Анализируя рис. 3.1.3., можно сделать вывод, что концентрация аммония в среде увеличивается по мере деградации ЭДТА, поскольку ионы аммония – продукты деградации ЭДТА. Во всех вариантах концентрация аммония достигает максимального значения и остается на постоянном уровне в течение нескольких дней. Снижение концентрации аммония при длительном культивировании бактерий объясняется, по-видимому, тем, что клетки потребляют его .
При добавлении глюкозы снижение концентрации ионов аммония начинается раньше, чем в контроле. Интересен тот факт, что накопление аммония в процессе роста штамма LPM-4 на средах с добавлением глюкозы до посева и на 1 сутки роста бактерий происходит сходным образом, причем концентрация аммония в опытах значительно меньше таковой в контроле. Концентрация аммония в опыте на среде с добавлением глюкозы на 2 и 3 сутки роста также ниже контроля. Вероятно, это связано с тем, что аммоний используется для роста клеток в присутствии глюкозы.
Показатели роста штамма LPM-4 при кометаболизме ЭДТА и глюкозы
В таблице 3.1.4. представлены сравнительные результаты показателей роста штамма LPM-4 на различных вариантах сред. На средах с глюкозой суммарная биомасса включает биомассу, образованную как за счет потребления ЭДТА, так и за счет потребления глюкозы. Поскольку концентрация ЭДТА во всех вариантах сред была одинаковой (0,873 г/л), можно предположить, что количество биомассы, образованной из ЭДТА на средах с глюкозой, было таким же, как в контроле (0,196 г/л). Следовательно, если вычесть из суммарной биомассы количество биомассы, образованной из ЭДТА, мы получим количество биомассы, образованной из глюкозы.
Из таблицы видно, что наибольший выход клеток по массе из глюкозы достигается на среде с добавлением глюкозы на 3 сутки роста бактерий. Поскольку ЭДТА и глюкоза характеризуются различным энергосодержанием, правильнее сравнивать выход из этих субстратов не по массе, а по энергии. С этой целью рассчитывали энергетический выход клеток. Наибольший выход биомассы по энергии из глюкозы характерен для опыта на среде с добавлением глюкозы на 3 сутки роста бактерий.
Таким образом показано, что бактериальный штамм LPM-4, облигатный деструктор ЭДТА, не может использовать глюкозу в качестве единственного источника углерода и энергии, но способен метаболизировать ее в присутствии ЭДТА. Установлено, что ЭДТА индуцирует ассимиляцию глюкозы и является источником азота для роста клеток на глюкозе. Индукция ассимиляции неростового субстрата у штамма LPM-4 требует продолжительной лаг-фазы и сопряжена с деградацией ЭДТА. Явление совместного метаболизма ЭДТА и глюкозы можно назвать кометаболизмом.
Кометаболизм – трансформация неростового субстрата в присутствии ростового субстрата или иного метаболизируемого соединения. В данном
Таблица 3.1.4.
Показатели роста штамма LPM-4 при ассимиляции ЭДТА и глюкозы
Показатели | ЭДТА | ЭДТА + глюкоза (до посева) | ЭДТА + глюкоза (1 сут) | ЭДТА + глюкоза (2 сут) | ЭДТА + глюкоза (3 сут) |
Максимальная удельная скорость роста, ч-1 | 0,042 | 0,057 | 0,055 | 0,049 | 0,042 |
ЭДТА, г/л | 0,873 | 0,873 | 0,873 | 0,873 | 0,873 |
Глюкоза, г/л | - | 0,910 | 0,977 | 1,020 | 1,060 |
Биомасса суммарная | 0,196 | 0,378 | 0,391 | 0,399 | 0,423 |
Биомасса, образованная из ЭДТА | 0,196 | 0,196 | 0,196 | 0,196 | 0,196 |
Биомасса, образованная из глюкозы | - | 0,182 | 0,195 | 0,203 | 0,227 |
Выход клеток по массе из ЭДТА, YЭДТА, % | 22,4 | 22,4 | 22,4 | 22,4 | 22,4 |
Выход клеток по массе из глюкозы,Yглюкоза, % | - | 20,0 | 20,0 | 19,9 | 21,4 |
Выход клеток по энергии из ЭДТА, hЭДТА, % | 32,0 | 32,0 | 32,0 | 32,0 | 32,0 |
Выход клеток по энергии из глюкозы, hглюкоза, % | 25,0 | 25,0 | 24,9 | 26,8 |
случае ростовым субстратом является ЭДТА, а неростовым – глюкоза. Из четырех известных типов кометаболизма штамм LPM-4 способен к третьему типу кометаболизма, когда процессы ассимиляции неростовых субстратов сопряжены с использованием ростовых субстратов, в результате чего соединения углерода включаются в компоненты клетки.
Не обнаружено ассимиляции глюкозы при ее внесении в среду через 1-3 сут после потребления ЭДТА.
Дата: 2019-07-24, просмотров: 201.