ГВЧ-6 и ГВЧ-7 относятся к роду Roseolovirus. Они являются лимфотропными вирусами, инфицируют Т-лимфоциты. ГВЧ-6 был выделен в 1986 г. группой Р. Галло из лимфоцитов крови больных лимфопролиферативными заболеваниями и СПИДом. Это распространенный лимфотропный вирус, как ВЭБ и ЦМВ. Предполагают, что ГВЧ-6 может постоянно инфицировать слюнные железы и выделяться из них. Очевидно, вирус становится латентным после первичного инфицирования и может реактивироваться после иммуносупрессии. Известны две разновидности: ГВЧ-6А и ГВЧ-6В.
ГВЧ-6 (Herpes lymphotropic virus) вызывает внезапную экзантему – exanthema subitum у младенцев (0,5-3 лет жизни) или roseola infantum с внезапным подъемом температуры (40 °С) и таким же спадом через 3 дня на фоне неяркой розовой папуломакулезной сыпи; синдром хронической усталости с субфебрильной температурой, потливостью, артралгией и слабостью. Возможны лимфаденопатия и неврологические нарушения.
ГВЧ-7 был выделен в 1990 г. Френкелем из Т-лимфоцитов здоровых людей, а затем его выделяли от больных СПИДом, синдромом хронической усталости.
ГВЧ-8 относится к роду Rhadinovirus. Он известен как герпесвирус, ассоциированный с саркомой Капоши. Обладает нейроинвазивными свойствами, определяясь в дорсальных спинальных ганглиях у больных саркомой Капоши и в цереброспинальной жидкости у ВИЧ-инфицированных.
Диагностика. ГВЧ-6 или ГВЧ-7 выделяют при кокультивировании лимфоцитов периферической крови с митогенактивированными лимфоцитами. В культуре образуются большие многоядерные клетки. Вирионы можно выделить из слюны.
В диагностике, в том числе ГВЧ-8, определяют маркерные гены возбудителя в ПЦР.
Лечение. Для лечения применяют аналоги нуклеозидов (ганцикловир, фоскарнет и др.), иммуномодуляторы (интерфероны).
Профилактика не разработана.
ГЛАВА 3. ГЕПАДНАВИРУСЫ (СЕМ. HEPADNAVIRIDAE )
Название семейства происходит от греч. hepar – печень и англ. DNA. Это семейство ДНК-содержащих оболочечных вирусов; представлено двумя родами: Orthohepadnavirus (от греч. orthos – правильный) и Avihepadnavirus (от лат. avis – птица).
Прототипным представителем семейства Hepadnaviridae и рода Orthohepadnavirus является вирус гепатита В (HBV), который инфицирует только человека и шимпанзе, поражая печень, в меньшей мере почки и поджелудочную железу. Впервые HBV был обнаружен под электронным микроскопом в 1970 г.Д. Дейном, получив название «частица Дейна».
 |
Структура. Вирус гепатита В – сложноорганизованный, ДНК-содержащий вирус сферической формы, диаметром 42-47 нм. Он состоит из сердцевины (core), построенной по кубическому типу симметрии, состоящей из 180 белковых частиц, составляющих сердцевинный НВс-антиген, диаметром 28 нм, и липидной оболочки, содержащей поверхностный HBs-антиген. Внутри сердцевины находятся ДНК-полимераза, обладающая ревертазной активностью, протеинкиназа и концевой белок НВе-антигена (рис. 29).
Рис. 29. Строение вируса гепатита В.
ДНК-полимераза является полифункциональным ферментом, она вовлекается во многие функции жизненного цикла вируса: способна синтезировать новые цепи ДНК, на матрице как ДНК, так и РНК, обладая как полимеразной, так и ревертазной активностью. Нуклеазная активность деградирует РНК-цепь в гибриде РНК-ДНК.
