркнуто интригующим выводом о том, что контроль хозяина генетической устойчивости к самой острой инфекции различается в зависимости от вирулентности и гено-типа штамма Т. гондия используемого ( Сузуки и др., 1995).
Ситуация становится еще более сложным, потому что эти различия не являются одинаковыми по отношению к штаммам, но также зависит от способа заражения. Это означает, что, например, штамм мыши, который очень чувствителен к внутрибрюшинной (IP) по сравнению с инфекцией другого штамма мышь не обязательно может быть очень восприимчив к инфекции полости рта, и наоборот. Действительно, почти зеркальная восприимчивость между устным и внутрибрюшинно вызов была найдена с инбредной мыши
Токсоплазма. Модельные Apicomplexan-перспективы и методы, под редакцией Weiss & Kim
ISBN-13: 978-0-12-369542-0
ISBN-10: 0-12-369542-2
Copyright © 2007 Elsevier Ltd.
Все права воспроизведения в любой форме зарезервированы.
154 Toxoplasma ЖИВОТНЫЕ МОДЕЛИ И ТЕРАПИЯ
штаммы (Johnson, 1984), предполагая, по крайней мере, частично независимых режимов защиты, участвующих в каждом маршруте инфекции. В этом контексте очень важно, чтобы быть в курсе, что, в общем, используют два режима инфекции: (1) инъекцию тахизоитов выращивают в культуре или в мышей внутрибрюшинно, подкожно или внутривенно, и (2) Пероральное введение тканевых цист Т . гондий получены в основном из мозга, хронически инфицированных мышей (Маклеода и др., 1984) (ооцисты редко используются для инфекции). В то время как последняя модель является по своей природе менее воспроизводимым из-за переменного размера и содержания кист, он имеет то преимущество, что она вытекает естественный путь Infec Тион. Как тахизоиты не устойчивы к рНу кислоты в желудке, они только плохо инфекционные при пероральном введении (Dubey, 1998).
Кроме того, чтобы провести факторы, исход вызова с токсоплазмами в значительной степени зависят от природы самого инфекционного агента, и одна из наиболее распространенных характеристик многих штаммов Toxoplasma является изменением в вирулентности. В зависимости от времени, прежде чем животные поддаваться инфекции или процент животных, которые поддадутся, высокой вирулентностью, умеренно вирулентными, и менее вирулентные штаммы были охарактеризованы (Кауфман и др., 1958). Однако, штамм-зависимая вирулентность не появляется в качестве статического элемента, как это
может быть повышена за счет непрерывного прохождения паразита у лабораторных животных. Например, когда штамм RH первоначально был изолирован, мышей поддался инфекции 17-21 дней в первом проходе, 7-8 дней во второй, и 3-5 дней в третьем, и после того, как-(Sabin, 1941) , В любом случае, вирулентность штаммов T.gondii, обычно оцениваются в соответствии с результатом системной внутрибрюшинна инфекцией у мышей, а также исследование генетической структуры популяции показала, что большинство штаммов Т. гондия принадлежат трем клональным линиям, какой типа Я включает в себя мышь-вирулентных штаммов, а также типы и II, III, включают в себя штаммы мыши авирулентные (Сибли и Бутройда, 1992; Howe и Сибли, 1995). В самом деле, штаммы типа I может привести к летальному исходу у мышей, когда один инфекционное организм вводят (Хау и др., 1996).
Рисунок 7.1 суммирует факторы, влияющие на исход Toxoplasma у животных.
Врожденные
ТОКСОПЛАЗМОЗ
Идеальная модель для животных врожденного токсоплазмоза, полезная для исследований лекарственных средств, а также для иммунологических исследований и дизайна вакцин, будет тот, который подражает
Доза посевного
Toxoplasma этап используется: Toxoplasma используемый штамм:
тахизоиты, кисты, 
тип I, тип II, тип III,
ооцисты генетически измененные штаммы
Способ заражения:
ф; IV; локализованы; и т.п.
Рисунок 7.1 Факторы, влияющие на исход инфекции Toxoplasma у животных.
Лаборатория животные: вид; генетический фон из
деформации (инбредные, беспородные, генетически измененные штаммы и т.д.)
| врожденный токсоплазмоз | 155 |
условия инфекции в организме человека. Кроме того, исход инфекции должен быть четко обложением. На практике выполнение этих требований, как представляется, зависит от нескольких условий:
● природа животного плаценты, как орган, в котором происходит передача
● продолжительность беременности
● продолжительность паразитемия
● размер животного (для обзора см Derouin и др., 1995).
Однако последняя точка не так важна, как раньше, так как технические разработки в течение последних нескольких десятилетий (такие как, например, количественный ПЦР в реальное время) значительно повысило оценку инфекции у мелких животных (примеры см Флори и др., 2002, 2003).
В отличие от большинства других органов, плацента показывает широкий разброс в структуре среди различных видов млекопитающих, и могут быть классифицированы согласие-ки с числом слоев матери и плода клеток (Лок, 1982). В то время как плаценты хищников и жвачные животных в целом показывает, от четырех до шести слоев, плацента человека состоит всего из трех - плод трофобласт, мезенхимные, и слой эндотелиальных клеток. Такой относительно тонкий интерфейс, предполагая значимость для передачи паразита называется hemochorial типа плацента, и этот тип также присутствует у приматов и грызунов (Лок, 1982; Дарси и Zenner, 1993). Действительно, большинство исследований по врожденному токсоплазмозу были проведены с использованием грызунов - хотя, конечно, Эти животные, как правило, не в первую очередь выбирают из-за характера их плаценте, а по практическим причинам, связанным с более легкого хранения и обработки мелких лабораторных животных. Тем не менее, основные ограничения при работе с небольшими животными лежат в оценке самой инфекции плода, и в большинстве случаев оценка сводится к оценке скорости передачи плода путем прямым наблюдением или мыши subinoculation. для простых моделей врожденных choriore-tinitis Кроме этого, исследование с анатомической оценкой инфекции плода требует больших животных, таких как свиньи, овцы, или даже приматы. В следующих и в большинстве случаев оценка сводится к оценке скорости передачи плода путем прямого наблюдения или мыши subinoculation. для простых моделей врожденных choriore-tinitis Кроме этого, исследование с анатомической оценкой инфекции плода требует больших животных, таких как свиньи, овцы, или даже приматы. В следующих и в большинстве случаев оценка сводится к оценке скорости передачи плода путем прямого наблюдения или мыши subinoculation. для простых моделей врожденных choriore-tinitis Кроме этого, исследование с анатомической оценкой инфекции плода требует больших животных, таких как свиньи, овцы, или даже приматы. В следующих
секций, различные виды животных и их использование в моделях врожденного токсоплазмоза обсуждаются. Сводные данные представлены в таблицах 7.1 и 7.2.
Mouse
Как свидетельствуют многочисленные статьи, которые появились в течение последних десятилетий, мыши хорошо изученные животные врожденного токсоплазмоза (см Beverley, 1959, Remington и др, 1961;. Beverley и Генри, 1970; Хей и др, 1981, 1984.; Робертс и Александр, 1992;. Робертс и др 1994). Это может быть несколько удивительно, так как, в общем, в естественных условиях, вертикальная передача, кажется, происходит при хронической инфекции и через последующих поколений мышей (Беверли, 1959; Ремингтон и др., 1961). Таким образом, на первый взгляд модель мыши не может быть лучше всего подходит для имитации ситуации в организме человека. Тем не менее, другие выводы доказывают, что ли передача плоду во время хронической инфекции происходит матери во многом зависит от штамма паразита, а также от штамма мыши используется - например, у мышей, которые были латентно инфицированных 11 различных штаммов Toxoplasma, плацентарный передачи удалось только 6 штаммов (Werner и др., 1977), и, действительно, хронически инфицированных BALB / с мышей, не позволяют вертикальной передачи заболевания у всех (Roberts и Александра , 1992). Кроме того, не врожденная передача не была обнаружена в пометах хронически инфицированных мышей линии BALB / K, хотя были найдены сами матери, чтобы иметь чрезвычайно высокие отсчеты киста (Roberts и Александр, 1992). Объяснение этого противоречивого исход вертикальной передачи хронически инфицированный мышей, скорее всего, лежит в их генетическом фоне (как известно, за низкую восприимчивость мышого BALB в целом), и эта точка зрения может быть подтверждаются тем фактом, что, в отличии от инбредного мышей BALB, большинство ранних исследований использовали беспородных животных или мышей NMRI. Как следствие, более поздние inves-его исследования по врожденного токсоплазмоза, как правило, используют модель BALB мыши, а не моделей с использованием других инбредных или беспородных линий мышей (Тувенен и соавт, 1997;.. Фукс и др, 2000; Elsaid и др., 2001; Abou-Bacar и др, 2004а, 2004b;.. Beghetto и др, 2005). С другой стороны, в качестве модели для оценки
156 Toxoplasma ЖИВОТНЫЕ МОДЕЛИ И ТЕРАПИЯ
Therapeutics модель мыши была редко используется (Nguyen и Stadtsbaeder, 1985;. Фукс и др, 2000); он использовался скорее как модель для исследования-ки патогенетических механизмов и, в последнее время, для оценки подходов вакцин (Маклеод и др, 1988;. Робертс и др 1994;. Elsaid и др., 2001; Ali и др. , 2003; Купер и др, 2003;.. Letscher-Брю и др, 2003;. Mevelec и др, 2005). Тем не менее, Фукс и др. смогли показать положительный эффект от лечения minoxycy-Клайн на врожденного токсоплазмоза транс-миссии (Фукс и др., 2000). Учитывая преимущества мышей как лабораторных животных, с их легкой обработки, а также наличие новых, чувствительных методов обнаружения на основе ПЦР, которые позволяют лучшую диагностику в маленьких животных, BALB / с мышиной модели, если дальнейшее развитие,
Rat
Как человек и приматы, крысы относительно устойчивы к Т. гондий относительно клинических проявлений инфекции. В то время как передача во время острой инфекции материнских крыс, индуцированных внутримозгового или внутривенной инфекции было впервые сообщено в течение начала 1950-х годов (Schultz и Bauer, 1952; Hellbrügge и Dahme, 1953;. Hellbrügge и др, 1953, 1955), было показано недавно что пероральный прием внутрь ооцист или цист тканей также приводит к эмбриональной transmis-сионной (Dubey и Shen, 1991;. Зеннер и др, 1993;. Фрейр и др, 2001a, 2003a). В целом, уровень transmis-Sion кажутся высокими, и, как сообщалось, в основном, лежат в пределах от 30 до 90 процентов. Тем не менее, было большое изменение, которое было приписано штаммами Toxoplasma и штаммы крысы, используемых (Фрейр и др., 2003a). В самом деле, наблюдалась широкая вариабельность в формировании Toxoplasma кист у крыс одного и того же штамма и беспородных возраста, засевают с тем же штаммом, стадии и дозы Toxoplasma, используя тот же самый маршрут, (Фрейре и др., 2001а). Такое индивидуальное сопротивление крыс, принадлежащих к одной и той же беспородной деформации может быть отнесено к индивидуальному генетическому фону крысы (Фрейр и др., 2001о). В экспериментальном исследовании конструкции, например, для эффективности лекарственного средства тестирование, такого недостатка
отдельные воспроизводимости могут быть преодолены либо сравнительно большое число животных в каждой группе, или путем использования инбредных животных.
