Несоблюдение вышеизложенных правил может привести к ошибочным заключениям о групповой принадлежности исследуемой крови. Отступлением от правил могут явиться: ошибочный порядок расположения реактивов или эритроцитов в штативах, ошибочный порядок нанесения их на пластину, неправильное соотношение количества реагента и эритроцитов, несоблюдение времени и температурного режима, необходимого для проведения реакции (3 минуты, комнатная температура), недостаточное освещение, загрязнение или применение мокрых пипеток, пластинок, палочек и т. д. Ошибки, возникающие при определении групповой принадлежности крови, бывают двух родов.

Ошибки первого рода возникают в том случае, если реакция агглютинации не учитывается там, где она фактически есть или должна быть. Это может произойти:

1) когда агглютинация начинается поздно или бывает слабо выражена при низкой активности реагента, или от того, что эритроциты исследуемого лица обладают слабой специфичностью.

Во избежание этой ошибки необходимо наблюдать за ходом реакции не

менее трех минут и особенно внимательно за теми каплями, в которых еще не 47

наступила агглютинация, а также работать только с реагентами, агглютинирующая способность которых проверена, соответствует требованиям инструкции и в пределах срока ее годности;

2) при избытке крови, если взята слишком большая капля.

Во избежание этой ошибки следует соблюдать соотношение объема

исследуемой крови и стандартной сыворотки (или стандартных эритроцитов и исследуемой сыворотки) приблизительно 1:10;

3) при высокой температуре (выше +25^о С) окружающего воздуха, например, в жаркую погоду.

Во избежание этой ошибки пластину, на которой определяется группа крови, следует охладить.

Ошибки второго рода возникают в том случае, если реакция агглютинации учитывается там, где ее нет или не должно быть. Это может произойти:

1) когда эритроциты испытуемой крови складываются в «монетные столбики», которые невооруженным глазом можно принять за агглютинаты.

Во избежание этой ошибки необходимо добавление изотонического

раствора NaCl с последующим покачиванием пластинки, что, как правило, устраняет «монетные столбики»;

2) когда исследуемые эритроциты дают феномен ауто- или панагглютинации, при использовании инфицированного образца крови

больного (взята в грязную пробирку).

Во избежание этой ошибки необходимо не допускать определения групп крови при температуре ниже +15^о С и использовать чистую посуду;

3) когда пластину со смесью эритроцитов и сыворотки не покачивают. В этом случае эритроциты, оседая на дно, могут образовывать отдельные

скопления, симулирующие агглютинацию.

Во избежание этой ошибки следует периодически покачивать пластину, на которой проводится исследование.

48

Однако и при правильной оценке реакции в каждой отдельной капле можно сделать неправильное заключение о групповой принадлежности, если спутать порядок расположения стандартов в штативе или на пластине. Поэтому каждый раз в начале работы по определению групповой принадлежности следует тщательно проверять расположение в штативах пробирок со стандартными эритроцитами, а также всех ампул (флаконов) с моноклональными антителами, номер серии и дату годности.

Во всех случаях нечеткого или сомнительного результата необходимо повторное определение группы крови при помощи моноклональных антител других серий. Если результаты также остаются неясными, а определение проводилось только при помощи цоликлонов, то следует определить группу крови также и перекрестным способом или с помощью гелевой технологии.