Диссертация на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук по специальности 16.00.08 – эпизоотология и инфекционные болезни. – Национальный аграрный университет, Киев, 2008.

Диссертация посвящена изучению эпизоотологических особенностей, молекулярного анализа штаммов вируса птичьего гриппа, выделенного в АР Крым, Одесской, Сумской и Херсонской областях. Установлена роль гидробионтов в поддержании неблагополучия эпизоотических очагов высокопатогенного гриппа птиц на юге Украины.

Доказано, что циркуляцию разных штаммов вируса гриппа поддерживают таксономическая и экологическая гетерогенность диких, домашних, синантропных и промышленных видов птиц, что является благоприятным условием для реассортации геномов вируса гриппа. Высокопатогенный вирус гриппа изолирован от птиц 6 видов. Четыре вида птиц (дикие гуси (Phalacrocorax carbo), утки (Anas platyrhynchos), лыски (Anser albifrons), бакланы (Fulica atra) отдают предпочтение гнездованию на водных и околоводных биотопах, пятый вид – дрозды (Turdus philomelos), обитают на сухой равнинной местности, а для мест гнездования шестого вида (павлины (Sturnus vulgaris) необязательно наличие больших водоёмов.

В результате проведенных исследований впервые установлена циркуляция высокопатогенного вируса гриппа птиц H₅N₁ на территории Украины и доказано отсутствие мутаций по адаптации вируса к рецепторам эпителиальных клеток верхних дыхательных путей человека, к которым вирус гриппа является тропным.

Выявлены и нанесены на карты эпизоотического состояния районов юга Украины природные водные очаги, в которых от птиц изолировали штаммы вируса высокопатогенного гриппа птиц H₅N₁.

Установлено, что эпизоотия гриппа птиц в Украине в декабре 2005 – июле 2006 годов была обусловлена высокопатогенным вирусом “A/chiken/ Crimea/1/2005(H₅N₁)”. Данный вирус подобен изолятам, полученным от некоторых водоплавающих птиц на озере Цинхай, и изолятам из Монголии, которые были причиной эпизоотии гриппа птицы в России, в Новосибирской, Тульской и Архангельской областях в 2005 году. Сродство вирусов по гену гемаггллютинина составляет от 99,2 % до 99,8 %, а по гену нейраминидазы – от 99,5 % до 99,7 %. В изолятах высокопатогенного вируса гриппа птиц не обнаружено мутаций адаптации вируса к характерным для людей рецепторов, а также мутаций, обусловливающих устойчивость к ремантадину, амантадину и азельтимивирину.

Впервые в личинках комаров – хиронамид выделен и идентифицирован высокопатогенный вирус гриппа птиц “A(chironomida)Azov/11/2006(H₅N₁)”. Изученные нуклеотидные и аминокислотные последовательности наглядно подтверждают отличие изолированного нами штамма “A(chironomida)Azov/ 11/2006(H₅N₁)” от “A/chiken/Crimea/1/2005(H₅N₁)”. Изучены молекулярно-биологические свойства нового штамма и показано, что титр вируссодержащей жидкости в куриных эмбрионах составляет 10^8,45ЭЛД_50/0,1см³, а на культурах куриных фибробластов – 10^5,9ЦПД_50/0,1см³.

Впервые установлена возможность сохранения высокопатогенного штамма гриппа птиц в организме рыб в течение 3-х суток. Изучена динамика состояния иммунокомпетентных органов карпа (гепатопанкреас, почки, селезёнки), уровня содержания белка и активность лизоцима в этих органах и сыворотке крови, которая отображает реакцию рыб на инфицирование вирусом птичьего гриппа и проявляется общим адаптационным синдромом. Достоверное (р<0,05) увеличение лизоцима и бактерицидной активности сыворотки крови зараженных карпов и отсутствие патолого-анатомических изменений в организме свидетельствует о природной резистентности рыб к вирусу птичьего гриппа.

Высокопатогенный вирус птичьего гриппа, инокулированный в организм медицинской пиявки, сохраняет свою вирулентность в течение 45 суток. Обнаруженный факт открывает новые перспективы изучения роли пиявки как резервуара возбудителя и биотранспортёра вируса.

Полученные данные относительно особенностей распространения и сохранения высокопатогенного гриппа птиц в природных водных эпизоотических очагах изменяют современные представления о роли гидробионтов (хиронамид, рыб) в эпизоотическом процессе высокопатогенного гриппа птиц. Впервые представлена альтернативная гипотеза контроля и распространения птичьего гриппа путём определения алиментарного механизма передачи возбудителя по типу “эстафетной” передачи при подключении разнообразных факторов. Большое скопление мигрирующих околоводных птиц на оз. Сиваш может способствовать переносу вируса по цепи питания хиронамиды – птицы или хиронамиды – рыбы – птицы. Аборигенные виды водоплавающих птиц могут включаться в циркуляцию возбудителя через трофическую связь с гидробионтами.

Изолированный штамм высокопатогенного вируса птичьего гриппа “A(chironomida)Azov/11/2006(H₅N₁)” рекомендуется использовать при разработке средств диагностики высокопатогенного гриппа птиц.

На основе полученных данных исследований разработана и внедрена электронная интегральная программа контроля птичьего гриппа в Украине, которая предусматривает проведение комплексных мероприятий в эпизоотическом очаге, неблагополучном пункте, зонах наблюдения и угрозы. Использование данной программы позволяет не допускать возникновения и распространения птичьего гриппа на территории Украины, а также быстро и эффективно ликвидировать данное инфекционное заболевание в случае вспышки эпизоотии.

Ключевые слова: высокопатогенный грипп птицы, эпизоотологический мониторинг, диагностика, профилактика.