Геном представлен двухнитевой ДНК кольцевой формы, у которой плюс-цепь укорочена на 1/3 длины. Вирусный геном записан на минус-цепи и состоит из 4 открытых частично перекрывающихся рамок считывания: Р, С, S и X. Рамка считывания Р кодирует вирусную полимеразу и терминальный белок, найденный на минус-цепи ДНК. Рамка считывания С кодирует структурные белки нуклеокапсида и НВе-антиген. Рамка считывания S кодирует вирусные поверхностные гликопротеины. Продукт гена Х усиливает транскрипцию гомологичных и гетерологичных клеточных генов, участвуя в процессе развития гепатоцеллюлярной карциномы.
Полноценная минус-цепь ковалентно связана с ДНК-полимеразой, которая достраивает плюс-цепь до полноценной структуры.
Репродукция. Прикрепление HBV к гепатоцитам определяется HBs-антигеном, который связывается с полимеризованным человеческим сывороточным альбумином и другими сывороточными белками, что облегчает взаимодействие вируса и мишени в печени. После проникновения сердцевины вируса (рис. 30, 1) в гепатоцит неполная нить ДНК-генома достраивается; формируется полная двунитевая циркулярная ДНК (рис. 30, 2), созревший геном (рис. 30, 3) попадает в ядро клетки. Транскрипция генома контролируется клеточными элементами транскрипции, находящимися в гепатоцитах. При транскрипции генома образуются четыре иРНК, включая иРНК-прегеном (рис. 30, 4), больший (3500 нуклеотидов), чем геном (3200 нуклеотидов). Прегеном кодирует HBe- и HBc-антигены, полимеразу и белковый праймер для репликации ДНК, а также является матрицей для репликации генома вируса. Информационная РНК перемещаются из ядра клетки в цитоплазму и транслируются с образованием белков вируса. Белки сердцевины собираются вокруг прегенома. Нуклеокапсид сердцевины содержит РНК-зависимую ДНК-полимеразу, имеющую активность обратной транскриптазы и рибонуклеазы. В результате синтезируется минус-нить ДНК (рис. 30, 5), после чего РНК разрушается действием рибонуклеазы, поскольку далее синтезируется плюс-нить ДНК на матрице минус-нити ДНК (рис. 30, 6). Оболочка вириона образуется на HBs-содержащих мембранах эндоплазматической сети или аппарата Гольджи (рис. 30, 7). Сформировавшийся вирион выходит из клетки
 |
экзоцитозом.
Рис. 30. Репродукция вируса гепатита В.
Культивирование. Вирус гепатита В не культивируется на куриных эмбрионах, не обладает гемолитической и гемагглютинирующей активностью. Культивируется только в культуре клеток, полученной из ткани первичного рака печени в виде персистирующей инфекции, без оказания цитопатического и цитолитического действий и с малым накоплением вирионов. К вирусу чувствительны приматы: гориллы, шимпанзе, африканские зеленые мартышки.
Антигенная структура. В сердцевине вирионов находится ДНК-полимераза, НВе-антиген и НВс-антиген (антиген сердцевины). В свободном виде НВс-антиген не обнаруживается, он ассоциирован с частицей Дейна и выявляется в ядрах зараженных гепатоцитов. Напротив, НВе-антиген обнаруживается в свободном виде в крови обычно при наличии HBs-антигена.
Впервые HBs-антиген был обнаружен в 1963 г.и описан в 1965 г. Блюмбергом, в крови австралийских аборигенов, поэтому получил название австралийского антигена. HBs-антиген обнаруживается в крови не только в составе вириона, но и в виде самостоятельных фрагментов. Помимо полноценных вирионов, частиц Дейна, в крови обнаруживаются пустые неинфекционные частицы диаметром 22 нм, сферической или филаментозной формы, состоящие из HBs-антигена как результат его избыточной продукции. Сферические и филаментозные пустые частицы неинфекционны, но высокоиммуногенны и индуцируют анти-HBs-нейтрализующие антитела. Присутствие HBs-антигена в крови свидетельствует об инфицированности организма вирусом. HBs-антиген обладает гетерогенностью, подразделяясь на 4 антигенных подтипа, имея общую антигенную детерминанту, обозначаемую как а, и две пары взаимно исключающих детерминант: d и y, w и r, образующих 4 главных подтипа: adw, ayw, adr и ayr, которые распространены в различных географических зонах. Связи между клиническим течением и подтипом не наблюдается. Защита против одного подтипа обеспечивает защиту и против других за счет наличия общей детерминанты.
Резистентность. Вирионы чувствительны к эфиру и детергентам. Необычным свойством вирионов является устойчивость к высокой температуре: они выдерживают нагревание до 100 °С в течение 1-2 минут, при этом устойчивость к температуре повышается, если они находятся в сыворотке крови. После 10-минутного кипячения инфекционная активность вируса утрачивается, но антигенность сохраняется. Антигенность сохраняется при низких значениях рН (2,4). Инфекционная активность и антигенность не утрачиваются при ультрафиолетовом облучении плазмы крови, хранении при температуре -20 °С в течение многих лет, повторном замораживании и оттаивании.
Этиология парентерального гепатита В. Гепатит В – одно из наиболее серьезных, широко распространенных заболеваний вирусной этиологии. Возбудитель относится к семейству Hepadnaviridae, роду Orthohepadnavirus. Для него известно 8 генотипов (HBV-A, HBV-B, HBV-C…HBV-H), поражающих человека.
Эпидемиология. Вирус гепатита В передается восприимчивым лицам при контакте с кровью или другими жидкостями организма больных в острой стадии заболевания, но чаще с хроническими формами. Инфекция может возникнуть при введении крови или ее препаратов, при использовании нестерильных шприцев или игл (особенно у наркоманов), при гомосексуальных контактах, а также при гетеросексуальных контактах во время острой или хронической стадии инфекции. Возможна передача вируса от беременной матери к плоду путем трансплацентарной передачи вируса, либо во время родов и после родов, через молоко, слюну или сыворотку матери.
Важнейшими моментами эпидемического процесса при гепатите В являются: 1) длительное хроническое носительство; 2) вовлечение в эпидемический процесс лиц разного возраста; 3) наличие групп высокого риска заражения; 4) отсутствие сезонности заболевания.
Патогенез. Вирус проникает в клетки печени благодаря наличию на их поверхности специфических рецепторов, после разрушения наружных оболочек освобождается внутренний компонент, имеющаяся в его составе вирусная ДНК-полимераза достраивает недостающий участок плюс-цепи ДНК. Инфекция может проходить по одному из двух механизмов – продуктивному и интегративному. При продуктивном типе инфекции происходит транскрипция ДНК с помощью клеточных ферментов, образование иРНК, синтез вирусных белков. Репликация ДНК происходит по уникальному механизму с использованием в качестве промежуточной формы не ДНК, а РНК. Цикл репродукции оканчивается сборкой вирусных частиц в цитоплазме гепатоцитов с участием мембран ретикулоэндотелиальной системы. При интегративной инфекции после достройки второй нити ДНК происходит интеграция ДНК с клеточным геномом вблизи сильного промотора. В этом случае клетка начинает в огромном количестве производить HBs-антиген.
Клиническая картина. Инкубационный период острого гепатита В составляет от 45 до 180 суток (в среднем 90 суток). Чаще всего болезнь имеет циклическое течение. Преджелтушный период (продолжительность 1-4 недели) характеризуется постепенным началом. Появляется слабость, быстрая утомляемость, снижается работоспособность. Наряду с астеническими явлениями имеют место диспептические (ухудшение аппетита, тошнота, рвота). Повышение температуры тела нехарактерно. В этот период, как правило, увеличены печень и селезенка, а в конце его темнеет моча и светлеет кал.
Появление желтухи отмечают у 20-35 % больных остым гепатитом В. В желтушный период симптомы интоксикации, астенические и диспептические явления достигают наибольшей выраженности, еще больше увеличивается печень и селезенка. Продолжительность этого периода колеблется в широких пределах, но к концу 1-го месяца у большинства больных желтуха исчезает, хотя у некоторых из них восстановительный период приобретает затяжной характер (до 6 месяцев).
Полное выздоровление регистрируют у 90-95 % больных острым гепатитом В и лишь у 5-10 % из них отмечают переход в хронический гепатит. У больных с безжетушной формой острого гепатита В клиническая симптоматика отличается скудностью, что не исключает возможности перехода острого гепатита в хронический.
При фульминантной (молниеносной) форме острого гепатита В в течение короткого периода времени (несколько суток) развиваются симптомы острой печеночной недостаточности и появляются признаки печеночной энцефалопатии. У 76 % больных с фульминантной формой острого гепатита обнаруживаются маркеры дельта-вирусной инфекции (вирус гепатита D). Часто эта форма гепатита В завершается летальным исходом.
У больных с хроническим гепатитом В нередко сохраняются умеренно выраженные симптомы интоксикации, слабая желтуха, гепатомегалия, ряд внепеченочных поражений.
Иммунитет. При заболевании формируется специфический иммунитет, который в большинстве случаев приводит к освобождению организма от вируса. Образование антител индуцируют три вирусных антигена – HBs, HBc и HBe. Основным антигеном, индуцирующим протективные антитела, является HBs-антиген. В период реконвалесценции обнаруживаются антитела ко всем трем антигенам. Показаетлем перенесенной острой инфекции являются анти-HBc и анти-HBe-антитела, в то время как анти-HBs-антитела могут обнаруживаться и у носителей.
Диагностика строится на определении ряда специфических маркеров гепатита В методом ИФА. Основным серологическим маркером перенесенной и хронической инфекции является HBs-антиген. Не менее важным является определение в крови HBe-антигена – маркера инфекционности (свидетельствует об активной репликации вируса). Кроме этих маркеров, широкое применение находит выявление ДНК вируса с использованием ПЦР и ПЦР в реальном времени с определением вирусной нагрузки, а также обнаружение специфических антител методом ИФА. Из биохимических тестов используют определение в крови активности аланинаминотрансферазы (АЛТ) и аспартатаминотрансферазы (АСТ) и анализ уровня билирубина. Большое значение для диагностики и выбора терапии больных хроническим гепатитом В имеет исследование биоптатов печени.
Лечение. В терапии используют интерферон и ингибиторы ДНК-полимеразы.
Профилактика. Важнейшим и наиболее эффективным методом профилактики гепатита В является исключение попадания вируса при парентеральных манипуляциях, переливаниях крови. Для предотвращения предачи вируса половым путем принимают меры, аналогичные таковым при ВИЧ-инфекции.
Специфическая профилактика осуществляется вакцинацией в соответствии с национальным календарем прививок. Новорожденных детей (кроме родившихся у больных хроническим гепатитом В и носителей вируса) вакцинируют трижды по схеме 0-1-6 месяцев. Первоначально вакцину вводят в первые сутки жизни ребенка, повторно – через месяц и третий раз – в возрасте 6 месяцев (одновременно с третьей прививкой против коклюша, столбняка, дифтерии, а также полиомиелита). Третья иммунизация против гепатита В важна для достижения высокой концентрации специфических антител и длительного (до 10 лет) их сохранения. Осуществление такой схемы иммунизации позволяет эффективно предупреждать возможное перинатальное инфицирование.
Детей, родившихся у женщин с хронической инфекцией, острым гепатитом В в III триместре беременности, носителей вируса вакцинируют 4 раза по схеме: 1-е сутки жизни, 1-2-12 месяцев. У этих детей, имеющих наиболее реальный риск инфицирования вирусом при прохождении родовых путей, важно своевременно ввести вакцину (в первые 12-24 ч жизни). Четырехкратная иммунизация позволяет в наиболее ранние сроки достичь у них появления в крови анти-HBs в защитной концентрации и тем самым предупредить развитее инфекционного процесса.
В РФ в настоящее время распространены рекомбинантные вакцины против гепатита В на основе HBs-антигена, экспрессируемого дрожжами: «Engerix B» фирмы «GlaxoSmithKline», «Эувакс В» фирмы «Санофи Пастер», H-B-VAX II фирмы «MERCK & CO.», отечественная вакцина производства «Комбиотех» и «НПО «Микроген». Также применяют комбинированные вакцины: «Бубо-Кок» - комбинированная вакцина для профилактики дифтерии, столбняка, коклюша и вирусного гепатита В и «Бубо-М» - комбинированная вакцина против дифтерии, столбняка и гепатита В производства «Комбиотех».
Дата: 2019-04-23, просмотров: 196.
