Принцип метода: Принцип метода основан на способности глюкозы окисляться в щелочной среде и восстанавливать Си(ОН)2 до СиОН в соответствии с реакцией:

Образовавашийся гидрат закиси меди вступает в реакцию с арсено-молибденовым реактивом (реактивом Нельсона), который при этом восстанавливается. По мере увеличения концентрации глюкозы в крови цвет раствора меняется от желто- зеленого до зелено-синего. Интенсивность окраски измеряется фотометрически.

Материальное обеспечение: изотонический раствор, 0,2% р-р вольфрамата натрия, стандартный раствор глюкозы, медный реактив А, медный реактив Б, арсено-молибденовый реактив, пробирки, штативы, водяная баня, фотоэлектроколориметр.

Ход работы:

1. В центрифужную пробирку наливают 3,7мл изотонического раствора.

2. Добавляют 0,1мл крови и 0,2 мл раствора вольфрамата натрия, во вторую пробирку добавляют те же реактивы, но вместо 0,1 мл крови берут 0,1 мл стандартного раствора глюкозы.

3. Обе пробирки центрифугируют 10 минут.

4. Берут по 1 мл центрифугата и добавляют по 1 мл медного реактива (медный реактив готовят перед опытом, смешивая 5мл медного реактива А и 0,2 мл медного реактива Б) для окисления глюкозы, закрывают пробирки ватой и кипятят 10 минут на водяной бане. 5. Пробирки затем охлаждают под струей воды.

6. Далее осторожно по стенке, встряхивая, добавляют 3 мл арсено-молибденового реактива (реактив Нельсона).

7. Колориметрируют обе пробирки при красном светофильтре в кювете толщиной 1 см против контрольной пробы.

                                                                                                                 Еоп · 5,6

  Содержание глюкозы в крови определяют по формуле: С = ---------------- (ммоль/л),  

                                                                                                                     Ест

где:    

Еоп - экстинкция опытной пробы,

Ест - экстинкция стандартной пробы,

5,6 ммоль/л – концентрация стандартного раствора глюкозы

 Содержание глюкозы в норме 3,3-5,5 ммоль/л.

Результаты:

ВЫВОДЫ:

Подпись преподавателя:

ТЕМА 2.8. ГОРМОНАЛЬНАЯ РЕГУЛЯЦИЯ СОДЕРЖАНИЯ ГЛЮКОЗЫ В КРОВИ. ПОСТРОЕНИЕ САХАРНЫХ КРИВЫХ. ГОРМОНЫ НАДПОЧЕЧНИКОВ

Актуальность темы

Глюкоза является основным энергетическим субстратом. Наиболее важными нарушениями гомеостаза глюкозы являются сахарный диабет, характеризующийся непереносимостью глюкозы и, следовательно, гипергликемией, и различные состояния, вызывающие патологически низкую концентрацию глюкозы в крови - гипогликемию.

Резкое снижение концентрации глюкозы в крови вызывает развитие гипогликемического шока. Гипергликемии могет быть панкреатического и внепанкреатического происхождения. Особого внимания заслуживают панкреатические, поскольку 5% населения развитых стран страдают сахарным диабетом и примерно столько же людей предрасположены к этой болезни.

В связи с этим клинический интерес представляет выполнение стандартного теста на толерантность к глюкозе, который позволяет получить уточненные данные о состоянии углеводного обмена у пациента со скрытой формой сахарного диабета.

Цели обучения

Общая цель

Уметь интерпретировать состояние гормональной регуляции углеводного обмена на основании выполнения перорального теста на толерантность к глюкозе.

       Конкретные цели:                                        Цели исходного уровня: