Тема 3.2. Частная микология. Противогрибковые препараты. Особенности противогрибкового иммунитета.
Микроскопический метод основан на выявлении возбудителя в неокрашенных и окрашенных препаратах исследуемого клинического материала. Исследуют соскобы с кожи, ногтей, отделяемое покровных тканей, пунктаты абсцессов, отделяемое пазух носа, биологические жидкости (мокроту, бронхоальвеолярную жидкость, мочу, спинномозговую жидкость, желчь) и др. Рассмотрению элементов гриба в препаратах мешают различные компоненты ткани, поэтому на исследуемый материал (соскобы с кожи), помещенный на предметное стекло, наносят I—3 капли 10—20% раствора NaOH или КОН и через 15 мин слегка придавливают покровным стеклом. Щелочь разрушает ткань («просветляет» ее), способствуя выявлению элементов гриба. Для ускорения этого процесса препарат нагревают на пламени до появления паров. Пораженные волосы и соскобы с ногтей обрабатывают аналогичным способом 20—30% щелочью в течение 1—3 ч.
Микроскопию окрашенных препаратов применяют при исследовании соскобов грануляций, отделяемого язв и свищей, реже — при изучении соскобов с кожи и ногтей для выявления элементов гриба. Препараты окрашивают по Граму, 1 раму—Вей- герту, Романовскому— Гимзе, Гомори—Грокотту, Ван-Гизону, Райту, Цилю—Нильсену, реактивом Шиффа, акридиновым оранжевым.
Гистопатологические препараты чаше применяют при изучении глубоких микозов в лабораториях с особым режимом работы — с опасными патогенами. Полученный биоптат заливают 10% раствором формалина на 24—48 ч, после чего заключают в парафин или замораживают с последующим получением срезов. Срезы окрашивают гематоксилин-эозином, по Гомори—Грокотту, применяют также ШИК (РAS)-окраску.
Культивирование (посев на питательную среду) выполняют для выделения чистой культуры при комнатной температуре. Диморфные грибы при комнатной температуре образуют мицелий, а при 37 °С (при температуре тела человека) — дрожжеподобные клетки. Для культивирования грибов рода Candida и дерматофитов применяют среду Сабуро, а для гифальных (плесневых) — среду Чапека. Часто в среды добавляют антибактериальные препараты. Культуры возбудителей глубоких микозов из-за их высокой контагиозности получают только в специализированных клинико-лабораторных центрах.
Серологический метод. В сыворотке крови больных обнаруживают АТ с помощью РП, ИФА и др. Перспективно также при этом определение АГ грибов.
Молекулярные методы. Наиболее распространенными являются ПЦР и газожидкостная хроматография.
Основные виды микотоксикозов
Заболевание |
Возбудители
Клиническая картина
Fusarium
sporotrichioides
Гранулоцитопения, некроз костного мозга, нарушение кроветворения
Fusarium
graminearum
Поражение ЦНС, слабость, скованность походки, резкие головные боли,головокружение, рвота, диарея, боли в животе и психические расстройства
Fusarium graminearum, Fusarium graminearum, Fusarium avenaceum
Рвота, диарея, головные боли, конвульсии
Penicillium citreoviridae, Penicillium islandicum
Поражения ЦНС (нисходящие параличи), сердечно-сосудистой системы, печени. Возможен летальный исход
Злаковые (чаще рожь), пораженные
рожками спорыньи
Растительные продукты питания (зерновые, арахис, морковь, фасоль)
Контакт с зараженным кормом для лошадей, крупного рогатого скота, домашней птицы
Микробиологическая диагностика. Основана на выявлении грибов или микотоксинов в полученном урожае, пищевых продуктах, кормах для скота, а также различном сырье, полученном от животных. Микотоксин извлекают из пробы органическим растворителем и выявляют с помощью хроматографии, спектрофотометрии и биопробы на куриных эмбрионах, культурах клеток, утятах, крысятах, морских свинках, мышах, голубях, некоторых микроорганизмах. Возможно применение ИФА и РИА.
Лечение. Симптоматическое. Проводят промывание желудка, очищение кишечника и другие мероприятия, направленные на детоксикацию организма.
Профилактика. Предупреждение заражения продуктов и кормов грибами и последующего их размножения, токсинообразования.
Подозрительные продукты необходимо исследовать на токсичность. Разработаны нормы предельно допустимой концентрации микотоксинов в продуктах питания.
Характеристика возбудителей
Дерматофиты подразделяют натри рода: Microsporum , Trichophyton, Epidermophyton . Они образуют септированный мицелий с макро- и микроконидиями. Грибы размножаются бесполым (анаморфы) или половым (телеоморфы) путем, образуя аски. Растут на среде Сабуро. Колонии (в зависимости от вида) разноцветные, мучнистые, зернистые, пушистые.
Резистентность. Грибы устойчивы к высушиванию и замораживанию. Трихофитоны сохраняются в волосах до 4—7 лет. Дерматофиты погибают при температуре 100 °С через 10—20 мин. Чувствительны к действию УФ-лучей, растворов щелочи, формальдегида, йода.
Эпидемиология. Около 40 видов дерматофитов вызывают патологические процессы у человека. Возбудители передаются при контакте с больным человеком или животным, а также с различными объектами окружающей среды. Грибы передаются через предметы обихода (расчески, полотенца). Люди чаще инфицируются в банях, душевых, бассейнах.
Различают антропофильные, зоофильные и геофильные грибы. Антропофильные дерматофиты передаются от человека к человеку, зоофильные — человеку от животных. Например, Trichophyton verrucosum передается от крупного рогатого скота (телячий лишай). Геофильные дерматофиты обитают в почве и передаются при контакте с ней.
Например, Microsporum gypseum передастся при обработке почвы голыми руками — микроспория садоводов.
Антропофильные дерматофиты
Виды дерматофитов | Микозы |
Microsporum audouinii, М. fcrrugincum | Микроспория |
Trichophyton tonsurans, T. vioiaceum | Трихофития |
Trichophyton mcntagrophytcs var. interdigitaie | Эпидермофития сгон, ногтей (онихомикоз) |
Epidermophyton floe cosum | Эпидермофития паховая, ногтей (онихомикоз) |
Trichophyton ruhrum | Руброфития стоп, ногтей (онихомикоз) |
Trichophyton schoenleinii | Фавус |
Виды дерматофитов | Природный резервуар | Микозы |
Microsporum canis | Кошки, собаки, лошади | Микроспория |
Microsporum gaiiinae | Домашняя птица | |
Microsporum nanum | Свиньи | |
Trichophyton verrucosum | Крупный рогатый скот | Трихофития |
Trichophyton equinum | Лошади | |
Trichophyton mentagrophytes var mentagrophytes | Грызуны | |
Trichophyton mentagrophytes var quinckeanum | Мышь |
Геофильные дерматофиты
Виды дерматофитов | Микозы |
Microsporum cookei | Микроспория |
Microsporum gypseum | |
Microsporum fulvum | |
Microsporum nanum |
Микробиологическая диагностика. Микроскопически исследуют соскобы с пораженной кожи, чешуйки, ногтевые пластинки, волосы, обработанные в течение 10—15 мин 10—15% раствором КОН. При микроскопии выявляют нити мицелия, артроконидии, макро- и микроконидии, бластоспоры. Артроконидии рода Trichophyton могут располагаться параллельными цепочками снаружи волоса (эктотрикс) и внутри волоса (эндотрикс). Артроконидии рода Microsporum располагаются мозаично снаружи волоса. При фавусе внутри волоса обнаруживаются элементы гриба и пузырьки газа.
При микологическом методе делают посев на питательные среды — сусло-агар, среду Сабуро и др. Рост грибов изучают через 1—3 нед культивирования при температуре 25 °С. Определяют АТ в сыворотке крови с помощью РСК, PH ГА, РП, РИФ, ИФА. Ставят кожно-аллергические пробы с аллергенами из грибов.
Биологическую пробу ставят на лабораторных животных (морских свинках, мышах и др.), заражая их кожу, волосы и когти.
Патогенез. Развитию заболевания способствуют мацерация, мелкие повреждения кожи, повышенная потливость, ослабленный иммунитет, эндокринные нарушения, длительное применение антибиотиков и др. В зависимости от вида гриба в различной степени поражаются кожа, волосы и ногти. Возбудители обитают на ороговевших субстратах (кератинофильные грибы). Дерматофиты не проникают далее базальной мембраны эпидермиса.
Клиническая картина. Волосы, пораженные грибами, обламываются, возникают плешивость, очаговое облысение. Кожа шелушится, появляются везикулы, пустулы, трещины. Развивается зуд очагов поражения. Воспаление отсутствует либо может быть в выраженной форме.
Грибковые инфекции ногтей (онихомикозы) сопровождаются изменением цвета, прозрачности, толщины, поверхности, прочности и целостности ногтевой пластинки. Возбудителем онихомикоза может быть любой дерматофит, но чаще его вызывают Trichophyton rubrum и Trichophyton interdigitale .
Трихофития (стригущий лишай) вызывается грибами рода Trichophyton. При поверхностной трихофитии кожа воспаляется и шелушится. Волосы надламываются у поверхности кожи. При инфильтративно-нагноительной трихофитии в коже развиваются абсцессы и гранулемы, пораженные волосы выпадают.
Микроспория — высококонтагиозное заболевание, встречается в основном у детей. Microsporum canis вызывает заболевание у кошек, собак и человека. Возбудители антропонозной микроспории — М. audouinii, М. ferrugineum — поражают волосы головы и кожу человека. Вокруг волос образуются муфты, или чехлы, из мелких спор, волосы ломаются.
Фавус (парша) — хроническое заболевание, встречается главным образом у детей, вызывается Trichophyton schoenleinii . Антропоноз. Поражаются кожа, волосы и ногти. Характерным является образование желтого цвета скутулы — скопления спор, мицелия, клеток эпидермиса и жира.
Эпидермофития паховая вызывается грибом Epidermophyton floccosum, а эпидермофития стоп — грибом Trichophyton interdigitale . Поражаются складки кожи и ногти.
Иммунитет. Снижение иммунитета способствует развитию микозов. У людей, инфицированных грибами, появляются АТ к IgM, IgG, IgE, развивается ГЗТ.
Лечение. При дерматофитии волосистой части головы применяют флуконазол, гризеофульвин; при дерматофитии ногтей проводят системную (гризеофульвином, ламизилом и др.) и местную противогрибковую терапию; при дерматофитии стоп применяют противогрибковые кремы и мази (ламизил и др.) в сочетании (при показаниях) с системной терапией и антигистаминными средствами.
Профилактика. Профилактика основана на соблюдении правил гигиены (гигиене кожи, использовании только личной обуви и др.), выявлении и лечении больных, обследовании контактных лиц. В эпидемических очагах проводят дезинфекцию.
ВОЗБУДИТЕЛЬ ПНЕВМ0ЦИСТ03А
Pneumocystis jiroveci вызывает пневмоцистную пневмонию у людей с ослабленным иммунитетом (недоношенностью, врожденным или приобретенным иммунодефицитом, ВИЧ-инфекцией). Возбудителя относят к условно патогенным дрожжеподобным грибам. Источник инфекции — человек. Путь передачи — преимущественно воздушнокапельный. Пневмоцистная пневмония протекает с одышкой, лихорадкой и сухим кашлем, но, как правило, это бессимптомная инфекция. Свыше 70% здоровых людей имеют антитела к пневмоцистам.
Микробиологическая диагностика. Микроскопический метод включает микроскопию мазка лаважной жидкости, биоптага, легочной ткани, мокроты, окрашенной по Романовскому—Гимзе: цитоплазма паразита имеет голубой цвет, а ядро — красно-фиолетовый. Для диагностики применяют также РИФ, ИФА. Обнаружение IgM или нарастание уровня АТ к IgG в парных сыворотках свидетельствуют об острой пневмоцистной инфекции.