За исключением редких случаев, когда неестественно высокие дозы нескольких миллионов организмов были использованы для инфекции (Hellbrügge, 1955), Т. гондий был или не передается вообще, либо была передана только крайне редко из хронически инфицированных крыс к плоду, независимо от маршрута прививка, стадия, штамм или размер инокулята (Ремингтон и соавт, 1958, 1961;. Дубей и Шен, 1991; Зеннер и др, 1993;. Дубей и др., 1997). В отличие от ситуа-ции у мышей, в которых организм передается повторно во время хронической инфекции, так как в организме человека, вертикальная передача у крыс практически не происходит. Таким образом, в отношении клинического течение и в внутриутробной передаче, токсоплазмоз у крыс и человека похож, и инфекция у крыс может служить правильной моделью - особенно для врожденного токсоплазмоза человека (для обзора,
Несмотря на очевидные аналогии, касающиеся передачи, скорость передачи данных, а также показатели клинического проявления, модели крыс - с редкими исключениями (Усманова, 1965) - до сих пор не были использованы для тестирования на наркотики в врожденного токсоплазмоза. Это может быть связано с тем, что инфицированные пометов обычно выглядят здоровыми. Тем не менее, в отношении штаммов Т. гондий, стадии, и путей инокуляции, и PROB-квалифицированно также штаммов крыс, крысы, могут служить в качестве превосходных моделей - особенно, когда акцент делается на placen-тал передаче. В любом случае, как полная защита от врожденного токсоплазмоза может быть достигнуто независимо от штамма Toxoplasma, крысы могут быть привлекательными моделями для будущих кандидатов в вакцины против болезни (ZENNER и др., 1993, 1999а).
Свинки
Модель свиньи подопытным врожденного токсоплазмоза была описана в различных исследованиях (Адамс и др, 1949;. Huldt, 1960;. Берар-Badier и др, 1968; Wright, 1972; Haumont и др., 2000;. Флори и др 2002, 2003). Как у человека, морская свинка плацента имеет hemomonochorial типа (Дарсите и Zenner, 1993), предполагающего аналогичные способами передачи. Тем не менее, скорость передачи данных и чувствительность
| врожденный токсоплазмоз | 157 |
морские свинки к T.gondii, после пероральной или IP-инфекции гораздо выше, будучи примерно на полпути между теми, крысами и мышей. Кроме того, врожденная передачи при хронической материнской беременности наблюдалось (Wright, 1972; Флори и др., 2002). В качестве возможного преимущества в сравнении с мышей и крыс, морских свинок имеют приблизительно в три раза большую продолжительность беременности 65 дней в общей сложности - достаточно долго, чтобы дать сравнительные исследования с различаются-Ent времени инокуляции и сравнительных исследований Chemother-APY (Флори и др ., 2002). Для этого приложения, модель морских свинок может быть лучше всего подходит. Тем не менее, за исключением редких случаев, за исключением (Юсеф и др., 1985), несмотря на потенциальные преимущества, модель морских свинок врожденного токсоплазмоза до сих пор не используется для тестирования на наркотики.
Предстоятель
Что касается hemochorial плацентации (Ramsey и Harris, 1966; Дарси и ZENNER, 1993), забор крови плода и оценками внутриутробной инфекции, в общем примате модели фактически должна наилучшим образом соответствовать требованиям, предъявляемым к изучению влияния препарата в инфицированный плод. Таким образом, первое исследование было проведено с Macaca arctoides в качестве модели для приматов (Вонг
и другие., 1979). Данные, полученные с помощью этой модели предположил, что хотя определенные стадии развития организма Toxoplasma и плода может способствовать возникновению врожденной инфекции, скорость передачи данных в целом, как представляется, с низким и очень мало результатов неонатальных заболеваний (Wong и др., 1979) , В противоположность этому, более применима модель была создана Schoondermark-ван де Вен и др. с макак-резусов (Macaca мулаток) (Schoondermark-ван де Вен и др., 1993). При этом, частоты передачи, которые были найдены в макаки-резуса после материнской инфекции во втором и третьем триместрах беременности, равных тем, которые наблюдаются у людей (Schoondermark-ван де Вен и др., 1993). Резуса модель была затем использована для доказательства эффективности спирамицина или сочетания пириметамина и сульфадиазина для лечения врожденных T. гондий инфекция (Schoondermark-ван де Вен и др 1994а;.. Schoondermark-ван де Вен и др, 1995). Результаты показали, что оба схемы были явно эффективными в снижении количества паразитов в инфицированном плоде, проверенном с помощью ПЦРА и мыши инокуляции с амниотической жидкостью. Тем не менее, спирамицин был менее активным (Schoondermark-ван де Вен и др., 1994а) и не был найден в любом месте в головном мозге плода (Schoondermark-ван де Вен и др., 1994b).
Текст продолжение на стр 162
ТАБЛИЦА 7.1 Фармакологические исследования врожденного токсоплазмоза
| виды животных | Конкретные замечания | Фармакологические исследования (примеры литературы) |
| мышь | Hemotrichorial плацента; вертикальный | Нгуен и Stadtsbaeder, 1985; Фукс и др., |
| передачи во время хронической инфекции | 2000 | |
| возможный; редкая вертикальная передача | ||
| в инбредных мышей BALB | ||
| крысиный | Hemotrichorial плацента; редкий вертикальный | Усманова, 1965 |
| передачи при хронической | ||
| инфекционное заболевание; Штамм-зависимые изменения | ||
| в скорости передачи | ||
| морская свинка | Hemomonochorial плацента; | Юсеф и др., 1985 |
| вертикальная передача при хроническом | ||
| инфекции наблюдается; В 3 раза больше | ||
| время беременности, чем у мышей и крыс | ||
| примат | Hemomonochorial плацента; | Schoondermark-ван де Вен и др., 1994а, |
| Скорости передачи напоминают | 1994b, 1995 | |
| те, у людей | ||
Таблица 7.2 Врожденные модели токсоплазмоза
| Результат животного | Результат животного | |||||
| инфекции I (с | инфекция II | |||||
| вид | Toxoplasma | время введения | что касается плода | (в отношении к | ||
| и напряжение | Toxoplasma | стадии и | Точка и Toxoplasma | передача в | коробка передач | |
| животных | штамм | маршрут | дозы по отношению к | с острой инфекцией | хронически | |
| используемый* | вводить * | инфекционное заболевание | беременность | животные) | инфицированные животные) | Публикация ** |
| Мышь: | RH, 113-CE, | Тахизоиты (RH) | Неопределенные номера | RH: нет инфекции | Передача | Remington |
| NIH | Beverley, | и кист | при острых и хронических | молодой, если доставка | хронически | и другие., 1961 |
| деформации | M7727 | (113-CE, | инфекции: острый (RH) | до 5-го дня | инфицированный мышей | |
| Beverley, | на 16-й день беременности; | после заражения; | произошло, большинство | |||
| M7727) | хронический (113-CE, | 56% инфекция | часто с | |||
| внутрибрюшинно или подкожно | Beverley, M7727) | на 7-й день после того, как | штамм Beverley | |||
| 2-15 месяцев до | ф прививка | |||||
| Доставка | ||||||
| Мышь: | S93, K8, 558/72, | Кисты внутрибрюшинно перед | 20 цист 4-8 недель | Первичная инфекция | Заражение до | Вернер и др., |
| ЯМРТ | Виттинг, Gail, | до беременности; | до спаривания; 20 | во время беременности | беременность: S93, | 1977 |
| КГУ, 1070, | кисты устно | Кисты на 10-й день | (ALT-деформированное только): | K8, 558/72, | ||
| 162/74, 248/70, | во время preg- | беременность | коробка передач | Виттинг, Gail: нет | ||
| MO, ALT | только гомосексуалист | Скорость 28% | коробка передач; КГУ, | |||
| в первичной | 1070, 162/74, | |||||
| инфекционное заболевание | 248/70, MO, ALT: | |||||
| испытание | коробка передач | |||||
| Toxoplasma | Скорость 1-3% | |||||
| ALT-деформированное | ||||||
| Мышь: | Beverley | киста СБН | Неопределенное количество | 75% потомства с | Котримоксазол | Нгуен и |
| ЯМРТ | кист 5-8 дней после | положительная серология; | лечение во время | Stadtsbaeder, | ||
| спаривание | выживание потомства | беременность почти | 1985 | |||
| 40%; число | нормированный | |||||
| потомства | отпрыск | |||||
| примерно на 20% | номер и | |||||
| по сравнению с не- | выживание | |||||
| инфицированный контроль; | ||||||
| 30% смертность | ||||||
| инфицированные матери | ||||||
| во время беременности | ||||||
| Мышь: | Beverley | Кисты устно | 8 недель до случки | Скорость передачи | Врожденная инфекция | Робертс и |
| BALB / с, | 5 цисты; день 12 | примерно на 50% | произошло только тогда, | Александр, | ||
| BALB / к | беременность 20 цист | (кисты на первый раз | мать была | 1992 | ||
| (Инбредный) | во время беременности только) | инфицированный для | ||||
| первый раз во время | ||||||
| беременность |
| 158 |
| Toxoplasma ЖИВОТНЫЕ МОДЕЛИ И ТЕРАПИЯ |
| Мышь: | п | Кисты устно | 2 цисты между | фетальный передачи | Миноциклин обработанными | Фукс и др., 2000 |
| BALB / с | дни 6 и 15 | Скорость 50-60% | мышах показали | |||
| (Инбредный) | беременности | коробка передач | ||||
| только 3,6% | ||||||
| Рац: | RH | тахизоиты ф | 1 × 107 и 2 × 107 | Практически нет плода | Remington | |
| Sprague- | тахизоиты 6-8 недель | коробка передач | и другие., 1958 | |||
| Dawley | до спаривания | (3 потомство от | ||||
| 140 в общей сложности - все | ||||||
| в одном помете) | ||||||
| Рац: | RH, S-6, | тахизоиты | 1 × 104 1 × 107 | Нет плода | Remington | |
| Sprague- | Beverley | (RH, S-6) и | тахизоиты и | коробка передач | и другие., 1961 | |
| Dawley, | кисты (Беверли) | не определено число | от хронически | |||
| Osborne- | IP | кист 2-8 месяцев | инфицированные крысы с | |||
| Мендель, | до беременности | RH или S-6; | ||||
| Черная крыса, | Beverley: 5% | |||||
