1.Размер колонии_______________________________________

2.Форма колонии_______________________________________

3. Поверхность колонии_________________________________

4. Края колонии________________________________________

5.Прозрачность колоний_________________________________

6.Пигмент_____________________________________________

7.Консистенция________________________________________

8.Форма бактерий______________________________________

9. Взаиморасположение бактерий_________________________

10.Латинское морфологическое название бактерий__________________

3. Изучение биохимической (ферментативной) активности бактерий

Объяснить принципы конструирования сред "пестрого ряда"; а также характерные изменения последних, наступающие в результате ферментативной деятельности бактерии. Произвести посев на среды "пестрого ряда" культур кишечной палочки и фекального шелочеобразователя.

Помимо общепринятых сред, в состав "пестрого ряда" нередко включаются среды с другими углеводами, а также среда для определения уреазы - фермента, расщепляющего мочевину. Среда представляет собой мясопептонный бульон с добавлением 1-2% мочевины и индикатора фенолового красного. При разложении мочевины образуется аммиак, вызывающий изменение рН среды и соответственно желтой окраски индикатора, на красную.

4. Методы культивирования анаэробов.

Разобрать типы дыхания, их сущность и разницу, группы бактерий по типу дыхания. Перечислить и раскрыть сущность механических, физических, химических и биологических методов культивирования анаэробов.

Приготовить взвесь почвы в физиологическом растворе. С помощью пастеровской пипетки засеять 1-2 капли взвеси на среду Кита-Тароцци.

Сделать посев почвенной взвеси на среду Вильсон-Блера в трубки Вейон-Виньяля. Для этого исходная взвесь почвы последовательно разводится в трех пробирках с 10 мл физиологического раствора[1]*. Несколько капель из последней пробирки засеять в расплавленную и остуженную до 42°-45° среду Вильсон-Блера. Среда с засеянным материалом переме­шивается и насасывается в трубки Вейон-Виньяля, которые после застывания среды запаивают и помещают в термостат.

Рис.1. Латинское морфологическое название выделенной культуры окраска по Граму	Рис.2. Латинское морфологическое название бактерий из колонии окраска по Граму	Рис.3. Метод выращивания анаэробов по Фортнеру

5. Дифференциально-диагностические питательные среды: Плоскирева, Эндо, Левина и др.

Записать состав среды Плоскирева и Эндо и характер их изменений при росте различных бактерий. Произвести посев культур кишечной палочки, фекального щелочеобразователя и стафилококка на среды Плоскирева, Эндо и МПА. Для этого чашка с каждой средой делится на три сектора и на каждый сектор с помощью петли засевается одинаковое количество культуры одного из микробов (культура рассеивается по всей поверхности сектора в виде газона). При посеве на разные среды и разных микробов следует стремиться засеять одинаковое количество бактерий и одинаковым способом для того, чтобы на следующем занятии можно было сравнить интенсивность роста.

Рецепт среды Эндо:____________________________________________________________

___________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Рецепт среды Плоскирева:______________________________________________________

_______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Контрольные вопросы

1. Какие методы определения чистоты выросшей культуры Вы знаете?

2. Как можно по внешнему виду культуры определить ее чистоту?

3. В чем заключается микроскопический метод проверки чистоты вы­деленной культуры бактерий?

4. Для чего добавляется индикатор в углеводные среды "пестрого ряда"?

5. Какие различия между бактериоскопическим и бактериологическим анализами?  

6. Какие углеводы чаше всего включаются в среды "пестрого ряда"?

7. Какой цвет имеет углеводная среда с индикатором Андреде в случае ферментации углевода?

8. Какого цвета углеводная среда с индикатором ВР, если бактерии потребляют углевод? Почему?

9. Как определяется способность бактерий ферментировать углеводы с образованием газа?

10. Как определяется индол в среде?

11. Как определяется уреазная активность бактерий?

12. Как определить способность бактерий образовывать H₂S?

13. Что такое анаэробиоз?        

14. Кто открыл анаэробные бактерии?

15. Какие методы применяются для удаления кислорода из атмосферы роста и питательных сред для анаэробов?

16. В чем заключается метод выращивания анаэробов, предложенный Фортнером?

17. Какой состав имеет среда Вильсон-Блера?

18. Чём отличаются облигатные анаэробы от факультативных?

19. Что такое регенерация питательной среды и как она производится?

20. Какие изменения вызывают анаэробы на среде Тароцци?

21. Почему происходит почернение среды Вильсон-Блера при росте анаэробов?   

22. Как выделяют чистые культуры анаэробных бактерий?

23. Какой состав имеют среды Эндо, Левина, Плоскирева?

24. Почему среда Плоскирева обладает бактериостатическим действие? 

25. Для чего в среды Плоскирева, Эндо, Левина добавляется молочный сахар (лактоза)?

26. Почему колонии кишечной палочки на средах Эндо, Левина и Плоскирева окрашены?

27. Какие бактерии на средах Эндо, Левина, Плоскирева вырастают в виде бесцветных колоний?

ПРИЛОЖЕНИЕ К ЗАНЯТИЮ 5