Лечение. Для лечения применяют пентамидин, каспофунгин, ко-тримоксазол и комбинацию примахина с клиндамицином.
Профилактика. Профилактика пневмоцистоза сводится к предупреждению воздушно-капельного инфицирования пневмоцистами и повышению иммунного статуса организма, особенно у ВИЧ- инфицированных.
Возбудители криптококкоза.
Криптококкоз вызывается инкапсулированными условно патогенными дрожжами рода Cryptococcus . Заболевание развивается у лиц с выраженным иммунодефицитом, сопровождается поражением легких, ЦНС и кожи.
Характеристика заболевания.
Клиническая картина. Происходит медленное развитие криптококкового менингита с явлениями лихорадки, ригидности затылочных мышц, головной боли, головокружения, нарушения зрения и повышенной возбудимости. Более остро нарушения протекают при СПИДе. Поражения легких сопровождаются кашлем со слизистой мокротой, повышенной потливостью и слабовыраженной лихорадкой. На коже появляются папулы и язвы с приподнятыми краями. Происходит диссеминация возбудителя в органы зрения, кости и предстательную железу. Первичный криптококкоз часто протекает бессимптомно либо его проявления незначительны.
Иммунитет. Преобладает клеточный иммунитет.
Лечение. Применяют амфотерицин В, флуконазол, итраконазол, фл у цитозин.
Тема 3.2. Частная микология. Противогрибковые препараты. Особенности противогрибкового иммунитета.
Микроскопический метод основан на выявлении возбудителя в неокрашенных и окрашенных препаратах исследуемого клинического материала. Исследуют соскобы с кожи, ногтей, отделяемое покровных тканей, пунктаты абсцессов, отделяемое пазух носа, биологические жидкости (мокроту, бронхоальвеолярную жидкость, мочу, спинномозговую жидкость, желчь) и др. Рассмотрению элементов гриба в препаратах мешают различные компоненты ткани, поэтому на исследуемый материал (соскобы с кожи), помещенный на предметное стекло, наносят I—3 капли 10—20% раствора NaOH или КОН и через 15 мин слегка придавливают покровным стеклом. Щелочь разрушает ткань («просветляет» ее), способствуя выявлению элементов гриба. Для ускорения этого процесса препарат нагревают на пламени до появления паров. Пораженные волосы и соскобы с ногтей обрабатывают аналогичным способом 20—30% щелочью в течение 1—3 ч.
Микроскопию окрашенных препаратов применяют при исследовании соскобов грануляций, отделяемого язв и свищей, реже — при изучении соскобов с кожи и ногтей для выявления элементов гриба. Препараты окрашивают по Граму, 1 раму—Вей- герту, Романовскому— Гимзе, Гомори—Грокотту, Ван-Гизону, Райту, Цилю—Нильсену, реактивом Шиффа, акридиновым оранжевым.
Гистопатологические препараты чаше применяют при изучении глубоких микозов в лабораториях с особым режимом работы — с опасными патогенами. Полученный биоптат заливают 10% раствором формалина на 24—48 ч, после чего заключают в парафин или замораживают с последующим получением срезов. Срезы окрашивают гематоксилин-эозином, по Гомори—Грокотту, применяют также ШИК (РAS)-окраску.
Культивирование (посев на питательную среду) выполняют для выделения чистой культуры при комнатной температуре. Диморфные грибы при комнатной температуре образуют мицелий, а при 37 °С (при температуре тела человека) — дрожжеподобные клетки. Для культивирования грибов рода Candida и дерматофитов применяют среду Сабуро, а для гифальных (плесневых) — среду Чапека. Часто в среды добавляют антибактериальные препараты. Культуры возбудителей глубоких микозов из-за их высокой контагиозности получают только в специализированных клинико-лабораторных центрах.
Серологический метод. В сыворотке крови больных обнаруживают АТ с помощью РП, ИФА и др. Перспективно также при этом определение АГ грибов.
Молекулярные методы. Наиболее распространенными являются ПЦР и газожидкостная хроматография.
Дата: 2018-12-28, просмотров: 425.