| Гольцман | коробка передач | |||||
| крыса | ||||||
| Рац: | CT-1 | ооцисты устно | 1 × 104 ооцисты в | Скорость передачи | Нет передачи | Дубей и |
| Sprague- | или подкожно; | 7-15 дней беременности; | 82,1% (ооцисты | хронически | Shen, 1991 | |
| Dawley | bradyzoites СБН | 1 × 104 bradyzoites в | перорально), 90,9% | инфицированные крысы | ||
| 10-14 дней беременности | (Ооцисты подкожно), 43,8% | |||||
| (Bradyzoites подкожно) | ||||||
| Рац: | RH, 76K, | RH: тахизоиты | Между 8 и | Скорость передачи | Нет передачи | Зеннер и др., |
| Фишер | Prugniaud | ф; Prugniaud | 12-й дни беременности: | 58% (RH), 63% | для плодов | 1993, 1999а |
| и 76K: | 8 × 106 тахизоиты RH; | (Prugniaud), | хронически | |||
| кисты устно | 1200 Prugniaud или | 35% (76K) | инфицированные крысы, | |||
| 76K кист | даже если крыса | |||||
| повторное заражение во время | ||||||
| беременность | ||||||
| Рац: | VEG | ооцисты устно | 1 × 104 ооцист на | Скорость передачи данных: | Практически нет | Дубей и др., |
| Sprague- | День 6, 9, 12 или 15 | 33% (день 6), | коробка передач | 1997 | ||
| Dawley | беременности | 55% (9-й день), | к следующему | |||
| 83% (12-й день) | поколение | |||||
| и 57% (15-й день) | ||||||
| продолжение |
| врожденный токсоплазмоз |
| 159 |
Таблица 7.2 Врожденные модели токсоплазмоза-прод
| Результат животного | Результат животного | |||||
| инфекции I (с | инфекция II | |||||
| вид | Toxoplasma | время введения | что касается плода | (в отношении к | ||
| и напряжение | Toxoplasma | стадии и | Точка и Toxoplasma | передача в | коробка передач | |
| животных | штамм | маршрут | дозы по отношению к | с острой инфекцией | хронически | |
| используемый* | вводить * | инфекционное заболевание | беременность | животные) | инфицированные животные) | Публикация ** |
| Рац: Wistar | 12 разные | Кисты устно | 2 × 102 3.4 × 103 кисты | В целом передача | коробка передач | Фрейре и др., |
| а также | штаммы низкого | в 6-8 и 15 дней | 44% с | более частый | 2001a | |
| Долго | до высокого | беременность | Диапазон 0-90% | в Лонг-Эванс | ||
| Эванс | патогенность | приписаны | чем в Wistar | |||
| для мышей | генетически обусловленный | крысы | ||||
| (Например, M7741, | восприимчивость | |||||
| Beverley, M49) | беспородные крысы Вистар; | |||||
| передача не | ||||||
| Пострадавшие от | ||||||
| штамм или доза | ||||||
| Toxoplasma ни | ||||||
| время точка | ||||||
| инфекционное заболевание | ||||||
| Рац: Wistar | 6 различных | ооцисты устно | 1 × 104 ооцисты в | Скорость передачи | Нет статистически | Фрейре и др., |
| штаммы | 15 дней беременности | на 10-80%; выше | значительное | 2003a | ||
| снизу вверх | коробка передач | различия в скорости | ||||
| патогенность | штаммами больше | передачи | ||||
| для мышей | патогенный для | у крыс, которых кормили | ||||
| мышь | Кисты (предыдущие | |||||
| Работа) | ||||||
| Гвинея | Beverley | Кисты внутрибрюшинно | 60 или 100 цист на | Скорость передачи | коробка передач | Райт, 1972 |
| свинья: не | 4-54 дней | 100%, если инфекция | ставка 30%, если | |||
| указанный | беременность; 100-200 | во время беременности | инфекции, прежде чем | |||
| кист 2-6 месяцев | беременность; в общем и целом | |||||
| до спаривания | большое количество | |||||
| мертворожденным или строго | ||||||
| больные щенки |
| 160 |
| Toxoplasma ЖИВОТНЫЕ МОДЕЛИ И ТЕРАПИЯ |
| Гвинея | C56 | тахизоиты | 5 × 105 тахизоиты после | Передача в | SAG1 иммунизированных | Haumont и др., |
| свинья: | внутрикожно | 7 недель беременности | более чем на 80% | животные с более низким | 2000 | |
| Dunkin- | коробка передач | |||||
| хартли | ставки | |||||
| Гвинея | RH, 76K, | Тахизоиты (RH) | Различные временные точки | Скорость передачи | коробка передач | Флори и др., |
| свинья: | Prugniaud | ф; Кисты (76K, | от 90 дней до | если инфекция во время | Скорость, если 17% | 2002 |
| Dunkin- | Prugniaud) | беременность 40-й день | беременность: | инфекционное заболевание | ||
| хартли | IP или устно | беременности: | 54% (RH); 84% | 30-90 дней | ||
| 100 тахизоиты | (Prugniaud); | до спаривания; | ||||
| (Ф); 100 цисты | 86% (76K) | общий высокий | ||||
| (IP или перорально) | количество | |||||
| мертворожденным и | ||||||
| нежизнеспособные эмбрионы | ||||||
| Гвинея | 76K | Кисты устно | 100 цист на 20-й день или | Скорость передачи | Инфекция оценена | Флори и др., |
| свинья: | 40 беременности | на 84,6% и 100% | с помощью ПЦР в реальном времени | 2003 | ||
| Dunkin- | после прививки | |||||
| хартли | в дни 20 и 40, | |||||
| соответственно | ||||||
| Кролик: не | Виттинг / | Кисты внутрибрюшинны до | 200 цисты -19 дней | фетальный передачи | Нет врожденных | Вернер и др., |
| указанный | ALT- | беременность; | до спаривания; | оценить до 79% | коробка передач | 1977 |
| кисты устно | 200 кист во время | когда первый | ||||
| в течение | первый или второй | инфекция | ||||
| беременность | триместры в пре- | размещены по меньшей мере, | ||||
| инфицированный или не- | 35 дней до | |||||
| предварительно зараженные животные | к спариванию | |||||
| Предстоятель: | RH | тахизоиты IV | 5 × 106 тахизоиты на | В целом передача | Schoondermark- | |
| Макака | день 90 или 130 | скорость 61%, что | ван де Вен и др | |||
| мулатка | беременность | сравнима с | аль., 1993 | |||
| (резус) | что находится в | |||||
| люди | ||||||
* Для определения штаммов животных или токсоплазмы, смотрите соответствующие статьи.
** Из-за многочисленные публикации на эту тему, только немногое из них иллюстративно выбрал для этой таблицы.
| врожденный токсоплазмоз |
| 161 |
162 Toxoplasma ЖИВОТНЫЕ МОДЕЛИ И ТЕРАПИЯ
Резус модель обезьяна теоретически возможно лучшая модель животного, чтобы доказать эффективность препарата против врожденного токсоплазмоза человека, особенно в связи с плацентарной передачей. Тем не менее, корпус и обработка обезьян требуют специального оборудования и подготовленных сотрудников. Это также отнимает много времени и дорого, что может ограничить число животных, используемых для исследований. не принимая во внимание этот факт, и принимая во внимание, что исход врожденной инфекции (как у людей), часто, как представляется, субклинический или, по крайней мере, показывает высокую степень изменчивости (Schoondermark-ван де Вен и др., 1993), никакой прямой препарат оценка касается его влияния на клиническое течение врожденного токсоплазмоза кажется практичным до сих пор. Таким образом, Эффективность лекарственного средства должна быть косвенно extrapo-ведена от демонстрации паразита или его ДНК в амниотической жидкости или ткани плода, а также фармакокинетических данные лекарственного средства, которые также могут быть получены из обезьяны плода. Таким образом, резус модель обезьяны может иметь свое место в качестве последнего этапа оценки для нового препарата, прежде чем он допущен к клиническим испытаниям.
Кролик
Удивительно, кролик врожденный токсоплазмоз не был хорошо изучен, хотя кроликов широко используются лабораторные животные и передачи от матери к плоду было продемонстрировано (Uhlikova и HÜBNER, 1973). Кроме того, эмбрионы от хронически инфицированных матерей, были защищены, таким образом, модель кролика разделят общие черты с инфекцией у человека (Werner и др., 1977). Модель кролика может представлять особый интерес, когда небольшой размер других общих Labo-ratory животных (таких как мыши и крысы) затрудняет эксперименты - например, когда большие объемы или последующие образцы крови необходимы для exami-нации в ответ антител ( Araujo и Remington, 1975). Насколько нам известно, не фарм-ceutical исследования врожденного токсоплазмоза было проведено с использованием модели кролика.
Другие животные
Различные другие животные были предложены в качестве моделей для врожденного токсоплазмоза, но есть
никогда не был широко использован. В качестве примера, хотя свиньи хорошо известны приобрести токсоплазмоз и играть решающую роль в распространении болезни к людям через их мясо (для обзора см рама для натягивания и др., 2000 и Монтойя и др., 2004), их использование в качестве модели животных никогда не были тщательно investi ворот. Тем не менее, при заражении беременных минисвинеев с штаммами различной вирулентности, даже штамм, который был рассмотрен апатогенным к обеим свинкам и мышею привел к значительному количеству congeni-индикаторных инфицированным поросят (Jungersen и др., 2001). Поэтому такая модель свинья врожденного токсоплазмоза может иметь значение для ситуаций, где необходимы большие животные, и они могут быть соответствующие модели животных для некоторых Toxoplasma напрягает, что, несмотря на низкую вирулентность, очевидно, передаются плоду (Jungersen и др., 2001).
Врожденное заболевание связано с T.gondii, является одной из основных причин абортов и смертности новорожденных у овец. Кроме того, недоваренные мясо от зараженных овец является важным источником инфекции для человека. Несмотря на то, врожденные передачи хорошо описана и в самом деле, как известны, как одной из основных причин абортов у этого вида (Dubey и Роммеля, 1992;. Андерсон и др, 1994), модель животного имитируя врожденную инфекцию у людей есть, насколько нам известно, не было установлено. Последние шпилька-х годов с овцами показывают, что реактивация хронической инфекции во время беременности может быть главной причиной врожденной инфекции (Duncanson и др., 2001;. Williams и др, 2005). В связи с этим, врожденный токсоплазмоз у овец кажется больше resem-BLE обычный режим передачи врожденной у мышей, чем у человека.
Совсем недавно, Que и др. сообщил новая модель куриного эмбриона, который был принят от модели цыпленка, которые были разработаны для изучения метастатических заболеваний (Que и др., 2004). В основном, тахизоиты вводили непосредственно в хорионаллантоисную вены 12-дневных птенцов, и после инкубационного периода от 3 до 6 дней степень инфекции оценивали путем гистопатологического исследования и количественной ПЦР в реальном времени на ДНК Toxoplasma. Поскольку эта модель также обеспечивает возможность инъекции наркотиков через chorioal-loantioic вены, это может оказаться полезным для первоначального скрининга лекарственных препаратов настройки с курсом инфекции, который короче, чем у мышея (Que и др., 2004).
| ГЛАЗ ТОКСОПЛАЗМОЗ | 163 |
ГЛАЗ ТОКСОПЛАЗМОЗ
Глазной токсоплазмоз может быть приобретен в результате инфицирования после родов, но в значительном проценте случаев этиология глазного токсоплазмоза человека, как представляется, связана с внутриутробным инфицированием плода с помощью матери, чья первичной инфекция была приобретена во время беременности (для обзора, см Голландия, 2003). Следовательно, глазное токсоплазмоз может считаться с одной стороны, послеродовом приобрела болезнь, а с другой поздним проявлением врожденного токсоплазмоза. Тем не менее, это, кажется практичной для описания моделей животных для производства глазного заболевания в основном первичной инфекцией у взрослых, хотя были усилия, которые успешно создали глазную болезнь, как следствие трансплацентарной Toxoplasma передачи (Hutchison и др ., 1982; Lee и др, 1983;.. Сено и др, 1984;. Даттон и др, 1986).
У пациентов с сопутствующим immunosuppres-SION или иммунными дефектами, такими как с трансплантацией костного мозга или ВИЧ, токсоплазматического хориоретинит часто связанно с одновременным токсоплазматическим энцефалитом (TE) или диссеминированный инфекцией (для обзора см Монтойи и др., 2004). Тем не менее, даже у больных СПИДом токсоплазматического Chori-oretinitis встречается относительно редко (Holland и др., 1988а), так что большинство случаев заболевания человека глазного токсоплазмоза находятся в иммунокомпетентных пациентов. Действительно, Т. гондий является одним из наиболее часто определены причин увеита и наиболее часто identitified возбудителя инфицирует ингу сетчатки иначе иммунокомпетентных лиц (Holland, 1999) и, независимо от того, глазного токсоплазмоза обусловлен реакционным vated врожденного инфекции или инфекции, которая приобретается после рождения, она обычно представляет в иммунокомпетентных хозяина, как более или менее локальной-роскопию болезни глаз (Монтойя и др., 2004). Таким образом, модель животного, особенно тот, который может быть подходит для оценки эффективности данного лекарственного средства, в идеале должны быть охарактеризованы локализованной инфекции глаза (или, по крайней мере, преимущественно локализованной инфекции глаз), а не обобщенный или инфекции ЦНС, где глаз только одно место заболевание среди других - экспериментальная задача, которую не легко выполнить. Однако в настоящее время в идеале должны быть охарактеризованы локализованной инфекции глаза (или, по крайней мере, преимущественно локализованной инфекции глаз), а не с помощью обобщенной или ЦНС инфекции, где глаз является только одно местоположение заболеванием среди других - экспериментальный вызов, что это не так легко выполнить. Однако в настоящее время в идеале должны быть охарактеризованы локализованной инфекции глаза (или, по крайней мере, преимущественно локализованной инфекции глаз), а не с помощью обобщенной или ЦНС инфекции, где глаз является только одно местоположение заболеванием среди других - экспериментальный вызов, что это не так легко выполнить. Однако в настоящее время
Модели основаны либо на первичном локальный инокуляты Тион Т. гондия в глаза животного, на semilo-ческе инфекции через сонную артерию, или на первичную системную инфекции, которая затем влияет на глаза, как преобладающий орган проявления (таблицы 7.3 и 7.4).
МОЗГОВОЙ
ТОКСОПЛАЗМОЗ
В данном разделе рассматриваются модели животных, доступные для токсоплазматического энцефалита (ТЕ) в качестве преобладающего проявления заболевания в immunocom обещанный хозяина. Она также включает в себя острые системные модели, в которых распространены инфекции Promi-NENT и где мозг обычно участвуют как часть этого. Гораздо чаще используется животных при острых или церебральным токсоплазмозом исследований, particu-бенно в отношении фармакологической тестирования, о чем свидетельствуют многочисленные публикации, является мышь (примеры см Переа и Daza, 1976; Grossman и Remington, 1979; Chang и Pechere, 1987; Hofflin и Ремингтон, 1987a, 1987b;. Чанг и др, 1988, 1991, 1994; Israelski и Ремингтон, 1990;. Derouin и др, 1991, 1992;. Араужо и др, 1991a, 1992a, 1992b, 1996, 1998; Weiss и соавт, 1992;. Родригес Диас и др, 1993;. Romand и соавт, 1993, 1995, 1996;.. ольха и др 1994; Дюма и др, 1994, 1999. Olliaro и др., 1994; Хан и др, 1996, 2000. Мартинес и др., 1996; Агирре-Круз и Sotelo, 1998; Агирре-Круз и др., 1998; Sordet и др., 1998; Djurkovic-Djakovic и др, 1999, 2002, 2005. Moshkani и Dalimi, 2000; Шёлер и др., 2001; Ferreira и др., 2002; Degerli и др., 2003; Belal и др., 2004; Dunay и др., 2004; Lescano и др., 2004; Груич и др., 2005; Лин и др., 2005).
Для некоторых целей хомячков (Я.И. и др, 1975;.. Гормли и др, 1998) или крыс (Foulet и соавт, 1994;. Дубей, 1996; De Champs и др, 1997;. Кемпф и соавт, 1999;. Зеннер и др аль, 1999b;.. Фрейр и др, 2001b, 2003b, 2004), был использован, но, как правило, не для оценки лекарственных средств. Модели основаны на первичной острой инфекции у животных, на прямой инокуляции паразита в организм животного мозга с или без иммуносупрессии, или на хронической инфекции у животного, которое может быть иммуносупрессией (например, с иммунодепрессантами или Радиа-ции, антитела, направленные против лимфоцитов или цитокинов, или сопутствующих инфекций вирусами, которые модулируют immunosystem) (см таблицы 7.5 и 7.6). Для некоторых применений, использование генетически модифицированных мышей с различными дефектами в их иммунной системы может также быть одним из вариантов. В общем,
Модели острой инфекции
Острые модели инфекции, как правило, связаны с 100-процентной смертностью лабораторных животных в пределах от 8 до 10 дней, и выживание в частности, лечит-ние групп оцениваются путем анализом предела продукта выживаемости Каплана-Мейер. До сих пор они были общими предпочтительными моделями для тестирования на наркотики, в основном из-за их последовательную воспроизводимость. Чаще всего, между 2× 102 и 2 × 104тахизоиты из вирулентного штамма RH инъецируют внутрибрюшинно в самок мышей Swiss Webster (примеры см Хан и др, 1996, 1998;. Араухо и соавт, 1997;. Djurkovic-Djakovic и др., 1999), но иногда животные заражены перорально, например, 10 цист T. гондий С56 (Араужо и др, 1997;.. Хан и др., 1998; Ярдли и др, 2002). Мыши затем, как правило, наблюдаются в течение 30 дней с момента заражения. Выжившие мыши исследовались на остаточную инфекцию с помощью микроскопии ткани головного мозга на наличие T.gondii, кисты, либо внутрибрюшинно subinoculation из suspen-сий порций различных органов здоровых мышей. К сожалению, эти модели не очень
| церебральный токсоплазмоз | 171 |
недалеко от большинства Toxoplasma-индуцированных заболеваний человека в ослабленном иммунитете хозяина, где инфекция клинически принимает более локализованный курс не всегда (хотя часто) ограничивается мозгом. В отличие от острого первичного токсоплазмоза в моделях животных является обобщенным инфекция, substan-ственно с участием других, чем мозг органов - например, легкие или печень. Таким образом, есть врожденные трудности в этих моделях для PROJEC-ской эффективности препарата, выведенной из диаграммы Каплана-Мейера, который в конечном счете, зависит не только от прямого действия препарата, но и на орган-специфических фармакокинетики и метаболизма лекарственных средств. Это означает, что, как следствие, что препарат успешно испытан в острых моделях инфекции может произойти сбой при лечении локализованной инфекции головного мозга, и наоборот. Во всяком случае, эта модель является стандартной моделью для первого скрининга в естественных условиях нового препарата. В дополнении к кривым выживаемости, подсчету или титрованию кист поддались и / или выживающим головным мозг животных, а также subinoculation в свежий мышей может быть выполнено. В качестве альтернативы, методы тканевой культуры или современные методы обнаружения, таких как ПЦР из органов выжившихов могут быть использованы для оценки остаточной паразитной нагрузки (Weiss и соавт, 1991;. Miedouge и др, 1997;.. Djurkovic-Djakovic и др, 1999) ,
В дополнении к первичной оценке лекарственных средств эф-cacy на основе смертельного исхода острого toxoplas-MOSIS, модель мыши была разработана, что не имеет большой недостатка в possi-BLY тяжелого страдания мышея, прежде чем они умирают от подавляющего T. гондий инфекции (Samuel и соавт, 2003;.. Муи и др, 2005). В этой модели мышей также инокулировал внутрибрюшинно с штаммом RH, но на четвертый день после заражения 1,5 мл фосфатно-солевого буфером (PBS) вводят внутрибрюшинно, а затем с нарисованными вместе со всей перитонеальной жидкостью. Общее количество паразитов и концентрации паразитов количественному микроскопически в качестве основы для последующего статистического анализа (Samuel и соавт., 2003). На самом деле, эта модель была доказана путем добавления сульфадиазина к питьевой воде зараженных мышей,
Локализованный мозг
Модели инфекции
Прямой инокуляции тахизоитов в лобной доли мышей может предоставить наиболее воспроизводимые результаты, с поражением гистологически, напоминающие те, которые можно было наблюдать в иммунодефицитом человека (Hofflin и др., 1987). Модель была успешно использована, например, чтобы продемонстрировать эффективность клиндамицина, roxithromycine, и гамма-интерферона на Toxoplasma энцефалита (Hofflin и Remington, 1987a, 1987b). Однако позже, в другой модели также с локализованной инфекцией головного мозга с высоким вирулентным штаммом RH, Clin-damycin не показал заметное воздействия; вместо этого, пириметамин сульфадиазина и их COMBINA-ции были полезны с точки зрения смертности и гистологического (Arribas и др., 1995). Во всяком случае, процедура местной прививки мозга требует высокой технической экспертизы, и, таким образом, может и не быть пригодным для исследований на более крупном масштабе в Aver возраста лабораториях. Кроме того, главный disadvan-Таге этой модели является то, что TE не следовать естественной истории Т. Gondii инфекции, так как это не является следствием отрыжку ранее установленной инфекции. Поэтому не может быть идеальным для фармакологических исследований, связанных с этими аспектами (например, для исследования помех наркотиков с механизмами обострений), а для изучения некоторых особенностей патогенеза.
РЕКОМЕНДАЦИИ
Abou-Bacar, А., Pfaff, AW, Джордж, S. и др. (2004a). Роль клеток NK и гамма-интерферон в трансплацентарном прохождении токсоплазма в мышиной модели первичной инфекции. Infect. Имун. 72, 1397-1401.
Abou-Bacar, А., Pfaff, AW, Letscher-Брю, В. и др. (2004b). Роль гамма-интерферона и Т-клеток при врожденной передачи Toxoplasma. Паразит Immunol. 26, 315-318.
Адамс, FH, Куни, М., Адамс, JM и Kabler, П.
(1949). Экспериментальная токсоплазмоз. Proc. Soc. Exp.
Biol, Med. 70, 258-260.
Агирра-Круз, Л. и Сотел, J. (1998). Отсутствие лечебного эффекта колхицина на мышином токсоплазмозе. J. Parasitol. 84, 163-164.
ВВЕДЕНИЕ
В этой главе рассматриваются животные модели toxoplas-MOSIS с особым вниманием к фармакологическому приме-катионов, и, таким образом, пытается обновить существующие обзоры (Darcy и ZENNER, 1993; Derouin и др., 1995).
Практически у всех млекопитающих могут быть инфицированы Тохо-plasmosis. Тем не менее, различные виды животных заметно различаются по их устойчивости к Toxoplasma Infec-ции - например, крысы обладают высокой устойчивостью, но мышей в целом очень чувствительны (Фуджи и соавт., 1983). Кроме того, исход инфекции зависит не только от вида животного, но и от штамма животного. Генетический фон, кажется, имеет важное значение, поскольку после заражения токсоплазмозом, наблюдаются значительные различия в чувствительности различных штаммов инбредных и беспородных мышей (Araujo и др, 1976;. Williams и др, 1978;.. Маклеод и др 1984, 1989,. Suzuki и др, 1991, 1994;. Браун и др, 1995). Сегодня мы знаем, что, по крайней мере частично, такое животное напряжения в зависимости от различия в восприимчивости
может быть отнесены к определенным регионам хромосомных и даже при наличии определенных отдельных генов, которые могут влиять на паразит нагрузку резко (Brown и Маклеод, 1990; Deckert-Шлютер и др, 1994;. Brown и соавт., 1995; Johnson и соавт. , 2002). Тем не менее, многие вопросы в этом отношении все еще остаются нерешенными, которые могут быть иллюстративно подчеркнуто интригующим выводом о том, что контроль хозяина генетической устойчивости к самой острой инфекции различается в зависимости от вирулентности и гено-типа штамма Т. гондия используемого ( Сузуки и др., 1995).
Ситуация становится еще более сложным, потому что эти различия не являются одинаковыми по отношению к штаммам, но также зависит от способа заражения. Это означает, что, например, штамм мыши, который очень чувствителен к внутрибрюшинной (IP) по сравнению с инфекцией другого штамма мышь не обязательно может быть очень восприимчив к инфекции полости рта, и наоборот. Действительно, почти зеркальная восприимчивость между устным и внутрибрюшинно вызов была найдена с инбредной мыши
Токсоплазма. Модельные Apicomplexan-перспективы и методы, под редакцией Weiss & Kim
ISBN-13: 978-0-12-369542-0
ISBN-10: 0-12-369542-2
Copyright © 2007 Elsevier Ltd.
Все права воспроизведения в любой форме зарезервированы.
154 Toxoplasma ЖИВОТНЫЕ МОДЕЛИ И ТЕРАПИЯ
штаммы (Johnson, 1984), предполагая, по крайней мере, частично независимых режимов защиты, участвующих в каждом маршруте инфекции. В этом контексте очень важно, чтобы быть в курсе, что, в общем, используют два режима инфекции: (1) инъекцию тахизоитов выращивают в культуре или в мышей внутрибрюшинно, подкожно или внутривенно, и (2) Пероральное введение тканевых цист Т . гондий получены в основном из мозга, хронически инфицированных мышей (Маклеода и др., 1984) (ооцисты редко используются для инфекции). В то время как последняя модель является по своей природе менее воспроизводимым из-за переменного размера и содержания кист, он имеет то преимущество, что она вытекает естественный путь Infec Тион. Как тахизоиты не устойчивы к рНу кислоты в желудке, они только плохо инфекционные при пероральном введении (Dubey, 1998).
Кроме того, чтобы провести факторы, исход вызова с токсоплазмами в значительной степени зависят от природы самого инфекционного агента, и одна из наиболее распространенных характеристик многих штаммов Toxoplasma является изменением в вирулентности. В зависимости от времени, прежде чем животные поддаваться инфекции или процент животных, которые поддадутся, высокой вирулентностью, умеренно вирулентными, и менее вирулентные штаммы были охарактеризованы (Кауфман и др., 1958). Однако, штамм-зависимая вирулентность не появляется в качестве статического элемента, как это
может быть повышена за счет непрерывного прохождения паразита у лабораторных животных. Например, когда штамм RH первоначально был изолирован, мышей поддался инфекции 17-21 дней в первом проходе, 7-8 дней во второй, и 3-5 дней в третьем, и после того, как-(Sabin, 1941) , В любом случае, вирулентность штаммов T.gondii, обычно оцениваются в соответствии с результатом системной внутрибрюшинна инфекцией у мышей, а также исследование генетической структуры популяции показала, что большинство штаммов Т. гондия принадлежат трем клональным линиям, какой типа Я включает в себя мышь-вирулентных штаммов, а также типы и II, III, включают в себя штаммы мыши авирулентные (Сибли и Бутройда, 1992; Howe и Сибли, 1995). В самом деле, штаммы типа I может привести к летальному исходу у мышей, когда один инфекционное организм вводят (Хау и др., 1996).
Рисунок 7.1 суммирует факторы, влияющие на исход Toxoplasma у животных.
Врожденные
ТОКСОПЛАЗМОЗ
Идеальная модель для животных врожденного токсоплазмоза, полезная для исследований лекарственных средств, а также для иммунологических исследований и дизайна вакцин, будет тот, который подражает
Доза посевного
Toxoplasma этап используется: Toxoplasma используемый штамм:
тахизоиты, кисты, тип I, тип II, тип III,
ооцисты генетически измененные штаммы
Способ заражения:
ф; IV; локализованы; и т.п.
Рисунок 7.1 Факторы, влияющие на исход инфекции Toxoplasma у животных.
Лаборатория животные: вид; генетический фон из
деформации (инбредные, беспородные, генетически измененные штаммы и т.д.)
| врожденный токсоплазмоз | 155 |
условия инфекции в организме человека. Кроме того, исход инфекции должен быть четко обложением. На практике выполнение этих требований, как представляется, зависит от нескольких условий:
● природа животного плаценты, как орган, в котором происходит передача
● продолжительность беременности
● продолжительность паразитемия
● размер животного (для обзора см Derouin и др., 1995).
Однако последняя точка не так важна, как раньше, так как технические разработки в течение последних нескольких десятилетий (такие как, например, количественный ПЦР в реальное время) значительно повысило оценку инфекции у мелких животных (примеры см Флори и др., 2002, 2003).
В отличие от большинства других органов, плацента показывает широкий разброс в структуре среди различных видов млекопитающих, и могут быть классифицированы согласие-ки с числом слоев матери и плода клеток (Лок, 1982). В то время как плаценты хищников и жвачные животных в целом показывает, от четырех до шести слоев, плацента человека состоит всего из трех - плод трофобласт, мезенхимные, и слой эндотелиальных клеток. Такой относительно тонкий интерфейс, предполагая значимость для передачи паразита называется hemochorial типа плацента, и этот тип также присутствует у приматов и грызунов (Лок, 1982; Дарси и Zenner, 1993). Действительно, большинство исследований по врожденному токсоплазмозу были проведены с использованием грызунов - хотя, конечно, Эти животные, как правило, не в первую очередь выбирают из-за характера их плаценте, а по практическим причинам, связанным с более легкого хранения и обработки мелких лабораторных животных. Тем не менее, основные ограничения при работе с небольшими животными лежат в оценке самой инфекции плода, и в большинстве случаев оценка сводится к оценке скорости передачи плода путем прямым наблюдением или мыши subinoculation. для простых моделей врожденных choriore-tinitis Кроме этого, исследование с анатомической оценкой инфекции плода требует больших животных, таких как свиньи, овцы, или даже приматы. В следующих и в большинстве случаев оценка сводится к оценке скорости передачи плода путем прямого наблюдения или мыши subinoculation. для простых моделей врожденных choriore-tinitis Кроме этого, исследование с анатомической оценкой инфекции плода требует больших животных, таких как свиньи, овцы, или даже приматы. В следующих и в большинстве случаев оценка сводится к оценке скорости передачи плода путем прямого наблюдения или мыши subinoculation. для простых моделей врожденных choriore-tinitis Кроме этого, исследование с анатомической оценкой инфекции плода требует больших животных, таких как свиньи, овцы, или даже приматы. В следующих
секций, различные виды животных и их использование в моделях врожденного токсоплазмоза обсуждаются. Сводные данные представлены в таблицах 7.1 и 7.2.
