Установление вида и серовара лептоспир проводят с помощью реакции агглютинации и лизиса с типичными диагностическими сыворотками. Частота выделения культур колеблется от 29 до 48%.

Рис. 8 Leptospira interrogans, тест агглютинации, темнопольная микроскопия, ув.х40. Характерные крючковые концы («вопросительные знаки» или «точки опроса»), которые видны в неагглютинированных бактериях

Современная методика полимеразной цепной реакции (ПЦР), основанная на высокой специфичности умножения in vitro последовательности селективной ДНК, показывает лептоспир в первые дни болезни, даже если их количество незначительно (1–10 клеток / мл). Постановка ПЦР с применением произвольных праймеров позволяет дифференцировать возбудителей на внутривидовом и субсероварном уровнях. Особенно показана реакция для выявления возбудителей в моче. ПЦР оказалась положительной в 94,4% случаев.

Лептоспиры в исследуемом материале можно обнаружить с помощью метода прямого иммуноферментного анализа. Теперь для ИФА разработаны и внедрены в практику высокоэффективный родоспецифичний диагностикум.

Биологический метод

Метод более чувствительный, чем культуральный; проводят с целью выделения и очистки культур, определения вирулентности и дифференциальной диагностики от сапрофитов. Проводят заражение золотистых хомячков 20–30-дневного возраста или крольчат-сосунов 10–20 дней. Материал вводят внутрибрюшинно, внутривенно или в скарифицированную кожу подушечек задних лапок. Через 5–7 дней после заражения у них возникает лихорадка, желтушное окрашивание склер и слизистых оболочек, кровоизлияния в органы и ткани. Лептоспиры обнаруживают в почках, печени, легких методом темнопольной микроскопии. Животных убивают на 4–5 и 14–16 дни, если они не погибли. После гибели животных от них выделяют чистую культуру и идентифицируют его с помощью реакции агглютинации и лизиса.

Вода является основным фактором в передаче возбудителя лептоспироза. Лептоспир обнаруживают в воде биологической пробой на крольчатах, свинках, хомяках, крапчатых сусликах, взрослых кроликах. Животных заражают в скарифицированную кожу или внутрибрюшинно. Начиная с четвёртого дня у крупных зверьков (крольчата, морские свинки) берут кровь из сердца с целью выделения гемокультур, исследуют микроскопически брюшной экссудат. Одного из мелких зверьков убивают. На 14–20-й день всех выживших животных так же убивают. Патологический материал исследуют на наличие лептоспир. Кровь исследуют в РМА.

Серологические исследования

В практических лабораториях чаще применяют реакцию микроагглютинации и лизиса лептоспир (РМАЛ) и реакцию агглютинации.

Лизис происходит в первых пробирках с меньшими разведенными сыворотки. Феномен агглютинации выглядит в поле зрения как образование клубков («паучков»), т.е. склеивания лептоспир между собой. Он наблюдается в следующих пробирках с большими разведенными сыворотки. Реакцию необходимо ставить повторно методом парных сывороток для определения нарастания титра антител.

ДИАГНОСТИКА КАМПИЛОБАКТЕРИОЗА ЖИВОТНЫХ

    Кампилобактериоз – болезнь крупного рогатого скота, овец и свиней, проявляющаяся у половозрелых животных поражением репродуктивных органов, массовыми абортами, перегулами, бесплодием и рождением нежизнеспособного потомства. Род Campylobacter, в который входит 14 видов, из них патогенные: Cambylobacter fetus, C. Jejuni, C. Sputorum, C. Hyointestinalis, C. coli. Экологической нишей кампилобактеров являются органы пищеварения и репродуктивной системы млекопитающих и патогенность связана зачастую с резистентностью организма.

Отбор и пересылка проб

Для бактериологического исследования на кампилобактериоз в ветеринарную диагностическую лабораторию от коров, нетелей и овцематок направляют – абортированный плод целиком с плодными оболочками (от крупных плодов – голову, желудок, печень, легкие), плаценту или часть ее. В

случае непригодности плода, плодовых оболочек и плаценты для исследований в лабораторию направляют слизь из шейки матки, стерильно взятую в первые 3–4 дня после аборта (при отсутствии гнойных выделений из матки) или в период охоты. Слизь берут также от животных, у которых наблюдается

расстройство полового цикла (в период охоты).

От быков-производителей станций (пунктов) по искусственному осеменению животных направляют препуциальную слизь и сперму, а от быков, используемых для естественного спаривания – препуциальную слизь и секрет придаточных половых желез,

Для бактериологического исследования на кампилобактериоз в ветеринарную диагностическую лабораторию от животных, убитых с диагностической целью направляют влагалище, матку, лимфоузлы тазовой полости.