Mouse
Как свидетельствуют многочисленные статьи, которые появились в течение последних десятилетий, мыши хорошо изученные животные врожденного токсоплазмоза (см Beverley, 1959, Remington и др, 1961;. Beverley и Генри, 1970; Хей и др, 1981, 1984.; Робертс и Александр, 1992;. Робертс и др 1994). Это может быть несколько удивительно, так как, в общем, в естественных условиях, вертикальная передача, кажется, происходит при хронической инфекции и через последующих поколений мышей (Беверли, 1959; Ремингтон и др., 1961). Таким образом, на первый взгляд модель мыши не может быть лучше всего подходит для имитации ситуации в организме человека. Тем не менее, другие выводы доказывают, что ли передача плоду во время хронической инфекции происходит матери во многом зависит от штамма паразита, а также от штамма мыши используется - например, у мышей, которые были латентно инфицированных 11 различных штаммов Toxoplasma, плацентарный передачи удалось только 6 штаммов (Werner и др., 1977), и, действительно, хронически инфицированных BALB / с мышей, не позволяют вертикальной передачи заболевания у всех (Roberts и Александра , 1992). Кроме того, не врожденная передача не была обнаружена в пометах хронически инфицированных мышей линии BALB / K, хотя были найдены сами матери, чтобы иметь чрезвычайно высокие отсчеты киста (Roberts и Александр, 1992). Объяснение этого противоречивого исход вертикальной передачи хронически инфицированный мышей, скорее всего, лежит в их генетическом фоне (как известно, за низкую восприимчивость мышого BALB в целом), и эта точка зрения может быть подтверждаются тем фактом, что, в отличии от инбредного мышей BALB, большинство ранних исследований использовали беспородных животных или мышей NMRI. Как следствие, более поздние inves-его исследования по врожденного токсоплазмоза, как правило, используют модель BALB мыши, а не моделей с использованием других инбредных или беспородных линий мышей (Тувенен и соавт, 1997;.. Фукс и др, 2000; Elsaid и др., 2001; Abou-Bacar и др, 2004а, 2004b;.. Beghetto и др, 2005). С другой стороны, в качестве модели для оценки
156 Toxoplasma ЖИВОТНЫЕ МОДЕЛИ И ТЕРАПИЯ
Therapeutics модель мыши была редко используется (Nguyen и Stadtsbaeder, 1985;. Фукс и др, 2000); он использовался скорее как модель для исследования-ки патогенетических механизмов и, в последнее время, для оценки подходов вакцин (Маклеод и др, 1988;. Робертс и др 1994;. Elsaid и др., 2001; Ali и др. , 2003; Купер и др, 2003;.. Letscher-Брю и др, 2003;. Mevelec и др, 2005). Тем не менее, Фукс и др. смогли показать положительный эффект от лечения minoxycy-Клайн на врожденного токсоплазмоза транс-миссии (Фукс и др., 2000). Учитывая преимущества мышей как лабораторных животных, с их легкой обработки, а также наличие новых, чувствительных методов обнаружения на основе ПЦР, которые позволяют лучшую диагностику в маленьких животных, BALB / с мышиной модели, если дальнейшее развитие,
Rat
Как человек и приматы, крысы относительно устойчивы к Т. гондий относительно клинических проявлений инфекции. В то время как передача во время острой инфекции материнских крыс, индуцированных внутримозгового или внутривенной инфекции было впервые сообщено в течение начала 1950-х годов (Schultz и Bauer, 1952; Hellbrügge и Dahme, 1953;. Hellbrügge и др, 1953, 1955), было показано недавно что пероральный прием внутрь ооцист или цист тканей также приводит к эмбриональной transmis-сионной (Dubey и Shen, 1991;. Зеннер и др, 1993;. Фрейр и др, 2001a, 2003a). В целом, уровень transmis-Sion кажутся высокими, и, как сообщалось, в основном, лежат в пределах от 30 до 90 процентов. Тем не менее, было большое изменение, которое было приписано штаммами Toxoplasma и штаммы крысы, используемых (Фрейр и др., 2003a). В самом деле, наблюдалась широкая вариабельность в формировании Toxoplasma кист у крыс одного и того же штамма и беспородных возраста, засевают с тем же штаммом, стадии и дозы Toxoplasma, используя тот же самый маршрут, (Фрейре и др., 2001а). Такое индивидуальное сопротивление крыс, принадлежащих к одной и той же беспородной деформации может быть отнесено к индивидуальному генетическому фону крысы (Фрейр и др., 2001о). В экспериментальном исследовании конструкции, например, для эффективности лекарственного средства тестирование, такого недостатка
отдельные воспроизводимости могут быть преодолены либо сравнительно большое число животных в каждой группе, или путем использования инбредных животных.
За исключением редких случаев, когда неестественно высокие дозы нескольких миллионов организмов были использованы для инфекции (Hellbrügge, 1955), Т. гондий был или не передается вообще, либо была передана только крайне редко из хронически инфицированных крыс к плоду, независимо от маршрута прививка, стадия, штамм или размер инокулята (Ремингтон и соавт, 1958, 1961;. Дубей и Шен, 1991; Зеннер и др, 1993;. Дубей и др., 1997). В отличие от ситуа-ции у мышей, в которых организм передается повторно во время хронической инфекции, так как в организме человека, вертикальная передача у крыс практически не происходит. Таким образом, в отношении клинического течение и в внутриутробной передаче, токсоплазмоз у крыс и человека похож, и инфекция у крыс может служить правильной моделью - особенно для врожденного токсоплазмоза человека (для обзора,
Несмотря на очевидные аналогии, касающиеся передачи, скорость передачи данных, а также показатели клинического проявления, модели крыс - с редкими исключениями (Усманова, 1965) - до сих пор не были использованы для тестирования на наркотики в врожденного токсоплазмоза. Это может быть связано с тем, что инфицированные пометов обычно выглядят здоровыми. Тем не менее, в отношении штаммов Т. гондий, стадии, и путей инокуляции, и PROB-квалифицированно также штаммов крыс, крысы, могут служить в качестве превосходных моделей - особенно, когда акцент делается на placen-тал передаче. В любом случае, как полная защита от врожденного токсоплазмоза может быть достигнуто независимо от штамма Toxoplasma, крысы могут быть привлекательными моделями для будущих кандидатов в вакцины против болезни (ZENNER и др., 1993, 1999а).
Свинки
Модель свиньи подопытным врожденного токсоплазмоза была описана в различных исследованиях (Адамс и др, 1949;. Huldt, 1960;. Берар-Badier и др, 1968; Wright, 1972; Haumont и др., 2000;. Флори и др 2002, 2003). Как у человека, морская свинка плацента имеет hemomonochorial типа (Дарсите и Zenner, 1993), предполагающего аналогичные способами передачи. Тем не менее, скорость передачи данных и чувствительность
| врожденный токсоплазмоз | 157 |
морские свинки к T.gondii, после пероральной или IP-инфекции гораздо выше, будучи примерно на полпути между теми, крысами и мышей. Кроме того, врожденная передачи при хронической материнской беременности наблюдалось (Wright, 1972; Флори и др., 2002). В качестве возможного преимущества в сравнении с мышей и крыс, морских свинок имеют приблизительно в три раза большую продолжительность беременности 65 дней в общей сложности - достаточно долго, чтобы дать сравнительные исследования с различаются-Ent времени инокуляции и сравнительных исследований Chemother-APY (Флори и др ., 2002). Для этого приложения, модель морских свинок может быть лучше всего подходит. Тем не менее, за исключением редких случаев, за исключением (Юсеф и др., 1985), несмотря на потенциальные преимущества, модель морских свинок врожденного токсоплазмоза до сих пор не используется для тестирования на наркотики.
Предстоятель
Что касается hemochorial плацентации (Ramsey и Harris, 1966; Дарси и ZENNER, 1993), забор крови плода и оценками внутриутробной инфекции, в общем примате модели фактически должна наилучшим образом соответствовать требованиям, предъявляемым к изучению влияния препарата в инфицированный плод. Таким образом, первое исследование было проведено с Macaca arctoides в качестве модели для приматов (Вонг
и другие., 1979). Данные, полученные с помощью этой модели предположил, что хотя определенные стадии развития организма Toxoplasma и плода может способствовать возникновению врожденной инфекции, скорость передачи данных в целом, как представляется, с низким и очень мало результатов неонатальных заболеваний (Wong и др., 1979) , В противоположность этому, более применима модель была создана Schoondermark-ван де Вен и др. с макак-резусов (Macaca мулаток) (Schoondermark-ван де Вен и др., 1993). При этом, частоты передачи, которые были найдены в макаки-резуса после материнской инфекции во втором и третьем триместрах беременности, равных тем, которые наблюдаются у людей (Schoondermark-ван де Вен и др., 1993). Резуса модель была затем использована для доказательства эффективности спирамицина или сочетания пириметамина и сульфадиазина для лечения врожденных T. гондий инфекция (Schoondermark-ван де Вен и др 1994а;.. Schoondermark-ван де Вен и др, 1995). Результаты показали, что оба схемы были явно эффективными в снижении количества паразитов в инфицированном плоде, проверенном с помощью ПЦРА и мыши инокуляции с амниотической жидкостью. Тем не менее, спирамицин был менее активным (Schoondermark-ван де Вен и др., 1994а) и не был найден в любом месте в головном мозге плода (Schoondermark-ван де Вен и др., 1994b).
Текст продолжение на стр 162
ТАБЛИЦА 7.1 Фармакологические исследования врожденного токсоплазмоза
| виды животных | Конкретные замечания | Фармакологические исследования (примеры литературы) |
| мышь | Hemotrichorial плацента; вертикальный | Нгуен и Stadtsbaeder, 1985; Фукс и др., |
| передачи во время хронической инфекции | 2000 | |
| возможный; редкая вертикальная передача | ||
| в инбредных мышей BALB | ||
| крысиный | Hemotrichorial плацента; редкий вертикальный | Усманова, 1965 |
| передачи при хронической | ||
| инфекционное заболевание; Штамм-зависимые изменения | ||
| в скорости передачи | ||
| морская свинка | Hemomonochorial плацента; | Юсеф и др., 1985 |
| вертикальная передача при хроническом | ||
| инфекции наблюдается; В 3 раза больше | ||
| время беременности, чем у мышей и крыс | ||
| примат | Hemomonochorial плацента; | Schoondermark-ван де Вен и др., 1994а, |
| Скорости передачи напоминают | 1994b, 1995 | |
| те, у людей | ||
Таблица 7.2 Врожденные модели токсоплазмоза
| Результат животного | Результат животного | |||||
| инфекции I (с | инфекция II | |||||
| вид | Toxoplasma | время введения | что касается плода | (в отношении к | ||
| и напряжение | Toxoplasma | стадии и | Точка и Toxoplasma | передача в | коробка передач | |
| животных | штамм | маршрут | дозы по отношению к | с острой инфекцией | хронически | |
| используемый* | вводить * | инфекционное заболевание | беременность | животные) | инфицированные животные) | Публикация ** |
| Мышь: | RH, 113-CE, | Тахизоиты (RH) | Неопределенные номера | RH: нет инфекции | Передача | Remington |
| NIH | Beverley, | и кист | при острых и хронических | молодой, если доставка | хронически | и другие., 1961 |
| деформации | M7727 | (113-CE, | инфекции: острый (RH) | до 5-го дня | инфицированный мышей | |
| Beverley, | на 16-й день беременности; | после заражения; | произошло, большинство | |||
| M7727) | хронический (113-CE, | 56% инфекция | часто с | |||
| внутрибрюшинно или подкожно | Beverley, M7727) | на 7-й день после того, как | штамм Beverley | |||
| 2-15 месяцев до | ф прививка | |||||
| Доставка | ||||||
| Мышь: | S93, K8, 558/72, | Кисты внутрибрюшинно перед | 20 цист 4-8 недель | Первичная инфекция | Заражение до | Вернер и др., |
| ЯМРТ | Виттинг, Gail, | до беременности; | до спаривания; 20 | во время беременности | беременность: S93, | 1977 |
| КГУ, 1070, | кисты устно | Кисты на 10-й день | (ALT-деформированное только): | K8, 558/72, | ||
| 162/74, 248/70, | во время preg- | беременность | коробка передач | Виттинг, Gail: нет | ||
| MO, ALT | только гомосексуалист | Скорость 28% | коробка передач; КГУ, | |||
| в первичной | 1070, 162/74, | |||||
| инфекционное заболевание | 248/70, MO, ALT: | |||||
| испытание | коробка передач | |||||
| Toxoplasma | Скорость 1-3% | |||||
| ALT-деформированное | ||||||
| Мышь: | Beverley | киста СБН | Неопределенное количество | 75% потомства с | Котримоксазол | Нгуен и |
| ЯМРТ | кист 5-8 дней после | положительная серология; | лечение во время | Stadtsbaeder, | ||
| спаривание | выживание потомства | беременность почти | 1985 | |||
| 40%; число | нормированный | |||||
| потомства | отпрыск | |||||
| примерно на 20% | номер и | |||||
| по сравнению с не- | выживание | |||||
| инфицированный контроль; | ||||||
| 30% смертность | ||||||
| инфицированные матери | ||||||
| во время беременности | ||||||
| Мышь: | Beverley | Кисты устно | 8 недель до случки | Скорость передачи | Врожденная инфекция | Робертс и |
| BALB / с, | 5 цисты; день 12 | примерно на 50% | произошло только тогда, | Александр, | ||
| BALB / к | беременность 20 цист | (кисты на первый раз | мать была | 1992 | ||
| (Инбредный) | во время беременности только) | инфицированный для | ||||
| первый раз во время | ||||||
| беременность |
| 158 |
| Toxoplasma ЖИВОТНЫЕ МОДЕЛИ И ТЕРАПИЯ |
| Мышь: | п | Кисты устно | 2 цисты между | фетальный передачи | Миноциклин обработанными | Фукс и др., 2000 |
| BALB / с | дни 6 и 15 | Скорость 50-60% | мышах показали | |||
| (Инбредный) | беременности | коробка передач | ||||
| только 3,6% | ||||||
| Рац: | RH | тахизоиты ф | 1 × 107 и 2 × 107 | Практически нет плода | Remington | |
| Sprague- | тахизоиты 6-8 недель | коробка передач | и другие., 1958 | |||
| Dawley | до спаривания | (3 потомство от | ||||
| 140 в общей сложности - все | ||||||
| в одном помете) | ||||||
| Рац: | RH, S-6, | тахизоиты | 1 × 104 1 × 107 | Нет плода | Remington | |
| Sprague- | Beverley | (RH, S-6) и | тахизоиты и | коробка передач | и другие., 1961 | |
| Dawley, | кисты (Беверли) | не определено число | от хронически | |||
| Osborne- | IP | кист 2-8 месяцев | инфицированные крысы с | |||
| Мендель, | до беременности | RH или S-6; | ||||
| Черная крыса, | Beverley: 5% | |||||
| Гольцман | коробка передач | |||||
| крыса | ||||||
| Рац: | CT-1 | ооцисты устно | 1 × 104 ооцисты в | Скорость передачи | Нет передачи | Дубей и |
| Sprague- | или подкожно; | 7-15 дней беременности; | 82,1% (ооцисты | хронически | Shen, 1991 | |
| Dawley | bradyzoites СБН | 1 × 104 bradyzoites в | перорально), 90,9% | инфицированные крысы | ||
| 10-14 дней беременности | (Ооцисты подкожно), 43,8% | |||||
| (Bradyzoites подкожно) | ||||||
| Рац: | RH, 76K, | RH: тахизоиты | Между 8 и | Скорость передачи | Нет передачи | Зеннер и др., |
| Фишер | Prugniaud | ф; Prugniaud | 12-й дни беременности: | 58% (RH), 63% | для плодов | 1993, 1999а |
| и 76K: | 8 × 106 тахизоиты RH; | (Prugniaud), | хронически | |||
| кисты устно | 1200 Prugniaud или | 35% (76K) | инфицированные крысы, | |||
| 76K кист | даже если крыса | |||||
| повторное заражение во время | ||||||
| беременность | ||||||
| Рац: | VEG | ооцисты устно | 1 × 104 ооцист на | Скорость передачи данных: | Практически нет | Дубей и др., |
| Sprague- | День 6, 9, 12 или 15 | 33% (день 6), | коробка передач | 1997 | ||
| Dawley | беременности | 55% (9-й день), | к следующему | |||
| 83% (12-й день) | поколение | |||||
| и 57% (15-й день) | ||||||
| продолжение |
| врожденный токсоплазмоз |
| 159 |
Таблица 7.2 Врожденные модели токсоплазмоза-прод
| Результат животного | Результат животного | |||||
| инфекции I (с | инфекция II | |||||
| вид | Toxoplasma | время введения | что касается плода | (в отношении к | ||
| и напряжение | Toxoplasma | стадии и | Точка и Toxoplasma | передача в | коробка передач | |
| животных | штамм | маршрут | дозы по отношению к | с острой инфекцией | хронически | |
| используемый* | вводить * | инфекционное заболевание | беременность | животные) | инфицированные животные) | Публикация ** |
| Рац: Wistar | 12 разные | Кисты устно | 2 × 102 3.4 × 103 кисты | В целом передача | коробка передач | Фрейре и др., |
| а также | штаммы низкого | в 6-8 и 15 дней | 44% с | более частый | 2001a | |
| Долго | до высокого | беременность | Диапазон 0-90% | в Лонг-Эванс | ||
| Эванс | патогенность | приписаны | чем в Wistar | |||
| для мышей | генетически обусловленный | крысы | ||||
| (Например, M7741, | восприимчивость | |||||
| Beverley, M49) | беспородные крысы Вистар; | |||||
| передача не | ||||||
| Пострадавшие от | ||||||
| штамм или доза | ||||||
| Toxoplasma ни | ||||||
| время точка | ||||||
| инфекционное заболевание | ||||||
| Рац: Wistar | 6 различных | ооцисты устно | 1 × 104 ооцисты в | Скорость передачи | Нет статистически | Фрейре и др., |
| штаммы | 15 дней беременности | на 10-80%; выше | значительное | 2003a | ||
| снизу вверх | коробка передач | различия в скорости | ||||
| патогенность | штаммами больше | передачи | ||||
| для мышей | патогенный для | у крыс, которых кормили | ||||
| мышь | Кисты (предыдущие | |||||
| Работа) | ||||||
| Гвинея | Beverley | Кисты внутрибрюшинно | 60 или 100 цист на | Скорость передачи | коробка передач | Райт, 1972 |
| свинья: не | 4-54 дней | 100%, если инфекция | ставка 30%, если | |||
| указанный | беременность; 100-200 | во время беременности | инфекции, прежде чем | |||
| кист 2-6 месяцев | беременность; в общем и целом | |||||
| до спаривания | большое количество | |||||
| мертворожденным или строго | ||||||
| больные щенки |
| 160 |
| Toxoplasma ЖИВОТНЫЕ МОДЕЛИ И ТЕРАПИЯ |
| Гвинея | C56 | тахизоиты | 5 × 105 тахизоиты после | Передача в | SAG1 иммунизированных | Haumont и др., |
| свинья: | внутрикожно | 7 недель беременности | более чем на 80% | животные с более низким | 2000 | |
| Dunkin- | коробка передач | |||||
| хартли | ставки | |||||
| Гвинея | RH, 76K, | Тахизоиты (RH) | Различные временные точки | Скорость передачи | коробка передач | Флори и др., |
| свинья: | Prugniaud | ф; Кисты (76K, | от 90 дней до | если инфекция во время | Скорость, если 17% | 2002 |
| Dunkin- | Prugniaud) | беременность 40-й день | беременность: | инфекционное заболевание | ||
| хартли | IP или устно | беременности: | 54% (RH); 84% | 30-90 дней | ||
| 100 тахизоиты | (Prugniaud); | до спаривания; | ||||
| (Ф); 100 цисты | 86% (76K) | общий высокий | ||||
| (IP или перорально) | количество | |||||
| мертворожденным и | ||||||
| нежизнеспособные эмбрионы | ||||||
| Гвинея | 76K | Кисты устно | 100 цист на 20-й день или | Скорость передачи | Инфекция оценена | Флори и др., |
| свинья: | 40 беременности | на 84,6% и 100% | с помощью ПЦР в реальном времени | 2003 | ||
| Dunkin- | после прививки | |||||
| хартли | в дни 20 и 40, | |||||
| соответственно | ||||||
| Кролик: не | Виттинг / | Кисты внутрибрюшинны до | 200 цисты -19 дней | фетальный передачи | Нет врожденных | Вернер и др., |
| указанный | ALT- | беременность; | до спаривания; | оценить до 79% | коробка передач | 1977 |
| кисты устно | 200 кист во время | когда первый | ||||
| в течение | первый или второй | инфекция | ||||
| беременность | триместры в пре- | размещены по меньшей мере, | ||||
| инфицированный или не- | 35 дней до | |||||
| предварительно зараженные животные | к спариванию | |||||
| Предстоятель: | RH | тахизоиты IV | 5 × 106 тахизоиты на | В целом передача | Schoondermark- | |
| Макака | день 90 или 130 | скорость 61%, что | ван де Вен и др | |||
| мулатка | беременность | сравнима с | аль., 1993 | |||
| (резус) | что находится в | |||||
| люди | ||||||
* Для определения штаммов животных или токсоплазмы, смотрите соответствующие статьи.
** Из-за многочисленные публикации на эту тему, только немногое из них иллюстративно выбрал для этой таблицы.
| врожденный токсоплазмоз |
| 161 |
162 Toxoplasma ЖИВОТНЫЕ МОДЕЛИ И ТЕРАПИЯ
Резус модель обезьяна теоретически возможно лучшая модель животного, чтобы доказать эффективность препарата против врожденного токсоплазмоза человека, особенно в связи с плацентарной передачей. Тем не менее, корпус и обработка обезьян требуют специального оборудования и подготовленных сотрудников. Это также отнимает много времени и дорого, что может ограничить число животных, используемых для исследований. не принимая во внимание этот факт, и принимая во внимание, что исход врожденной инфекции (как у людей), часто, как представляется, субклинический или, по крайней мере, показывает высокую степень изменчивости (Schoondermark-ван де Вен и др., 1993), никакой прямой препарат оценка касается его влияния на клиническое течение врожденного токсоплазмоза кажется практичным до сих пор. Таким образом, Эффективность лекарственного средства должна быть косвенно extrapo-ведена от демонстрации паразита или его ДНК в амниотической жидкости или ткани плода, а также фармакокинетических данные лекарственного средства, которые также могут быть получены из обезьяны плода. Таким образом, резус модель обезьяны может иметь свое место в качестве последнего этапа оценки для нового препарата, прежде чем он допущен к клиническим испытаниям.
Кролик
Удивительно, кролик врожденный токсоплазмоз не был хорошо изучен, хотя кроликов широко используются лабораторные животные и передачи от матери к плоду было продемонстрировано (Uhlikova и HÜBNER, 1973). Кроме того, эмбрионы от хронически инфицированных матерей, были защищены, таким образом, модель кролика разделят общие черты с инфекцией у человека (Werner и др., 1977). Модель кролика может представлять особый интерес, когда небольшой размер других общих Labo-ratory животных (таких как мыши и крысы) затрудняет эксперименты - например, когда большие объемы или последующие образцы крови необходимы для exami-нации в ответ антител ( Araujo и Remington, 1975). Насколько нам известно, не фарм-ceutical исследования врожденного токсоплазмоза было проведено с использованием модели кролика.
Другие животные
Различные другие животные были предложены в качестве моделей для врожденного токсоплазмоза, но есть
никогда не был широко использован. В качестве примера, хотя свиньи хорошо известны приобрести токсоплазмоз и играть решающую роль в распространении болезни к людям через их мясо (для обзора см рама для натягивания и др., 2000 и Монтойя и др., 2004), их использование в качестве модели животных никогда не были тщательно investi ворот. Тем не менее, при заражении беременных минисвинеев с штаммами различной вирулентности, даже штамм, который был рассмотрен апатогенным к обеим свинкам и мышею привел к значительному количеству congeni-индикаторных инфицированным поросят (Jungersen и др., 2001). Поэтому такая модель свинья врожденного токсоплазмоза может иметь значение для ситуаций, где необходимы большие животные, и они могут быть соответствующие модели животных для некоторых Toxoplasma напрягает, что, несмотря на низкую вирулентность, очевидно, передаются плоду (Jungersen и др., 2001).
Врожденное заболевание связано с T.gondii, является одной из основных причин абортов и смертности новорожденных у овец. Кроме того, недоваренные мясо от зараженных овец является важным источником инфекции для человека. Несмотря на то, врожденные передачи хорошо описана и в самом деле, как известны, как одной из основных причин абортов у этого вида (Dubey и Роммеля, 1992;. Андерсон и др, 1994), модель животного имитируя врожденную инфекцию у людей есть, насколько нам известно, не было установлено. Последние шпилька-х годов с овцами показывают, что реактивация хронической инфекции во время беременности может быть главной причиной врожденной инфекции (Duncanson и др., 2001;. Williams и др, 2005). В связи с этим, врожденный токсоплазмоз у овец кажется больше resem-BLE обычный режим передачи врожденной у мышей, чем у человека.
Совсем недавно, Que и др. сообщил новая модель куриного эмбриона, который был принят от модели цыпленка, которые были разработаны для изучения метастатических заболеваний (Que и др., 2004). В основном, тахизоиты вводили непосредственно в хорионаллантоисную вены 12-дневных птенцов, и после инкубационного периода от 3 до 6 дней степень инфекции оценивали путем гистопатологического исследования и количественной ПЦР в реальном времени на ДНК Toxoplasma. Поскольку эта модель также обеспечивает возможность инъекции наркотиков через chorioal-loantioic вены, это может оказаться полезным для первоначального скрининга лекарственных препаратов настройки с курсом инфекции, который короче, чем у мышея (Que и др., 2004).
| ГЛАЗ ТОКСОПЛАЗМОЗ | 163 |
ГЛАЗ ТОКСОПЛАЗМОЗ
Глазной токсоплазмоз может быть приобретен в результате инфицирования после родов, но в значительном проценте случаев этиология глазного токсоплазмоза человека, как представляется, связана с внутриутробным инфицированием плода с помощью матери, чья первичной инфекция была приобретена во время беременности (для обзора, см Голландия, 2003). Следовательно, глазное токсоплазмоз может считаться с одной стороны, послеродовом приобрела болезнь, а с другой поздним проявлением врожденного токсоплазмоза. Тем не менее, это, кажется практичной для описания моделей животных для производства глазного заболевания в основном первичной инфекцией у взрослых, хотя были усилия, которые успешно создали глазную болезнь, как следствие трансплацентарной Toxoplasma передачи (Hutchison и др ., 1982; Lee и др, 1983;.. Сено и др, 1984;. Даттон и др, 1986).
У пациентов с сопутствующим immunosuppres-SION или иммунными дефектами, такими как с трансплантацией костного мозга или ВИЧ, токсоплазматического хориоретинит часто связанно с одновременным токсоплазматическим энцефалитом (TE) или диссеминированный инфекцией (для обзора см Монтойи и др., 2004). Тем не менее, даже у больных СПИДом токсоплазматического Chori-oretinitis встречается относительно редко (Holland и др., 1988а), так что большинство случаев заболевания человека глазного токсоплазмоза находятся в иммунокомпетентных пациентов. Действительно, Т. гондий является одним из наиболее часто определены причин увеита и наиболее часто identitified возбудителя инфицирует ингу сетчатки иначе иммунокомпетентных лиц (Holland, 1999) и, независимо от того, глазного токсоплазмоза обусловлен реакционным vated врожденного инфекции или инфекции, которая приобретается после рождения, она обычно представляет в иммунокомпетентных хозяина, как более или менее локальной-роскопию болезни глаз (Монтойя и др., 2004). Таким образом, модель животного, особенно тот, который может быть подходит для оценки эффективности данного лекарственного средства, в идеале должны быть охарактеризованы локализованной инфекции глаза (или, по крайней мере, преимущественно локализованной инфекции глаз), а не обобщенный или инфекции ЦНС, где глаз только одно место заболевание среди других - экспериментальная задача, которую не легко выполнить. Однако в настоящее время в идеале должны быть охарактеризованы локализованной инфекции глаза (или, по крайней мере, преимущественно локализованной инфекции глаз), а не с помощью обобщенной или ЦНС инфекции, где глаз является только одно местоположение заболеванием среди других - экспериментальный вызов, что это не так легко выполнить. Однако в настоящее время в идеале должны быть охарактеризованы локализованной инфекции глаза (или, по крайней мере, преимущественно локализованной инфекции глаз), а не с помощью обобщенной или ЦНС инфекции, где глаз является только одно местоположение заболеванием среди других - экспериментальный вызов, что это не так легко выполнить. Однако в настоящее время
Модели основаны либо на первичном локальный инокуляты Тион Т. гондия в глаза животного, на semilo-ческе инфекции через сонную артерию, или на первичную системную инфекции, которая затем влияет на глаза, как преобладающий орган проявления (таблицы 7.3 и 7.4).
Модели, основанные на местной глазной инфекции
Для выполнения вышеуказанной требуют-ки, локализованная инфекция глаз животного была первым выбором - который, по техническим причинам, требуется использование более крупных животных. Таким образом, до 1982 года кролик служил в качестве наиболее важной существующей экспериментальной модели глазного токсоплазмоза, и морфологические поражения острого экспериментального Toxoplasma хориоретинит были получены путем инъекции паразитов стекловидное (Kaufman, 1960) в переднюю камеру (Беверли и др., 1954; Беверли, 1958, 1961; Jacobs и др, 1964) или путем транссклеральной инокуляции в супрахориоидальное пространство (Нозик и O'Connor, 1968;. Tabbara и др, 1974;.. Роллинс и др, 1982). На самом деле, передняя модель камеры была использована, чтобы показать эффективность пириметамина и сульфадиазина (Jacobs и др., 1964),
В 1982 году была создана модель примата, которая надежно производится острый токсоплазматического chorioretini-ТИС путем инъекции жизнеспособных штамма RH Toxoplasma организмов (Калбертсон и др, 1982;. Ньюмана и др., 1982). В то время как в модели кролика инъекции были сделаны транс-sclerally в супрахориоидальное пространство на заднем полюсе, у обезьян не было возможности выставить заднюю часть склеры для прямого впрыска. Таким образом, ретинальные INJEC-ции были сделаны через Рагз ресничного через полость стекловидного тела, непосредственно в поверхностную часть сетчатки в заднем полюсе (Калбертсон и др., 1982). Номера человек приматы, а также кролики, инфицированные с transvitreal подходом были впоследствии использованы также и в других работах (Webb и др, 1984;.. Garweg и др, 1998; Holland и др 1988b.).
164 Toxoplasma ЖИВОТНЫЕ МОДЕЛИ И ТЕРАПИЯ
и они производят некоторое механическое повреждение сетчатки (Калбертсон и др., 1982); С другой стороны, кровь-ретиналь барьер может быть лучше, главное полученным экспериментальным, чем при использовании супрахориоидального подхода, по крайней мере, в течение начальной фазы инфекции (Garweg и др., 1998). Таким образом, профиль заболевания в супрахориоидальной модели включает в себя начальную локальную инфекцию с последующей очень ранним системными один, и как таковая ситуацией не является иммунологический сравнит с в организме человек проявляло (Фридрих и Мюллера, 1989). В любом случае, помимо более короткого времени конечно, transvitreal прививка примата модель, в частности, представляет клинические и гистопатологические условия, напоминающие естественного заболевания у человека (Калбертсон и др., 1982). Он также может обойти недостаток модели кролика, который является анатомическим несходством сетчатки по сравнению с людьми (O'Connor, 1984). Однако, насколько нам известно, эта модель еще не была использована для оценки лекарственных средств, а скорее eluci-дата патогенеза глазного токсоплазмоза.
В дополнение к местной глазной инфекции в более крупных животных, более поздняя модель использует B6, а также мышей MRL и инъекцию Т. гондий (PLK штамм, клон Me49) в камеру переднего отдела глаза (Ху и др., 1999а, 1999b). Патологические и гистопатологические особенности этой модели напоминают в части острого глазного токсоплазмоза у людей, particu-бенно когда мыши были загрунтованы (предварительно инфицированных за перорально) (Ху и др., 1999а). Поскольку местные модели инфекции с более крупными животными и особенно приматами очень трудно и дорого, эта мышиная модель может предложить рациональную альтернативу, по крайней мере, для более крупных масштабного контролируемых исследований с терапией, чтобы быть экранированы. Кроме того, недостаток небольшой площади инфекции, которая должна быть исследована частично может быть чрезмерно прийти с использованием современных высокочувствительных методов DETEC-ции, такие как ПЦР или количественный ПЦР в реальном времени. Другой недостаток потенциально обширного повреждение иглы, особенно когда мелкие животные, такие как мыши используют, возможно, может быть обойден, когда местная инстилляция паразита использует вместо внутриглазной инъекции. Очень недавнее исследование показало, что это, в принципе, приводит к инфекции сосудов сетчатки с глиальных реакций (Tedescos и др., 2005). Однако, к нашему знанию местных моделей инфекции глаз у мышей еще не были использованы
для фармакологического тестирования на наркотики, а для иммунологических и патогенетических исследований (Hu и др., 2001;. Lu и др, 2004, 2005).
Местная инфекция глаз морских свинок также RELI-умело достигнуто еще в 1956 году путем введения штамма RH в стекловидное тело (Hogan и др., 1956). Это животное было выбрано из-за его относительную устойчивость к токсоплазматическому инфекции, а также потому, что размер глаз не запрещает офтальмо-макроскопическую экспертизы. На самом деле, еще в 1964 году морская свинки с моделью заднекамерного инокулята-ции низкого вирулентного штамма Т. гондий вместе с моделью кролика упомянутой выше была успешно использована, чтобы показать терапевтический эффект сульфадиазина и пириметамина в лечении глазнога болезнь (Jacobs и др., 1964). Однако, по нашим данным, местные модели инфекции с использованием морских свинок не были использованы для фармакологических шпильки-х лет в течение последних нескольких десятилетий.
Дата: 2019-05-28, просмотров: 204.
